紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA_张同艳
光谱分析法研究瓜环对苯并咪唑衍生物的分子识别
![光谱分析法研究瓜环对苯并咪唑衍生物的分子识别](https://img.taocdn.com/s3/m/fdc2081a5f0e7cd1842536e5.png)
关键词 : 紫外吸收光谱 ; 荧光 光谱 ; 瓜环 ; 苯并咪唑衍生 物 ; 包结配合物
中 图分 类 号 : 0 6 5 7 . 3 文 献 标 志码 : A
R e c o g n i t i o n o f c u c u r b i t [ n = 6~ 8 ] u r i l s t o w a r d b e n z i mi d a z o l e
s p e c t r o p h o t o m e t r y . T h e r a t e o f r e c o v e y r o f C u c u r b i t [ n = 6~8 ] u r i l s f o r t h r e e g u e s t s w a s d e t e c t e d b y U V s p e c t r o s c o p y . T h e e x p e r i —
Ab s t r a c t : T h e a u t h o r s i n v e s t i g a t e d i n t e r a c t i o n o f C u c u r b i t [ , l = 6—8 ] u r i l s w i t h t h r e e B e n z i m i d a z o l e d e i r v a t i v e s , i n l f u e n c e s o f p H o n
八元瓜环 与客体 相互作用分别形成 1 . 5 : 1 和1 : 2 的包 结配合物 , 六、 八元瓜环与三种 客体相互作用形成 的主 客
体配合 物的稳定常数分别在 1 O ~l O L・ o t o l 和 l O “~1 O L 2 ・ m o l 范 围内 。瓜 环对 三种 客 体 的 回收率 在
2010年全国最优秀博士学位论文
![2010年全国最优秀博士学位论文](https://img.taocdn.com/s3/m/15436fc489eb172ded63b768.png)
李应红
空军工程大学
2010099
电化学电容器用碳纳米管阵列及其复合电极的制备与性能
张浩
杨裕生
防化研究院
2010100
中国人群SNP的大规模发掘和慢性乙型肝炎的遗传易感性研究
周钢桥
贺福初
军事医学科学院
纪奎
蒋春澜
河北师范大学
2010023
多级孔道沸石分子筛的合成、表征及催化应用
方云明
胡浩权
大连理工大学
2010024
基于LMI技术的自适应容错控制系统优化设计方法
叶丹
杨光红
东北大学
2010025
尺寸依赖的界面能
陆海鸣
蒋青
吉林大学
2010026
清代云南(1711-1911年)的季风气候与天气灾害
杨煜达
邹逸麟
许运华
彭俊彪
华南理工大学
2010069
蔗渣和麦草半纤维素分离、改性及其应用
任俊莉
孙润仓
华南理工大学
2010070
中国农业增长及其效率评价——基于要素配置视角的实证研究
郑晶
温思美
华南农业大学
2010071
温敏及离子响应型智能材料的制备及构效关系研究
巨晓洁
褚良银
四川大学
2010072
压应力对骨髓间充质干细胞成骨分化早期阶段成骨和破骨生成能力的影响
冷川
杨义
中国社会科学院研究生院
2010091
中国部分地区猪流感病毒的分子流行病学研究
于海
童光志
中国农业科学院
2010092
丹参酮类化合物生物合成相关酶基因克隆及功能研究
高伟
黄璐琦
中国中医科学院
医学分子生物学实验技术
![医学分子生物学实验技术](https://img.taocdn.com/s3/m/b66107ff9e3143323968931c.png)
医学分子生物学实验技术课程教学大纲
课程负责人:苑辉卿张利宁
课程名称:医学分子生物学实验技术(Experimental Protocols in Medical Molecular Biology)
开课学期:
课程学时:72学时(3学分)
课程教学目标:通过对现代分子生物学实验基本原理和技术的学习,从医学生物学角度培养研究生从事科学研究的能力。
课程内容:
基因克隆:构建一个载体
基因表达:mRNA水平
蛋白质水平
真核基因组分析技术
教学要求:
通过实验原理的讲解、实验示教和实验操作,掌握现代分子生物学实验的基本原理、操作技能和实际应用。
考核方式:实验设计
参考书目:
1. 孙汶生等编.《基因工程学》
2. 金冬雁等译.《分子克隆实验指南》.科学出版社
3. 吴乃虎编.《基因工程原理》
4. 子颖等译.《精编分子生物学实验指南》.科学出版社
5. 卢圣栋等编译.《现代分子生物学实验指南》。
荧光光谱法考察七、八元瓜环与甲基吲哚的相互作用
![荧光光谱法考察七、八元瓜环与甲基吲哚的相互作用](https://img.taocdn.com/s3/m/8789ef136bd97f192279e98c.png)
温 度对 主客体相互作用 的影响等 ,以期为相关 理论研 究及应
收 稿 日期 :2 1 —92 。修 订 日期 :2 1—22 0 00 —6 0 01 —2
基金项 目:国家 自然科学基金项 目( 0 6 0 1 和教育部“ 2770) 春晖计划” 目资助 项 作者简介 :侯华丽 ,女,1 8 9 4年生 ,贵州大学 化学与化 工学 院硕士研究生
O
0 0 0 一 0 ∞ Hj o q Q 0 一 曲 禹
图 2给出 T Q[ ] Me s 7 和 k的荧光光谱 以及 最大发射 波长处的荧光强度与主客体作用体系物质 的量之 比的关系 曲
线 。Me S 和 k的荧光 光 谱 的最 大 发射 波长 分 别为 一30 6
40 5
W a ee g h n v ln t/ m
口 ∞ . 量 . 1 0 丁
O
如 0
0
O
O
m O O 5
0
2
3
4
O
O5 .
10 .
15 .
20 .
