胆碱酯酶测定试剂盒(丁酰硫代胆碱底物法)产品技术要求shouyi1
临床化学质控血清产品技术要求yuepu
临床化学质控血清
适用范围：与本公司生产的试剂盒配套使用，用于α-羟丁酸脱氢酶、白蛋白、碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶、胰淀粉酶、淀粉酶、天门冬氨酸氨基转移酶、二氧化碳、总胆汁酸、直接胆红素、总胆红素、钙、总胆固醇、胆碱酯酶、肌酸激酶、肌酐、D-3羟丁酸、谷氨酰氨基转移酶、葡萄糖、铁、乳酸、亮氨酸氨基肽酶、乳酸脱氢酶、脂肪酶、镁、游离脂肪酸、无机磷、总蛋白、甘油三酯、尿素、尿酸、锌共32个检测项目的室内质量控制。
1.1 包装规格
1×5mL；6×5mL；10×5mL；20×
5mL。
1.2 主要组成成分
冻干粉，单水平，人血清基质、防腐剂（0.1%）、冻干保护剂（2%）和稳定剂（0.1mol/L），具体质控项目及目标浓度范围如下表所示：
质控品质控范围批特异，详见靶值单。
2.1 性状
浅黄色至黄色冻干粉，复溶后为浅黄色至黄色透明液体。
2.2 可接受区间
质控品各项目测值应在质控范围内。
2.3 瓶间均匀性
使用配套试剂盒测定，瓶间变异系数（CV）应不超过10%。
2.4 稳定性
2.4.1 效期稳定性
原包装试剂盒在2℃～8℃密封避光保存条件下有效期为36个月，在稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。
2.4.2 复溶稳定性
质控品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天；-20℃冰冻保存，稳定期为28天。
在稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。
胆碱酯酶测定试剂盒(丁酰硫代胆碱底物法)标准化操作规程,SCHE-SOP
胆碱酯酶测定试剂盒(丁酰硫代胆碱底物法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的临床检验人员。
3 适用范围本试剂用于体外定量检测人血清或血浆中胆碱酯酶的活力。
4 检验方法本试剂采用丁酰胆碱底物测定胆碱酯酶的活力。
5 检验原理样本中胆碱酯酶水解丁酰硫代胆碱生成硫代胆碱，硫代胆碱与二硫代双硝基苯甲酸反应生成黄色的硫代硝基苯甲酸，通过测定405nm处吸光度值的升高，可以计算出样本中胆碱酯酶的活力。
6 标本要求6.1 样本为血清或血浆。
及时离心分离样本，不得使用溶血或被污染的样本。
血浆样本可采用肝素或EDTA抗凝。
6.2 血清密闭贮存于2℃~8℃可稳定1周，经稀释后，在室温可稳定2小时。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司胆碱酯酶试剂盒（丁酰硫代胆碱底物）7.2含非反应性保护剂和稳定剂7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为18个月。
7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。
7.4试剂的变质指示：试剂混浊，或以纯水为空白，试剂在405nm处的吸光度大于0.800A（1.0cm光径）时，表明试剂已失效。
8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1空白吸光度：A≤0.800。
8.2.2空白吸光度变化率：△A/min≤0.020。
8.2.3分析灵敏度：测试1U/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＞0.00005。
8.2.4 线性范围：50U/L～15000U/L；线性相关系数r≥0.9900；[50,2000] U/L 范围内，线性绝对偏差应不超过±500U/L；（2000,15000] U/L范围内，相对偏差不超过±15％。
8.2.5 准确度：80%≤回收率≤120%。
8.2.6 测量精密度重复性：CV≤5.0%。
胆碱酯酶活性测定试纸干化学法使用说明书
胆碱酯酶活性测定试纸（干化学法）使用说明书【产品名称】通用名：胆碱酯酶活性测定试纸（干化学法）【包装规格】1人份/袋、10-100袋/盒；25人份/筒、50人份/筒、1-20筒/盒。
【预期用途】用于体外定性检测人血清、血浆中胆碱酯酶活性。
【检验原理】胆碱酯酶催化水解乙酰胆碱（Ach）生成乙酸和胆碱，乙酸能使指示剂溴百里香酚蓝（BTB）发生颜色变化，通过颜色的改变反映生成乙酸的量，乙酸量的多少即可表示酶活力的高低；反应结果可与胆碱酯酶活性测定比色表直接进行比色测定。
【主要组成成份】本产品系由20%乙酰胆碱(Ach)、3%溴百里香酚蓝等试剂固定在通过双面胶粘贴有中速滤纸的PVC板上，干燥后裁切成胆碱酯酶活性测定试纸。
