RNA干扰下调FXR1基因表达对卵巢癌细胞系A2780生物学功能的影响

合集下载

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用引言：癌症是当今世界面临的一大挑战，而抗癌研究一直是科学家们的重点关注领域。

近年来，RNA干扰技术作为一种新兴的基因调控方法，正在逐渐展现其在抗癌研究中的巨大潜力。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及在抗癌研究中的进展。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是一种通过沉默特定基因表达的方法。

其原理是利用双链RNA分子（small interfering RNA，siRNA）或长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）与目标mRNA序列互补配对，从而导致目标mRNA的降解或转录抑制。

这种基因调控机制被广泛应用于基因功能研究和药物开发领域。

二、RNA干扰技术的应用1. 基因功能研究：RNA干扰技术可以通过靶向特定基因，使其表达受到干扰，从而研究该基因在细胞生理和病理过程中的功能。

通过RNA干扰技术，科学家们可以揭示癌症相关基因的作用机制，为癌症的发生和发展提供新的认识。

2. 药物靶点筛选：RNA干扰技术可以通过沉默癌症相关基因，评估其在肿瘤生长和转移中的重要性，从而为药物靶点的筛选提供依据。

这种筛选方法可以加速抗癌药物的研发过程，提高药物的准确性和有效性。

3. 抗癌治疗：RNA干扰技术可以通过靶向癌症相关基因，抑制其表达，从而达到抗癌治疗的目的。

临床研究已经证明，RNA干扰技术对于某些癌症类型具有显著的治疗效果。

例如，通过靶向癌细胞中的特定基因，可以使癌细胞的增殖和转移受到抑制，从而延长患者的生存期。

三、RNA干扰技术在抗癌研究中的进展1. 抗血液系统肿瘤：RNA干扰技术在治疗白血病、淋巴瘤等血液系统肿瘤方面取得了显著进展。

通过靶向癌细胞中的特定基因，可以有效抑制癌细胞的增殖和转移，提高患者的生存率。

2. 抗实体肿瘤：RNA干扰技术在治疗实体肿瘤方面也取得了一定的突破。

通过靶向肿瘤细胞中的关键基因，可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭能力，从而达到抗癌治疗的效果。

RNA干扰和基因编辑技术在疾病治疗中的应用研究

RNA干扰和基因编辑技术在疾病治疗中的应用研究随着科技的不断发展，新型医疗技术也不断涌现，其中RNA干扰和基因编辑技术在疾病治疗中的应用越来越受到关注。

RNA干扰技术，又称RNAi技术，是一种利用长度约20-30个核苷酸的双链RNA产生的小RNA分子对特定mRNA分子进行特异性切割和降解的技术。

这种技术可以抑制或消除相应基因的表达，从而影响相应蛋白的合成，进而降低或消除疾病发生的风险。

RNA干扰技术在各种各样的疾病治疗中都有应用，例如癌症、冠心病、糖尿病等等。

在癌症治疗中，RNA干扰技术可以选择性地靶向癌细胞中的某些基因，使其失去活性并防止癌细胞的生长和繁殖。

同时，该技术可以避免对正常组织造成伤害。

在冠心病治疗中，RNA干扰技术可以靶向一些与心血管疾病有关的基因，从而降低患者的心血管病发生率。

在糖尿病治疗中，RNA干扰技术可以针对胰岛素等相关基因，调控血糖水平，从而降低糖尿病患者的血糖水平和并发症的发生率。

除了RNA干扰技术外，基因编辑技术也是一种重要的治疗方法。

基因编辑技术，又称基因修饰技术，是一种利用CRISPR/Cas9或其他基因编辑工具直接修改DNA序列的技术。

该技术可以用于疾病的基因治疗、疾病模型的构建以及生物基因修饰等领域。

与RNA干扰技术相比，基因编辑技术的应用更加广泛。

例如在遗传性疾病治疗中，该技术可以直接编辑患者的基因序列，从而纠正肝性脑病、克隆体病、囊性纤维化等疾病。

在细胞治疗领域，该技术可以直接编辑细胞的基因序列，例如CAR T细胞治疗用于防癌免疫治疗。

同时，在药物研发领域，基因编辑技术也被广泛应用，其可以用于构建药物的靶点和筛选药物的相关基因等。

当然，基因编辑技术也存在着一些问题和难点。

例如，随着对基因编辑技术的掌握越来越深入，未来存在着制造出超人类的可能性。

此外，基因编辑技术的精度和安全性也是目前需要进一步探索的问题。

针对这些问题，科学家们正在寻求更好的方法进行研究和应用。

RNA干扰HIF-1α对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响

RNA干扰HIF-1α对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响摘要】目的缺氧诱导因子-1 α (HIF-1 α)是参与肿瘤细胞代谢的核心转录因子。

本研究旨在于评估RNAi下调HIF-1a对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响。

方法化学合成特异性HIF-1a siRNA，转染缺氧条件下培养的肝细胞肝癌细胞系HepG2，利用Westernblot技术检测转染后HIF-1a，血管生产因子，和基质金属蛋白酶2表达情况。

