高山红景天总甙的抗衰老作用

E ffect of n2butanol fraction from Fructus K ochiae(地肤子)on intestinal motility
Dai Yue,Xia Yufeng,Y ang Li
(Department of Pharmacology of Chinese Materia Medica,China Pharmaceutical University,Nanjing　210038)
Objective:To examine the effect of n2butanol fraction from Fructus K ochiae(NBF K)on intestinal motility of mice.Methods:5% charcoal as a marker was orally administered to determine the propulsive function of small intestine(PFSM).The effects of NBF K were ob2 served in normal mice and mice pretreated with drugs such as fenfluramine and dopamine.R esults:NBF K50mg/kg more potently acceler2 ated PFSM in mice pretreated with fenfluramine,dopamine,acetic acid and Nω2nitro2L2arginine than in normal mice.However,in at2 ropine2pretreated mice,the accelerative effect of NBF K on PFSM disa ppeared.Conclusion:NBF K improves the propulsive function of small intestine,and the mechanism of action probably involves cholinergic nerve and nitric oxide.
K ey w ords　Fructus K ochiae(地肤子);intestinal motility;cholinergic nerve;nitric oxide
高山红景天总甙的抗衰老作用
苗艳波　师海波　孙英莲　王力平　周重楚
(吉林省中医中药研究院　长春　130021)
提　要　目的:观察高山红景天总甙的抗衰老作用。

方法:用自然衰老小鼠观察高山红景天对清除自由基相关酶:超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH2PX)、过氧化氢酶(CA T)活性的影响;同时观察其对脂质过氧化产物的清除作用。

结果:高山红景天对血中SOD、CA T及肝组织中GSH2PX活力均有明显的提高作用,明显降低血浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)及肝组织中脂褐素的产生。

关键词　高山红景天总甙;SOD;CA T;GSH2PX;MDA;脂褐素
高山红景天(Rhoaiola sacha Linensis A.Bor)有抗疲劳、抗乏氧、提高脑力和体力机能、提高机体免疫功能等作用[1],本文对其总甙的抗氧化作用进行了初步研究,现将结果报告如下。

1　材料
1.1　试验药物及试剂　高山红景天总甙为棕红色浸膏,含皂甙70%,本院化学室提供;人参茎叶皂甙由本院药理室李龙云提供,含量90%。

均临用时以蒸馏水配成所需浓度。

GSH2PX 试剂盒,长春汇力生物工程技术开发中心产品,批号:990330。

1.2　动物　昆明种小鼠,青年鼠18～22g、老年鼠6月龄,雌雄各半,购自本院实验动物饲养室,合格证号:990101017。

2　方法与结果
2.1　对老龄小鼠红细胞SOD活力的影响　老龄小鼠50只分5组,另设青年对照组。

连续给药5天,于末次给药后1小时眼眶静脉取血,放入肝素抗凝的试管中,生理盐水洗涤3次,分离出红细胞,取沉积红细胞加等体积去离子水使之溶血,在冰浴中加入预冷的0.42倍体积乙醇氯仿抽提液,混匀,放置30分钟,加0.16倍体积去离子水,加塞混匀,离心10分钟,取上清液按Pyrogallol2NB T显色法[2]测定SOD含量,结果高山红景天能明显提高老龄小鼠血液中SOD的含量,见表1。

表1　高山红景天对老龄小鼠红细胞SOD及CAT活性、肝中GSH2Px和脂褐质含量及血浆MDA的影响( x±s,n=10)组别剂量(g/kg)鼠数(只)SOD(μg/ml)GSH2PX活力(u/g肝组织)K/gHb MDA(nmol/ml)脂褐素含量(u/g)青年小鼠对照1066.55±27.023340.54±7.913351.62±9.7633 4.56±1.3033276.88±40.9133老龄小鼠对照1023.63±7.9522.77±5.3825.68±9.67 6.63±1.14370.62±61.54
高山红景天 2.81047.91±16.443331.80±7.743342.44±10.9933 4.62±1.1033297.36±49.0333高山红景天 1.41043.98±19.653328.39±6.50336.80±12.063 5.24±1.073308.80±49.173高山红景天0.71035.74±15.22325.44±7.3232.10±8.96 5.92±1.59338.13±77.65
人参茎叶皂甙0.21041.11±10.863332.46±7.593337.77±9.743 4.74±0.8933296.90±53.913 与老龄小鼠对照组比较3P<0.05,33P<0.01(下同)
2.2　对老龄小鼠肝中GSH2PX的影响　分组、给药同前,于末次给药后1小时脱臼处死小鼠,取新鲜肝组织用p H7.0磷酸缓冲液制成10%肝匀浆,3000rpm离心10分钟,取上清液用GSH2 PX试剂盒测定活力。

结果高山红景天能增加老龄鼠肝中GSH2PX的活力,见表1。

2.3　对老龄小鼠红细胞中CA T的影响　分组、给药同前,于末次给药后1小时小鼠摘眼球取血,肝素抗凝,离心后分离出红细胞,用生理盐水洗涤3次,取压紧的红细胞加入等体积的蒸馏水使成1∶1的溶血液,按Nelson法[3]测定并计算红细胞中CA T 活力。

结果高山红景天能显著增加老龄小鼠红细胞CA T活力,
02中药药理与临床2004;20(5)
见表1。

2.4　对老龄小鼠血浆中脂质过氧化产物MDA的影响　分组、给药同前,于末次给药后1小时小鼠摘眼球取血,肝素抗凝,然后放入37℃水浴中静置10分钟,2500rpm离心10分钟,取血浆按TBA反应比色法[4]测定血浆中的MDA含量。

