榛蘑粗多糖提取工艺的研究
榛蘑多糖药理作用研究现状
鼠的体液免疫反应及细胞免疫反应 能力 ” 引。另有报道 Ａ ＭＰ 能在体 外 显 著 增 强 小 鼠腹 腔 巨 噬 细 胞 吞 噬 中性 红 的 作
用 － 并可诱导 巨噬细胞 产 生 Ｎ ｌ ， Ｏ且 呈现 一定 的浓 度相 关
菌丝 体和菌丝索在黑暗处能发光 ， Ｊ与兰科植 物天麻具有 极 为密切 的营养关系 。大量的实验结果 表明 ， 的菌丝体 和 榛蘑 发酵 液都具有与天麻相似 的药理作 用和临床 疗效。因此 ， 对
内外对榛蘑 多糖药理作用的研 究现状 ， 并且结合 当前实际分析 了榛蘑 多糖在食品及 医药等行业 的应 用和发展 前景。
随着社会的发展 ， 人类生活节 奏加快 ， 生活压力 变大 ， 环 境 污染加剧 ， 导致 多数人 免疫 系统 的抵抗 能力 下降 ， 很多疾 病 的发病率都呈上 升趋 势。在 ２ ０世纪 ５ Ｏ年代 就有 把真 菌 多糖作为药物进行研究的报道 ， 经过 １ 年 的发展 ， ０余 真菌 多 糖作为免疫促进剂引起世界各 国的研究 兴趣 ， 如今 已经成 为 国际上公认的具有 较好疗 效 的生物 反应调 节剂 。 目前多糖
２ １ 年 ５月 ０１
第２ ４卷第 ３ 期
黑龙江生态工程职业学院学报 Ｊｕ ａ ｏ ｅｌ ｇｉ ｇＶ ｃｔｎｌ ｎｔｕｅ ｆ ｃｌｇ ａ Ｅ ｇ ｅｒ ｇ ｏｒｌ ｆ ｉ ｎ ｊｎ ｏａ ｏａ Ｉｓｔｔ ｏ ｏ ｉ ｌ ｎ ｎｅｉ ｎ Ｈ ｏ ａ ｉ ｉ Ｅ ｏ ｃ ｉ ｎ
野生榛蘑多糖提取、分离纯化和相对分子量的测定
万方数据 万方数据 万方数据野生榛蘑多糖提取、分离纯化和相对分子量的测定作者：施溯筠， 金在久， SHI Su-yun， JIN Zhai-jiu作者单位：延边大学长白山生物功能因子省部共建教育部重点实验室,吉林,延吉,133000刊名：兰州大学学报（自然科学版）英文刊名：JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES）年，卷(期)：2009,45(z1)1.刘景圣.郑明珠.蔡丹长白山地区蜜环菌菌种的分离与筛选[期刊论文]-食品科学 2005(07)2.李巧云.阎月荣单扫描示波极谱法连测五味子、榛蘑中的铜和锌[期刊论文]-生析试验室 2005(01)3.李永泉.吴炬.花立民白阿魏菇菌丝体多糖(PNMP)体外抗氧化活性[期刊论文]-兰州大学学报(自然科学版)2003(06)4.李永泉.吴炬.花立明白阿魏菇菌丝体多糖分离纯化工艺的优化和结构分析[期刊论文]-兰州大学学报(自然科学版) 2003(04)5.陶美华.潘清灵.章卫民多糖含量测定方法研究[期刊论文]-中国食用菌 2005(05)6.DONG Q.YAO J.FANG J N Structural characterization and immunological activity of two coldwater extractable polysaccharides from Cistanche deserticola Y.C.Ma[外文期刊] 2007(10)7.CHAN TW.CHAN P K.TANG K Y Determination of molecular weight profile for a bioactive beta-(1-3) polysaccharides (Curdlan)[外文期刊] 2006(01)8.HABIBI Y.HEYRAUD A L.MAHROUZB M Structural features of pectic polysaccharides from the skin of opuntia ficus-indica prickly pear fruits[外文期刊] 2004(6)9.林启中草药成分化学 197710.SASAKI T.ABIKO N.NITTA K Antitumor activity of carboxymethylglucans obtained by carboxymethylation of (1 leads to 3)-beta-D-glucan from Alcaligenes faecalis vat.myxogenes IFO 13140 1979(02)11.WASSSER S P Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysaccha-rides[外文期刊] 2002(03)1.朱艳红.邓远辉.王海兰紫草多糖提取工艺参数优选及其分子量测定[期刊论文]-中国实验方剂学杂志2010,16(1)2.颜军.刘嵬.邬晓勇.郭晓强.何钢.张良蕾.孙晓春.苟小军柴胡多糖的分子量测定及单糖组成分析[期刊论文]-安徽农业科学2010,38(9)3.李静.左雄军.Li Jing.Zuo Xiongjun水溶性凝胶渗透色谱法测定芸芝多糖组分的分子量及其相对含量[期刊论文]-分析化学1999,27(8)本文链接：/Periodical_lzdxxb2009z1008.aspx。
榛蘑多糖的提取及抗氧化性研究
（ １ ． 延 边 大学 医学 院 ； ２ ． 延边大学农学 院： 吉林 延 吉 １ ３ ３ ０ ０ ２ ）
摘 要 ：为 确 定 榛 蘑 多 糖 的 最 佳 提 取 工 艺 条 件 及 抗 氧 化 性 ， 本 试 验 以榛 蘑 为 研 究对 象 ， 采 用 单 因 素 试 验 和 Ｌ 。 （ ３ ） 正交试验的方法 ， 对 用 水 提 取 出 的榛 蘑 粗 多糖 的抗 氧 化 性 进 行 测 定 。得 出 榛 蘑 多 糖 的 最 佳 提 取 工 艺 条
２ ． Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｙ ａ ｎ ｂ ｉ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ， Ｙａ ｎ ｊ ｉ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ３ ０ ０ ２， Ｃｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍａ ｌ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ａ １ ｐ ａ ｒ ａ ｍｅ ｔ ｅ ｒ ｓ ａ ｎ ｄ ａ ｎ ｔ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ，Ｍ ｅ ｌ ｌ ｅ ａ ａ ｒ —