MTT分析及裸鼠皮下接种肿瘤细胞明确细胞增殖率。

结果乏氧条件培养，HIF-1α表达减少61.54%，VEGF表达减少64.71%；MMP-2表达减少53.33%。

HepG2 细胞增殖力下降50%，接种裸鼠肿瘤形成缓慢。

结论 HIF-1a SiRNA抑制HIF-1α表达，抑制肝癌细胞系生长。

其机制可能与下调血管生成因子和基质金属蛋白酶表达有关。

【关键词】缺氧诱导因子-1 α RNA干扰肝细胞肝癌【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0078-03前言肝细胞肝癌是危害人类健康的第五大恶性肿瘤，每年大约500,000新发病例，肿瘤致死率位居第三位[1-2]。

血管丰富是影响肝癌预后的主要原因，在肿瘤生长和转移过程起重要作用。

低氧是实体瘤微环境的基本特征之一，局部缺氧微环境使肿瘤细胞的一些基因和蛋白表达发生改变。

这些变化使肿瘤细胞在适应缺氧微环境的同时，也会增加肿瘤血管生成。

在这个过程中转录因子HlF-l起着中枢纽带的作用[3]。

缺氧诱导因子是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物及人体的一种转录因子[4,5]。

研究证实HIF—l在动物及人体许多肿瘤中大量表达，对肿瘤的生长、血管生成、转移、凋亡及耐药皆有影响。

HIF-1α与HIF-1β结合形成有转录活性的HIF-α，从而调节血管生成，肿瘤生长和凋亡等活动。

常氧情况下，HIF-1α维持低浓度状态。

缺氧状态下，更多的HIF-1α与HRE结合，刺激血管生成，在肿瘤细胞浸润、转移方面起重要作用。

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用癌症，一直以来都是威胁人类健康的重大疾病之一。

随着科学技术的不断发展，新的治疗方法层出不穷，其中 RNA 干扰技术在癌症治疗领域展现出了巨大的潜力。

RNA 干扰（RNA interference，简称 RNAi）是一种由双链 RNA 诱发的基因沉默现象。

它通过降解具有同源序列的 mRNA，从而特异性地抑制基因表达。

这一机制的发现为癌症治疗提供了全新的思路和策略。

在癌症的发生和发展过程中，往往存在着多个基因的异常表达。

这些异常表达的基因可能促进癌细胞的增殖、存活、侵袭和转移，或者抑制癌细胞的凋亡。

RNA 干扰技术能够针对这些关键的基因进行特异性沉默，从而达到抑制癌症进展的目的。

例如，在乳腺癌中，HER2 基因常常过度表达，导致癌细胞的恶性增殖和侵袭。

通过 RNA 干扰技术特异性地沉默 HER2 基因的表达，可以有效地抑制乳腺癌细胞的生长和扩散。

同样，在肺癌中，EGFR 基因的突变和过表达也是常见的致癌因素。

利用 RNA 干扰技术靶向 EGFR 基因，能够显著降低肺癌细胞的活性，为肺癌的治疗带来新的希望。

RNA 干扰技术在癌症治疗中的应用方式多种多样。

其中，最常见的是使用小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）。

siRNA 是一段长度约为 21-23 个核苷酸的双链 RNA，能够与特定的 mRNA 结合并诱导其降解。

为了将 siRNA 有效地递送到癌细胞内，科学家们开发了多种载体系统。

脂质体是一种常用的 siRNA 载体。

它具有良好的生物相容性和细胞摄取能力，能够将 siRNA 包裹在内部，并通过与细胞膜融合的方式将其递送入细胞。

纳米颗粒也是一种有潜力的载体，它们可以通过修饰表面特性，实现对癌细胞的特异性靶向传递，提高siRNA 的治疗效果。

此外，病毒载体在 RNA 干扰技术的应用中也发挥着重要作用。

腺病毒、慢病毒等病毒载体能够高效地感染细胞，并将携带的 siRNA 表达元件整合到细胞基因组中，实现长期稳定的基因沉默。

RNA干扰技术在癌症治疗中药物靶点筛选意义

RNA干扰技术在癌症治疗中药物靶点筛选意义随着癌症的发病率不断上升，寻找新的治疗手段成为科学家们的重要任务。

RNA干扰技术作为一种强有力的基因沉默工具，近年来在癌症治疗中发挥了重要作用。

该技术通过介导特定RNA序列的降解，达到沉默靶基因的效果，从而抑制恶性肿瘤的生长和扩散。

在癌症治疗中，RNA干扰技术可以被用来筛选药物靶点，这在新药开发中具有重要意义。

药物靶点是指药物与细胞分子相互作用的特定位点，通过调节靶点的功能，可以干扰细胞正常生理过程或恶性肿瘤的异常增生。

然而，在癌症治疗中，寻找适当的药物靶点一直是一个挑战。

RNA干扰技术通过可靠且高效的靶基因沉默，为确定药物靶点和研发新药物提供了有力的方法。

首先，RNA干扰技术可以通过筛选靶基因，帮助科学家们探究不同基因在癌症中的功能。

以RNA插入技术为例，通过将RNA序列导入到细胞中，靶向敲除特定基因，可以观察到该基因沉默所带来的细胞和生物学行为改变。

通过高通量筛选技术，可以在全基因组和一揽子基因组中快速鉴定出具有与癌症相关功能的潜在靶点。

这种筛选方法可以加速对癌症发生机制的理解，同时为新药物的开发提供有力的依据。

其次，RNA干扰技术可以用于筛选靶向治疗癌症的药物候选物。

现有的药物筛选方法往往只能针对单一的靶点进行研究，并且存在许多限制条件。

而RNA干扰技术可以同时对上千个基因进行靶向，通过高通量筛选技术，确定对于癌症细胞具有显著毒性的候选物。

这种方法可以更加全面地研究不同药物与靶基因的相互作用，从而提高筛选到具有较高疗效的药物几率。

此外，RNA干扰技术还可以用于筛选靶向癌症耐药性的药物。

癌症细胞的耐药性是临床治疗中常见的问题，导致药物治疗不彻底或无效。

通过RNA干扰技术，可以诱导细胞特定基因的沉默，从而模拟癌症耐药性状态。

研究人员可以利用这种方法，鉴定出对于治疗耐药癌症的药物候选物，为克服癌症耐药性提供新的思路。

最后，RNA干扰技术在癌症治疗中的意义还体现在个体化治疗方面。

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用近年来，癌症的发病率不断攀升，成为全球范围内的严重健康问题。