Ⅳ[ 0】 8
Ⅳ [Ⅳk o] s 8 /
Fg3 Fu rsec pcr f( )Me n b ki e rsneo 8 i ces grt f 8 og et i. loecneset o a a d( )S t e c f a nhp e QE 3w t i r i ai o ]t us, hn an o Q[
第3 卷, 6 1 第 期
20 11 年 6月
光
谱
学
与
光
谱
分
析
V 13 , o6p 18—50 o.1N . ,p5 519
【国家自然科学基金】_八元瓜环_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
![【国家自然科学基金】_八元瓜环_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802](https://img.taocdn.com/s3/m/422f148dd4d8d15abe234e3e.png)
2011年 科研热词 相互作用 热力学稳定性 八元瓜环 靛蓝 荧光光谱法 苯丁酸氮芥 紫外吸收光谱法 稳定性 稳定常数 甲氨蝶呤 甲基吲哚 瓜环 溶解度 日落黄 分光光度法 七、八元瓜环 推荐指数 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
科研热词 菲 芴 瓜环 室温磷光 八元瓜环 光谱法 主客体相互作用 2-氨基苯并噻唑 1hnmr谱
推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
科研热词 推荐指数 瓜环 2 八元瓜环 2 超分子自组装 1 超分子组装 1 超分子催化 1 超分子 1 质子转移 1 紫精 1 系列瓜环 1 类轮烷 1 相互作用 1 光环加成反应 1 光切割dna 1 二溴化1 1 主客体相互作用 1 主客体包结配合物 1 ω -二(2-氨基吡啶)烷烃 1 n-亚烷基-二-2-甲基吡啶 1 6-二甲基-n-庚烷基吗啉 1 2-(2-氨基-3-吡啶基)苯并咪唑 1 2 1 1hnmr 1 1 1
2008年 1 瓜环(q[8]) 1 晶体结构 1 八元瓜环 1 二(2-亚甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉) 1 1,3-二(2-氨基苯氧基)-2-丙醇 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
科研热词 超分子 荧光光谱法 紫外吸收光谱法 瓜环 循环伏安法 司帕沙星 八元瓜环 亚甲基蓝 乙酰苯胺 乙酰乙酰苯胺 主客体配合物 七、八元瓜环 ph影响
依据金针菇遗传变异的种性,不断选育优良菌种(株)——诱变育种
![依据金针菇遗传变异的种性,不断选育优良菌种(株)——诱变育种](https://img.taocdn.com/s3/m/a04eef3b30b765ce0508763231126edb6f1a76f0.png)
依据金针菇遗传变异的种性,不断选育优良
菌种(株)——诱变育种
诱变育种是采用物理因子(如紫外线、y射线、X射线等),或化学诱变剂(如亚硝基胍等)来改变菌种的遗传特性,从而获得变异的新菌株。
①辐金1号是河南省科学院同位素研究所(杨宗渠等,1997),用1.5千戈瑞的丫射线,处理经过驯化的野生金针菇F126的双核菌丝选育出来的新菌株。
②F—8817是中国农业科学院植物保护研究所食用菌组(周宗俊,1990),以三明1号的原生质体为材料,经60Co-7射线辐射诱变选育出的一个优良菌株。
此外,河北大学生物系(成亚利等,1995)对金针菇Y19和W088两个菌株的原生质体进行紫外线诱变,获得了一系列长势快,出菇齐的新菌株。
- 1 -。
紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA
![紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA](https://img.taocdn.com/s3/m/bf8bb30c90c69ec3d5bb753a.png)
研 究 热点 ,开发 高效 的核 酸切 割试 剂是 研究 核酸 结 构 与功 能 等方 面 的 主要 课题 ¨ .非 金 属 类 紫精 化 合 物 是很 好 的 电子受 体 ,当二价 紫精被 还 原为 单 电荷紫 精 自由基 时 可 以活 化溶 液 中的溶 解 氧 ,生
成 能 够破 坏核 酸 的活性 氧 ,因此研 究紫 精类 化合 物对 于非 金 属核 酸切 割试 剂具 有重 要 的理论 价 值 .
V0 _ 3 】3
21 0 2年 2月
高 等 学 校 化 学 学 报
C HEMI CAL J OURNAL OF CHI NES E UNI VERST ES II
No 2 .
2 2 ~2 7 9 9
紫 精 与八 元瓜 环 的超 分 子 组 装及 光切割质粒 D A N
核磁 等方 法研 究了 B V与八元瓜环 C [ ]之间的相互作用.实 验结 果表明 , E B8 2种 化合物 可以进行 主客体超 分子 白组 装形成 1 1 : 的二元包 合物 B V—B 8 .同 时 , 别考察 了化合 物 B V和 B V C 8 与 小牛 胸腺 E C [] 分 E E —B[ ] D A的相互作 用 , N 并采用琼脂糖凝胶 电泳研 究了氙灯光照下化合物对 p R 2 N B 3 2D A的切割能力 .结果 表 明, C [] B 8 的引入改变了化合物 B V与 D A的作 用方 式 , E N 使嵌入作用 和静 电作用增强.光照结果说 明只有超分 子 B V C [ ] 光照下可以完全切割质粒 D A, C [ ] E —B 8 在 N 即 B 8 的存在 明显提高 了 B V对质粒 D A的切割效率. E N 关键 词 八元瓜环 ;紫精 ; 超分子组装 ; 光切割 D A N
分子生物学实验理论与操作教程
![分子生物学实验理论与操作教程](https://img.taocdn.com/s3/m/bedcfd12c5da50e2524d7f92.png)
分子生物学实验理论与操作教程分子生物学实验理论与操作教程中国农科院研究生院中国生化及分子生物学学会植物病虫害生物学国家重点实验室二零零四年七月目录前言-----------------------------------------------------------I 第一部分核酸提取----------------------------------------------1 实验一:基因组DNA提取--------------------------------------------1 实验二:总RNA提取------------------------------------------------3 第二部分亚克隆技术---------------------------------------------8 实验三:质粒DNA提取----------------------------------------------8 实验四:DNA片段的酶切--------------------------------------------9 实验五:DNA片段的酶修饰-脱磷-------------------------------------12 实验六:DNA片段的连接--------------------------------------------13 实验七: DNA片段的回收-------------------------------------------15 第三部分 PCR技术-----------------------------------------------18 实验八:PCR产物的克隆技术----------------------------------------18 八.1:T-载体构建 ---------------------------------------------19 八.2:PCR产物的T-载体克隆------------------------------------20 八.3:PCR产物的平端克隆技术----------------------------------21实验九:RT-PCR技术-----------------------------------------------21 实验十:定量PCR -------------------------------------------------25 第四部分文库构建技术------------------------------------------29 实验十一:mRNA的提取及纯化 --------------------------------------29 实验十二:cDNA文库构建技术- cDNA 链的反转合成--------------------32实验十三:1,cDNA文库构建技术- cDNA 链的连接、包装及转染----------34 实验十三:2,RACE技术---------------------------------------------36 第五部分核酸杂交技术-------------------------------------------40 实验十四:DNA探针的标记------------------------------------------40 