文章 编 号 ： １ ０ ０ ４ — ７ ９ ９ ９ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ４ — ０ ２ ７ ８ — ０ ７
Ｄ ＯＩ ： １ ０ ． １ ３ ４ ７ ８ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｊ ａ ｓ ｙ ｕ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ０ ０ １
榛 蘑 多糖 的提 取 及 抗 氧 化 性 研 究
ｍ ｉ ｌ ｌ ａ ｒ ｉ ａ ｓ ｐｏ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｒ ｅ ｗａ ｓ ｔ ａ ｋ ｅ ｎ ａ ｓ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ，ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｗａ ｓ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｍｏ ｎ ｏ — ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ Ｌ９
榛蘑、元蘑混合浸膏中多糖含量测定方法的研究
加 ４倍量 ９ ％ 乙醇 静置 ４ ｈ 同上条 件离 心取沉 淀 ， 水溶 ５ ８， 加
解， 重复醇沉 ， 置 ２ｈ 离 心取 沉淀 ， 纯化 水溶 解定 容至 静 ４， 加 １ｍ ， ０ ｌ作为供试 品溶液 。
２ ３ 测 定 方 法 ．
分别取葡萄 糖标 准 品溶 液 ２ ０ ｌ 供试 品溶 液 ２ ０ ｌ ．ｍ 及 ．ｍ 于具塞 比色管中 ， ５ 加 ％苯酚溶液１０ ｌ摇匀 ， ．ｍ ， 迅速滴加浓硫
２ ２ 样 品 溶 液 的 制 备 ．
Ｃ（ ／ ） ｍｇ ｍ１
图 １ 葡萄糖标准 曲线
２ ４ ２ 精密度试验 ．．
取同一供试 品溶 液 ， “ ． ” 按 ２ ３ 项下 方法 分别 测定 ６次 ， 运用水提 醇沉法提 取 、 干燥 ， 得蘑 菇干浸 膏 ， 确称取 １ 精 Ｒ Ｄ＝ ． １ （ ＝６ 。 Ｓ ０２％ ） ９号浸 膏各一定量 ， 置烧 杯中 ， 分别加 １ 倍 量纯化水 加热 ２ ２ ４ ３ 稳定性试验 ．． 溶解 ， 不溶物３ ０ ｒ ｒｎ ０・ｉ ０ ａ 下 离心 ２ｍｎ ０ ｉ 离心 除 去 ， 上清液 取 ３号供试 品溶液 ０ ４ ｌ ．ｍ 定容 至 ｌｍｌ按 “ ． ” 下方 Ｏ ， ２３ 项 法每 间隔 ３ｍｎ测定 一次 吸光度 ，Ｓ ０ ３％ （ ６ ， ０ｉ Ｒ Ｄ＝ ．０ ｎ＝ ） 结 收稿 日期 ：０ １— ６— ４ ２ １ ０ ２ ｈ内基本稳定 。 基金项 目： 江省教 育厅 ２１ 黑龙 ００年度科 学技 术研 究 项 果表明显色在 ３ ２４４ 重复性试验 ．． 目（ 目编号 ：１５ ０ ３ 项 １５５ ７ ） 平行取 ３ 号样 品溶液 ０２ ｌ ｌｍ 容量瓶 中 ， ， ．ｍ 于 Ｏ ｌ 定容 分 作者简介 ： 桑咏 梅 （ ９ ８一） 女 ， 东菏 泽人 ， １６ ， 山 副教 授 。 别精密量取２Ｏ ｌ ５ 具塞 比色 管 中， “ ．” ．ｍ 于 支 按 ２ ３ 项下 方法 研究方 向： 中药炮制 。
亮菌固态发酵提取多糖的工艺研究
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ５ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ４ — ５ ０ ６ Ｘ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ 一 ｏ ０ ７
亮菌 ， 又称 为假 蜜环 菌 、 青 杠茸 、 榛蘑 ， 是伞菌 目
口蘑科 蜜 环 菌 属 的一 种 真菌 ， 因 菌丝 含 有 物 质能 发
本研 究 通 过单 因素 实 验 和多 因素正 交 试验 ， 对
亮 菌 固态 发酵提 取 多糖 的工艺 条件 进行 了研 究 和优
出荧光 而得 名 。 现亮 菌 多 由固体发 酵法 生产 ， 其 发酵 提 取物 中含 有 多种 生物有 效及 活性 成 份 ， 如 亮 菌 甲、 乙、 丙素 ， 亮菌 多糖 、 多 肽及 氨 基酸 、 微量 元 素 、 天然 甘露 醇 ， 其 中亮 菌 多糖是 主 要成 分之 一 ＿ １ ］ 。 亮 菌多 糖作 为 一 类 低毒 而 免 疫 活性 强 、 毒 副作 用少 、 来源 广 的生 物大分 子 物质 ， Ｅ ｔ 益 受 到人们 的注 意和 重视 。 有研 究 发 现 ， 它作 为 一 种 真 菌活 性 物 质 ，
ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｕ ｍ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｗ ｅ ｒ ｅ ａ ｓ ｆ ｏ ｌ ｌ ｏ ｗｓ ：ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｏ ｆ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｔ ｏ ｗａ ｔ ｅ ｒ（ Ｗ： Ｖ ） ，ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ —
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食用菌多糖提取工艺研究
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食用菌多糖提取工艺研究（大纲）一、引言1.1食用菌多糖的背景及意义1.2国内外研究现状1.3研究目的与意义二、食用菌多糖的来源与种类2.1食用菌的分类及特点2.2常见含多糖的食用菌2.3食用菌多糖的生物活性三、食用菌多糖的提取方法3.1水提法3.2醇沉法3.3超声波辅助提取法3.4微波辅助提取法3.5酶法提取3.6超临界流体提取法四、食用菌多糖提取工艺优化4.1单因素实验4.1.1提取温度对多糖提取率的影响4.1.2提取时间对多糖提取率的影响4.1.3料液比对多糖提取率的影响4.1.4提取次数对多糖提取率的影响4.2正交实验4.2.1正交实验设计4.2.2正交实验结果分析4.3响应面法优化4.3.1响应面实验设计4.3.2响应面实验结果分析五、食用菌多糖的结构与活性研究5.1多糖的分离纯化5.1.1分离方法5.1.2纯化方法5.2多糖的结构分析5.2.1红外光谱分析5.2.2核磁共振波谱分析5.2.3凝胶渗透色谱分析5.3多糖的生物活性研究5.3.1抗氧化活性5.3.2免疫调节活性5.3.3抗肿瘤活性六、结论与展望6.1结论6.2展望一、引言引言：1.1食用菌多糖的背景及意义食用菌多糖作为一种天然生物活性物质，具有广泛的药用价值和健康效益。
