高山红景天苷的初步纯化
高山红景天苷的初步纯化
０． ８
Ａ ＝ ５ ５ ７ 一 ０ ０ ６ ２ ８４ Ｃ ． ３
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红景天苷浓度 （ｇｍ ） ａ ｒ／Ｅ
图 １ 红 景天苷浓度与吸光度的关系
作者简介：袁先铃 （ ９９ ），女，重庆人，助教 ，硕士，主要从事食品安全与工程及保健 酒的开发与研 究。 １７一
苷得率为考察指标 ，采 用乙酸铅沉淀法正 交实验和 乙醇沉淀法正 交实验 ，确定较优化的工艺参数 。１ ．
乙酸铅 沉 淀 法的 最佳 方案 即 乙酸铅 浓度 为 ５ 沉 淀 时间为 ５ ｍｉ， ％， ０ ｎ 温度 为 ４Ｃ， ￣ 红景 天苷 含 量 为 ７５ ％； ．８ ２ 乙醇 沉淀 法的 最佳 方案 即 乙醇 浓度 为 ７ ％，沉 淀 时 间为 ２ ｈ ． ０ ４ ，温度 为 ４Ｃ，红景 天苷 含量 为 ２ ． ％。 ￣ ０６ ９ 结论 醇沉 法和 乙酸铅 沉 淀 法均 能提 高红景 天 苷 的纯度 ，醇沉 法优 于 乙酸铅 沉 淀 法。
关键 词 ：红景 天苷 ； 乙酸铅 沉淀 ；醇 沉 ；纯化
中 图分 类号 ：Ｏ１６７ ５．
文 献标 识码 ：Ａ
Байду номын сангаас
高 山红景 天 （ ｈ ｄｃａＳ ｃａｉｎｉ ＡＢ ｒ）系 景天科 多年 生草 本植 物 ，在 长 白山区海 拔 １０ ｍ 一 Ｒ ｏｉｌ ａｈｌ ｓ ．ａ． ｅ ｓ ７０ ２ ０ｍ 的苔原 带上 生长 较 多 。高 山红景 天在 国内外 主要 作为 滋 补强化 剂 ，广泛 用 于抗 疲劳 、抗缺 氧 、抗 ５０ 辐射 、抗衰老 、镇静强心和提高脑力 、体力机能等方面［ ］ １。 － ２ 红 景天 苷是 红 景天 中 的主要 有效 成 分 ， 它 的提 取 工艺 的研 究有 很 多 ， 常见 的分 离纯化 方 法却 少 ， 对 而 也主要 只有醇沉 、乙酸铅沉淀 、有机溶剂多步萃取和 Ｈ Ｌ 等方法。对其鉴定 的方法 ，随着科技的进 ＰＣ 步多数采用 的是高效液相色谱『，但也有根据它与重氮盐反应有特异吸收值而进行 的重氮盐比色法ｌ。 ３ 】 ４ Ｊ 本 文用 乙酸 铅沉 淀 的正 交实 验优 化纯 化 方法 【，乙醇 沉淀 的正 交 实验对 红 景天 苷纯 化 ， 在 二者 的 ５ 】 并
高山红景天首次分离的化合物(I)
茎 ，具有 抗 疲 劳 、抗 缺 氧 、抗 辐 射 、提 高 机 体 免疫 能力 和延缓 衰 老 等 作 用 ¨ 。主要 分 布 于 吉 林 省 的扶 』 松县 、安 图县 和黑龙 江省 的 尚志县 、海 林 县 的 山区 。
对 购于我 国吉 林 省 长 白山地 区 安 图 县 的高 山红 景 天
醋酸 乙酯 以及 正 丁 醇 萃 取 。正 丁醇 萃 取 部 分 （０ ） ６ ｇ
进 行硅 胶柱 色谱 ，用石 油醚 ． 酸 乙酯 、醋 酸乙酯一 醋 甲 醇溶 剂 系 统 梯 度 洗 脱 ，得 到 １ 个 流 分 。 第 ４ Ｏ （ ． ｇ 、７（ ． ｇ 和 ９（ ． ｇ ３个 流 分 分 别 用 ０５ ） １０ ） ０３ ） ｓｐ ａ ｅ Ｈ ２ ｅ ｈｄｘＬ ．Ｏ柱 色谱 （ 甲醇 ） Ｄ 、０ ｓ柱 色谱 （ 醇一 甲
水 ， 度洗 脱 ） 和半微 量 制 备 型 Ｈ Ｌ Ｏ Ｓ柱 ， 梯 Ｐ ｃ（ Ｄ 甲醇
．
水 ）分 离纯 化 。从 第 ４流 分 得 到 化 合 物 ４（ ０ ） ２ ｍｇ （０ ） ２ ｍｇ 、２和 ７的混 合物 （ ７ ｇ ，第 ９流 分 得 到化 １ｍ ）
（０ａｎ６） 和 百 脉 根 苷 （ｏａｓａｉ， ） ｒｓｒ ， ｉ １ｔ ｔｌ ７ 。其 中 化 合 ｕｒ ｎ
［ 摘要 ］ 目的 ：对高 山红景天药材进行化学成分研究 。方 法 ：高山红景 天根及根茎 的乙醇提 取物 ，经正相 硅
