精浆浓度对17℃保存下猪精子活率和活力的影响
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法实验室中常常需要使用猪精液进行一系列实验和研究，但是猪精液的保存非常关键。
低温保存是一种常用的方法，可以有效地延长猪精液的保存时间，保持其活力和质量。
本文将介绍实验室常用的猪精液低温保存方法，希望能对实验室工作人员有所帮助。
一、低温保存的原理猪精液在常温下易受到氧化、蛋白质降解、细菌感染等影响，导致精子质量下降，活力减弱。
而低温保存的原理主要是降低猪精液内部的化学反应速率，减缓精子的新陈代谢，从而延长其保存时间。
一般来说，对猪精液进行低温保存可分为冷冻保存和冷藏保存两种方法。
二、冷冻保存方法1. 猪精液的采集猪精液采集是冷冻保存的第一步，要在成熟健康的猪只进行采集。
采集前应先对猪进行清洁，确保采集的猪精液是干净的。
通常采集后的精液应在30分钟内使用，如不能马上使用则应迅速进行冷藏，避免影响后续的保存效果。
2. 筛选和稀释将采集到的猪精液进行筛选和稀释，可以通过离心或者过滤手段进行筛选，去除其中的不活跃精子和其他杂质。
稀释的目的是使猪精液的密度均匀，便于后续的保存和使用。
3. 冷冻冷冻保存是最常见的猪精液保存方法之一，一般是将稀释后的猪精液置于-196℃的液氮罐中进行冷冻保存。
在进行冷冻前，要将猪精液分装入冷冻管或其他容器中，避免因为一次性取用而导致冷冻-解冻多次，影响猪精液的活力。
4. 解冻和使用需要使用时，将冷冻的猪精液快速解冻，不要使其在室温下解冻，以免影响猪精液的质量。
解冻后的猪精液应在4-8℃的温度下保存，尽快使用，避免长时间存放造成精子活力的下降。
除了冷冻保存外，冷藏保存也是一种常用的猪精液保存方法。
相比于冷冻保存，冷藏保存更加简便，并且对设备要求不高。
一般采用4-8℃的冷藏温度进行保存。
采集和筛选步骤与冷冻保存相同，在采集后务必迅速进行冷藏，避免影响后续的保存效果。
稀释后的猪精液可以直接置于4-8℃的冰箱中进行保存，无需进行冷冻。
在保存时要注意避免温度的波动，尽量将猪精液置于冰盒或者恒温箱中进行保存。
26333060_影响猪精子冷冻保存效果的研究进展
遗传改良GENETIC IMPROVEMENT影响猪精子冷冻保存效果的研究进展张涵，王赫川，李天峰，张群，王骞，郭铭晖，李雁冰，魏国生，李井春*（黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆 163319）随着我国居民生活水平的提高，猪肉已经成为我国乃至世界上需求量最广泛的肉类。
为了满足人类的需求，就必须专注于用更少的种猪生产更多品质优异的猪肉。
目前精液保存方法主要有常温、低温和冷冻保存，常温保存精液技术操作简单，但精液保存时间超过48 h就会品质下降，而冷冻保存精液与常温保存精液相比，具有保存时间长、便于远距离运输和成本低等优点。
猪精液在冷冻-解冻过程中易遭受损伤，造成精子受精能力下降。
因此，人们开始不断探索在精液稀释液中加入一定量的抗氧化剂、保护剂、抗菌剂等物质来改善解冻后猪精子质量。
加快猪精液冷冻保存技术的改良研究，有助于推动畜牧业发展，提高人民生活品质。
1 猪精液冷冻原理及损伤机制猪精液冷冻主要是指新鲜采集的精液经过稀释等预处理后，利用液氮（-196℃）、干冰（-79℃）作为冷源，通过熏蒸或其他处理方式缓慢降温，然后在超低温状态下保存，使精子代谢速率降低或处于静止状态，便于长期保存，待解冻后精子仍具有活性和受精能力。
精子在冷冻保存过程中极易受到不同程度的物理损伤、氧化损伤和化学损伤。
物理损伤通常指在精液冷冻时因温度下降过快，细胞内液体形成冰晶体从而对精子细胞内部及细胞膜造成不可逆损伤。
通过控制温度下降速度可减少冰晶数量维持微晶状态，减少冷冻造成的物理损伤。
氧化损伤是精子在冷冻过程中温度下降过快，精子氧化应激产生过多活性氧，造成膜上不饱和脂肪酸被氧化，产生大量脂质过氧化物，打破原本的氧化还原平衡状态和精子的完整结构，对精子造成不可恢复的损伤，也是细胞凋亡的重要因素之一。
化学损伤是指精液在冷冻过程中，细胞外液最先形成冰晶，导致细胞内外渗透压不平衡，使细胞外液渗透压大于细胞内渗透压，水分从细胞内部流向细胞外液，造成精子脱水死亡。
温度和保存时间对猪精子顶体酶活性的影响
（Ｐ ＜０畅０５）。 （３）液相精液在 ４℃保存超过 １ ｄ 时精子顶体蛋白酶活性显著下降 （Ｐ ＜０畅０５）； 在 １７、２５ 和 ３９℃保
存超过 ２ ｄ 时顶体酶活性显著下降 （Ｐ ＜０畅０５）， 且在 １７℃保存效果较好。 结论是猪精子顶体蛋白酶活性受温度的
影响，在 １７℃的条件下 ３ ｄ 内保存的猪精子顶体酶活性最佳。
关键词：猪精子；温度；保存时间；顶体酶活性
中图分类号：Ｓ８２８畅３４
文献标识码：Ａ
文章编号：１６７２－３５２Ｘ（２０１０）０１－００５４－０４
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｐｉｇ ｓｐｅｒｍ ａｃｒｏｓｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ
ＰＩＡＯ Ｈａｉ－ｘｉａｎ，ＪＩＮ Ｙｉ，ＨＡＮ Ｍｉｎｇ－ｍｉｎｇ
① 收稿日期：２００９－０４－２０ 基金项目：国家自然科学基金（３０９６０２５０） 资助。 作者简介：朴海仙，女，硕士研究生。 Ｅ－ｍａｉｌ： ｈｅａｓｅｎ５２０＠１６３畅ｃｏｍ 倡 通讯作者：金一，男，教授。 Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｊｉｎ＠ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
３７ 卷 １ 期
朴海仙等 温度和保存时间对猪精子顶体酶活性的影响
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｂｏａｒ ｓｐｅｒｍ；ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；ｓｔｏｒａｇｅ ｔｉｍｅ；ａｃｒｏｓｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ
精子顶体是由精子细胞核附近的高尔基复合体 所形成，顶体内富含多糖及各种水解酶。 其中顶体 酶最为重要，它是一种特殊的丝氨酸蛋白水解酶，主
要功能是水解卵细胞的透明带，形成一条通道以利 于精子与卵子结合，完成受精过程。 精子顶体酶是 以一种胰蛋白酶原形式合成并储存在顶体内，发生
安徽农业大学学报，２０１０，３７（１） ：５４－５７ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
影响猪常温精液产品保存效果的因素
一
规定在 ８ １ ０月龄 、体重达 到 １ １ ０ １ ３ ０ ｋ ｇ 允许 开始 采精 ， 每 头后 备种 公猪 每 周可 以采精 １ － ２次 ， 成 年 公猪每周可采精 ２ ～ ３次 。后 备公猪 由于繁殖机能 尚 未完全成熟 ， 其采精量和精子密度均 低于成年公猪 ， 精液 中精子畸形率较 高，因此 生产 出的常温 精液产 品 的保存 期也较 短 。成年 公猪如 果采精 次数过度 ， 会表现 出性欲 降低 ， 原精液 品质也会 明显下降 。 １ ． ２ ． ２ 季节 寒冷 的冬季和气候 炎热 的夏季 ，种公 猪 的性欲 、采精量和精液 品质会 明显 下降。特 别是 在气温高达 ３ ５ ｑ Ｃ 以上 闷热 的夏季 ， 应注意 降低种公 猪舍和采精室 的温度 ， 给公猪 身体冲凉 以降低体温 。 必要时应停止采精休 息几天 ， 延长采 精间隔时 间。 公猪 采 精应 安排 在采 精 室 内进 行 ，特 别 是在 环 境温 度低 的秋 冬季 节 里应注 意 将精 液 收集入 保 温瓶 内或在 精液 瓶外 套 以保温 棉袋 。注 意 不得 使 精 液温度 低 于 ３ Ｏ℃， 而 降低公 猪 原精液 品质 。 １ ． ２ ． ３ 种 公猪营养状况和饲养管理要求ｔ ２ ］ 在猪配种
不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃液态保存效果的影响
作 者简介 ：李琦 （ １ ９ ９ ２ 一），男，大兴安岭人 ，硕士研究生 ，研
究方 向为动物遗传 育种 与繁 殖，Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ！ｌ ｉ ｑ ｉ ｂ ｙ ｎ ｄ ｌ ６ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ 通讯作 者：魏 国生，教授 ，研 究方向为动物遗传育种与繁殖 ，
Ｅ － ｍａ ｌ：ｗｅ ｒ ｉ ｇ ｓ ６ ３ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ
在 Ｍｏ ｄ ｅ ｎ ａ 稀释液基础 上添加 不 同浓度 的鱼精
蛋 白，检测 精子活 率 、路径速 度 、直线速度和畸形 率等指标 ，研究鱼精蛋 白在猪精 液常温保 存 中的适
宜添加量 ， 为猪精液常温保存 的研究提供理论指导 。
１ 材料 与方 法
收 稿 日期 ：２ ０ １ ７ － ０ １ — ２ ０ ； 修 回 日期 ：２ ０ １ ７ — ０ ２ — ２ ３
酸 钠 ；１ ． ０ ０ ｇ碳 酸 氢 钠 ；５ ． ６ ５ ｇ三 羟 甲基氨 基 甲烷 ；
大庆 市指 导性科 研 项 目 （ ｚ ｄ 一 ２ ０ １ ６ — ０ ８ ７）；黑龙 江八 一农 垦大
学博 士启动基金 （ Ｂ ２ ０ １ ２ — ０ ６ ）；黑龙 江省 高等教 育 学会 高等教
２ ０ １ １ 年 １ 月 １日 《 猪常温精液生产与保 存技术 规范 》正式实施 ，其对猪 的常温精液 定义如下 ：经 稀释后 在 １ ６ － １ ８ ￣ Ｃ下短期保 存 ，仍具 有受精 能力 的 精液。在常温 状态下保存 的猪精液 ，常受 到细菌等 微生物影 响。若母猪输入被 微生物污染 的精液后 ，
稀释液和温度对猪精液保存效果的影响
稀释液和温度对猪精液保存效果的影响作者：黄龙艳潘越博王玺年吴孝杰来源：《国外畜牧学·猪与禽》2020年第07期摘要：为了获得猪精液最佳的保存效果，本试验采用不同的稀释液和保存温度对猪精液的保存效果进行了研究。