水提取榛子壳多糖的工艺优化
Ｖｏ １ ． ３ ８＿ ， Ｎｏ． ０６ ， ２０１７
食品 ， 盐 斜技
水提取榛子壳 多糖 的工艺优化
王 磊， 李 健 ， 刘 宁，ห้องสมุดไป่ตู้戴 瑞
（ 哈 尔滨 商业 大学食 品 工程 学院 ， 黑龙 江省普 通 高等 学校食 品科 学
与工程 重 点 实验 室 ， 黑龙 江哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ７ ６ ）
摘 要： 以废 弃榛子 壳为原料 ， 采 用响应 面分析 法优化水提取榛 子 壳多糖 的工 艺。通过单 因素 实验考 察 了浸提 温度 、 浸提 时间、 料液 比因素对榛子壳 多糖得率的影响 ， 并利用 Ｂ ｏ ｘ － Ｂ ｅ ｈ ｎ ｋ ｅ ｎ设计和响 应面分析 法， 确 定 了榛子 壳多糖的最
佳提 取 工 艺 参 数 。 结 果 表 明 ， 各 因 素 对 多 糖 得 率 影 响 的 大 小 顺 序 为 浸 提 时 间 ＞液 料 比 ＞浸 提 温 度 ， 在 浸 提 时 间 为
１ ． ６ ｈ 、 液料比为 １ ２ ： １ ｍ Ｌ・ ｇ ～、 浸提 温度 ８ １℃ 的条件 下， 榛 子 壳 多糖 的最 佳得 率 为 ３ ． ０ ３ ｍｇ ・ ｇ ～， 与模 型的 预测 值 ３ ． ２ ４ ｍ ｇ ・ ｇ 基 本吻合 ， 表明该工艺具有 良好 的可行性 。
关键 词 ： 榛子 壳， 多糖 ， 水 浴 浸提 ， 响 应 面法
Ｐｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈ ａ ｚ ｅ ｌ ｎｕ ｔ ｓ ｈｅ ｌ ｌ ｐ０ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｂ ｙ ｗａ ｔ ｅ ｒ
Ｗ ＡＮＧ Ｌ ｅ ｉ ， ＬＩ Ｊ ｉ ａ ｎ ， ＬＩ Ｕ Ｎｉ ｎ ｇ， ＤＡＩ Ｒｕ ｉ
榛蘑粗多糖碱提取工艺的研究
榛蘑粗多糖碱提取工艺的研究摘要：本实验通过单因素试验和L9(34)正交试验，对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺过程中的料液比、温度、水提时间、碱提时间进行了研究，结果显示温度是影响多糖提取率的关键因素，最佳工艺为料液比1：30，温度60℃，水提时间4h，碱提时间48h，在最佳提取工艺时，榛蘑多糖的提取率为65.4% 。
关键词：榛蘑碱提多糖提取工艺多糖又称多聚糖（Polysaccharide）,是由10个以上单糖以糖苷键连接而成的一大类聚合物。
它广泛存在于动物、植物和微生物体内。
多糖具有多种包括抗肿瘤、抗突变、降血脂、抗菌素病毒、促进免疫等活性生物功能，以及抗氧化、抗衰老、保肝等作用。
现代医学研究表明，榛蘑具有抗防癌、防治病毒性疾病、降低胆固醇、防止动脉硬化、稳定血压等功能，故是一种理想的医疗保健品。
近年来对多糖提取工艺的研究方法较多，如热水浸提法、稀碱液浸提法、稀酸液浸提法。
本文采用稀碱液浸提法。
1、实验部分1.1仪器、试剂与材料榛蘑：购于内蒙古海拉尔地区。
试剂：无水乙醇、95%乙醇、蒽酮、浓硫酸、萘酚、过氧化氢、氯仿、正丁醇、葡萄糖等。
0.1mol/L氢氧化钠溶液，浓盐酸等。
微型植物试样粉碎机、电子天秤、SHB-III型循环水式多用真空泵、98-1-B 型电子调温电热套、数显恒温水浴锅、752N型紫外可见分光光度计、WMK-02型电热恒温培养箱。
1.2多糖的提取流程1.2.1榛蘑的前处理称取购买的榛蘑,放入水中洗净, 60℃烘干至恒重,用粉碎机粉碎得榛蘑粉末,装瓶,干燥处中保存备用。
1.2.2 榛蘑多糖的分离提取首先,称取5克榛蘑,向其中加入一定量的水,在一定温度下加热数小时。
然后抽滤,将滤液保存。
残渣倒入烧杯中,加入200ml，0.1mol/L氢氧化钠溶液，静置一段时间，重复两次。
然后将滤液合并，调PH为7.0。
滤液浓缩，在浓缩的同时加入过氧化氢，这样可以除去色素。
再加入1/4糖溶液体积的Sevage试剂，摇动10分钟，再静置一天。
粗多糖提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解粗多糖的基本性质和提取方法。
2. 掌握水提醇沉法提取粗多糖的原理和操作流程。
3. 通过实验验证粗多糖提取效果，并对其含量进行测定。
二、实验原理粗多糖是一类高分子碳水化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。
水提醇沉法是一种常用的粗多糖提取方法，其原理是利用多糖在水中的溶解度较高，而在乙醇中的溶解度较低的特点，通过加水提取多糖，然后用乙醇沉淀多糖，从而实现多糖的分离纯化。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：植物材料（如大麦、玉米等），乙醇，蒸馏水，硫酸铵，苯酚，浓硫酸等。
2. 实验试剂：95%乙醇，NaOH，FeCl3，浓盐酸，氯仿，乙酸乙酯等。
四、实验仪器1. 实验室常用仪器：电子天平，恒温加热器，水浴锅，旋转蒸发仪，离心机，移液器等。
2. 特殊仪器：分光光度计，真空干燥箱等。
五、实验步骤1. 植物材料预处理：将植物材料洗净、晾干，然后研磨成粉末。
2. 水提：将研磨好的植物粉末加入适量蒸馏水，加热煮沸，提取多糖。
3. 醇沉：将提取液冷却至室温，加入95%乙醇，使多糖沉淀。
4. 沉淀分离：将沉淀物用离心分离，弃去上清液。
5. 沉淀干燥：将沉淀物用无水乙醇洗涤，然后在真空干燥箱中干燥至恒重。
6. 粗多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法测定粗多糖含量。
六、实验结果与分析1. 粗多糖提取率：根据实验数据计算粗多糖提取率，并与文献报道进行比较。
2. 粗多糖含量测定：根据苯酚-硫酸法测定粗多糖含量，并与理论值进行比较。
3. 结果分析：分析实验结果，探讨影响粗多糖提取率的因素，如提取时间、提取温度、乙醇浓度等。
七、实验讨论1. 粗多糖提取率的影响因素：实验结果表明，提取时间、提取温度、乙醇浓度等因素对粗多糖提取率有显著影响。
在实验条件下，最佳提取时间为2小时，提取温度为80℃，乙醇浓度为95%。
2. 粗多糖提取方法的优化：通过实验，对水提醇沉法进行了优化，提高了粗多糖提取率。