胶柱 、０ ｓ柱 、Ｓｐ ａｅ Ｈ２ Ｄ ｅ ｈｄｘＬ －Ｏ凝胶柱色谱以及半 微量制 备型 Ｈ Ｉ ＰＪ Ｃ色谱分离 、纯化 。结果 ：分离得 到 ７个单体 化 合物 ，经谱学数据及理化性质鉴定为熊果苷 （ ｒｕｉ， ） ａｈｔ １ 、表百 脉根苷 （ｐｌ ａｓ ａｎ ２ 、垂 盆草苷 （ａ ｎｏｉ， ） ｎ ｅ ｉｔｕｔ ｌ ， ） ０ ｒｉ ｓｍｅｔｓ ３ 、 ｎ 红景天苷（ａ ｄ ｉｅ４ 、苄基 一 葡 萄糖苷 （ ｅｚｌ — ｇｕｏｙａｏｉｅ５ 、络塞维 （０ａｉ， ）和百脉根苷 （ｏ ｕ— ｓｌ ｍ８ ， ） ｉ ｄ Ｄ一 ｂ ｎｙ１ Ｄ— ｃｐｒｎｓ ， ） Ｂ ｌ ｄ ｒｓｖ ６ ｎ １ ．ｓ ｔ ｄ ｔ ¨ ，） ｒ ｎ７ 。结论 ：化合物 ｌ～ ａ ３为首次从 高山红景 天中分离得到 。 ［ 关键词 ］ 高山红景天；熊果苷 ；百脉根苷 ；垂盆草苷
高山红景天浸提液中红景天甙和酪醇的超滤纯化研究
高山红景天浸提液中红景天甙和酪醇的超滤纯化研究高山红景天系景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物,其根、茎、花、种子俱可入药,具有抗缺氧、抗疲劳、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老和增强免疫力等多种药理活性,被称为是继人参和刺五加之后的新一代环境适应原药物,目前正在得到广泛的研究和应用。
其原植物药材中主要含有甙类、黄酮类、香豆素、鞣质等多种化学成分,其中红景天甙及其甙元酪醇为主要的药理活性成分,但它们的含量却很低。
因此,有必要对原药材的浸提液进行分离和提纯,以克服产品质量差、服用剂量大等缺点。
文献报道的分离提纯方法有溶剂萃取法、柱层析法等。
柱层析法可得到较高纯度的红景天甙,但有效成分损失严重,收率太低,只适用于微量标准品的制备;溶剂萃取法的溶剂消耗量大、工艺步骤复杂、成本高,而且也给环境带来一定的压力。
超滤技术是20世纪70年代发展起来的一项膜分离技术,具有节能、高效、环保、操作简便、有效成分回收率高等优点。
目前,该技术发展迅速,已广泛应用于食品、医药、工业废水处理、超纯水制备及生物技术工业等领域。
因此,研究它在红景天甙和甙元酪醇纯化中的应用具有重要的实际意义。
作者首次将超滤技术应用于高山红景天植物原药材浸提液中主要有效成分红景天甙和酪醇的分离纯化中,并对超滤用中空纤维膜的膜材料、截留相对分子质量和适宜的工艺参数进行了对比研究。
分别用重量法、吸光度法和紫外分光光度法对浸提液、微滤液和超滤液中的固形物含量、非水杂质成分含量、主要有效成分红景天甙和酪醇的含量(以红景天甙计)进行了测定,以评价超滤膜的分离提纯效果。
最后,综合考虑各种因素,选择了超滤分离提纯高山红景天浸提液的最佳工艺条件:膜材料:PS;截留相对分子质量:10000;料液温度:40℃;操作压力:0.10 MPa;药液浓度:0.10 g/ml;pH值:7.0;进料速率:530 ml/min。
在此最佳工艺条件下,对高山红景天浸提液进行了一次超滤实验,并对处理效果进行了考察。
红景天中红景天苷和酪醇提取工艺研究
红景天中红景天苷和酪醇提取工艺研究红景天是一种生长在我国高原草甸、腹地山区的名贵野生草药，已被认为拥有一定的调节心血管功能、提高免疫力等保健作用，特别是红景天中含有的红景天苷和酪醇是两种具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生理活性成分。
在对红景天进行深入研究和开发利用的过程中，红景天苷和酪醇的提取工艺显得尤为重要。
本文将从以下三个方面来阐述红景天中红景天苷和酪醇的提取工艺研究。
一、红景天苷的提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：由于红景天苷的含量因不同的生长环境、生长状态和季节等因素而异，因此选择优质红景天原料非常重要。
2. 优化提取工艺：根据红景天苷的特性，采用水提醇沉法进行提取，调整不同的提取参数如时间、温度、浓度等以达到红景天苷提取效果最佳。
3. 精制和净化红景天苷：将提取得到的红景天苷采用ABS-8型吸附树脂进行分离纯化，得到含红景天苷98%以上的制剂。
二、酪醇的提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：同样，酪醇的提取也需要选择优质红景天原料。
2. 优化提取工艺：酪醇的提取可采用乙醇浸提法加分级分离提高提取效果，通过控制原料粉碎度、醇浓度、提取时间等参数，充分提取酪醇。