【储存条件及有效期】在2-30℃干燥、阴凉、无酸碱腐蚀的条件下密封保存，有效期二年。
试纸开封铝箔袋后在无酸碱腐蚀的条件下可保存3小时，有酸碱腐蚀的条件下开封即用。
【样本要求】1、在无菌条件下采集静脉血样本，尽快分离血清或血浆以避免溶血。
2、检测时应使用新鲜标本。
3、常规抗凝剂不影响检测结果。
【检验方法】在进行测试前必须先完整阅读使用说明书。
1、取测定试纸一片，放在培养皿中，向反应纸片中央加上8～10μl待测新鲜血清或血浆，盖上培养皿盖保持密封（保持一定的湿度以防血清蒸发，同时防外界酸碱影响），放置37℃水浴箱中并开始记时。
2、11分30秒后取出，所呈现色泽与胆碱酯酶活力比色表(见图一)比较，即得胆碱酯酶活力单位。
3、如无水浴箱，根据测定时室温，查附表确定反应所需时间，在到达反应所需时间后立即比色。
4、正常值30-80单位，如低于30单位的标本，欲求得较精确的结果，可将时间延长一倍，再观察结果。
附表：20～40℃内反应终点时间表温度(℃) 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 时间22′15″21′19′45″18′45″17′45″16′45″16′15″15′45″15′15″14′45″14′15″温度(℃) 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40时间14′13′30″13′12′30″12′15″12′11′30″11′15″10′45″10′30″【检验结果的解释】阳性：胆碱酯酶活力单位小于30。
丁酰硫代胆碱法
丁酰硫代胆碱法
丁酰硫代胆碱法（acetylthiocholine method）是一种用于检测胆碱酯酶活性的方法。
胆碱酯酶是一种在生物体中广泛存在的酶，负责水解乙酰胆碱等胆碱酯类物质。
丁酰硫代胆碱法通过测量胆碱酯酶将丁酰硫代胆碱水解成乙硫胺和丙酮的速率来确定胆碱酯酶的活性。
该方法通常以乙硫胺的产生速率作为胆碱酯酶活性的指标。
使用该方法时，将丁酰硫代胆碱与胆碱酯酶反应，在反应过程中生成乙硫胺，然后使用特定的化学试剂标记乙硫胺，通过测量标记物的产生量来确定胆碱酯酶的活性。
丁酰硫代胆碱法常用于生物医学研究中，特别是在神经科学领域中研究胆碱酯酶的功能和调控。
它也被用于临床诊断中，例如检测胆碱酯酶缺乏症和其他与胆碱酯酶活性相关的疾病。
胆碱酯酶的测定
胆碱酯酶（CHE）的测定
一、原理：血清及组织中CHE使乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸，未被水解的剩余乙酰胆碱与羟胺作用生成乙酰羟胺，再与铁离子在酸性溶液中形成棕色复合物，根据颜色深浅推算出酶的活力。
二、试剂：
1、试剂一：溶液60ml×1瓶，室温保存。
2、试剂二：乙酰胆碱粉剂×1支，-20℃保存，稀释液5ml×1瓶，4℃保存。
80μmol/ml 乙酰胆碱底物贮备液的配制：将一支乙酰胆碱碱粉剂倒入5ml稀释液中即成，4℃。
8μmol/ml 乙酰胆碱应用液的配制：贮备液：试剂=1：9稀释。
3、试剂三：甲粉剂×1支；乙液30ml×1瓶；丙液30ml×1瓶；室温保存。
试剂三应用液的配制：每次测试前将甲粉倒入乙液中，充分摇匀，根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合，充分混匀，配成试剂三应用液，现用现配。
4、试剂四：溶液30ml×1瓶，室温保存。
5、试剂五：溶液20ml×1瓶，室温保存。
6、试剂六：粉剂×1瓶，稀释液30ml×1瓶，测试前将稀释液倒入粉剂中，充分混匀，避光
4℃冷藏。
测各管吸光度值。
四、计算：
1、定义：血清中CHE的计算：每毫升血清在37℃和底物作用20分钟，分解1μmol乙酰胆
碱为1个活力单位。
2、计算公式：
血清中CHE活力。
胆碱酯酶测定方法
胆碱酯酶测定方法
胆碱酯酶测定方法一般分为以下几种：
1.电化学法：该方法利用电化学传感器测定胆碱酯酶在体外水溶液中所釋放出的胆碱量。
2.比色法：该方法使用乙酰胆碱（ACh）作为底物，使其在胆碱酯酶作用下分解为胆碱和乙酸。
其中生成的乙酸与酶促色反应物（Ellman's reagent）发生反应，并生成黄色的苯硫酚盐（thioamato compounds），在一定波长下可测定其吸光度。
3.放射性测定法：该方法使用放射性标记的底物，如3H-ACh或14C-ACh作为标记，使其在胆碱酯酶的作用下分解，再通过放射计测量放射性底物和产生的放射性胆碱数目的差别，得出胆碱酯酶的活性。
4.光学测定法：该方法利用胆碱酯酶和重组胆碱酯酶能够在基质中催化反应，并通过检测基质中的光学旋光度或发光度来测定胆碱酯酶的活性。
总之，胆碱酯酶测定方法根据测量原理和技术手段的不同，应用范围和测量精度也会有所区别。
具体选择何种方法应根据实际需要和实验条件来选择。
临床化学校准血清产品技术要求乐普(北京)诊断技术