3. 粗多糖的应用前景：粗多糖具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、降血糖等，具有广泛的应用前景。
食用菌多糖的提取检测及应用研究进展
食用菌多糖的提取检测及应用研究进展食用菌是一种富含营养价值且被广泛食用的菌类食品。
近年来，食用菌多糖的研究引起了人们的广泛关注。
食用菌多糖指的是从食用菌中提取得到的多糖类化合物，具有丰富的生物活性和药用价值。
本文将就食用菌多糖的提取、检测及应用进行综述。
一、食用菌多糖的提取1.物理法：物理法主要是通过水浸提、热水浸提、酸碱浸提等方式提取食用菌多糖。
物理法提取的多糖含量较低，但是对菌体损伤小，适用于大规模生产。
2.化学法：化学法主要是通过酸碱法、酶解法、醇沉法等方式提取食用菌多糖。
化学法提取的多糖含量较高，但是有可能破坏多糖的生物活性。
3.生物法：生物法主要是通过微生物法和酵素法提取食用菌多糖。
生物法提取的多糖含量较高，并且对多糖的生物活性影响较小。
二、食用菌多糖的检测1.物理检测：物理检测主要是通过红外光谱、核磁共振、质谱等技术对食用菌多糖进行分析。
2.化学检测：化学检测主要是通过酸碱滴定、硫酸热解等方法对食用菌多糖进行分析。
3.生物检测：生物检测主要是通过生物传感技术对食用菌多糖进行检测，如免疫检测、酶反应等。
三、食用菌多糖的应用1.医药应用：食用菌多糖具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、调节免疫功能等多种生物活性，被广泛应用于药物研发、肿瘤治疗、心血管疾病防治等领域。
2.食品应用：食用菌多糖具有增加食品的营养价值、改善食品口感的作用，可用于制备功能性保健食品、调味料等。
3.化妆品应用：食用菌多糖具有保湿、美白、抗衰老等功能，可应用于化妆品的研制及生产。
总之，食用菌多糖的提取、检测及应用研究进展已经取得了一定的成果。
随着人们对食用菌多糖的认识不断深入，食用菌多糖的研究将会得到更加广泛的关注，并有望在医药、食品、化妆品等领域得到更多的应用。
一种超声波辅助复合酶提取榛蘑多糖的方法[发明专利]
![一种超声波辅助复合酶提取榛蘑多糖的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/bb45b5a5fe4733687f21aa41.png)
专利名称：一种超声波辅助复合酶提取榛蘑多糖的方法
专利类型：发明专利
发明人：于国萍,陈超,王艳菲,岳崇慧,陈媛,范美婧,藏小丹,刘鹏,孙琪
申请号：CN201610800639.7
申请日：20160905
公开号：CN106220751A
公开日：
20161214
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种超声波辅助复合酶提取榛蘑多糖的方法，属于提取多糖的制备领域。
该制备方法包括以下步骤：将榛蘑洗净、晾干、粉碎后过60目筛，得到榛蘑粉末；按照不同的条件进行酶解，100℃灭酶，冷却；将上述提取液再经过不同条件的超声处理后，离心，上清液即为多糖提取液。
通过单因素试验，最终确定了提取榛蘑多糖的最适液料比、酶解时间、酶解温度、复合酶比例、加酶量、超声时间、超声功率。
本发明研究了不同反应条件对榛蘑多糖提取率的影响，优化得出提取榛蘑多糖的最适条件。
申请人：东北农业大学
地址：150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号
国籍：CN
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正交试验法优化巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺的研究
正交试验法优化巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺的研究首先，我们需要确定需要优化的因素和其水平。
对于巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺，可能有以下因素：料液比、提取温度、提取时间和回流次数。
水平可以根据实际情况确定，如料液比可以分为2:1、3:1和4:1；提取温度可以设置为50℃、60℃和70℃；提取时间可以设为1小时、2小时和3小时；回流次数可以分为1次、2次和3次。
然后，根据正交试验法的原理，我们需要设计一个正交表来安排试验方案。
正交表可以确保各个因素在试验过程中均匀地变化，从而得到较准确的结果。
一般选择L9（3^4）正交表，其中有9个试验组合。
接下来，我们根据正交表，按照对应的试验条件进行实验，并记录相应的结果。
假设我们对每个试验组合进行3次重复试验，以减少误差。
最终，我们可以得到多组数据，包括粗多糖的提取率。
然后，我们需要对实验数据进行分析。
这里可以使用方差分析（ANOVA）来评估各个因素的主效应和交互作用。
通过计算F值和P值，我们可以确定哪些因素对提取率有显著影响，以及它们之间的相互作用。
最后，结合实验结果和分析，我们可以确定最佳的提取工艺条件。
对于巨大口蘑子实体中粗多糖的提取工艺来说，这可能是料液比为3:1、提取温度为60℃、提取时间为2小时和回流次数为2次。
然后我们可以验证这个最佳条件是否有效，可以再进行一次实验来验证实际提取率。
总结起来，正交试验法是一种有效的优化多因素试验设计方法，可以帮助我们找到最佳的工艺条件。
对于巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺的研究，通过正交试验法，我们可以明确各个因素对提取率的影响，并找到最佳的工艺组合，以实现优化提取效果。
蘑菇多糖提取实验报告
一、实验目的1. 学习蘑菇多糖的提取方法；2. 掌握蘑菇多糖的鉴定与检测技术；3. 研究蘑菇多糖的生物活性。
二、实验原理蘑菇多糖是一种生物活性物质，具有多种生物学功能，如抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等。
本实验采用水提醇沉法提取蘑菇多糖，并对其理化性质、结构特征和生物活性进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蘑菇子实体：香菇、金针菇等；- 无水乙醇、丙酮、正己烷等有机溶剂；- 碘液、硫酸铜溶液等试剂；- pH计、紫外分光光度计等仪器。
2. 实验仪器：- 电子天平；- 磁力搅拌器；- 烘箱；- 冷冻离心机；- 超声波清洗器；- 离心管、烧杯等实验器材。
四、实验方法1. 蘑菇子实体的预处理将蘑菇子实体洗净，去除杂质，切碎，用蒸馏水浸泡过夜。
