鼠尾胶原蛋白制备

鼠尾胶原蛋白制备详细步骤

1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；

2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段，抽出银色的尾键 3、将尾腱剪断置于平皿中，PBS浸泡；

4、将所有的尾键放于Tris-HCl中，4度过夜。 0.05mol/L Tris-bas的Tris-HCl的配制

方法。

称量6gTris置于1L烧杯中，加入约800ml去离子水，充分搅拌溶解，浓盐酸调节PH，高压灭菌。

5、吸去Tris-HCl，将尾腱称重（0.5-1克）；

6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；

7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；

8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；

9、离心，4

度4000转/分，30分钟； 10、吸取上清，过300目滤器。

11、每600ml上述粗提液中加入100ml 0.14 mol/LNaOH，8000转5min离心，弃上清，留絮状沉淀。

12、将絮状沉淀物置于三蒸水中，用0.1mol/L（1000:6）醋酸溶解沉淀物。