虽然现有的治疗手段有助于控制和缓解癌症症状，但仍然需要更加有效和安全的治疗方法来提高患者的生存率和生活质量。

在这方面，RNA干扰技术作为一种具有潜力的治疗策略，日益受到研究人员的关注。

本文将探讨RNA干扰技术在癌症治疗中的应用以及其潜在的临床价值。

RNA干扰是一种通过RNA分子干扰特定基因表达的技术。

这种技术利用了细胞内存在于多种生物系统中的一种现象，即RNA干涉(RNA interference, RNAi)。

RNAi是一种调节基因表达的天然机制，通过抑制特定mRNA分子的翻译过程，从而有效地降低相关蛋白质的表达水平。

在癌症治疗中，RNA干扰技术可以被用于两个主要方面：癌症相关基因的靶向沉默和药物载体的基因递送。

首先，RNA干扰技术可以用于靶向沉默癌症相关基因。

癌症的发生和发展往往与某些异常的基因表达或突变有关。

通过设计和合成特定的小干扰RNA (small interfering RNA，siRNA)，可以靶向性地沉默这些异常基因，从而抑制癌症细胞的增殖和扩散能力。

例如，一项研究发现，靶向沉默癌症细胞中的抑癌基因p53的siRNA能够显著抑制癌细胞的生长，并且增强化疗和放疗的疗效。

这表明RNA干扰技术可以在治疗上产生协同效应，有助于增强现有治疗手段的疗效。

其次，RNA干扰技术还可以用于药物载体的基因递送。

在癌症治疗中，通过合成适当的RNA分子，并将其结合到纳米颗粒或其他递送系统中，可以将抗癌药物准确地运送到肿瘤细胞中。

这种药物递送系统能够提高药物在肿瘤组织中的浓度，同时减少对正常组织的毒副作用。

一项研究报告显示，通过使用siRNA作为药物载体，将抗癌药物运送到乳腺癌细胞中，可以显著增强药物的治疗效果，并抑制肿瘤生长。

这为开发更有效的癌症治疗策略提供了新的途径。

RNA干扰技术具有一些与传统治疗方式相比的优势。

RNA干扰在细胞调控中的作用

RNA干扰在细胞调控中的作用细胞调控是生物体内各种复杂生理过程的基础，也是维持机体正常功能的关键。

在细胞调控中，RNA干扰起着重要的作用。

RNA干扰是一种通过特异性降解靶基因mRNA的机制，以调节基因表达和维持基因组稳定的方式。

在过去的几十年里，RNA干扰已成为分子生物学和生物医学研究中的重要工具，并在当前的研究领域中有着广泛的应用。

RNA干扰是一种通过双链RNA介导的降解特定mRNA的生物学过程。

它的发现源于人们对植物中双链RNA导致基因剪接异常的观察。

随后的研究揭示了RNA干扰在多种生物中的存在，并被发现能有效地靶向基因表达。

RNA干扰的机制主要通过两种方式实现：siRNA介导的RNA干扰和miRNA介导的RNA干扰。

siRNA是由外源双链RNA引起的RNA干扰。

它可以来源于体外合成的siRNA，也可以由细胞内的dsRNA本身产生。

siRNA进入到细胞内后，与RNA诱导的沉默复合物（RISC）结合，形成活化状态的RISC-siRNA复合物。

RISC-siRNA复合物的一条链将靶标mRNA选择性降解，另一条链用于重复循环这个过程，从而迅速地和高效地靶向特定mRNA，抑制其翻译和表达。

miRNA是由内源性的长RNA产生的RNA干扰。

miRNA分子经过一系列成熟步骤后，进入RISC复合物中。

与siRNA类似的是，RISC-miRNA复合物靶向靶基因mRNA，并将其靶向选择性降解。

与siRNA不同的是，miRNA能够在较长时间范围内调节基因表达，从而对细胞调控起到更稳定的作用。

RNA干扰在细胞调控中的作用是多方面的。

首先，RNA干扰可以调节基因表达。

通过选择性降解特定mRNA，RNA干扰可以有效地抑制基因的翻译和表达。

这对于细胞调控来说意义重大，因为不同的基因表达水平可以调节细胞的功能、分化和增殖。