试验结果：Ⅰ组稀释液的稀释保存效果最好，精子活力、有效存活时间、总存活时间及生存指数分别为0.75、98.5 h、129.8 h、75.9 h，除精子活力与其他组间差异不显著（P>0.05）外，其他指标差异极显著（P关键词：猪精液稀釋液;精子活力;存活时间;生存指数中图分类号：R913+S859.1 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2020）07-0019-031 试验材料1.1 精液来源试验用长白种公猪15头，18～24月龄，身体健康，性欲良好，生产成绩优秀，体质健壮结实，遗传性能稳定，且无任何遗传疾病。
人工采集公猪精液，选择精子活力在0.8以上，且气味、色泽正常的精液稀释保存。
1.2仪器设备控温冰箱、伟力精液分析仪、恒温水浴箱、电子秤、烧杯、量筒、高压消毒锅、生化培养箱、干燥箱、双蒸仪、磁力搅拌器和pH测定仪。
1.3 稀释液配方稀释液配方见表1。
2 试验方法2.1 试验用品的消毒为了尽可能实现无菌操作，试验所用的玻璃器械均用干燥箱进行干燥消毒，金属器械用高压锅蒸汽消毒，新鲜鸡蛋洗净外壳后用75%酒精消毒。
2.2 稀释液的配制准确称量葡萄糖、碳酸氢钠、二水柠檬酸钠、氯化钠、氨基乙酸、氨苯磺胺和EDTA并转移至消毒过的量杯中，加100 mL双蒸水搅拌稀释;将稀释液过滤、分装到消毒过的玻璃瓶中，盖好瓶塞并用纱布将其包裹后高压蒸汽消毒10 min～15 min，将溶液冷却至室温，按比例加入新鲜卵黄、新鲜牛奶和抗生素并搅拌混匀，测定pH后密封保存。
2.3 精液处理及保存首先，按国家标准采集精液，测定并记录精液pH和精子活力;然后，将同一头猪采集的合格精液分成4份，分别用4种稀释液按1∶3进行稀释;第三，将每种处理分成2份，快速测定其中一份的精子活力;第四，将精子活力最高的稀释精液分成4份，分别置于15 ℃、16 ℃、17 ℃和18 ℃的环境中保存36 h;第五，测定精子活力、生存指数等指标，记录相应数据。
牛磺酸对猪精子负压17℃液态保存效果的影响
围绕这几方面展开。由于猪精子本身的局限性，如何 在 17 益液态保存条件下延长精液的保存时间以及 保证精液的保存质量，将会是种猪繁育事业的重点 内容。
在精子常温保存过程中，猪精液稀释液主要是 扩大精液容量，提高精液利用率；为精子活动提供所 需的能量；创造相对稳定的生存环境；抑制微生物的
收稿日期：2018-09-13 基金项目：黑龙江省自然科学基金面上项目（C2017053）；黑龙江省农垦总局科研计划项目（HNK135-04-06、HNK135-04-02-03）；
Abstract：To study the effect of taurine on the quality of boar sperm stored at 17 益 under negative pressure，the effect of different concentration of taurine on the quality of boar sperm was explored through adding different doses of taurine to the basic diluent of Modena and preserving at 17 益 under negative pressure and analyzing the sperm quality，semen pH and H2O2 concentration of sperm were measured by Mailang automatic sperm quality detector. The experiment was divided into 5 treatment groups（0，2.5，5，7.5， 10 mmol·L-1 taurine were added to the base diluent）and repeated four times .The experimental data showed that7.5 mmol·L-1 taurine was better than other groups in sperm motility and path speed （P <0.05）.The pH value of semen decreased slowly，and the concentration of H2O2 in semen was lower than that without adding group. In conclusion，7.5 mmol·L-1 taurine was beneficial to the preservation of boar sperm under negative pressure environment at 17 益 from the comprehensive index. The results provided the experimental basis for the preservation of boar sperm in production practice.