2. 蘑菇多糖的提取将浸泡好的蘑菇子实体加入蒸馏水中，搅拌提取2小时；将提取液过滤，收集滤液；将滤液用无水乙醇沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，重复上述沉淀、离心步骤，直至沉淀物基本溶解；将溶解后的沉淀物用丙酮沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，得蘑菇多糖粗品。
3. 蘑菇多糖的鉴定与检测（1）外观鉴定：蘑菇多糖粗品为白色粉末；（2）溶解性检测：蘑菇多糖粗品可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂；（3）分子量测定：采用凝胶渗透色谱法（GPC）测定蘑菇多糖的分子量；（4）单糖组成分析：采用高效液相色谱法（HPLC）分析蘑菇多糖的单糖组成；（5）生物活性检测：通过体外抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等实验，检测蘑菇多糖的生物活性。
五、实验结果与分析1. 蘑菇多糖粗品的外观为白色粉末，可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂。
2. GPC结果显示，蘑菇多糖的分子量在10-100 kDa之间。
3. HPLC分析表明，蘑菇多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖等单糖组成。
4. 生物活性检测结果显示，蘑菇多糖具有抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等生物活性。
六、实验结论本实验成功提取了蘑菇多糖，并通过鉴定与检测，证实了蘑菇多糖具有多种生物活性。
榛蘑多糖的分离鉴定及其清除氧自由基作用研究
榛蘑多糖的分离鉴定及其清除氧自由基作用研究杨立红;黄清荣;冯培勇;姜华;蔡德华;刘静【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2007(028)001【摘要】榛蘑烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖.粗多糖经Sevag法除蛋白后上DEAE-纤维素(OH-)柱层析,分离得到五种多糖组分Am-Ⅰ、Am-Ⅱ、Am-Ⅲ、Am-Ⅳ和Am-Ⅴ,SepharoseCL-4B测得Am-Ⅰ分子量为1.46×104,红外光谱和NMR波普分析表明An-Ⅰ为含有葡萄糖醛酸的主要以β(1,3)糖苷键和β(1,6)糖苷键连接的D-吡喃葡聚糖.邻苯三酚自氧化法测定榛蘑粗多糖和Am-Ⅰ均具有清除氧自由基的作用.【总页数】5页(P309-313)【作者】杨立红;黄清荣;冯培勇;姜华;蔡德华;刘静【作者单位】烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025;烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025;烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025;烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025;烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025;烟台师范学院生命科学学院,山东,烟台,264025【正文语种】中文【中图分类】S646.19【相关文献】1.榛蘑多糖对大鼠血管内皮细胞的保护作用 [J], 丛贺;周广亮;金梅花;沈明花2.野生元蘑多糖的分离鉴定及其清除氧自由基作用 [J], 杨立红;刘林德;姜华;王晓洁;邢伟;蔡德华3.女贞子多糖与菟丝子多糖清除氧自由基及抗衰老协同作用实验研究 [J], 蔡曦光;张振明;许爱霞;孟勇;葛斌;宋秀荣;路新爱4.榛蘑粗多糖对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用 [J], 卫莹;魏红燕;张蕊萌;沈明花5.榛蘑多糖药理作用研究现状 [J], 丁振铎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
榛蘑中多糖水提法工艺优化
141榛蘑中多糖水提法工艺优化杨立霞 李 艳 杨 静 邓庆华 黄学文多糖是具有多种生物活性的大分子物质。
本实验采用热水浸提的方法从榛蘑中提取多糖，通过单因素试验和正交试验，研究了浸提温度、时间以及料液比对多糖提取率的影响。
从单因素试验表分析可得温度是影响多糖提取率的主要因素。
通过正交试验确定最佳提取工艺为料液比1:30、温度100℃、浸提时间为4h，在最佳提取工艺时，榛蘑多糖提取率为3.28%。
多糖是由单糖基通过糖苷键连接而成的化合物，具有抗肿瘤、抗病毒，促进免疫等多种生物活性。
此外它还能影响细胞的分裂和分化，调节细胞的生长和衰老。
大多数真菌多糖易被生物降解，长期服用可达到防治肿瘤的目的，是一种很好的广谱免疫增强剂。
因此，多糖在生物医药、保健食品、农业生产、化妆品等方面具有独特的应用价值。
榛蘑(Armillariella mellea)产于黑龙江三江平原地区，属于真菌类物质。
现代医学研究表明，榛蘑具有防癌抗癌、防治病毒性疾病稳定血压等功能，目前从榛蘑中提取粗多糖工艺的研究还很少。
多糖的提取工艺方法有多种，但醇提、碱提、酸提等都能不同程度的破坏多糖，因此本实验采用热水浸提法。
1 材料及方法1.1材料、试剂及仪器材料：购于内蒙古海拉尔地区。
试剂：无水乙醇，85%、95%乙醇，丙酮，无水乙醚，蒽酮，浓硫酸，葡萄糖，三氯甲烷，正丁醇。
仪器：电子天平，恒温水浴锅，电热恒温干燥箱，循环水式多用真空泵，离心机，分液漏斗，分光光度计。
1.2方法1.2.1多糖的提取流程将榛蘑原料水洗，60℃烘干后粉碎。
称取一定量的榛蘑粉末加入相应体积的水，置于冰箱中，冻融处理后在一定温度下进行一定时间的提取。
将提取后的溶液过滤，剩余残渣重复提取2-3次，合并提取液加热浓缩至1/3体积。
用Sevag 法除蛋白，再用3倍量95%的乙醇醇析得粗多糖沉淀。
分别用85%、95%和无水乙醇、无水乙醚、丙酮洗涤，干燥后得粗多糖。
1.2.2多糖的初步鉴定及含量测定本实验采用蒽酮-硫酸法测定总的多糖含量。
榛蘑粗多糖醇提提取工艺研究