3. 精制和净化酪醇：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和光谱技术对酪醇进行精制和净化，并经过低温真空干燥制为粉末。
三、酪醇和红景天苷共同提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：这一点同样适用于酪醇和红景天苷共同提取工艺。
2. 优化提取工艺：在提高红景天苷提取效果的同时，采用合适的有机溶剂如乙醇、丙酮等进行酪醇的提取，调整提取参数使两种物质得以充分提取。
3. 精制和净化酪醇和红景天苷：可将提取得到的物质分别采用吸附剂、凝胶电泳等技术进行精制和净化，制得高纯度的酪醇和红景天苷。
通过上述分步骤阐述，可以看出红景天中红景天苷和酪醇的提取工艺是通过优化提取参数、精制和净化等方面来一步步提高提取效果和制备高纯度产品的。
这些研究成果为红景天的进一步开发应用提供了有力保障。
高山红景天多糖RSA的分离纯化和组成分析
高山红景天多糖 ,-. 的分离纯化和组成分析
5 汉丽萍5 ， 梁忠岩9 ， 张丽萍9 ， 汉丽梅@ ， 宫汝醇5 ， 马晓红（ 吉林 5 < 通化师范学院生物系，
通化 5@!==9； 9 < 东北师范大学生命科学
学院， 吉林 长春 5@==9!； 辽宁 沈阳 55=5C5） @ < 沈阳农业大学牧医学院，
表% !"# % 外植体和继代时间对愈伤组织分化苗的影响
调节作用， 它们以直接或间接的方式影响基因的活 性。分析白花假龙胆愈伤组织分化再生能力的降 低， 可能与外源激素的种类和浓度有关。同时， 内源 激素是否平衡也可能直接影响到愈伤组织的分化。
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， 而幼叶仅为 5= I 。继代培 化苗频率最高 （!5 < DI ） 养时间对愈伤组织分化苗频率也有影响。随着继代 时间的增加， 分化苗频率也逐渐降低， 并且畸形苗比 例增高。及时把 5 J 9 %- 高的小苗转移到壮苗培养 基上， 可获得健壮小苗。小苗长至 C J A %- 高时， 便 可移栽于花盆。关于分化， K0L&,$*$& 认为是受特殊 物质决定的， 分化能力的丧失是由于在培养过程中 耗尽了在原有母体组织中存在的与分化有关的物
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红景天苷及其衍生物的生物合成
红景天苷及其衍生物的生物合成红景天（Rhodiola rosea）是一种生长在高山地区的多年生草本植物，被广泛应用于药用和保健领域。
红景天苷是红景天中的一种有效成分，具有多种生物活性和药理作用。
近年来，研究人员对红景天苷及其衍生物的生物合成进行了深入的研究。
红景天苷是红景天中的主要成分，具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤和抗衰老等多种生物活性。
红景天苷的生物合成途径主要经过三个关键酶的催化作用完成。
首先，苹果酸通过苹果酸脱氢酶（MDH）催化转化为丙酮酸。
接着，丙酮酸通过丙酮酸酰基转移酶（AAT）的作用，与蔗糖磷酸（T6P）结合形成丙酮酸蔗糖磷酸。
最后，丙酮酸蔗糖磷酸通过红景天苷合成酶（RRS）的催化作用，转化为红景天苷。
红景天苷的生物合成途径中，红景天苷合成酶是关键的限速酶。
研究人员利用基因工程技术，成功地从红景天中克隆和表达了红景天苷合成酶基因。
通过对红景天苷合成酶基因进行结构和功能的研究，揭示了红景天苷合成的分子机制。
红景天苷合成酶是一种特殊的酸酯酶，其催化机制与其他酯酶有所不同。
研究发现，红景天苷合成酶的活性中心含有一个亲水性氨基酸残基，该残基能与底物的羧基氧原子形成氢键，从而促进催化反应的进行。
此外，红景天苷合成酶还具有高度的立体选择性，只能催化特定构型的底物。
除了红景天苷，红景天中还存在着其他衍生物，如rosavins和salidroside等。
这些衍生物也具有多种生物活性和药理作用。
研究表明，红景天苷是红景天中rosavins和salidroside的前体物质。
红景天苷在体内会被酶催化转化为rosavins和salidroside，从而发挥药理作用。
对红景天中其他衍生物的生物合成也进行了一定的研究。
研究发现，rosavins的合成依赖于一系列酶的协同作用。