实验十五:Southern杂交技术---------------------------------------44 第六部分:基因及基因产物检测技术----------------------------------48 实验十六:DNA的测序技术------------------------------------------48 实验十七:基因表达 1,基因的体外快速翻译-------------------------53 2,基因的诱导表达-----------------------------54 实验十八:报告基因的应用------------------------------------------57 实验十九:Western杂交技术----------------------------------------58 第七部分基因表达轮廓技术---------------------------------------67 实验二十:DD-PCR技术---------------------------------------------73 实验二一:SSH技术------------------------------------------------74 第八部分:遗传转化技术-------------------------------------------75 实验二二:感受态细胞制备-----------------------------------------75 实验二三:重组基因的转化及筛选------------------------------------77 实验二四:原生质体分离--------------------------------------------78 实验二五:农杆菌转化技术------------------------------------------79 第九部分:分子标记技术--------------------------------------------80 实验二六:RFLP技术-----------------------------------------------86 实验二七:RAPD技术-----------------------------------------------86 实验二八:AFLP技术-----------------------------------------------87 实验二九:SSR技术------------------------------------------------89 第十部分:细胞技术-----------------------------------------------89 实验三十:细胞凋亡------------------------------------------------89 十一:附录一----------------------------------------------------92 二-----------------------------------------------------961第一部分核酸提取目的基因主要可以通过以下途径加以分离获取。
辣椒雄性不育的分子研究进展
![辣椒雄性不育的分子研究进展](https://img.taocdn.com/s3/m/355b574d11a6f524ccbff121dd36a32d7275c757.png)
中国瓜菜2024,37(2):1-7收稿日期:2023-10-16;修回日期:2023-11-22基金项目:湖北省重点研发计划项目(2022BBA0061,2023BBB013,2023BBB044);湖北省援疆援藏项目(2022BGD008);湖北省农业科技创新中心项目(2021-620-000-001-007);湖北省自然科学基金青年项目(2022CFC055);湖北省支持种业高质量发展资金项目(HBZY2023B004-4)作者简介:张怡文,女,硕士,主要从事辣椒生物技术研究。
E-mail :********************通信作者:姚明华,男,研究员,主要从事辣椒遗传育种方面的研究工作。
E-mail :******************徐凯,男,助理研究员,主要从事辣椒分子育种与生物技术研究工作。
E-mail :***************辣椒为茄科辣椒属园艺植物,是全球规模最大的香料作物和调味品,也是我国栽培面积最大的蔬菜之一,常年栽培面积达3200万hm 2,年产值逾2500亿元,栽培面积和总产量居世界首位,且有继续增加的趋势[1]。
杂交品种被广泛应用于辣椒生产,可显著提高辣椒的产量、抗性和品质。
然而,目前辣椒杂交种的生产仍以人工去雄为主,授粉过程技术性强且劳动密集,成本巨大,种子纯度难以保证。
因此,利用雄性不育系可有效解决人工去雄的难题,简化制种工序,降低生产成本,进而应用于辣椒杂交种的商业化高效生产[2]。
1辣椒雄性不育的类型与特点辣椒雄性不育主要包括两种类型,细胞质雄性不育(cytoplasm male sterility ,CMS )和细胞核雄性不育(genic male sterile ,GMS )[3-4]。
GMS 只由细胞核基因控制,不受细胞质影响,且育性遗传符合孟德尔遗传定律;而CMS 是一种母系遗传性状,雄性辣椒雄性不育的分子研究进展张怡文1,2,徐兰婷1,2,王飞2,3,刘奕清1,2,姚明华1,2,3,徐凯2(1.长江大学香辛作物研究院·长江大学园艺林学学院湖北荆州434025;2.蔬菜种质创新与遗传改良湖北省重点实验室·湖北省农业科学院经济作物研究所武汉430064;3.湖北洪山实验室武汉430070)摘要:辣椒(Capsicum annuum L.)是世界上重要的蔬菜作物之一,杂种优势明显。
云南微生物研究所
![云南微生物研究所](https://img.taocdn.com/s3/m/1c9eedeae009581b6bd9ebdf.png)
云南微生物研究所云南省微生物所成果汇编发布者:发布时间:2009-11-1 0:01:08 阅读:561 次云南省微生物研究所成果汇编●竹红菌素治疗外阴白色病变和瘢痕疙瘩的研究(1981年度云南省科研成果二等奖)主要完成单位:中国科学院昆明植物所,云南省微生物研究所,云南省人民医院,云南省药品检验所等主要完成人员:万象义,陈远腾,刘学系组织鉴定单位:云南省科学技术委员会、中国科学院昆明分院、云南省卫生厅鉴定时间:1980年12月14日奖励等级:云南省科研成果二等奖奖励时间:1981年4月内容简介:竹红菌是一种资源丰富的野生药用真菌。
通过野生资源调查和生药研究,分离到竹红菌的主要光敏有效成分为竹红菌甲素,是一种新的苝醌衍生物,含药量为生药干重的2.5%。
根据民间用药经验和光敏作用的研究结果,首次提出将它作为光化疗药物应用。
经动物毒性试验证明,毒性和副作用较小,外用比较安全。
云南省第一人民医院等13个医院,用10%竹红菌提取物配制度外用剂用于临床,治疗外阴白色病变和瘢痕疙瘩,疗效显著。
治疗外阴白色病变500例,总有效率97.4%,其中治愈99例,占19.8%;显效244例,占48.8%;好转144例,占28.8%,经随访临床治愈病例停药后均未见复发。
治疗瘢痕疙瘩299例,总有效率为95.2%,其中显效106例,占46.3%;有效112例,占48.9%。
该成果达到国内先进水平,为竹红菌野生资源的开发利用提供了科学依据、资源和应用范例。
●普洱茶发酵工艺原理研究(1984年度云南省科技成果四等奖)研究单位及人员云南省微生物研究所盛玲玲江东福杜仲文苏任昆明茶厂主持鉴定单位云南省经贸厅鉴定时间1984年12月获1984年度云南省科技进步四等奖内容摘要:早期的普洱茶靠长期贮存。
1974年我省“湿水发酵普洱茶”成功,使生产量大为增加,但缺乏科学的系统认识更不知道微生物作用规律,往往因管理和发酵条件控制不好而影响质量的稳定。
分子生物学实验理论与操作教程
![分子生物学实验理论与操作教程](https://img.taocdn.com/s3/m/b511fb85ce2f0066f5332274.png)
分子生物学实验理论与操作教程分子生物学实验理论与操作教程中国农科院研究生院中国生化及分子生物学学会植物病虫害生物学国家重点实验室二零零四年七月目录前言-----------------------------------------------------------I 第一部分核酸提取----------------------------------------------1 实验一:基因组DNA提取--------------------------------------------1 实验二:总RNA提取------------------------------------------------3 第二部分亚克隆技术---------------------------------------------8 实验三:质粒DNA提取----------------------------------------------8实验四:DNA片段的酶切--------------------------------------------9 实验五:DNA片段的酶修饰-脱磷-------------------------------------12实验六:DNA片段的连接--------------------------------------------13实验七: DNA片段的回收-------------------------------------------15第三部分 PCR技术-----------------------------------------------18实验八:PCR产物的克隆技术----------------------------------------18 八.1:T-载体构建 ---------------------------------------------19八.2:PCR产物的T-载体克隆------------------------------------20八.3:PCR产物的平端克隆技术----------------------------------21实验九:RT-PCR 技术-----------------------------------------------21实验十:定量PCR -------------------------------------------------25第四部分文库构建技术------------------------------------------29实验十一:mRNA的提取及纯化 --------------------------------------29实验十二:cDNA文库构建技术- cDNA 链的反转合成--------------------32实验十三:1,cDNA文库构建技术- cDNA 链的连接、包装及转染----------34实验十三:2,RACE技术---------------------------------------------36第五部分核酸杂交技术-------------------------------------------40实验十四:DNA探针的标记------------------------------------------40实验十五:Southern杂交技术---------------------------------------44第六部分:基因及基因产物检测技术----------------------------------48实验十六:DNA的测序技术------------------------------------------48实验十七:基因表达 1,基因的体外快速翻译-------------------------532,基因的诱导表达-----------------------------54实验十八:报告基因的应用------------------------------------------57实验十九:Western杂交技术----------------------------------------58第七部分基因表达轮廓技术---------------------------------------67实验二十:DD-PCR技术---------------------------------------------73实验二一:SSH技术------------------------------------------------74第八部分:遗传转化技术-------------------------------------------75实验二二:感受态细胞制备-----------------------------------------75实验二三:重组基因的转化及筛选------------------------------------77实验二四:原生质体分离--------------------------------------------78实验二五:农杆菌转化技术------------------------------------------79第九部分:分子标记技术--------------------------------------------80实验二六:RFLP技术-----------------------------------------------86实验二七:RAPD技术-----------------------------------------------86实验二八:AFLP技术-----------------------------------------------87实验二九:SSR技术------------------------------------------------89第十部分:细胞技术-----------------------------------------------89实验三十:细胞凋亡------------------------------------------------89十一:附录一----------------------------------------------------92二-----------------------------------------------------96第一部分核酸提取目的基因主要可以通过以下途径加以分离获取。
昆虫细胞无血清培养的研究进展及应用
![昆虫细胞无血清培养的研究进展及应用](https://img.taocdn.com/s3/m/baf715ebdc3383c4bb4cf7ec4afe04a1b071b08a.png)
激光生物学报ACTA LASER BIOLOGY SINICAVol. 32 No. 3June . 2023第32卷第3期2023年6月收稿日期:2023-03-16;修回日期:2023-04-20。
作者简介:黎宏,技术员,主要从事细胞和微生物培养基的研究工作。
* 通信作者:扶星星,主要从事细胞和微生物培养基的研发工作。
E-mail: 562737459@ 。
昆虫细胞无血清培养的研究进展及应用黎 宏,郭清源,郭拉杨,扶星星*(四川百诺吉科技有限公司,绵阳 621000)摘 要:随着生物工程技术的快速发展,细胞工程愈来愈受到重视。
昆虫细胞培养技术作为生物工程的新领域,在现代生物学上具有重要的价值,其中以昆虫杆状病毒为载体,以昆虫细胞为受体的基因工程研究也取得了突破性的进展。
体外培养的昆虫细胞可以高效地表达外源基因,且昆虫杆状病毒具有对人畜无害等特点,使得昆虫细胞培养技术广泛地应用于生物学、医药学和农业等各个领域。
本文综述了昆虫细胞培养的研究进展,其中包括了体外培养昆虫细胞培养基的基础成分及无血清培养基的添加物、生物反应器大规模培养昆虫细胞和昆虫杆状病毒表达载体系统及其应用,为昆虫细胞无血清培养基的研发提供了理论依据。
关键词:昆虫细胞;杆状病毒;无血清培养;大规模培养中图分类号:Q 813.1+1 文献标志码:A DOI :10.3969/j.issn.1007-7146.2023.03.002Research Progress and Application of Serum-free Culture of Insect CellsLI Hong , GUO Qingyuan , GUO Layang , FU Xingxing *(Sichuan Benoji Technology Co., Ltd., Mianyang 621000, China)Abstract: With the rapid development of the field of bioengineering, cell engineering has been paid more and more attention.Insect cell culture technology, as a new field of bioengineering, has important value in modern biology, among which the genetic engineering research using insect baculovirus as the carrier and insect cells as the receptor has also made breakthrough progress. Insect cells cultured in vitro can express foreign genes efficiently, and insect baculoviruses are harmless to humans and animals, which makes insect cell culture technology being widely used in various fields such as biology, medicine and agriculture. In this paper, the research progress of insect cell culture is reviewed, including the basic components of insect cell culture medium in vitro , the addition of unclear medium, the bioreactor for the large-scale culture of insect cellss and the vector system of insect baculovirus expression and its application. It provides a theoretical basis for the development of serum-free culture medium for insect cells.Key words: insect cells; baculovirus; serum-free culture; mass cell culture(Acta Laser Biology Sinica , 2023, 32(3): 200-207)昆虫细胞培养始于1915年,理查德·戈德施密特[1]使用惜比古天蚕蛾(Hyalophora cecropia )的精子进行体外培养并成功保持了惜比古天蚕蛾的精子活性,但是由于没有适合的培养基用于细胞体外培养,所以没有看到细胞分裂;1962年Grace 建立了世界上第一个细胞系[2],昆虫细胞系的建立工作开始在世界范围内广泛的开展。