临床化学校准血清适用范围：与本公司生产的试剂盒配套使用，用于α-羟丁酸脱氢酶、白蛋白、碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶、α-淀粉酶、天门冬氨酸氨基转移酶、二氧化碳、总胆汁酸、直接胆红素、总胆红素、钙、胆固醇、胆碱酯酶、肌酸激酶、肌酐、谷氨酰氨基转移酶、葡萄糖、铁、乳酸脱氢酶、镁、无机磷、总蛋白、甘油三酯、尿素、尿酸、锌共26项检测系统的校准。
1.1 包装规格1×5mL；2×5mL；5×5mL；20×5mL。
1.2 主要组成成分冻干粉，单水平，人血清基质、防腐剂（0.1%）、冻干保护剂（2%）和稳定剂（0.1mol/L）。
具体项目及靶值范围见表1：表1 主要组成成分校准品靶值批特异，详见靶值单。
2.1 性状浅黄色至黄色冻干粉，复溶后为浅黄色至黄色透明液体。
2.2 水分含量采用烘干法进行测定，水分含量不超过3%。
2.3 量值溯源根据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》中有关规定提供校准品的来源，赋值过程及测量不确定度等内容，具体项目及溯源信息见表2：表2 溯源信息2.4 赋值结果及其不确定度的表示方式赋值结果±扩展不确定度2.5 正确度使用该校准品校准后测量各项目的有证参考物质或制造商溯源文件声称的参考│≤1。
具体项目及参考物质信息见表3：物质，量值传递的正确度应符合│En表3 参考物质信息2.6 均匀性2.6.1 瓶内均匀性赋值结果的瓶内均匀性（变异系数）应不大于10%。
2.6.2 瓶间均匀性赋值结果的瓶间均匀性（变异系数）应不大于10%。
2.7 稳定性2.7.1 复溶稳定性本品复溶后，2～8℃可保持7天。
-20℃冰冻保持可稳定28天。
在稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。
2.7.2 效期稳定性在2℃～8℃条件下贮存24个月，稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。
胆碱脂酶(CHE)测定试剂盒标准操作程序
胆碱酯酶（CHE ）测定标准操作程序1. 摘要血清拟胆碱酯酶是在肝脏中生成然后分泌到血液中的酶，可将胆碱酯水解成胆碱和有机酸。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清中胆碱酯酶（CHE ）的活力3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定胆碱酯酶（CHE ）活力的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的胆碱酯酶（CHE ）试剂盒采用的是丁酰硫代胆碱-铁氰化钾法。
5. 原理丁酰硫代胆碱-铁氰化钾法（DGKC1994new ）[1]---++−→−+++−−−→−+462362])([2)(2])([2CN Fe O H OH CN Fe O H 胆碱双二硫代硫代胆碱硫代胆碱丁酸丁酰硫代胆碱胆碱酯酶底物碘化丁酰硫代在血清中拟胆碱酯酶的作用下水解为丁酸和硫代胆碱，然后试剂中的铁氰化钾被硫代胆碱还原为亚铁氰化钾，引起在波长405 nm 处吸光度下降，下降速率与血清中CHE 活力成正比6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：R1：焦磷酸盐缓冲液（PH7.6）、铁氰化钾、稳定剂；R2：碘化丁酰硫代胆碱、稳定剂7.3 试剂稳定性：未打开试剂在2-8℃避光保存可失效期，测定液打开后冷藏于分析仪中2-8℃避光可以保存42天，本试剂有效期为12个月，试剂不可冰冻。
7.4 试剂准备：试剂为即用式。
8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
胆碱酯酶活性测定方法
胆碱酯酶活性测定方法
胆碱酯酶（acetylcholinesterase, AChE）活性测定方法主要有以下几种常用的方法：
1. 利用酶促反应产生的色素变化测定：
(1) 比色法：将胆碱酯酶底物乙酰胆碱与碱性溴化镉等试剂反应，生成黄色产物，利用比色计或分光光度计测定产物的吸光度，间接测定胆碱酯酶活性。
(2) 荧光法：将胆碱酯酶底物与荧光染料反应，使底物和产物之间发生荧光变化，利用荧光光谱仪测定荧光强度，间接测定胆碱酯酶活性。
2. 利用电化学方法测定：常用的是反应器中使用碳电极或银电极，利用底物和产物之间的电位差变化测定胆碱酯酶活性。
3. 利用放射性同位素标记测定：将底物或产物标记上放射性同位素，通过测定放射性同位素的放射性强度，间接测定胆碱酯酶活性。
4. 利用质谱法测定：将底物和产物分离并通过质谱仪测定其质荷比，间接测定胆碱酯酶活性。
需要注意的是，不同的测定方法适用于不同的实验目的和样本类型，具体的选择应根据实验需求和设备条件来确定。