首先，苹果酸通过苹果酸脱氢酶催化转化为丙酮酸。
接着，丙酮酸通过丙酮酸脱羧酶（ACO）的作用，转化为乙醛。
最后，乙醛通过rosavins合成酶的催化作用，与蔗糖磷酸结合形成rosavins。
红景天的提取工艺分析
进一步精制，具有稳定、安全、高效、不礞坏有效成分、使用方便且成
本低廉等优点。
造的防水质量。
参考文献：
…孙吉军．建筑屋顶防水工程实施与质量控制探讨．中国医院建筑与装
备：２００８，０４．
ｆ２ｌ佘学良浅析屋顶防水工程监理要点．中国建设信息：２００７门Ｏ． 【３】方刘晶．地区坡屋顶防水保温技术问题探讨，低温建筑技术：２００６／０３．
Ｂ
１ ２
艺及精制方法具有稳定，安全，高效，且不破坏有效成分及成本低廉等特点。
关键词：红景天提取工艺分析
Ｏ引言 高山红景天是一种景天科红景天属多年生草本植物。高山红景 天含有红景天苷、苷元（对一酪醇ｐ—ＴｙｒｏｓｏＩ，Ｃ８ Ｈ１００２）、多糖、 脂肪、甾醇、酚类化合物、黄酮、有机酸、水溶性挥发油、１８种氧基酸 以及铁、钙、镁、铜、铬、硒等３５种无机元素。现代药理学结果研究表 明，红景天具有抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、调节免疫功能及解毒等作 用，对血压及血糖具有双向调节作用，还具有镇静、抗微波辐射、促进 蛋白质代谢、消炎、强心及抗肿瘤等功效。本研究以精制品中红景天 苷的含量为指标，筛选出高山红景天最佳提取工艺和精制方法，旨在 为高山红景天制剂的开发提供理论依据。 １材料 ＳＣＬ一１０ＡＶＰ型高效液相色谱仪及ＵＶ一２２０１型紫外分光光度 计为日本Ｓｈｉｍａｄｚｕ产品，旋转蒸发器为上海青浦沪西仪器厂产品， 循环水式多用真空泵为郑州长城科工贸有限公司产品；电子恒温水 浴锅为深圳国华仪器厂产品：高山红景天药材购自于延边土特产品 经销公司，红景天苷对照品由中国药品生物制品检定所提供： ＺＴＣｌ＋１澄清剂为天津正天成澄清技术公司产品，大孔吸附树脂为 天津市海光华工有限公司产品，其他化学试剂均为分析纯。 ２方法与结果 ２．１红景天苷含量测定方法的建立与评价 ２．１．１色谱条件色谱柱为Ｈｙｐｅｒｓ．｜ＯＤＳ２Ｃ１８（５．Ｏｍｍ×
一种从女贞子中提取纯化红景天苷的方法[发明专利]
![一种从女贞子中提取纯化红景天苷的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a6b43f3c77c66137ee06eff9aef8941ea76e4b2b.png)
(10)申请公布号 CN 101775049 A(43)申请公布日 2010.07.14C N 101775049 A*CN101775049A*(21)申请号 201010111783.2(22)申请日 2010.02.08C07H 15/18(2006.01)C07H 1/08(2006.01)(71)申请人苏州宝泽堂医药科技有限公司地址215125江苏省苏州市工业园区星湖街218号纳米科技园A2栋101室(72)发明人刘东锋 张翼(54)发明名称一种从女贞子中提取纯化红景天苷的方法(57)摘要本发明涉及从女贞子中提取纯化红景天苷的方法，工艺以女贞子为原料，15-50％乙醇炖制，烘干，所得粗品分散于其5-8倍量(V/W)的冷水中，加其3-5倍量(V/W)的乙酸乙酯萃取，水相过截留分子量300-500的纳滤膜除杂，透过液减压浓缩至原体积的1/10-1/15，静置结晶，再在90-95％的甲醇中饱和溶解，重结晶3次得到产品。
采用该法生产品原料利用率高，溶剂用量少，成本低、收率高、纯度高。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 3 页权 利 要 求 书CN 101775049 A1/1页1.一种从女贞子中提取纯化红景天苷的方法，其特征在于包含以下步骤：1)乙醇炖制：取净女贞子，置反应器中，加原料量1/4-1/5的乙醇水溶液拌匀，密封，闷润4-6h，用蒸汽加热，炖制12-24h，烘箱中烘干，得粗品；2)膜分离：将上述粗品分散于冷水中，过滤，用乙酸乙酯萃取，取水相过截留分子量300-500的纳滤膜，透过液浓缩，静置结晶；3)重结晶：将粗结晶滤出在90-95％甲醇中加热饱和溶解，静置结晶，滤出结晶物，重复2次，放置结晶，滤出低温干燥即得产品。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述1)中乙醇炖制条件：乙醇水溶液的浓度为15-50％。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述2)中冷水用量为粗品的5-8倍量(V/W)，乙酸乙酯用量为粗品的3-5倍量(V/W)。