瓜环试剂的发展及应用研究
![瓜环试剂的发展及应用研究](https://img.taocdn.com/s3/m/0d4337b450e79b89680203d8ce2f0066f5336433.png)
168化学试剂2021年2月DOI:10.13822/ki.hxsj.2021007802化学试剂,2021,43(2) ,168〜173瓜环试剂的发展及应用研究余诗雨,刘智敏,杨怡,时开存,唐思静,李娇,蔡晓丽,张雪花,许志刚•(昆明理工大学理学院,云南昆明650500)摘要:瓜环是超分子领域中的一类备受关注的新兴大环化合物,但由于其溶解度小、活性基团少、难以衍生化等因素,一定程度上限制其发展和广泛应用。
简要介绍了瓜环的发展历程,全面介绍了常见瓜环化合物的合成、分离与表征,进一 步介绍了各种衍生化瓜环,重点介绍了各种瓜环在分子包结与识别和分子催化等方面的应用,讨论了瓜环类试剂发展中 存在的问题及发展趋势。
将为从事功能材料、吸附分离方法和超分子化学等方面的研究人员提供有益的参考。
关键词:瓜环;超分子;分子包结;分子催化;试剂中图分类号:0601; 0656.4 文献标识码:A文章编号:0258-3283 (2021)02-0168-06Development of Cucurbit [/i ] urils and Its Applications YU S h i-y u,L I U Z h i-m i n.Y A N G Y i^S H I K a i-c u n,T A N G S i-j i n g, LI J i a o,C A I X i a o-l i,Z H A N G X u e-h u a,X U Z h i-g a n g *(F a c u h y of Science, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500,C h in a),Huaxue Shiji,2021,43(2),168〜173Abstract:Cucurbit[ «] urils are a kind of emerging macrocyclic compounds that has attracted much attention in the field of supra-molecular. However, the development and application of Cucurbit[ «] urils are limited to a certain extent due to its low solubility, few active groups,and difficulty in derivatization.The development history of Cucurbit[ re] urils was briefly presented firstly.Then, the synthesis,separation and characterization of common Cucurbit[ n] urils were comprehensively introduced. And some derivatized Cucurbit [ n] urils were further introduced.The recent applications of Cucurbit[«] urils in molecular inclusion and recognition ,and molecular catalysis, were introduced.Finally, the urgently problems in the development of Cucurbit[ n] urils reagents and its development trends were also discussed.The work will provide a useful reference for researchers engaged in functional materials, adsorption and separation methods,and supramolecular chemistry.Key words : Cucurbit [ n] urils ;supramolecular; molecular inclusion ; molecular catalysis ; reagent瓜环(Cucurbit [ n ] urils,CB [ n ]),是继杯芳烃、冠醚、环糊精后备受关注的一类大环主体分子[|_3],瓜环的诞生为超分子化学注人了新的血液。
构建微生物突变体的方法综述
![构建微生物突变体的方法综述](https://img.taocdn.com/s3/m/e5a12b6aaf1ffc4ffe47ac9f.png)
・技术与方法・生物技术通报B10TECHNOLOGYBULLETlN2010年第2期构建微生物突变体的方法综述张念章逯忠新(中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州730046)摘要:生物学范畴内的突变是指细胞中的遗传物质发生可遗传的改变,包括DNA碱基对的置换、增添或缺失等结构的变化。
人们利用突变生物体进行科学研究和培育新产品。
综述了人工构建突变体的几种常用方法及原理,着重介绍了应用基因工程技术进行微生物改造的方法,为科研工作和生产实践拓展思路。
关键词:构建突变体微生物方法原理基因工程TheMethodsofConstructingMicrobialMutantZhangNianzhangLuZhongxin(StateKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicalBiology,KeyLaboratoryofGrazingAnimalDiseasesofMinistryofAgriculture,KeyLaroratoryofAnimalVirologyofMinistryofAgriculture,LanzhouVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Lanzhou730046)Abstract:Mutationinthescopeofbiologyreferstothegeneticmaterialswhichexistingintheceilscanhavehereditarychanges,includingthesubstitution,additionordeletionofDNAbase—pairandotherstructurechanges.Themutantisusedforscientificresearchesandacquiringnewproducts.Thisarticleintroducessomeusefulmethodsabouthowtoartificiallyconstructmutantandtheprinciples,emphaticallyintroducesthemethodsofmicrobialtransformationbyusinggeneticengineeringtechnology.Thepurposeistodevelopideasforscientificresearchandpractice.Keywords:ConstructingthemutantMicroorganismMethodPrincipleGgenetieengineering自然条件下发生突变的频率很低,其中不理想的突变还会因物竞天择被淘汰,而有利于物种的突变则会被逐渐累积下来。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Vol.33高等学校化学学报No.22012年2月CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 292 297紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA张同艳1,孙世国1,彭孝军1,陶彬彬2(1.大连理工大学精细化工国家重点实验室,大连116024;2.浙江闰土股份有限公司,上虞312368)摘要利用紫精可以活化水中溶解氧的特性,设计合成了苯-紫精化合物(BEV ).利用紫外吸收、电化学及核磁等方法研究了BEV 与八元瓜环CB [8]之间的相互作用.实验结果表明,2种化合物可以进行主客体超分子自组装形成1ʒ1的二元包合物BEV-CB [8].同时,分别考察了化合物BEV 和BEV-CB [8]与小牛胸腺DNA 的相互作用,并采用琼脂糖凝胶电泳研究了氙灯光照下化合物对pBR322DNA 的切割能力.