其次，RNA干扰在基因组稳定性中起到了重要的作用。

除了抑制基因表达，RNA干扰还能抑制内源性的嵌合基因活化，防止基因组中的不正常重排和突变。

RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞放疗敏感性影响的实验研究

ＲＮＡ干扰ＥＲ基因对卵巢癌细胞放疗敏感性影响的实验ＧＦ研究
罗茜ｔ吴永忠２林远洪－启帅，，，，郭黄
（．１重庆医科大学附属第一医院肿瘤科，重庆军医大学大坪医院肿瘤科，重庆４０４）００２
环
４０３；．０００３第三
４０１；．００６２重庆医科大学临床学院，重庆市肿瘤研究所，重庆
ＳＫＯＶ３ｔｅｏｅａｕｔｈｆｃｆＲＮＡｎｅｅｅｃ（，ｈｎｔｖｌａｅｔｅｅｅｔｏｉｔｒｒｎｅＲＮＡｉｎｔｅｔｒｅｅｅｅｐｅｓｎａｄｒｄｏｅｓｔｉｆｔｅｃｌｌｅｆ）ｏｈａｇｔｇｎｘｒｓｉｎａｉｓｎｉｖｔｏｅｌｉ．ｏｉｙｈｎ
ＷｅｔｒＢｏ技术检测ＥＦＲＡ及其蛋白质的表达情况。分别给予不同放射剂量（ … 、ｙ照射，Ｔ法绘制细胞存ｓｎｌｅｔＧＲｍＮ０２４６８）ＧＭｒ
活曲线。结果：向ＥＦ靶ＧＲ的序列特异性ｓＲＡ可明显抑制ＥＦｈＮＧＲ基因的表达，ＧＲｍＮＥＦＲＡ和蛋白的抑制率分别为７．％和７５７．；６１序列特异性ｓＲＡＥＦ％ｈＮ — ＧＲ可明显提高ＳＯ３细胞对放疗的敏感性，ＫＶ差异有统计学意义（＜．１。结论：Ｐ０）Ｏ体外研究表明
一
６０一７
重庆医科大学学报２１年第３卷第５（ｏｒｌｆｈｎｑｇＭｅｉｌｎｅｉ１．Ｏ３ｏ５）００５期ＪｕｎｏｇｉｄａＵｉｒｔ２０ＶＩ５．ａｏＣｎｃｖｓｙ０．Ｎ

RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞生长和化疗敏感性的影响的开题报告

RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞生长和化疗敏感
性的影响的开题报告
一、研究背景和意义
卵巢癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其高度侵袭性和易复发性使治疗难度加大。

近年来，RNA干扰（RNAi）成为了基因敲除和基因沉默的重要工具，可用于研究致病基因的功能和治疗靶点的筛选。

EGFR（表皮生长因子受体）是卵巢癌细胞生长和转移的重要分子标志物，RNAi靶向EGFR基因可能成为一种治疗卵巢癌的未来新颖策略。

因此，研究RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞生长和化疗敏感性的影响具有重要的理论和实践意义。

二、研究方案
1. EGFR基因的RNAi构建：使用合成siRNA序列靶向EGFR基因，通过RNAi技术，将siRNA转染入人卵巢癌细胞株中，实现EGFR基因的沉默。

2. 细胞生长实验：将EGFR基因敲除后的卵巢癌细胞与对照组细胞一同培养，检测细胞生长增殖能力的变化。

3. 细胞凋亡实验：通过TUNEL染色和Flow Cytometry技术，检测EGFR基因敲除是否能够诱导卵巢癌细胞凋亡。

4. 化疗敏感性实验：比较EGFR基因靶向RNAi处理和对照细胞株在化疗药物作用下的敏感性差异，探讨RNAi对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响。

三、研究结果及预期
通过RNAi技术靶向EGFR基因，在卵巢癌细胞中成功实现EGFR基因的沉默，观察细胞的凋亡情况以及细胞生长增殖能力的变化，并比较RNAi处理和对照组细胞在化疗药物作用下的敏感性差异。

预计在本研究
中，RNAi靶向EGFR基因将能够有效抑制卵巢癌细胞的生长和促进细胞凋亡，提高细胞对化疗药物的敏感性，为RNAi在卵巢癌治疗中的应用提供实验基础和理论支持。