高速逆流色谱纯化红景天中的红景天甙
宁 夏农 林 科 技 。Ｎ ｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ．ａ ｎ ｄ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ． Ｓ ｃ ｉ ． ＆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ． ２ ０ １ ３ ， ５ ４ （ ０ ３ ） ： １ ０ ６ — １ ０ ８
高速逆流色谱纯化红景天中的红景天甙
【 Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ］ Ｔ ｈ ｉ ｓ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ｇ ｉ ｖ ｅ ｓ ａ ｎ ｅ ｗ ｗ ａ ｙ ｔ ｏ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ｅ ｈ ｉ ｇ ｈ － ｐ ｕ ｒ ｉ ｔ ｙ ｓ ａ ｌ ｉ ｄ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ．
ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ＨＳ Ｃ Ｃ Ｃ ａ ｎ ｄ ＨＰ Ｌ Ｃ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｗ ｏ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｌ ｖ ｅ ｎ ｔ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｓ ｅ ｄ ｏ ｆ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｏ ｆ ｏ ｒ ｍ ：ｍｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ｌ： ｗａ ｔ ｅ ｒ（ ４ ：１ ． ５： ２） ．
关键词 ： 红景 天甙 ；高效液相 色谱 ；高速 逆流 色谱
中图 分 类 号 ： Ｒ９ １ ４ 文 献 标 识码 ： Ａ 文 章 编号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ０ ４ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ — ０ １ ０ ６ — ０ ３
Ｓｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｐｕ ｒ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｓ ａｌ ｉ ｄ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｂ ｖ ＨＳＣＣＣ
［ Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ］Ｔ ｈ ｅ ｐ ｕ ｉ ｒ ｔ ｙ ｏ ｆ ｓ ａ ｌ ｉ ｄ ｒ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｇ ｅ ｔ ８ ４ － ３ ％，ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｇ ｅ ｔ ９ ５ ． ７ ％ｊ ｕ ｓ ｔ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｏ ｎ ｅ ｐ ｕ ｉ ｒ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