榛蘑粗多糖醇提提取工艺研究李艳;王舒雅【摘要】[目的]研究优化用醇提法从榛蘑中提取粗多糖的工艺.[方法]以榛蘑为试材,通过L9(33)正交试验,研究了料液比、乙醇浓度、浸提时间对榛蘑粗多糖醇提提取率的影响.[结果]试验显示,乙醇浓度和浸提时间是影响榛蘑粗多糖醇提提取率的主要因素,榛蘑粗多糖醇提最佳提取工艺为料液比1∶10,乙醇浓度30％,时间3h.[结论]研究可为榛蘑粗多糖的进一步开发利用提供参考.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)031【总页数】3页(P11100-11101,11104)【关键词】榛蘑;多糖;醇提;提取工艺【作者】李艳;王舒雅【作者单位】呼伦贝尔学院生命科学与化学学院,内蒙古海拉尔区021008;呼伦贝尔学院生命科学与化学学院,内蒙古海拉尔区021008【正文语种】中文【中图分类】S646多糖是由单糖基通过糖苷键连接起来的。
药理研究表明，植物多糖具有抗病毒、抗辐射、抗肿瘤、延缓衰老及增强免疫调节等作用，且某些多糖还具有降血脂、降血糖等作用，有的多糖还能诱导干扰素的产生［1－2］。
近年来，植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现。
据文献报道，已有100种植物的多糖被分离提取出来［3］。
榛蘑营养丰富，富含大量钙、磷、铁、蛋白质、糖类、胡萝卜素、维生素C等微量元素和营养成分，是一般蔬菜的十几倍。
榛蘑含有人体必需的多种氨基酸和维生素，具有抗癌防癌、防治某些呼吸道及消化道感染疾病、防治病毒性疾病、降低胆固醇、防止动脉硬化、稳定血压等功能，它对预防视力减退、夜盲也很有效果。
近年来对多糖提取工艺的研究方法较多［4－6］，如热水浸提法、醇浸提法、稀碱液浸提法、稀酸液浸提法［7－8］。
但用醇提法从榛蘑中提取粗多糖的工艺研究还鲜见报道。
同时因为在稀酸、稀碱条件下，易使多糖发生糖苷键的断裂，部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少，因此笔者采用乙醇浸提法提取榛蘑粗多糖。
榛子壳多糖的提取纯化及应用研究
榛子壳多糖的提取纯化及应用研究研究以榛子壳为原料,采用热水浸提法和超声辅助浸提法制备榛子壳粗多糖,利用酶+Sevag法脱蛋白、H2O2脱色,利用大孔树脂S-8脱盐,将纯化后的多糖与Vc对比,进行DPPH·、·OH以及O2-·三种自由基的清除作用的研究,通过验证榛子壳总多糖结构及分析榛子壳的组成成分,最后在单因素实验的基础上,利用正交实验得出榛子壳多糖红茶复合饮料的最佳配方,确定该饮料的制作工艺,主要研究内容和结果如下:(1)采用热水浸提法和超声辅助浸提法这两种浸提方法。
热水浸提通过采取响应曲面分析法优化分析浸提榛子壳多糖的最佳浸提工艺条件为:浸提时间为1.6h、水固比为12:1 mL·g-1、浸提温度81 ℃,在此条件下进行平行验证实验3次,得到榛子壳多糖提取率平均值是3.03 mg·g-1。
超声辅助浸提法通过采取响应曲面法进行分析得出如下的最佳浸提工艺条件:超声功率为200w、超声时间为36 min、超声温度是60 ℃、水固比12:1 mL·f1,在此条件平行验证实验3次,榛子壳多糖提取率平均值是7.99 mg·g-1。
超声辅助浸提法相比于常规的热水浸提法,其多糖提取率明显提高2倍以上。
(2)对超声辅助浸提得到的榛子壳粗多糖进行纯化,通过横向比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶法以及酶+Sevag法,最终选择酶+Sevag法脱榛子壳多糖中蛋白,通过采取正交实验明确最佳除蛋白条件为:酶添加量1.5%,酶解温度60℃,酶解时间1.5h,pH值6.0。
采用双氧水法(H202)脱除榛子壳多糖中色素,通过采取正交实验明确最佳脱色参数为:H202体积分数15%,溶液pH8,脱色时间2h,脱色温度50℃。
采用S-8大孔树脂除去榛子壳多糖中小分子成分,动态吸附实验中,最佳条件为:上样液pH7,上样体积量10mL,流动速度控制1mL·min-1,在该条件下吸附率可达83.31%,动态洗脱实验中,洗脱溶液最佳pH值为9,在该条件下解吸率为32.68%。
正交试验法优化巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺的研究
正交试验法优化巨大口蘑子实体中粗多糖提取工艺的研究作者：陈梅梅周于轩来源：《食品安全导刊》2022年第08期摘要：本研究利用正交试验法优化巨大口蘑粗多糖水提法工艺，以提高其提取率。
单因素试验选取了提取时间、提取温度、料液比和滤液与无水乙醇的体积比这4个因素，以提取率作为评价标准。
在此基础上设计4因素3水平的正交试验，对其提取工艺进行优化。
结果表明，影响巨大口蘑子实体中粗多糖提取率的主要因素为料液比，其次是提取时间和滤液与无水乙醇的体积比，而提取温度对其提取率的影响最低;最佳提取工艺为滤液与无水乙醇体积比为1∶2、提取温度为70 ℃、料液比为1∶15、提取时间为1.0 h，在此条件下巨大口蘑的多糖提取率可达8.42%。
关键词：巨大口蘑;多糖;正交试验;水提法Optimization of Extraction Process of Crude Polysaccharides from Macrocybe giganteum by Orthogonal Experimental DesignCHEN Meimei， ZHOU Yuxuan（Guangzhou College of Technology and Business， Guangzhou 510000， China）Abstract： In this study， orthogonal experimental design was used to optimize the process of crude polysaccharides from Macrocybe giganteum with the method of water extraction. The one-factor experimental design was adopted with the temperature， time， solid-liquid ratio and the ratio of the filter liquor to the absolute ethanol. The yield rate of the crude polysaccharides was the evaluation standard. Then an orthogonal test of four factors at three different levels were designed and used. The results indicated that the most important factor that infect