影响种公猪精液保存效果的因素分析
110猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2019年36卷第9期遗传改良GENETIC IMPROVEMENT北京顺鑫农业小店种猪分公司协办猪的人工授精（AI ）技术是一种优良的种猪繁育技术，AI 可以改善种猪的繁育利用率、促进猪群遗传改良的进展以及不同场间的基因交流。
该技术为全世界大多数集约化养猪生产企业所采用，随着我国规模化养猪进程的加快，AI 技术在我国养猪生产中发挥了巨大的作用[1]。
随着养猪规模进一步扩大，养殖生产厂家对优质公猪精液的需求量日益增加，AI 技术使用的效果在很大程度上取决于公猪精液品质的好坏，因而改善优秀种公猪精液保存的效果对AI 技术的广泛推广应用具有积极意义。
文章从影响种公猪精液保存效果的因素作了较为系统的阐述，从抗冻剂[2]、抗氧化剂[3]、抗菌肽[4]、稀释液配方及方法[5]等方面阐述了对种公猪精液保存效果的影响，并简要地分析了种公猪精液品质的评价体系。
笔者结合国内外的相关研究，就影响种公猪精液保存效果的因素分析加以综述，阐明各因素对种公猪精液保存效果的影响，旨在为种猪繁育研究人员、公猪站以及种猪生产企业一线人员提供思路和科学依据，促进场间的遗传交流，进一步改善我国整体养猪生产水平以及地方畜禽资源的保种情况，打造出中国种猪种业航母。
1 种公猪精液品质保存效果的评价指标在现代规模化养猪生产中，种公猪精液品质对养猪生产的效益具有很大影响。
我国猪精液品质评价影响种公猪精液保存效果的因素分析陈 辉（华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，农业农村部猪遗传育种重点开放实验室，湖北 武汉 430070）摘 要：猪人工授精技术（AI ）在现代养猪生产中占据着越来越重要的作用，被广泛应用于养猪生产中，人们对提供优良的种公猪精液需求越来越大，因而精液的保存效果对人工授精技术的广泛应用具有积极意义。
文章结合前人的相关研究，分析了抗冻剂、抗氧化剂、抗菌肽、稀释配方和方法等影响因素，阐述了改善措施，旨在为生产出优质种公猪精液提供思路和参考，进而发挥优良种公猪的繁育性能，促进我国养猪生产水平的提高。
不同精液稀释粉与保存温度对猪精液的保存效果
不同精液稀释粉与保存温度对猪精液的保存效果俞湘麟吴昊晏曹建国孙东东(1上海市动物疫病预防控制中心201103韩盛利张佩华吴金林朱永军2上海市农业科学院畜牧兽医研究所201106)稀释精液的保存时间依稀释液及保存环境的不同而有很大差别，能够保证其活率在0．7的时限一般为5 d【1 。
精子活力在0．5级以上才可用于人工授精【2-4 7，也有认为需达到0．6级以上】。
目前规模化猪场在实施人工授精技术时大多采用商品化的营养稀释粉，但由于供应渠道众多，采购时往往忽视商品的技术参数，把短效当成长效使用，或配制不精确、放置时间过长，这样就得不到应有的效果。
本试验探讨不同的精液营养稀释粉在不同的保存温度下对猪精液保存效果的观察。
1 材料与方法1．1 精液采集与测试时间6头种公猪精液取自上海市3个种猪场，公猪耳号分别是：长白猪4009，杜洛克猪ll7—2、130—1、391、700、1406。
检测由专职人员负责。
测试时间自2006年11月13日至12月8 13止。
1．2 精液营养稀释粉1．2．1 精液稀释粉：采用不同时效的4种精液稀释粉，市售的长效、中效、短效和自配稀释粉。
自配稀释粉为：葡萄糖27．5 柠檬酸三钠6．9 g、碳酸氢钠1．0 g、乙二胺四乙酸二钠2．35 g、柠檬酸2．9 g、三羟基氨基甲烷5．65 g。
1．2．2 稀释液配制：市售稀释液配制按照产品使用进行。
自配稀释粉溶于1 000 ml蒸馏水中，自配好的稀释液使用前加入庆大霉素注射液tO ml／2支。
1．3 主要仪器显微恒温板、恒温冰箱、意大利产Medi Chimica精液密度测定仪、精密分析天平及其它试验常规仪器。
1．4 试验设计按常规采精法采集6头公猪的合格精液，用Medi Chimi—ca精液密度测定仪检测原精精子数，分别按每1O0 ml含40亿有效精子数进行稀释，每头公猪精液取4份，计24份。
稀释时严格控制稀释液温度和原精温度相一致，缓慢加入，稀释过程在15 rain内完成。
影响猪精液常温保存效果的因素分析及改进技术
摘要：猪精液的常温保存是常见的一种精液保存方式，也是使用人工授精技术的核心重点，良好的精液质量可以提高猪精液的利用率、改善猪只的品种改良效果，还可以控制一些疾病的传播，但是精液在保存过程中易受到各种因素的影响。
因此本文总结分析了影响猪精液常温保存效果的因素，并阐述了提高保存效果的改进措施，以期能够为广大同行提供参考。
关键词：猪精液；常温保存；影响因素；改进措施影响猪精液常温保存效果的因素分析及改进技术李晖（湖南省衡东县畜牧水产事务中心湖南衡阳421400)收稿日期：2023-04-04作者简介：李晖（1973.11—)，男，湖南衡东人，本科，兽医师，研究方向：动物医学。
doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2024.02.0402021、2022年我国的猪肉产量分别为5295.93万和5541.00万t ，年底生猪存栏量分别为44922.42万和45256.00万头，这些数据表明随着经济和相关科学技术的发展，我国养猪业也由传统、落后的散养逐渐转变为规模化、集约化、标准化和现代化的养殖，而在现代化养殖过程中，常用的繁育技术包括人工授精和精液保存技术。
精液保存技术是应用人工授精技术进行繁育时较为重要的环节之一，其精液质量的好坏直接影响到母猪的受胎率和仔猪的成活率，但是精液在保存过程中又易受到各种因素的影响，如温度、pH 、稀释倍数、活性氧等。
因此在充分了解到影响猪精液常温保存效果因素的基础上，如何通过改进措施来延长精液的保存时间、保证精液的质量至关重要。
1影响猪精液常温保存的因素在体外常温保存的猪精液易受到各种因素的影响，导致其精液质量下降。
常见的影响因素包括温度、pH 、稀释倍数、活性氧、微生物等。
1.1温度温度会直接影响精液的品质和精子的活力，是精液是否保存成功的关键。
从精液的采集、稀释、分装、运输到最终的使用均会受到外界环境的影响。
若温度过高则会导致种公猪的性欲低下并对精液品质造成直接影响，当外界温度过低则会导致精子产生冷休克。
影响猪精液常温保存效果的因素
＊［通 讯 作 者 ］ 胡 建 宏 （１９６９一）男 ，博 士 ，教授 ，主要 从 事 动 物 遗 传 繁 育 方 面 的 教 学 与 科研 工 作 。
实 际生 产过 程 中精 液 的保 存 提 供 一些 理 论 依 据 ，从 而促 进 生产 中高 品 质精 液 的有 效保 存 ，发 挥 良种 公 猪 的种用 价值 ，提 高养猪 业 的科技 含量 。
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｖａｒｉｏｕｓ Ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｂｏａｒ Ｓｅｍｅｎ
ＺＨ ＡＮＧ Ｌｉ—ｋｕｎ ，ｊＩＮＧ Ｘｉｎ—ｙｕ。，ＬＩ Ｙｕ ，ＲＥＮ Ｆａ ，Ｗ ＥＮ Ｆｅｉ ， ＫＡ ＮＧ Ｈ ｕａｉ～ｙａｎ ，ＺＨＡＯ Ｂｏ。，ＬＩＡ ＮＧ Ｇｕｏ—ｄｏｎｇ ，Ｈ Ｕ Ｊｉａｎ—ｈｏｎｇ
［收稿 日期 ］ ２０ｌ８—０ｌ—ｌ６ ［基 金 项 目］ 国 家 生 猪 产 业 技 术 体 系 （ＣＡＲＳ一 ３６）；陕 西 省 重
大科 技 创 新 专 项 资 金 项 目 （２０１７ＺＫＣ０７— １１４、
２０１７ＺＫＣ０７— １１５）。
［作者简介］ 张 利 坤 （１９９２一）男 ，河 南 内 黄 人 ，在 读 硕 士 ，主 要 从 事 动 物 遗 传 育 种 与 繁 殖 研 究 ．
聚乙烯吡咯烷酮_聚乙烯醇对公猪精液常温保存的影响_陈东峰
养猪SWINE PRODUCTION 2012第4期目前，猪精液的常温保存是猪人工授精技术普遍应用的方法。
为此，国内外研究者围绕猪精液常温保存稀释液开展了大量的研究工作，并研制出应用效果较好的稀释液配方[1，2]。
然而猪精液在保存过程中猪精子会因活动减弱而沉淀，严重影响猪精液保存的效果。
在ZORLESCO（-BSA）稀释液中加入一定浓度的悬浮剂PVA（聚乙烯醇）、PVP（聚乙烯吡咯烷酮）有可能减缓其沉淀，并由于大分子物质是非渗透性的，可能对精子在稀释和保存过程中有一定的保护作用。
本试验旨在筛选出效果较优的PVA和PVP配比。
1材料与方法1.1猪精液来源试验于2010年7月18日至2010年9月20日分别在广西壮族自治区扬翔贵瑞种猪场和广西壮族自治区畜禽品种改良站进行。
猪精液由广西壮族自治区扬翔贵瑞种猪场和广西壮族自治区畜禽品种改良站提供。
1.2试验仪器电脑温控冰箱、精子图像分析仪、电子恒温水浴锅、相差显微镜、分析天平、激光温度计。
1.3稀释液配方及配制本试验以ZORLESCO（-BSA）[3]为基础配方，对照组添加0.010g/100mL氧氟沙星，试验组分别在在对照组基础上添加PVP0.2g/100mL、0.4g/100mL、0.6g/100mL和PVA0.2g/100mL、0.4g/100mL、0.6g/100mL。
1.4精液稀释液保存效果观察1.4.1精液选取稀释液现用现配，随机采集去胶体公猪精液镜检后，取活率高于0.8、异常精子少于10%的精液供稀释保存试验。
1.4.2精液的处理及保存稀释时，精液与稀释液的温差不超过0.5℃，精液稀释分装后放置在20℃～25℃下1h后进行温度平衡，最后用毛巾包裹放入17℃恒温箱中保存。
1.4.3精子活率检测将从恒温箱中取出的精液置于35℃～37℃的水浴锅中预热20～30min，摇匀后随机取10μL滴在载玻片（38.5℃预热）上，盖上盖玻片，在400倍光镜下观察5个视野，分别计算视野中活动的精子数和精子总数。