下调表达RNA的生物学功能

下调表达RNA的生物学功能RNA是一种重要的生物分子，它在细胞内承担着多种生物学功能。

其中，包括了mRNA、tRNA、rRNA等多种类型的RNA。

在这其中，表达RNA是起到了很重要的作用。

然而，表达RNA的生物学功能可能被过高估计，下调表达RNA 可能是一个更为有效的方法。

一、表达RNA的生物学功能表达RNA是生命体内一种非编码RNA，它们被转录成链状RNA，但不会翻译成蛋白质。

分子生物学领域长期以来一直认为它们的生物学功能十分重要，因为它们能够参与细胞内重要的生物学过程，例如调控某些基因的表达，或者参与细胞周期的调控等。

二、表达RNA的下调与人类疾病表达RNA的研究表明，它们在人类的疾病发生过程中，可能也扮演着重要的角色。

例如，在肿瘤细胞中，对表达RNA的下调可能会导致细胞的增殖和转移。

因此，一些科学家把表达RNA视为治疗癌症的新工具。

他们通过利用RNA干扰技术，以很高的效率来靶向破坏表达RNA。

三、下调表达RNA的技术进展近来，生物学家们倾向于利用RNA干扰技术实现表达RNA的下调。

它是一种针对特定RNA的靶向破坏技术，它能够抑制RNA分子的稳定性或翻译率，从而达到下调RNA表达的目的。

这种技术使用了RNAi（RNA干扰）的概念，并且在小分子化学的帮助下被广泛研究和应用。

四、下调表达RNA的临床前景显然，下调表达RNA可能是控制一些疾病的新方法。

例如，某些疾病患者的细胞中可能存在着过多的、患病相关的表达RNA。

通过针对这些RNA的下调，可以阻断疾病的发展过程。

这种方法被视为有效、可靠的治疗方法之一，而且与传统的治疗手段相比，风险更小、副作用更少，具有更好的临床前景。

五、总结表达RNA在细胞内扮演着重要的角色，但其生物学功能也许被过高估计。

越来越多的生物学家开始通过下调RNA的方式来达到治疗目的。

这种方法在治疗癌症等疾病领域已经得到了广泛研究和应用，它的临床效果也得到了验证。

虽然这种技术还处于起步阶段，但在未来，随着技术的进步，下调RNA可能成为治疗疾病的一种常规手段。

腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用

腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用田丽娜;瞿全新;盛晓滨;徐福强【摘要】目的探讨腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用.方法采用直接感染法、台盼蓝活细胞计数、MTT、Hoechst染色法及流失细胞仪检测等方法,绘制SKOV3细胞生长曲线及倍增时间,检测SKOV3细胞感染重组病毒前后其顺铂的IC50值、细胞凋亡形态及细胞各周期的分布.结果 (1)顺铂浓度与SKOV3细胞抑制率呈线性正相关,相关系数r =0.9905 (P ＜0.05),顺铂IC50值为(7.76 ±0.37) μg/ml;腺病毒载体介导的RNA干扰ERCC1基因表达后,SKOV3细胞的生长受到一定程度的抑制;(2)与对照组相比,梯度浓度的重组腺病毒感染后,SKOV3细胞对顺铂的敏感性分别增加了9.4％、16.4％、23.2％、33.5％,呈剂量依懒性;(3)梯度滴度重组腺病毒表达载体联合顺铂作用于SKOV3细胞株,细胞凋亡显著增高;(4)重组腺病毒表达载体感染并联合顺铂用药,G1期细胞比例减小,S期细胞比例增大,细胞凋亡率进一步增高.结论重组腺病毒表达载体可以通过诱导肿瘤细胞凋亡、调节肿瘤细胞周期分布等途径增加SKOV3细胞对顺铂的敏感性.【期刊名称】《武警医学》【年(卷),期】2018(029)004【总页数】6页(P361-366)【关键词】卵巢癌;ERCC1基因;RNA干扰;重组腺病毒表达载体【作者】田丽娜;瞿全新;盛晓滨;徐福强【作者单位】100000,北京市石景山医院妇产科;300052,天津医科大学总医院妇科;100000,北京市石景山医院妇产科;100000,北京市石景山医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R731.31卵巢癌在所有妇科肿瘤中发病率最高，危害较大。

顺铂是卵巢癌化疗的一线药物，在卵巢癌综合治疗中占有重要地位。

目前普遍认为，DNA损伤是癌症发病的重要机制，顺铂细胞毒作用主要是形成铂-DNA加合物，ERCCl基因是DNA损伤修复途径的关键基因，其表达升高与卵巢癌顺铂耐药的发生密切相关。

RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌细胞耐药的影响

RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌细胞耐药的影响刘静;瞿全新;靡若然【期刊名称】《河北医学》【年(卷),期】2006(012)009【摘要】目的:观察RNA干扰沉默ERCC1基因对卵巢癌细胞耐药的影响.方法:体外合成靶向于ERCC1基因的小干扰RNA(ERCC1-siRNA),用脂质体法转染至卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP,RT-PCR方法检测转染前后细胞内ERCC1 mRNA的表达,Western blot方法检测ERCC1基因蛋白表达的改变,MTT实验检测转染前后COC1/DDP细胞对顺铂敏感性的变化.结果:转染ERCC1-siRNA后,COC1/DDP细胞中ERCC1基因的mRNA和蛋白表达均明显减少.RNA干扰联合顺铂用药能明显提高COC1/DDP细胞对顺铂的敏感性.结论:RNA干扰ERCC1基因能明显抑制COC1/DDP细胞内ERCC1基因mRNA和蛋白的表达,增加COC1/DDP细胞对化疗药顺铂的敏感性.【总页数】3页(P893-895)【作者】刘静;瞿全新;靡若然【作者单位】天津市中心妇产科医院,天津,300100;天津医科大学附属总医院妇产科,天津,300100;天津医科大学附属总医院妇产科,天津,300100【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.RNA干扰ERCC1基因表达对肺腺癌细胞A549/DDP顺铂耐药的影响 [J], 高赟;苏丹;应莉莎;吕汪霞;马胜林2.ERCC1基因表达与磁性Fe3O4纳米颗粒逆转卵巢癌细胞耐药性的关系 [J], 居蓉;刘嘉茵;姜智3.RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响 [J], 刘静;糜若然;瞿全新;熊冬生4.腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达对逆转卵巢癌顺铂耐药的效果 [J], 田丽娜;徐福强;姬力群;刘小平;单育;杨菲菲;陈静;瞿全新5.封闭ERCC1基因表达对卵巢癌细胞耐药的影响 [J], 李体远;Jing Jie Yu;Eddie Reed因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

短发卡状RNA抑制人Bubl基因表达及其对人卵巢癌A2780细胞药物敏感性和周期的影响

短发卡状RNA抑制人Bubl基因表达及其对人卵巢癌A2780细胞药物敏感性和周期的影响周婷;翁丹卉;王世宣;卢运萍;马丁【期刊名称】《中国癌症杂志》【年(卷),期】2010(20)3【摘要】背景与目的:既往研究提示,紫杉醇类药物作用的发挥有赖于功能完整的纺锤体检查点,而Bubl是纺锤体检查点的重要组成部分.本研究旨在探讨Bubl短发卡状RNA真核表达载体稳定转染对人卵巢癌A2780细胞紫杉醇敏感性及细胞周期的影响.方法:构建Bubl基因短发卡状RNA真核表达载体pEGFP-Bubl-shRNA,以脂质体Lipofectamine~(TM)2000包裹空质粒转染体外培养的人卵巢癌细胞株A2780后进行稳定筛选.应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因mRNA及其蛋白水平的表达情况:MTT法、流式细胞术等方法检测转染前后,A2780细胞对紫杉醇敏感性及其细胞周期的变化;Hoechst33342染色法检测细胞分裂指数.结果:与对照组pEGFP-Cl/A2780及A2780组相比,pEGFP-Bubl-ShRNA/A2780组细胞中mRNA和蛋白水平的表达均明显下降,其差异具有统计学意义(P＜0.05);MTT 检测结果提示,转染pEGFP-Bubl-shRNA质粒后细胞对紫杉醇的敏感性明显降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05);流式细胞术检测结果显示,紫杉醇1 μ mol/L处理细胞24及48 h后,与pEGFP-Cl/A2780及A2780组相比,该组细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),G_2/M期细胞比例下降,差异具有统计学意义(P＜0.05);Hoechst33342染色提示,与对照组相比,pEGFP-Bubl-shRNA/A2780组的分裂指数(MI)明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:Bubl基因的下调可导致人卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性及G_2/M期细胞比例下降.pEGFP-Cl-shBubl质粒的成功构建,为研究Bubl基因的功能及定位的研究提供了进一步的实验条件.【总页数】6页(P161-166)【作者】周婷;翁丹卉;王世宣;卢运萍;马丁【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R73-36~+1【相关文献】1.RNAi抑制Akt2基因表达对卵巢癌细胞系A2780放射敏感性的影响 [J], 孙冬岩;翁丹卉;宋晓红;夏曦;卢运萍;马丁2.RNAi抑制Aurora B激酶对卵巢癌A2780细胞增殖和周期的影响 [J], 任利容;肖兰;梁铭霖;王泽华3.短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究 [J], 翁丹卉;邢辉;邓友星;梁逢奇;黄磊;李芳;马丁;卢运萍4.短发卡状RNA对AKT2基因表达的抑制诱导人胰腺癌细胞凋亡 [J], 蔡庆和;陈先祥;张征;王江华;车军5.短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究 [J], 翁丹卉;邢辉;邓友星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