结果表明,CB [8]的引入改变了化合物BEV 与DNA 的作用方式,使嵌入作用和静电作用增强.光照结果说明只有超分子BEV-CB [8]在光照下可以完全切割质粒DNA ,即CB [8]的存在明显提高了BEV 对质粒DNA 的切割效率.关键词八元瓜环;紫精;超分子组装;光切割DNA中图分类号O629.7文献标识码A DOI :10.3969/j.issn.0251-0790.2012.02.014收稿日期:2011-03-10.基金项目:国家自然科学基金(批准号:21072024,20872012)资助.联系人简介:孙世国,男,博士,副教授,主要从事功能染料分子及其光电化学研究.E-mail :shiguo@dlut.edu.cn 彭孝军,男,博士,教授,博士生导师,主要从事功能性染料及其工业应用研究.E-mail :pengxj@dlut.edu.cn 核酸切割是通过化学反应将长链的核酸分子断裂成较短的碎片,该领域的研究一直是生物化学的研究热点,开发高效的核酸切割试剂是研究核酸结构与功能等方面的主要课题[1 3].非金属类紫精化合物是很好的电子受体[4],当二价紫精被还原为单电荷紫精自由基时可以活化溶液中的溶解氧[5],生成能够破坏核酸的活性氧,因此研究紫精类化合物对于非金属核酸切割试剂具有重要的理论价值[5,6].然而,单电荷紫精自由基的存在寿命很短,限制了它在核酸切割领域的应用.文献[7]报道,大环主体化合物环糊精可与吖啶紫精类客体进行超分子组装,从而延长紫精单电荷自由基的存在寿命,因此将超分子化学引入生物领域具有良好的应用前景.瓜环(Cucurbit [n ]uril ,n =4 12,简写CB [n ])是超分子化学中继环糊精(Cyclodextrin )、冠醚(Crown ether )及杯芳烃(Calixarene )之后发展起来的一类高度对称的大环分子.CB [n ]是由不同数量的甘脲聚合而形成中间疏水空腔的大环分子,羰基集中在两个端口,具有很高的电负性,很容易包结一些中性小分子和带正电的金属离子或有机化合物.近年来,瓜环在超分子组装、分子识别、分子器件、超分子生物学、纳米科学及超分子药物学等领域中备受关注[8],但是有关瓜环在核酸切割方面的研究报道较少.Yang 等[9,10]发现六元瓜环CB [6]和1,6-二咪唑基己烷二溴酸盐发生自组装后形成的超分子包合物在生理条件下可以高效切割质粒DNA.常用的瓜环CB [7]和CB [8]均可以与甲基紫精(MV 2+)进行自组装生成二元化合物[11 13],并且MV 2+被还原后生成的紫精自由基(MV +·)可以在CB [8]的疏水空腔内部形成紫精自由基二聚体,生成稳定的三元络合物(MV +·)2/CB [8][13,14].这是由于在CB [8]的空腔内2个紫精自由基之间存在较强的电荷转移作用.基于此,我们[15]将CB [8]与Ru (Ⅱ)-(CH 2)n -MV 2+进行超分子组装形成1ʒ1的二元包合物.当客体受到光激发后发生分子内电子传递,导致Ru (Ⅲ)-(CH 2)n -MV +·紫精自由基与CB [8]之间发生2ʒ1的超分子组装,延长了该体系紫精自由基的存在寿命( 2μs ),并将此结果应用于DNA 切割,发现CB [8]的加入提高了钌化合物光切割DNA 的效率[16].为进一步考察CB [8]超分子体系对DNA 切割的影响,本文将CB [8]引入到非金属类紫精化合物N -乙基-N -苯甲基-4,4'-联吡啶二氯化物(Benzene-CH 2-EV ,BEV )的研究中.紫外、电化学和核磁等表征数据表明,BEV 与CB [8]自组装生成1ʒ1二元包合物.在光激发下CB [8]可显著提高BEV 对质粒DNA 的切割效率.1实验部分1.1试剂与仪器瓜环CB [8]参照文献[16]方法合成,BEV 为本实验室自合成(结构见图1);质粒DNA (pBR322Fig.1Structures of BEV and CB [8]DNA )和6ˑloading buffer (30mmol /L EDTA +36%(质量分数)甘油,0.05%(质量分数)二甲苯青FF +0.05%(质量分数)溴酚蓝)购自宝生物公司;小牛胸腺DNA (CT DNA )和溴化乙锭购自上海生工公司;150W 氙灯购自上海仪器厂;其它试剂均为市售分析纯或生化试剂.Bruker Avance Ⅱ400M 核磁共振仪(D 2O 为溶剂,德国布鲁克公司);LC /Q-TOF MS 液相色谱/四级杆飞行时间串联质谱仪(英国Micromass 公司);BAS 100B /W 电化学工作站(美国Bioanalytical Sys-tem 公司);DYCP-31DN 型琼脂糖水平电泳仪和DYY-8C 型双稳定时电泳仪电源(北京六一仪器厂);GIS-2010数码凝胶成像分析系统(上海天能科技有限公司).1.2实验过程1.2.1化合物BEV 的合成BEV 的合成参考文献[17,18]方法.将4,4'-联吡啶与碘乙烷按摩尔比1.3ʒ1溶于CH 2Cl 2中,回流反应,生成的沉淀用乙醇重结晶得纯品N -乙基-4,4'-联吡啶(收率30%,TOF-MS ,m /z :186.1084[M -Cl -]+).将单乙基紫精与等摩尔的苄溴在乙腈中搅拌回流,生成的固体滤出干燥,得到二价紫精的溴碘盐.最后进行阴离子置换过程:首先向NH 4PF 6水溶液中滴加产物水溶液,将其阴离子置换成六氟磷酸根阴离子,滤出沉淀,冲洗、干燥,得到二价紫精的二PF -6盐;再用同样方法用四丁基氯化铵将PF -6置换为Cl -离子,溶剂为干燥丙酮.滤出沉淀,冲洗、干燥,得二价BEV 的二氯盐[图1(A )].TOF-MS ,m /z :275.1558(计算值275.1548,[M -2Cl -+H +]+).1H NMR (400MHz ,D 2O ),δ:1.61(t ,J =6.8Hz ,3H ),4.68(q ,J =6.8Hz ,2H ),5.85(s ,2H ),7.45(s ,5H ),8.45(t ,J =6.4Hz ,4H ),9.03 9.08(dd ,J =6.4Hz ,4H ).13C NMR (400MHz ,D 2O ),δ:15.8,57.8,64.9,127.2,127.3,129.5,129.8,130.3,132.4,145.4,145.6,149.9,150.6.1.2.2BEV 与CB [8]的超分子自组装配制0.2mmol /L 的CB [8]水溶液和1mmol /L BEV 水溶液.分别移取一定体积的上述主、客体溶液于25mL 容量瓶中,用水定容后配成CB [8]与BEV 不同浓度比的溶液(BEV 浓度均为20μmol /L ),考虑到所选用的波长在紫外范围内(240 280nm ),为避免瓜环的吸收对测试体系的影响,以相应浓度的瓜环溶液为空白,在室温下测定各溶液的紫外-可见吸收光谱.采用Job 法,固定CB [8]和BEV 的总摩尔浓度不变,配制n (CB [8])/[n (CB [8])+n (BEV )]=0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.8,0.9和1.0的一系列待测溶液,测定其紫外-可见吸收光谱.将1mg BEV 溶于0.5mL D 2O 中,少量多次向溶液中加入CB [8]固体,测定溶液的核磁谱.电化学测试所用电解质为0.1mmol /L 的磷酸钠缓冲溶液,BEV 的浓度0.5mmol /L.采用三电极测试体系:饱和甘汞电极为参比电极,Pt 丝为辅助电极,玻碳电极为工作电极.测试前向待测溶液中通入氩气除氧15min ,再将氩气置于待测溶液上方保持体系在无氧条件下测试.玻碳电极在测试前用磨皮抛光,再用去离子水冲洗干净待用.测试中需要经常抛光,以保持电极表面光滑洁净.1.2.3光切割超螺旋质粒pBR 322DNA 将BEV 或BEV-CB [8]溶液、pBR 322DNA (3.44μmol /L ,0.15μg )、Tris ·HCl (10mmol /L )和NaCl (10mmol /L ,pH =7.15)混合配制总体积为20μL 的溶液,将混合液置于直径为5mm 的玻璃管中,测试温度用水浴控制为22ħ左右,在距离25cm 处用150W 氙灯光照.1.2.4电泳分析取光照后的溶液10μL ,加入2μL 6ˑloading buffer 终止反应,然后进行琼脂糖凝392No.2张同艳等:紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA胶电泳分析.1%(质量分数)琼脂糖凝胶中含有0.5μg /mL 溴化乙锭,电泳缓冲液为1ˑTAE (TAE :40mmol /L Tris-HAc +2mmol /L EDTA ,pH =8.5).电泳后置于凝胶成像系统中照相,用软件计算整合密度值(Integrated density value ,IDV ,强度ˑ面积,mm 2)进行半定量分析.DNA 切割效率(C )的计算公式如下[18]:C (%)=[Form Ⅱ]+2[Form Ⅲ][Form Ⅰ]+[Form Ⅱ]+2[Form Ⅲ]ˑ100%2结果与讨论2.1BEV-CB [8]超分子组装图2(A )和(B )分别为瓜环CB [8]与化合物BEV 相互作用的紫外吸收光谱和循环伏安曲线.由图2(A )可见,随着CB [8]的加入,BEV 在258nm 的最大吸收峰强度明显下降,同时还伴随微弱的红移.当CB [8]与BEV 的摩尔比达到1ʒ1时,体系的吸收达到稳定.因为八元瓜环在近紫外和可见区无吸收,所以紫外吸收光谱的变化表明瓜环与客体BEV 发生了超分子相互作用,形成了稳定的包合物.