the yield rate was the temperature and the best extraction process were： the ratio of the flter liquor to the absolute ethanol was 1 ∶ 2，the temperature was 70 ℃， the solid-liquid ratio was 1∶15， and the time was 1.0 hour. With the best extraction process the yield rate was 8.42%.Keywords： Macrocybe giganteum; polysaccharides; orthogonal experimental design; water extraction巨大口蘑（Macrocybe giganteum），又名大白口蘑、洛巴口蘑（Tricholoma lobayene Heim），是一種子实体单生或丛生的食用菌，具有较高的营养价值且耐贮运，不易褐变、腐烂[1-2]。
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榛蘑粗多糖提取工艺的研究李巧云, 翟 春, 居红芳, 葛粉凤(常熟高等专科学校化学系,江苏常熟215500)摘 要:对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L 9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为料液比1∶25,温度100°C ,时间4h ,在最佳提取工艺时,榛蘑的多糖提取率为4.37%。
对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag 法除蛋白的基础上采用Sevag 法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮—硫酸法测定多糖含量。
关键词:榛蘑;可溶性多糖;提取工艺中图分类号:O 629.12 文献标识码:A 文章编号:036726358(2004)0720372204Study on the Ex tracti on T echno logy of Po lysaccharidefrom A ri m illaria M elleaL I Q iao 2yun , ZHA I Chun , JU Hong 2fang , GE Fen 2feng(D ep art m ent of Che m istry ,Chang shu Colleg e ,J iang su Chang shu 215500,Ch ina )Abstract :T he ex tracti on of p lysaccharide from ari m illaria m ellea w as studied .Single facto r test and o r 2thogonal exp eri m en t design m ethod (L 9(33)w ere app lied to analyze the influence of facto rs such as so lid 2liqu id rati o ,tem p eratu re and ti m e on the ex tracti on p ercen t of the po lysaccharides .Exp eri m en tal resu lts indicated that tem p eratu re and so lid 2liqu id rati o sign ifican tly affect the ex tracti on p ercen t of the so lub le po lysaccharides .T he op ti m um so lid 2liqu id rati o is 1∶25,tem p eratu re is 100°C and the ex tracti on ti m e is 4hou rs :U uder these conditi on s ,the ex tracti on p ercen t of so lub le po lysaccharides from ari m illaria m ellea is 4.37%.In additi on ,the traditi onal m ethod of p reci p itating po lysaccharides w ith alcoho l w as i m p roved .T he Sevag m ethod com b ined w ith the enzym e m ethod w as adop ted to get rid of p ro tein w h ich seves ,a lo t of ti m e .A lso ,the po lysaccharide w as determ ined by an i m p roved an th ro ic ketone 2su lp hu ric acid m ethod .Key words :ari m illaria m ellea ;so lub le po lysaccharide ;ex tracti on techno logy收稿日期:2003207221;修回日期:2003210220作者简介:李巧云(1961～),女,副教授,主要从事教学和研究工作。
多糖是由单糖基通过糖苷键连接而成的化合物,越来越多的研究证明,多糖不但能治疗使机体的免疫系统受到严重损伤的癌症,还能治疗多种免疫缺损疾病,如慢性病毒肝炎和某些细菌和病毒引起的慢性疾病,还能治疗风湿病之类的疾病,有的多糖还能诱导干扰素的产生。
总之,多糖具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗病毒病菌、降血糖血脂、抗溃疡等作用。
目前多糖的分离分析仍是比较活跃的研究领域。
现代医学研究表明,榛蘑具有抗癌防癌、防治病毒性疾病、降低胆固醇、防止动脉硬化、稳定血压等功能,故是一种理想的医疗保健品。
本文所选用的榛蘑是纯天然野生的,它们生长在黑龙江省东经137°北纬47°地带,从榛磨中提取粗多糖工艺的研究还鲜见报道。
近年来对多糖提取工艺的研究方法较多[3,4～6],如热水浸提法、稀碱液浸提法、稀酸液浸提法。
但因为稀酸、稀碱条件下,易使多糖发生糖苷键的断裂,部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少,因此本文采用热水浸提法。