通过影响RNA干扰调节基因表达

通过影响RNA干扰调节基因表达随着科技的进步和发展，人们对于基因的研究越来越深入。

在这个过程中，RNA干扰作为一种新兴的基因调节技术，已经成为了热门话题。

它的作用是通过干扰RNA的功能和表达，来调控基因的表达，从而对人类健康等方面产生重大的影响。

本文将从基本原理、应用前景以及存在的问题等方面，对RNA干扰技术进行详细的探讨。

一、基本原理RNA干扰是一种紧密结合于基因的后转录调控机制。

它的主要作用是通过RNA分子的降解或者抑制转录，来影响基因的表达。

RNA干扰过程中，RNA分子与特定的核酸复合物结合，形成RISC复合物。

RISC复合物能够识别并结合到具有互补序列的RNA分子，以此来调控RNA的降解或者抑制转录。

在RNA干扰过程中，RNA分子主要分为两种类型，一种是长链RNA（dsRNA），另一种是短链RNA（siRNA）。

其中，长链RNA是由两条互补的RNA分子所组成，能够被RISC复合体切割成短链RNA。

短链RNA则是由外源性dsRNA或部分内源性lncRNA剪切产生的。

两种类型的RNA分子在RISC复合体的共同作用下，能够识别并结合到具有互补序列的RNA分子，从而调控基因的表达。

二、应用前景RNA干扰作为一种新兴的基因调节技术，具有广泛的应用前景。

针对RNA干扰的应用场景，大致可以分为两类：基础研究和临床研究。

基础研究方面，RNA干扰技术可用于解决基因功能研究和疾病模型建立等问题。

在基因功能研究方面，RNA干扰技术可以使研究者采用靶向性的方法，精确地控制基因的表达，从而更好地解析基因与疾病发生的关系。

在疾病模型建立方面，RNA干扰技术可以提供更直接、准确的方法，使得研究者可以通过RNA干扰对感兴趣的基因进行控制，从而构建更加实用、稳定的疾病模型。

临床研究方面，RNA干扰技术可用于开发新型的治疗方案。

在治疗癌症等疾病方面，RNA干扰技术通过针对关键基因的干扰，可以起到精确诊断和靶向治疗的作用，从而有效地提高治疗效果。

RNA干扰和小 RNA在癌症中的作用机制研究

RNA干扰和小 RNA在癌症中的作用机制研究RNA干扰和小RNA在癌症中的作用机制研究近年来，癌症已成为全球医学界关注的一大问题，许多研究机构和学者都在研究癌症的治疗方法和机制。

其中，RNA干扰和小RNA在癌症中的作用机制引起了广泛的关注。

1. RNA干扰RNA干扰指的是在一些物种中发现的一种与后转录过程相关的现象，通常是通过使用双链RNA来触发这种干扰作用。

一些研究表明，RNA干扰可能有助于抵抗肿瘤的发生。

RNA干扰的基本原理是通过切割mRNA，并将其降解为短的非编码RNA序列。

这些非编码RNA序列通常被称为siRNA （small interfering RNA）或shRNA（short hairpin RNA）。

这些RNA序列结合到RISC（RNA诱导沉默复合体）中，并引导RISC 到靶标的mRNA，从而切割靶标的mRNA，并阻止其进一步翻译成蛋白质。

最近的一些研究表明，RNA干扰还可能参与调节一些在癌症细胞中异常表达的基因。

例如，一些TRAIL基因在癌症中表达异常，这可能导致细胞抗凋亡能力的提高，从而导致癌症的生长和扩散。

然而，在一些研究中发现，使用RNA干扰将TRAIL的表达抑制，可以抑制癌细胞的生长和扩散。

2. 小RNA小RNA是指长度在20-30个核苷酸之间的RNA序列。

小RNA通常分为miRNA（microRNA）和siRNA（small interfering RNA）两类。

miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用。

研究表明，miRNA可以通过下调调控基因的mRNA表达量来抑制基因的表达，从而影响细胞的生长、凋亡和分化等功能。

miRNA在癌症的发生和发展中也发挥了重要作用。

一些miRNA的表达异常可能导致细胞凋亡的下调，从而导致癌细胞的生长和扩散。

例如，一些miRNA在癌症中表达下调，这可能抑制一些细胞凋亡途径的活性，从而导致癌症的生长和扩散。

siRNA可以通过RNA干扰作用来抑制基因的表达。

RNA干扰抑制人肺癌细胞HMGB1基因表达的实验研究的开题报告

RNA干扰抑制人肺癌细胞HMGB1基因表达的实验研究的开题报告一、研究背景肺癌是世界上最常见的癌症之一，其发病率和死亡率仍然居高不下。

高迁移相关基因1（HMGB1）是一种广泛存在于哺乳动物细胞核中的DNA结合蛋白。

HMGB1在不同细胞类型中具有多种生物学功能，例如，调节基因转录、DNA修复和炎症反应等。

HMGB1的异常表达已被证明参与了许多肿瘤形成和生长的过程，因此认为其可能是肺癌的一个潜在治疗靶点。

RNA干扰（RNAi）作为一种重要的基因沉默技术，已经在许多研究中被应用。

在RNAi中，借助于外源的小干扰RNA（siRNA）或microRNA（miRNA），可以精准地沉默目标基因的表达。

因此，本研究旨在通过RNAi技术抑制HMGB1基因的表达，探索其对人肺癌细胞增殖和存活的影响，为肺癌的治疗提供新的可能性。

二、研究方法1.构建siRNA干扰载体：选择适当的siRNA序列设计和合成，构建带有siRNA序列的干扰载体，并验证其对HMGB1基因的抑制能力。

2.细胞培养和转染：选择2种肺癌细胞H292和A549，培养至对数生长期，利用polybrene和干扰载体进行脂质体介导的转染。

3.实时荧光定量PCR：从转染的细胞中提取总RNA，通过实时荧光定量PCR检测HMGB1基因的表达情况，探究siRNA是否成功抑制HMGB1基因表达。

4.Western印迹：利用Western印迹技术检测HMGB1蛋白的表达情况，以验证RNAi干扰的效果。

5.细胞增殖和生存分析：MTT实验用于评估细胞增殖和存活情况，记录不同时间点和不同siRNA浓度下的细胞增殖和存活率情况，探究HMGB1基因的沉默是否对肺癌细胞的增殖和存活产生影响。