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第20卷 第3期 四川理工学院学报（自然科学版） V ol ．20 No ．3JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY OF2007年6月 SCIENCE & ENGINEERING （NATURAL SCIENCE EDITION ） Jun ．2007文章编号：1673-1549（2007）03-0061-03高山红景天苷的初步纯化袁先铃1，雷大利2，黎昌华2（1.四川理工学院生物工程系，四川 自贡 643000；2.四川省富顺县第二高级职业中学校，四川 自贡 643000）摘 要：通过正交实验和对比实验，找出较优的红景天苷初步纯化的方法。
以纯化后样品的红景天苷得率为考察指标，采用乙酸铅沉淀法正交实验和乙醇沉淀法正交实验，确定较优化的工艺参数。
1.乙酸铅沉淀法的最佳方案即乙酸铅浓度为5%，沉淀时间为50min ，温度为4℃，红景天苷含量为7.58%；2.乙醇沉淀法的最佳方案即乙醇浓度为70%，沉淀时间为24h ，温度为4℃，红景天苷含量为20.69%。
结论 醇沉法和乙酸铅沉淀法均能提高红景天苷的纯度，醇沉法优于乙酸铅沉淀法。
关键词：红景天苷；乙酸铅沉淀；醇沉；纯化中图分类号：O156.7 文献标识码：A高山红景天（Rhodicla Sachaliensis A.Bar.）系景天科多年生草本植物，在长白山区海拔1700m ～2500m 的苔原带上生长较多。
高山红景天在国内外主要作为滋补强化剂，广泛用于抗疲劳、抗缺氧、抗辐射、抗衰老、镇静强心和提高脑力、体力机能等方面[1-2]。
红景天苷是红景天中的主要有效成分，对它的提取工艺的研究有很多，而常见的分离纯化方法却少，也主要只有醇沉、乙酸铅沉淀、有机溶剂多步萃取和HPLC 等方法。
对其鉴定的方法，随着科技的进步多数采用的是高效液相色谱[3]，但也有根据它与重氮盐反应有特异吸收值而进行的重氮盐比色法[4]。
本文用乙酸铅沉淀的正交实验优化纯化方法[5]，乙醇沉淀的正交实验对红景天苷纯化，并在二者的最佳方案进行比较，得出最优方案。
1 材料与仪器高山红景天的新鲜根茎，购于天津剑门关开发有限公司；红景天苷标准品，购于上海君创生物科技有限公司；其他试剂均为分析纯，购于重庆川东化工（集团）有限公司。
N-1000EYELA 旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；SHB-Ⅲ循环式多用真空泵（上海本波仪器有限公司）；AR2140电子分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；UV-2000紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）；LXJ-Ⅱ离心沉淀机（上海医用分析仪器厂）。
2 方法与结果2.1 红景天苷的提取[6-7]取烘干的红景天根茎，用粉粹机磨成粉总共250g ，在80℃恒温的水浴中用70%乙醇回流提取3次，每次40min 。
收集提取液，弃渣；将用纱布过滤后的提取液用低速制备离心机（4000r/min ）离心10min ，弃沉淀；将离心后的上清液用旋转蒸发仪60℃真空浓缩至无醇味。
2.2 红景天苷的检测方法—重氮盐比色法[4]收稿日期：2006-10-25作者简介：袁先铃（1979-），女，重庆人，助教，硕士，主要从事食品安全与工程及保健酒的开发与研究。
红景天苷浓度与吸光度的关系62 四川理工学院学报（自然科学版） 2007年6月2.3 标准曲线的绘制精密称取红景天苷对照品5.9mg ，置于25mL 容量瓶中，用水稀释至刻度得标准溶液。
分别吸取标准液1、2、3、4、5mL 于10mL 容量瓶中，各加水至5mL ，再各加入2% Na 2CO 3 1.5mL ，放置片刻，分别加重氮化试剂1mL ，加水至刻度，摇匀，4min 后于491nm 处测吸收度A 。