因包合物在最大吸收波长下的吸光度比客体本身的小,随着瓜环的加入,游离的BEV 浓度降低而包合物的浓度增大,所以体系吸光度随着瓜环的增多而逐渐降低[19].当主客体摩尔比达到1ʒ1时,体系达到平衡,说明瓜环与客体的包合比为1ʒ1.主体CB [8]与客体BEV 之间的配比可通过Job 法确定.在Job-plot 曲线图上明显看出瓜环浓度为体系总浓度1/2时吸收最大,证明主客体之间的包合比为1ʒ1.Fig.2UV absorption spectra (A )and cyclic voltammograms (B )of BEV and BEV-CB [8](A )From top to bottom ,n (BEV )/n (BEV -CB [8]):0,0.2,0.4,0.5,0.6,0.8,0.9,1.0.Insert of (A ):the Job-plot of BEV and CB [8]system.由电化学循环伏安曲线[图2(B )]可见,化合物BEV 2+/BEV +·对应的还原电位由-0.61eV 移动到-0.55eV ,BEV +·/BEV 0对应的还原电位由-0.86eV 移动到-1.13eV ,表明当双电荷的紫精在溶液中被还原成单电荷自由基时,2分子紫精自由基同时进入八元瓜环的空腔内部,形成稳定的自由基电子对,生成稳定的2ʒ1的三元结构(BEV +·)2-CB [8],此结果与文献[13,14]结果相符.同时也说明BEV-CB [8]相比于BEV 更容易生成稳定的单电荷的紫精自由基.Fig.31H NMR spectra of BEV without (a )and with (b )equimolar of CB [8]Fig.4Schematic drawing of the supramolecularself-assembly between BEV and CB [8]由图3的核磁谱图可见,苯环上的氢和联吡啶上的一组α-H 向高场移动,同时联吡啶上所有的β-H 均略向低场移动,表明苯环和一部分吡啶进入了CB [8]的空腔内部.实验中发现,当瓜环的量与492高等学校化学学报Vol.33BEV 的摩尔数相等时,体系的紫外-可见光谱和核磁谱图基本不变,说明底物BEV 全部转化为1ʒ1的二元包合物BEV-CB [8][20].利用质谱对超分子体系BEV-CB [8]进行了精确质量校正,TOF-MS ,m /z :1604.5542(计算值:1604.5553).根据以上结果,推测的BEV 与CB [8]的组装过程如图4所示.2.2BEV 和BEV-CB [8]与CT DNA 的相互作用图5为测得的BEV 及BEV-CB [8]与CT DNA 相互作用的紫外-可见吸收光谱.可见,随着CT DNA的加入,BEV 的最大吸收峰强度逐渐减弱,而BEV-CB [8]在吸收峰强度下降的同时伴随明显的红移,表明CB [8]的加入使化合物与DNA 的作用方式发生了变化.当小分子荧光化合物以嵌入方式结合于DNA 双螺旋碱基对之间时,其吸收光谱呈现减色效应且出现红移现象,因此可初步判断BEV-CB [8]Fig.5UV-Vis absorbption spectra of BEV (A )and BEV-CB [8](B )with the addition of CT DNAFig.6Fluorescence intensity changes of BEV /DNA (a )and BEV-CB [8]/DNA (b )systems with the in-creasing concerntration of NaCl与CT DNA 之间的相互作用以嵌入方式为主.在2种底物与DNA 的混合体系中,随着NaCl 浓度的增大,BEV 与DNA 的混合体系的荧光强度变化不明显,而BEV-CB [8]与DNA 的混合体系荧光强度则明显下降,说明该体系中存在静电作用(图6).由络合物的化学结构(图4)可以推断,当BEV-CB [8]接近DNA 时,未进入瓜环空腔的半边吡啶与DNA的负电骨架结构发生相互作用,使其嵌入到DNA 内部.因为紫精带有双电荷正离子,当DNA 接近时二者同时存在静电作用.Fig.7Gel electrophoresis diagrams of photoinduced oxidative cleavage of SC pBR 322DNA (0.15μg ,3.44μmol /L )with BEV (A )and BEV-CB [8](B )for 1h irradiation under xenon arc lamp at room temperature(A )Lane 1:DNA control ;lanes 2—6:DNA +BEV ,100,150,200,250and 300μmol /L ,respectively.(B )Lane 1:DNA control ;lanes 2—6:DNA +BEV-CB [8],20,30,40,50and 75μmol /L ,respectively.2.3光切割质粒DNA单体BEV 和超分子BEV-CB [8]在水溶液中均能稳定存在.单电荷紫精自由基能够活化水中的溶解氧,因此可将单体与超分子化合物引入到DNA 的切割中.在生理条件无光照时,2种化合物均不能与质粒DNA 发生切割.而在相同的生理条件用氙灯光照后,从凝胶电泳结果(图7)可见,BEV 对质粒pBR 322DNA 几乎无切割效果.相反,BEV-CB [8]却能将超螺旋质粒DNA (Form Ⅰ)切割成缺刻开环型(Form Ⅱ)和线型(Form Ⅲ).相同光照时间下,随着BEV-CB [8]浓度的增大,质粒pBR 322DNA超螺旋构型逐渐减少,而缺刻开环型和线型不断增多;当浓度达到50μmol /L 时,超螺旋DNA 被完全切割.保持BEV-CB [8]的浓度为50μmol /L ,随着光照时间的增长,质粒DNA 光切割效率逐渐增高,592No.2张同艳等:紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNAFig.8Cleavage efficiency of pBR 322DNA by50μmol /L BEV-CB [8]for differentirradiation time光照1h 时,切割率达到100%(见图8).2.4切割机理探讨为考察CB [8]在DNA 切割过程中的作用,向BEV和DNA 混合溶液中加入不同摩尔浓度的CB [8]进行实验.结果表明,DNA 的切割效率随着瓜环的加入逐步提高,当加入与BEV 等摩尔数的CB [8]时,切割完全.这说明瓜环起到的不是催化作用.考察溶解氧的影响时,相同条件下将溶液分别置于空气和氩气环境下进行测试.实验发现,BEV-CB [8]在空气中的切割效率远远高于在氩气环境下(见图9),证明水中的溶解氧参与了反应,也从侧面论证了瓜环起到稳定紫精自由基,延长自由基存在寿命的作用,从而更好地活化溶液中的溶解氧,进一步提高了对DNA 的切割效率.Fig.9Gel electrophoresis diagram of photoinducedoxidative cleavage of SC pBR 322DNA (0.15μg ,3.44μmol /L )by BEV and BEV-CB [8]in air or argon under 1h irradiationLane 1:DNA control ;lane 2:DNA +BEV-CB [8](50μmol /L )in air ;lane 3:the same sample as lane 2but inargon ;lane 4:DNA +BEV (100μmol /L )in air ;lane 5:the same sample as lane 4but inargon.Fig.10Effects of different radical inhibitors on DNA cleavage efficiency by 50μmol /L BEV-CB [8]under xenon arc lamp for 1h irradiation a.BEV-CB [8]+mannitol ,in air ;b.BEV-CB [8]+HCOONa ,in air ;c.BEV-CB [8]+NaN 3,in air ;d.BEV-CB [8]+KI ,in air ;e.BEV-CB [8]+histidine ,in air ;f.BEV-CB [8]+SOD ,in air ;g.BEV-CB [8],in argon ;h.BEV-CB [8],in air ;i.BEV-CB [8],dark ;j.DNA ,control.为进一步研究活化粒子对切割作用的影响,向切割体系中加入不同的自由基抑制剂进行实验.结果(见图10)表明,超氧基阴离子抑制剂(SOD )对切割的抑制作用不明显,而单线态氧抑制剂(L -组氨酸、KI 和NaN 3)及羟基自由基抑制剂(甲酸钠、甘露醇)则可降低BEV-CB [8]对DNA 的切割效率.以上结果表明,单线态氧和羟基自由基起到主要的切割作用.3结论含有苯环的紫精化合物BEV 可与CB [8]进行超分子组装形成稳定的1ʒ1的超分子化合物,其中BEV 的苯环和一部分吡啶进入瓜环空腔内部,其余部分露在瓜环端口外侧.化合物被还原为单电荷自由基后可与CB [8]组装成2ʒ1的三元络合物(BEV +·)2/CB [8].当超分子靠近CT DNA 时,未包合的吡啶部分嵌入到DNA 链内,改变了BEV 与DNA 的作用方式.