三、研究意义本研究通过RNA干扰技术，成功抑制了HMGB1基因的表达，预计可以探究其对肺癌细胞的影响。

通过实验结果，可以进一步确认HMGB1是否是肺癌的一个潜在治疗靶点，为肺癌的治疗提供新的可能性。

RNA基因调控机制及其在肿瘤治疗中的作用

RNA基因调控机制及其在肿瘤治疗中的作用随着生物学研究的不断深入，我们发现不仅DNA可以进行基因调控，RNA也可以发挥重要作用。

RNA分子可以通过不同的机制来调控基因表达，从而影响细胞生长和分化、调节信号通路等生命过程。

在肿瘤研究中，越来越多的证据表明RNA基因调控机制在肿瘤发生、发展中起着重要的作用。

1. RNA干扰（RNA interference）RNA干扰是通过小分子RNA（siRNA）来抑制基因表达的一种方式。

siRNA可以与靶基因的mRNA结合并切割它，使其无法被翻译成蛋白质。

这种技术可以用来靶向癌细胞中的致病基因，从而减少肿瘤细胞的增殖和扩散。

近年来，RNA干扰治疗肿瘤的研究已经得到了一些成功，例如对于一个叫做HER2的癌症靶点，已经有了一些通过RNA干扰治疗的产品。

2. RNA编辑（RNA editing）RNA编辑是一种通过修改RNA序列来改变蛋白质翻译的方式。

可以把这个过程类比成剪辑一个电影，只有把正确的片段拼接在一起才能呈现出正确的故事。

RNA编辑可以用来消除或改变一些误识别的RNA剪切位点，避免由此引起蛋白质突变和功能的改变。

这种技术也可以应用于肿瘤治疗，例如针对一个叫做BCL2L12的靶点，利用RNA编辑技术可以增加它对肿瘤细胞的敏感性。

3. RNA启动子（RNA promoter）RNA启动子是一个能够引导RNA转录起始的DNA序列，在转录过程中具有非常重要的作用。

在肿瘤中，某些启动子的变异或过度表达会导致癌症的发生。

近年来，一些研究者试图利用RNA启动子来治疗癌症。

例如通过寻找肿瘤细胞中过度表达的启动子，然后针对其进行RNA干扰或RNA编辑等技术，以达到治疗癌症的目的。

4. RNA结构（RNA structure）RNA分子的结构特点对其生物功能具有重要的影响。

近年来，一些研究者已经开始探索如何利用RNA的结构来进行肿瘤治疗。

例如肿瘤细胞中一些关键的RNA结构发生变异，可以抑制tRNA的正常功能，防止细胞进行翻译和生长。

RNA干扰抑制h POT1表达对人胃癌细胞生物学特性的影响的开题报告

RNA干扰抑制h POT1表达对人胃癌细胞生物学特性的影
响的开题报告
摘要：
懂得基因调控的方式对于癌症的治疗和预防非常重要。

近年来，RNA干扰技术已成为研究基因调控的有力工具之一。

本研究旨在探讨RNA干扰抑制h POT1表达对人
胃癌细胞生物学特性的影响，为胃癌的治疗提供新的思路和方法。

背景：
POT1被证明在恶性肿瘤中发挥作用，是一种结合DNA并在端粘性末端上形成稳定的单链G四面体结构的蛋白质。

h POT1是人类的POT1家族中最重要的成员之一。

研究表明，h POT1在癌症的发生和发展中可能发挥着重要作用。

RNA干扰可以根据基因的序列选择性地降低或沉默目标基因的表达，因此RNA干扰抑制h POT1表达可能
会影响人胃癌细胞生物学特性。

方法：
本实验选取胃癌细胞株进行实验，进一步分别应用RNA干扰技术和对照技术，
分别抑制和不抑制h POT1的表达。

通过Western blotting和实时荧光定量PCR等方法，检测h POT1的表达水平。

同时，通过细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡等指标的检测，分析RNA干扰抑制h POT1表达对胃癌细胞生物学特性的影响。

预期结果：
我们将得到RNA干扰h POT1的细胞系，这些细胞系将用于评估在抑制h POT1
的情况下的细胞生物学行为。

我们预计RNA干扰抑制h POT1表达会显著影响胃癌细
胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡等生物学特性。

结论：
研究将有助于理解h POT1在胃癌发生和发展中的作用，并有望为胃癌的治疗提
供新的思路和方法，从而为临床治疗胃癌提供良好的理论和实践基础。