种公猪精液品质鉴定及稀释保存
种公猪精液品质鉴定及稀释保存2019-07-05摘要：公猪的精液品质决定母猪的⽣产性能和产仔数量与质量，因此，经过稀释后的精液要进⾏品质鉴定，否则不能进⾏⼈⼯授精。
本⽂简要介绍了种公猪精液品质鉴定的⼏项主要指标以及操作⽅式进⾏检测，另外还就在操作过程中需要注意的具体事项进⾏简要的说明。
关键词：精液品质；检测；注意事项中图分类号：S828.3 ⽂献标识码：A ⽂章编号：1674-0432（2012）-05-0166-1采集种公猪的精液后，应在最短的时间内进⾏稀释和保存，⽽在稀释前应鉴别精液品质的优劣,以此作为新鲜精液稀释和保存的依据,同时也能确定种公猪的配种负担能⼒。
为保证精液不受不良物理、化学、⽣物因素的影响。
对所采精液应规范合理地处理和保存。
种公猪精液的品质鉴定检测的主要⽬的就是快速准确地确定其精液活率,保证输⼊的精液质量和数量,减少空怀。
因为检测种公猪的精液品质是必不可少的。
本⽂就保证种公猪精液品质的⼏项主要指标及利⽤何种⽅式检测做了简要的阐述。
1 种公猪精液品质鉴定⽅法1.1 外观评定种公猪的精液外观评定主要是观察精液的颜⾊，⽓味。
精液颜⾊正常要求呈乳⽩⾊，⽆异物，如果精液出现黄脓状，或夹杂杂物，⾎液，⽑发等均为不合格精液，不能作为输精⽤。
猪精的正常⽓味是略带腥味，如果发现有异味则判定精液不合格。
如果发现精液内含⾎液，臭味，则认为种公猪可能发⽣⽣殖器疾病，要及时淘汰。
颜⾊，⽓味均符合要求的可进⾏下⼀步检测。
1.2 精⼦活⼒检测精⼦的活⼒是指原精液在37℃条件下呈直线运动的精⼦占全部精⼦总数的百分率。
⾸先将显微镜载玻⽚放在已经升温⾄37℃左右的载物台上，将精液⽤移液器滴适量在载玻⽚上，盖上盖玻⽚，以⽆⽓泡，不能移动为好，分别以显微镜10×10和10×16视野进⾏观测。
精⼦活动分直线前进、旋转和原地摆动3种，以直线前进的活⼒最强。
⾁眼观测⼀般是按0.1—1.0的⼗级评分法进⾏，精液⼀般可以保存3-4天，要求当天精液活率不低于0.7级，3-4天要求不低于0.6级，活⼒低于0.5级者，不宜使⽤。
猪精液常温保存效果观察
０．６２ 士 ０．０３
０．５４ 士 ０．０３
０．５０ 士 ０．０３
０．４５ 士 ０．０４
７２
６６
新霉素 Ｎｅｏｍｙｃｉｎ ０．９０ 士 ０．０１ ０．８５ 士 ０．０１ ０．８０ 士 ０．０２ ０．７２ 士 ０．０３ ０．６３ 士 ０．０４ ０．５５ 士 ０．０４ ０．４６ 士 ０．０４
将添加不同 抗 生 素 的 稀 释 液 保 存 ４８ｈ 后 精 子 活 力 进 行 多 重 比 较，结 果 详 见 表 ２。 经 方 差 分 析 表 明，添加庆大 霉 素 、新 霉 素 和 青 霉 素 的 稀 释 液 与 不 添加抗生素 稀 释 液 差 异 极 显 著 （Ｐ＜０．０１）；添 加 庆 大霉素的稀释液与添新霉素和青霉素的稀释液差异 显 著 （Ｐ＜０．０５）。
２ 结 果
２．１ 不 同 抗 生 素 对 猪 精 液 的 保 存 效 果 在常温条件下添加不同抗生素的精液稀释液对
精子活力的影响，结 果 见 表 １。 由 表 １ 可 见，未 添 加 抗生素的精液稀释液有效保存时间明显比加入抗生 素的有效保存 时 间 短，在 加 入 不 同 的 抗 生 素 的 保 存 条 件 下 差 异 不 大 ，以 加 入 庆 大 霉 素 的 效 果 最 好 ，新 霉 素次之。
现行的精液保 存 方 法 按 保 存 温 度 分 为 ３ 种，即 常温保存（１５ ℃～２５ ℃）、低 温 保 存（０ ℃ ～５ ℃）和 超低温保存（－７９ ℃或－１９６ ℃）。由于冷冻猪精液 精子成分丢失 导 致 受 精 率 下 降［３］，加 之 冷 冻 技 术 难 度大，冷冻设备 投 资 高，还 不 能 在 生 产 中 广 泛 应 用。 而 公 猪 精 液 的 低 温 保 存 不 如 常 温 保 存 效 果 好 ，因 此 ， 公猪精 液 常 温 保 存 在 生 产 上 具 有 很 大 的 实 用 价 值 。 ［４－５］ 影响常温猪精液保存 效 果 的 因 素 很 多，本 研 究针对我国种 猪 及 商 品 猪 饲 养 数 量 大，但 主 要 为 小 规模和个体饲 养，无 法 发 挥 优 秀 种 公 猪 在 品 种 改 良 中 作 用 的 问 题 ，自 优 秀 种 公 猪 采 集 精 液 ，对 影 响 精 液 常温保存的主 要 因 素，如 抗 菌 药 选 择、稀 释 液 比 例、 光 照 、振 荡 、尿 液 污 染 等 进 行 了 深 入 研 究 。
不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃液态保存效果的影响