得出线性回归方程为：A=5.584 7C －0.036 2，R 2＝0.999 5。
如图（1）所示：2.4 乙酸铅沉淀法对纯化的影响以纯化后所得的红景天苷含量为考察指标，纯化结果见表1和表2。
表1 乙酸铅沉淀法正交实验结果因素吸光值 红景天苷 得率实验号 A （乙酸铅浓度%） B （时间min ） C （温度℃）A y i （%） 1 1（5%） 1（10） 1（4） 0.270 5.082 1 2（30） 2（15） 0.209 3.373 1 3（50） 3（常温） 0.326 5.184 2（10%） 1 2 0.233 0.965 2 2 3 0.218 1.186 2 3 1 0.230 1.417 3（15%） 1 3 0.141 0.68 3 2 1 0.126 0.639 3 3 2 0.145 0.751i y 4.54 2.21 2.37 2i 1.18 1.72 1.69 3i y 0.66 2.45 2.32 R j 3.88 0.73 0.68最优组合 A 1 B 3 C 1 表2 乙酸铅沉淀法方差分析方差来源 离均差平方和 自 由 度 方 差 F 值 显 著 性A 26.644 2 13.322 52.24 *B 0.810 2 0.405 1.588C 0.858 2 0.429 1.68 误差e 0.51 2 0.255 注：“*”为显著意义，“**”为极显著意义。
从表1和表2 的结果表明：（1）A （乙酸铅浓度）、B （时间）和C （温度）对红景天苷的纯化都有影响，其中A （乙酸铅浓度）对纯化有显著影响；（2）影响因素的主次为：乙酸铅浓度＞时间＞温度；最优组合为A 1B 3C 1，即乙酸铅浓度为5%，沉淀时间为50min ，温度为4℃，红景天苷含量为7.58%。
2.5 乙醇沉淀法对纯化的影响以纯化后所得的红景天苷含量为考察指标，纯化结果见表3和表4。
表3 乙醇沉淀法正交实验结果因素 吸光值 红景天苷得率实验号A （温度℃）B （时间h ）C （乙醇浓度%）Ay i （%） 1 1（4） 1（12） 1（60） 0.527 12.922 1 2（18） 2（70） 0.465 15.053 1 3（24） 3（80） 0.569 17.854 2（15） 1 2 0.319 10.915 2 2 3 0.265 11.376 2 3 1 0.621 13.257 3（常温） 1 3 0.219 12.738 3 2 1 0.528 12.09 9 3 3 2 0.497 16.191i 15.27 12.19 12.75 2i y 11.84 13.05 14.05 3i y 13.67 15.76 13.98 R j3.43 3.57 0.7 最优组合 A 1 B 3 C 2第20卷第3期袁先铃等：高山红景天苷的初步纯化63表4 乙醇沉淀法方差分析值显著性方差来源离均差平方和自由度方差 F**323.632A 17.678.835398.910.89**2B 21.78*56.7521.6C 3.20100.027误差e 0.055 2注：“*”为显著意义，“**”为极显著意义。
从表3和表4的结果分析：（1）A（温度）、B（时间）、C（乙醇浓度）对红景天苷的纯化都有着影响，而且B（时间）、A（温度）对纯化有着极显著影响；（2）影响因素的主次为：时间＞温度＞乙醇浓度，最优组合为A1B3C2，即乙醇浓度为70%，沉淀时间为24h，温度为4℃，红景天苷含量为20.69%。
2.5 乙酸铅沉淀法和乙醇沉淀法的比较乙酸铅沉淀法的最优组合（A1B3C1）和乙醇沉淀法的最优组合（A1B3C2）的比较，结果见表5。
表5 乙酸铅沉淀法和乙醇沉淀法的结果比较体积(mL) 干物质重（g）吸光度红景天苷含量（%）乙酸铅沉淀法 19 2.017 0.427 7.58乙醇沉淀法 60 3.241 0.614 20.69 从表5可以看出乙酸铅沉淀法和乙醇沉淀法的最优组合中的红景天苷的含量比之前的都高，从而验证了正交试验的可实行性。
乙醇沉淀法的含量比乙酸铅沉淀法的含量高，同时乙醇沉淀法不会涉及重金属残留等有害因素的影响，从而说明乙醇沉淀法优于乙酸铅沉淀法。
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