在生理条件下,50μmol /L BEV-CB [8]超分子与超螺旋质粒DNA 作用后,氙灯光照1h 可以完全切割超螺旋质粒DNA ,比BEV 本身的切割效率明显提高.其主要原因是八元瓜环很好地稳定了光照后生成的单电荷紫精自由基,延长了其在水溶液中的存在寿命,使其更好地活化水中的溶解氧,生成单线态氧与羟基自由基来氧化破坏超螺旋质粒DNA.总之,CB [8]使几乎无切割作用的BEV 转变为只需50μmol /L 即可将超螺旋质粒DNA 完全切割的光切割试剂BEV-CB [8],为超分子化学在生物化学领域的应用提供了理论依据.参考文献[1]Wade W.S.,Mrksich M.M.,Dervan P.B..J.Am.Chem.Soc.[J ],1992,114:8783—8794692高等学校化学学报Vol.33[2]White S.,Baird E.E.,Dervan P.B..Chem.Biol.[J ],1997,4:568—578[3]Yang Q.,Xu J.Q.,Sun Y.S.,Li Z.,Li Y.,Qian X..Bioorg.Med.Chem.Lett.[J ],2006,16:803—806[4]Hariharan M.,Joseph J.,Ramaiah D..J.Phys.Chem.B [J ],2006,110:24678—24686[5]Hormann H.,Neubauer C.,Asada K.,Schreiber U..Photosynth.Res.[J ],1993,37:69—80[6]Clark C.D.,Debad J.D.,Yonemoto E.H.,Mallouk T.E.,Bard A.J..J.Am.Chem.Soc.[J ],1997,119:10525—10531[7]Hariharan M.,Neelakandan P.P.,Ramaiah D..J.Phys.Chem.B [J ]2007,111:11940—11947[8]Lagona J.,Mukhopadhyay P.,Chakrabarti S.,Isaacs L..Angew.Chem.Int.Ed.[J ],2005,44:4844—4870[9]Huo F.J.,Yin C.X.,Yang P..Bioorg.Med.Chem.Lett.[J ],2007,17:932—936[10]HUO Fang-Jun (霍方俊),YIN Cai-Xia (阴彩霞),YANG Pin (杨频).Chem.J.Chinese Universities (高等学校化学学报)[J ],2007,28(5):894—896[11]MU Lan (牟兰),XUE Sai-Feng (薛赛风),DU Ying (杜莹),ZHAO Yun-Jie (赵云洁),ZHU Qian-Jiang (祝黔江),TAO Zhu (陶朱).Chem.J.Chinese Universities (高等学校化学学报)[J ],2006,27(4):654—659[12]Ong W.,Kaifer M.G.,Kaifer A.E..Org.Lett.[J ],2002,4:1791—1794[13]Jeon W.S.,Kim H.J.,Lee C.,Kim K..Chem.Commun.[J ],2002,(17):1828—1829[14]Jeon W.S.,Ziganshina A.Y.,Lee J.W.,Ko Y.H.,Kang J.K.,Lee C.,Kim K..Angew.Chem.Int.Ed.[J ],2003,42:4097—4100[15]Sun S.,Zhang R.,Andersson S.,Pan J.,Zou D., kermark B.,Sun L..J.Phys.Chem.B [J ],2007,111:13357—13363[16]Sun S.,He Y.,Yang Z.,Pang Y.,Liu F.,Fan J.,Sun L.,Peng X..Dalton Trans.[J ],2010,39:4411—4416[17]Albrecht M.,Yulikov M.,Kohn T.,Jeschke G.,Adams J.,Schmidt A..J.Mater.Chem.[J ],2010,20:3025—3034[18]Lamberto M.,Rastede E.E.,Decker J.,Raymo F.M..Tetrahedron Lett.[J ],2010,51:5618—5620[19]YANG Luan-Fang (杨鸾芳),HOU Hong-Bo (侯洪波),ZHAO Li-Ju (赵丽菊).Journal of Dezhou University (德州学院学报)[J ],2010,26(6):55—57[20]JIANG Ping-Yue (姜平月),XUE Sai-Feng (薛赛风),WU Ming-Qiang (吴明强),XIAO Xing (肖昕),ZHU Qian-Jiang (祝黔江),TAO Zhu (陶朱).Chem.J.Chinese Universities (高等学校化学学报)[J ],2008,29(8):1573—1577Supramolecular Self-assembly Between Viologen and Cucurbit [8]uril andIts Application for the DNA PhotocleavageZHANG Tong-Yan 1,SUN Shi-Guo 1*,PENG Xiao-Jun 1*,TAO Bin-Bin 2(1.State Key Laboratory of Fine Chemicals ,Dalian University of Technology ,Dalian 116024,China ;2.Zhejiang Runtu Co.Ltd.,Shangyu 312368,China )Abstract Combining supramolecular chemistry with biochemistry was a new research direction.In this pa-per ,self-assembly between a host compound CB [8]with a guest molecule benzyl viologen (BEV )was examined by UV absorption measurement ,cyclic voltammetric method and 1H NMR technique.The experi-mental results revealed that CB [8]included benzyl and part of pyridinum of BEV to form binary compounds BEV-CB [8],and when BEV 2+was reduced to BEV +·,a new stable ternary complex (BEV +·)2/CB [8]would be formed.The two kinds of viologens ,BEV and BEV-CB [8],were used for DNA photocleavage stu-dies in physiological environment following the research results that CB [8]could enhance the interaction be-tween BEV and CT DNA with intercalation and electrostatic interaction.Only 50μmol /L of the complex BEV-CB [8]could cleave SC pBR 322DNA completely compared with BEV ,which showed no ability for DNA clea-vage under the irradiation of Xe lamp.The main reason was that BEV 2+was reduced to BEV +·under ir-radiation and CB [8]bound BEV +·tightly to form (BEV +·)2/CB [8],which prolonged the lifetime of violo-gen radical BEV +·,causing the dissolved oxygen in water activation and the reactive oxygen species ,·OH and O -·2,could cleave SC pBR 322DNA.The results indicate an important application by host molecule CB [n ]in supramolecular chemistry ,which gives an obviously evidence for the field of DNA cleavage.Keywords Cucurbit [8]uril ;Viologen ;Supramolecular self-assembly ;DNA photocleavage(Ed.:H ,J ,K )792No.2张同艳等:紫精与八元瓜环的超分子组装及光切割质粒DNA。