不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃液态保存效果的影响李琦;李井春;李雁冰;黄大鹏;魏国生【期刊名称】《中国畜牧杂志》【年(卷),期】2017(053)008【摘要】鱼精蛋白具有一定的抗菌效果和保护精子的作用,为探讨不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃保存效果的影响,本实验在Modena稀释液中分别添加0、5、10、20μg/mL的鱼精蛋白,在常温保存过程中,检测精子活率、路径速度、直线速度、畸形率等质量参数.结果表明:精液在17℃保存过程中,在Modena稀释液中添加10 μg/mL的鱼精蛋白,精子活率、路径速度、直线速度显著高于其他组(P＜0.05),畸形率显著低于其他组(P＜0.05).综上可知,17℃保存的过程中,在Modena 稀释液中添加10μg/mL的鱼精蛋白能够提高精液的保存效果,延长猪精液的保存时间.%The aim of this study was to investigate that the effects of protamine on the quality of boar semen stored at 17℃.Boar semen was diluted with Modena diluent containing different concentrations (0,5,10,20 μg/mL) of protamine.The sperm motility,path velocity,linear velocity,and sperm deformity rate were evaluated to analyze the effects of protamine on boar semen quality during liquid pre servation at 17℃.The results showed that the process of storage at 17℃,detecting sperm motility,path velocity,linear velocity of the group on the basis of the diluent containing 10μg/mL protamine were significantly higher than that of the other groups (P＜0.05),and sperm deformity rate of group containing 10μg/mL protamine was the lowest in all groups.In this study,our results confirmedthat 10μg/mL protamine can improve the quality of boar semen during liquid storage at 17℃.【总页数】4页(P51-54)【作者】李琦;李井春;李雁冰;黄大鹏;魏国生【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319【正文语种】中文【中图分类】S828.3【相关文献】1.不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响 [J], 周佳勃;马思楠;王娜;李文倩;聂云;邵千朔;王启蒙;岳顺利2.稀释液中添加还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响 [J], 严子祎;孙琪;王娜;杨康;汪顺伟;孙梦;岳顺利;孙中桐;周佳勃3.影响猪精液常温保存效果的因素 [J], 孙福魁;冉本康;贾永宏;胡建宏4.精浆甘油三酯含量对猪精液保存效果的影响 [J], 甘麦邻;朱砺;刘麟;郑婷;赵雪;郭宗义;沈林園;潘红梅;张亮;王金勇5.不同浓度β-胡萝卜素对17°C保存猪精液质量的影响 [J], 魏华凯;翟军军;关湘妍;曹思广;张智源;杜春婧;张群;王骞;李井春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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中图分类号 ： ８ ８ ３ ￥２ ．４ 文 献标 志码 ： Ａ 文章 编号 ：０ ２—１０ （０ １ ０ ０ ５ ０ １０ ３２ ２ １ ）６— ３ １— ３
为 了对猪有效开展人 工授精 ， 精液 的稀释保存 是关键 技 术之一 。精液 的保存 主要 有低温保存 和常 温保存 ， 经过多 年 研究 ， 虽然猪 精液低温保存技术有所改进 ， 低温保存 效果仍 但 不如常温保存 ， 因此 ， 公猪精液常温保存 技术是生产中推广应 用 的主要技术 。在 １ ５—１ ８℃常温 保存 中多种 因素对精 液保存 效果有影 响 ， 中精 浆是精液 的无形 成分 ， 其 由睾丸液 、 附睾液 和精囊腺 、 前列 腺、 尿道球腺等附属腺体的分泌液混合 组成 。它含有蛋 白质 、 脂类 、 碳水化合物 、 维生素 、 激素及微量 元素等物质 。有研究表 明 ， 浆对精子 功能具有 多方 面的 ］ 精