结果高山红景天能明显降低老龄小鼠血浆中脂质过氧化产物MDA的含量,见表1。

2.5　对老龄小鼠肝脏中脂褐素生成的影响　分组、给药同前,于末次给药后1小时脱臼处死小鼠,取新鲜肝组织200mg,用氯仿2甲醇(2∶1)液4ml制备匀浆,而后加入等量蒸馏水剧烈震荡3分钟,3000rpm离心10分钟,吸取氯仿层于另一试管中,加氯仿5ml,紫外灯下照射30秒,以激发波长360nm,发射波长450nm 处测定样品荧光强度。

以每毫升0.05mol/L硫酸含0.1μg硫酸奎宁的溶液的荧光强度为10单位计算脂褐素的含量。

结果高山红景天能明显抑制老龄小鼠肝脏中脂褐素的生成,见表1。

3　讨论
现代衰老学说认为,自由基及所诱导的脂质过氧化对细胞和机体的损伤与机体的衰老过程有关。

老年人体内脂褐质的堆积也与膜的过氧化有关。

本文实验结果表明,高山红景天总皂甙能明显提高老龄小鼠红细胞中SOD及过氧化氢酶活力,提高肝组织中GSH2PX的活力,表明其可使机体清除自由基的能力明显增强;明显降低老年小鼠血浆脂质过氧化产物丙二醛含量,抑制肝组织中脂褐素的生成,表明高山红景天总皂甙可明显减轻机体脂质过氧化反应,降低生物膜的过氧化程度,减轻机体代谢过程中氧化还原反应产生的自由基对机体的损害,从而预防和延缓机体衰老。

参考文献
1　王本祥,主编.现代中药药理学.第一版.天津:天津科学技术出版社,1997∶1200
2　刘智峰,等.血液中超氧化物歧化酶测定的光化学扩增法.军事医学科学院院刊,1986;10(4)∶313
3　Nelson DP,K iesow LA.Enthalpy of decomposition of hydrogenper2 oxide by catalase at25℃(with molar extrnction coefficients of H2O2solu2 tions in the UV).anal Biochem,1972;49∶474
4　Buege JA,Aust SD.Microsomal lipid peroxidation.Methods Enzymol, 1978;52∶302
淡豆豉提取物降糖有效部位研究
牛丽颖　王鑫国　葛喜珍　崔力剑　白霞
(河北医科大学中医学院　石家庄　050091)
提　要　目的:筛选淡豆豉提取物降糖作用的有效部位。

方法:先将淡豆豉用80%乙醇提取,再用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇分别萃取不同的有效部位,以四氧嘧啶及链脲佐菌素腹腔注射造成小鼠及大鼠的糖尿病模型,观察血糖和血脂的变化。

结果:四氧嘧啶糖尿病小鼠灌胃给予淡豆豉各提取部位10天后,总提物、乙酸乙酯部分、正丁醇部分小鼠血糖均较模型组小鼠低,血清甘油三酯水平亦较模型组小鼠低。

链脲佐菌素糖尿病大鼠灌胃给予淡豆豉各提取部位10天后,总提物、乙酸乙酯部分、正丁醇部分大鼠血糖均较模型组大鼠低。

结论:淡豆豉总提物、乙酸乙酯部分、正丁醇部分均有一定的降糖作用,其中正丁醇部分更为明显。

关键词　淡豆豉;血糖;血脂
我们的前期研究发现,淡豆豉有一定的调脂作用[1],并意外发现其对血糖异常有明显的调节作用,为进一步探讨其降糖的有效部位,进行了以下的探索。

1　材料
1.1　试验药物　淡豆豉购于石家庄乐仁堂药店。

称取淡豆豉1kg,用80%乙醇冷浸24h,用80%乙醇提取三次,每次加热回流2h,乙醇量为3000ml,回收乙醇。

提取物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取三次,回收溶媒后分别制成干膏备用。

另称取淡豆豉1kg,依照上述方法制成总提取物浸膏。

1.2　动物　昆明种小鼠,雄性,体重18～22g,河北医科大学实验动物学部提供,动物合格证号:冀医动字04056;SD大鼠,雄性,体重180～200g,由河北医科大学实验动物学部提供,合格证号为医动字04057号。

1.3　试剂与仪器　四氧嘧啶,sigma公司产品,临用前用生理盐水配成2%浓度使用;链脲佐菌素,sigma公司产品,购于石家庄市拜昂生物技术有限公司,临用前用0.1mol/L的柠檬酸缓冲液(p H4.5)配成10mg/ml溶液使用。

稳步血糖仪,美国强生。

1.4　方法
1.4.1　对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响　小鼠100只禁食24h,腹腔注射2%四氧嘧啶生理盐水溶液100mg/kg,48h后尾部取血测血糖,选择血糖值大于13.8mmol/L的小鼠60只随机分成6组,另取10只正常小鼠作为正常对照组,每日灌胃一次,容量为0.2ml/10g体重,连续10天,每日观察小鼠一般状况,记录小鼠进食量、饮水量,检测小鼠血糖水平,末次给药后所有小鼠禁食不禁水,12h后取血测血脂。

1.4.2　对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血糖的影响　大鼠常规饲养1周后眶后静脉取血,分离血清,检测空腹血糖水平,选择血糖水平在3.6～5.4mmol/L范围内的大鼠80只,随机取其中10只作为正常对照组,其余70只大鼠分别腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50mg/kg),72小时后检测空腹血糖,选择60只血糖水平大于13.8mmol/L的大鼠随机分为6组,每日灌胃药物或等容量蒸馏水一次,容量为1ml/100g,连续10天,末次给药30分钟后,取血测定血糖水平。

2　结果
2.1　淡豆豉提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及血脂的影响
12
中药药理与临床2004;20(5)。