1 实验部分1.1 主要材料、试剂及仪器榛蘑:产于黑龙江三江平原地区,自采。
无水乙醇、95%乙醇、丙酮、无水乙醚、蒽酮、浓硫酸、葡萄糖、三氯甲烷、甲苯、正丁醇(均为分析纯);国产木瓜蛋白酶:生化试剂,上海蓝季科技有限公司。
D S21高速组织捣碎机:上海标本模型厂;SH Z2 C型循环水多用真空泵:河南省巩义市站街光亚仪器厂;电热恒温干燥箱:上海跃进医疗器械厂;数显恒温水浴锅:常州国华电器有限公司;721型分光光度计:上海精密科学仪器有限公司;FT I R28700红外光谱仪:日本岛津制作所。
1.2 多糖的提取流程将榛蘑原料水洗,在60°C烘干后将其粉碎,用无水乙醇回流脱脂,再在60°C时干燥,然后加入一定量的水,在一定温度下进行一定时间的提取,提取液经过减压浓缩得浓缩液,浓缩液进行除蛋白透析后,用3倍量95%(质量分数)乙醇醇析得粗多糖沉淀,抽滤,沉淀分别用无水乙醇、无水乙醚、丙酮依次洗涤,真空干燥后得除蛋白粗多糖产品。
1.3 多糖含量的测定本实验采用蒽酮—硫酸法测定总的多糖含量[1,2]。
蒽酮—硫酸法是利用糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,可与蒽酮试剂缩合产生有色物质,反应后溶液呈蓝绿色,于620nm处有最大吸收。
本实验先利用标准糖溶液和其用蒽酮试剂处理后在620nm处的吸光度制作标准曲线,再测定待测样品溶液的吸光度,根据回归方程计算相应的浓度从而求出多糖含量。
1.4 粗多糖中蛋白质的去除本实验采用酶法结合Sevag法脱蛋白。
Sevag 是利用蛋白质遇有机溶剂变性而不溶于水的特点而分离除去,酶法是利用植物蛋白酶在一定条件下将植物蛋白降解而除去。
按多糖提取液1%(质量分数)的比例向提取液中加入木瓜蛋白酶,同时加入1滴甲苯防腐,于39°C保温48h,将适当浓缩的提取液加入到分液漏斗中,再按提取液体积的1 5的量加入Sevag溶液(三氯甲烷∶正丁醇=4∶1,体积比),振荡,静置,分离,直至无乳白色变性蛋白质析出为止。
1.5 小分子杂质的去除利用溶液浓度扩散效应,将相对分子质量小的物质如无机盐、低聚糖等从透析袋渗透到袋外的蒸馏水中,不断换水即可保持浓度差,从而除尽小分子杂质。
根据多糖溶液的体积截取相应长度的透析袋,用透析夹夹住一端,灌入多糖液,离液面2～3c m处夹紧透析袋,置于一大烧杯中,采用逆向流水透析法透析。
1.6 多糖的初步鉴定将提取的榛蘑粗多糖分别与KB r以1∶100比例混合研细后,以KB r为本底,在4000～400c m-1波数范围内测定其红外光谱图。
2 结果与讨论2.1 多糖含量的测定在实验条件下,以浓度(C)为横坐标,以吸光度(A)为纵坐标作图,得标准曲线。
回归方程为:A=5.1964C+0.0345(相关系数r=0.9998)多糖提取率=(V×C×f×W2 W3×W1)×100%W1:称取干样品的质量(g)W2:由W1提取的粗多糖的质量(g)W3从W2中称取的用于分析测定的粗多糖质量(g)V:溶解W3定容后的体积(L)f:多糖的校正系数[1],f≈0.9C:由回归方程计算所得多糖的浓度(g L)2.2 热浸提的料液比、温度、时间单因素对榛蘑可溶性多糖提取率的影响热浸提工艺涉及三个关键条件:热浸提的料液比、热浸提的温度和热浸提的时间。
料液比(干燥样品的质量与水的质量之比)采用1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶40五个水平,浸提温度采用85、90、95、100°C四个水平,浸提时间采用3、4、5、6、7h五个水平分别进行单因素试验。
2.2.1 料液比的影响改变料液比对多糖提取率影响如图1所示。
试验结果显示:料液比的上升会增加多糖的溶出量,1∶25以后,上升的幅度趋于平缓。
2.2.2 温度的影响改变温度对多糖提取率的影响如图2所示。
温度单因素试验表明:温度对榛蘑多糖的提取率有显著的影响,温度的上升伴随着多糖提取率的显著上升,在100°C条件下多糖的提取率几乎是85°C时提取率的两倍。
图1 料液比对榛蘑多糖提取液的影响图2 温度对榛蘑多糖提取率的影响2.2.3 时间的影响改变时间对多糖的提取率的影响如表1所示。
表1 时间对多糖提取率的影响时间 h榛蘑中多糖的提取率 %33.3244.1354.1764.1974.20 时间单因素试验显示:随着热浸提时间的增加,榛蘑中多糖提取率也有所增加,但4h 以后增加趋势缓慢。
2.3 热浸提榛蘑中可溶性多糖提取率的正交试验2.3.1 正交试验设计和结果的直观分析在上述单因素试验的基础上,选定3因素3水平作正交试验,因素水平、试验结果计算及分析见表2。
从表2可知,提取温度是影响多糖提取率的最关键因素,其次是物料比,在实验范围内,时间的影响最小。
2.3.2 正交试验的方差分析结果正交试验的方差分析结果如表3所示:温度的差异显著对榛蘑多糖提取率的影响起最主要作用,料液比和时间在此实验范围内没有显著性差异,对测定结果的影响较小。
这与直观分析结果是相吻合 的。
2.3.3 正交试验多重性比较[7](1)料液比各水平间差异显著性SSR 比较表4的SSR 检验显示:3和1差异显著,故料液比的最佳工艺参数选1∶25表2 正交试验结果试验因素料液比A温度B °C 时间C h榛蘑中多糖的提取率 %11∶208541.5421∶209562.7431∶2010083.2441∶258561.7251∶259583.0261∶2510044.1371∶308581.9181∶309543.1991∶3010064.37K{17.525.178.86K {28.878.959.83K {39.4711.748.17优水平A3B3C 2K {12.5071.3902.953K{22.9572.9833.273K {33.1573.9132.723R i0.6502.5230.550主次顺序BAC表3 正交试验的方差分析差异来源dfS SS 2FF 0.05F 0.01A (料液比)20.66500.33255.82319.0099.00B (温度)27.24863.624363.473319.0099.00C (时间)20.10140.05070.888019.0099.00误差20.11420.0571总变异8.1292表4 料液比各水平间差异显著性SSR 检验处理平均数Α=0.05Α=0.0133.157a A 22.957ab A 12.507aA (2)温度各水平间差异显著性SSR 比较表5的SSR 检验显示:控制提取温度非常重要,三个水平间都有显著差异和极显著差异,故选平均值最大的,即温度最佳工艺参数为100°C 。