后在这 ２种稀释剂中分别加入一 定 比例 的精 浆 ， 分别 配成含
０ ５ ２ ％ 、０ 、５ 、０ ％精浆 的常温保 护剂 ， 、 ％、５ ５ ％ ７ ％ １０ 精浆 由新
究结果表 明， 在人 工授精 中添加 精浆能够 提高受胎 率和分娩 率 ； 但是 ， 也有研究报道 表明 ， 精浆 中存 在对精 子活力和 活
定 ［］ Ｊ ．南京农 业大学学报 ，９９，２ ２ ：７２ ０ １ ９ ２ （ ）６ ７ ．
（ 上接 第 ３ ０页 ） ５
防， 在饲喂过程中抗菌药物应用得 比较普遍 ， 特别 是 一内酰
［］ ３ 李乾学 ， 郭建顺 ， 张锦霞 ， 口一内酰胺类药物对 临床分离猪链 等．
胺类药物 。长期 不合 理用药 ， 可能使 细菌 产生 了高 耐药 性 。
１１ 常 温 保 护 剂 配制 ．
精液稀释剂为商业化 Ｃ Ｍ稀释粉 （ Ｘ 比利时产 ） 和实验室
配制 的 普 通 稀 释 剂 。普 通 稀 释 剂 配 方 参 照 文 献 ［］ 每 ８，
１０ｍ 普通 稀释剂 中含有葡萄糖 ５０ｇ二水柠檬酸钠 ０ ３ｇ ０ Ｌ ． 、 ． 、
Ｅ Ｔ ． ｇ蒸 馏水 １ Ｌ 青霉素 ｌ Ｄ Ａ０１ 、 ０ ｍ、 ０ ０万单位 、 双氢链 霉素 １ ０万单位 。先按配方 配制好 Ｃ Ｍ 稀释剂 和普通稀 释剂 ， Ｘ 然
摘要 ：为了解 精浆浓度对精子常温保存 的影 响 ， 对含不 同浓度精浆 的商业化 Ｃ Ｍ稀释剂和 自制稀 释剂的精液 于 Ｘ １ ７℃下的保存效果进行 比较 。结果表 明 ： 当稀释剂为 Ｃ Ｍ时 ，５ Ｘ ２ ％精浆获 得了最好 的保存效果 ， ０５ 含 、％精浆也有较
好的保存效果 ； 而使用 自 制稀释剂 时 ， ５％ 、 ％精浆 获得 了较好 的保存效 果 ， 含 ０ ７ ５ 其次是含 ２％精浆 。说 明在常温保 ５ 存 中一定浓度 的精浆有利 于维持精子的活力和活率 ， 但这与稀释剂组成有关 。在实 际生产应用 中， 在稀释剂 中约添 加 ２ ％ 精浆对维持精子在常温保存 中的活 力和活率可能有较好效果 。 ５
率不利 的物质 ， 因此关于精浆在精 子保 存 中对精 子功能是 有利还是不利 目前仍存在 争议 。针对这一 问题 ， 者设 计试 笔 验， 分析在常温保存 （７℃ ） １ 条件下不 同浓度精浆对精子活力 和 活率 的影 响 ， 以改进 猪精液保 存方法 ， 高精子保存 后的 提
品质 。 １ 材 料 与 方 法
影响 ， 可以归 结为 以下几个 方面 ： １ 调控精 子 活力 和活率 ； （） （ ） 响精子 竞争 力 ； ３ 调 控精 子获能 和顶体 反应 ； ４ 提 ２影 （） （） 供精子生存 的微环境 ； ５ 为精子 提供能量 和营养 物质 ； ６ （） （） 在雌性生殖道形成 精子库 “ 。此 外 ， 浆还 能够调 控雌性 精 生殖道微环境 ， 括调 节子 宫免疫 反应 、 包 促进 排卵 等 。研
物遗传育种与繁殖 。Ｅ—ｍａ ：ｈｎｙｌｂ ｏ ｉ ｃｎ。 ｉ ｅｅｇｉ ＠ｈｔ ｌ ｏ ｌ ａ ｍａ ．
式人工采精 ， 收集 时去除前段尿液 ， 并用 １ ６层纱布过滤 ， 经显 微镜检查 ， 精子活率在 ９ ％ 以上 ， 原精轻轻上下混匀 ， ０ 将 然后 分装于 １ Ｌ的离心 管中 ， ０ｍ 每管 ５ｍ 。以１２０ｒｒｉ的速度 Ｌ ０ ／ ｎ ａ
江苏农业科学
２ １ 年第 ３ ０１ ９卷第 ６期
一 ３ ｌ一 ５
宋成义 ， 辉云， 周 查丽莉 ， 精浆浓度对 １ 等． ７℃保存 下猪精 子活率和 活力 的影响［ ］ Ｊ ．江苏农 业科 学， １ ， （ ） ３ １ ３３ ２ １３ ６ ： — ５ ０ ９ ５
精浆浓度对 １ 保存 下猪精子活率和活力 的影 响 ７ｃ Ｃ
宋成 义 ，周辉 云 ，查 丽莉 黄 继 荣。 ， ，吴 晗
（ ． 州大学 动物科学 与技术 学院 ， １扬 江苏扬州 ２５ ０ ； ． ２ ０ ９ ２ 香港北欧农庄有限公司苏州代表处 ， 江苏苏州 ２ ５２ ； １０ １
３ 江苏省姜堰市种猪场 ， ． 江苏姜堰 ２ ５０ ） ２ ５ ８
收稿 Ｆ期 ：００—１ ２ ｔ ２１ ２— ２
鲜精液经 １ ０ ｍ ｎ离心制备 。 ０ｒ ｉ ６ ／
１２ 精子的分离 ．
成年公猪的精液 由江苏省扬州市家畜改 良站提供 。手握
基金项 目： 江苏省 自 然科学基金 （ 编号 ： Ｋ ０ ０ １ ） Ｂ ２ １３ ７ 。 作者简介 ： 宋成义 （ ９４ ， ， １７ 一） 男 江苏灌南 人 ， 副教 授 ， 研究 方向为 动
建议养殖场在使用抗菌药 物时 ， 量避免 在饲料 中盲 目长期 尽
添加和滥用药物 ， 以减少 耐药 菌株大 量产生和扩 散。针对猪
球 菌 ２ 的体外抗菌活性［］ 型 Ｊ ．中国兽医学报，０７２ （ ）９ ２０ ， １ ： ７ ５～