针对有机磷农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用研究
针对有机磷农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用研究目的：对有机磷农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用进行探讨。
方法：选取2010年1月-2014年12月在笔者所在医院治疗的100例有机磷农药中毒患者，分别对患者中毒后1、24、48、72、120 h及治愈后的乙酰胆碱酯酶活性进行检测，比较患者中毒后与治愈后的乙酰胆碱酯酶活性，进行对照分析。
结果：中毒后1、24、48、72、120 h患者血液中乙酰胆碱酯酶活性明显低于治愈后，差异有统计学意义（P＜0.05）。
100例中毒患者在抢救治疗后，死亡率为13.00%，剩余患者转到相关科室或转院继续进行治疗。
结论：急性有机磷中毒后，大大抑制患者的乙酰胆碱酯酶活性，导致乙酰胆碱酶在患者脑组织大量累积，严重影响患者的预后，因此需及时给予患者有效处理，缓解患者神经组织受到的损伤，保证患者脑组织的完整性。
[Abstract] Objective：To explore the inhibitory effects of organophosphorus pesticides on acetylcholinesterase activity.Method：In our hospital from January 2010 to December 2014 100 cases of organophosphorus pesticide poisoning patients were selected.For patients with after poisoning respectively 1，24，48，72，120 h and acetylcholinesterase activity were detected after parison of patients cured after poisoning and acetylcholinesterase activity were analyzed.Result：1，24，48，72，120 h acetylcholinesterase in the blood of patients were significantly lower than that of the activity after poisoning after cure，there were significant difference（P＜0.05）.100 cases of poisoning patients in the emergency treatment，the mortality rate was 13%，the remaining patients transferred to the relevant department or hospital to continue treatment.Conclusion：Acute organophosphate poisoning patients，greatly inhibited acetylcholinesterase activity，leading to acetylcholine accumulation in brain tissue of patients，seriously affect the prognosis of patients，patients need timely effective treatment therefore，alleviate nerve tissue of patients with trauma，ensure completeness of patients with brain tissue.[Key words] Organophosphorus pesticide；Acetylcholinesterase activity；Inhibition急性有机磷中毒属于我国临床治疗中的常见病症[1]。
血清胆碱酯酶测定标准操作规程
血清胆碱酯酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清丁酰硫代胆碱法碱酯酶测定(缩写ChE)，组合项目申请：血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。
-20℃保存稳定6个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。
3 方法原理CholinsteraseButyrylthiocholine iodide+H20…………thiocholine+butyrate,Thiocholine+DTNB………2-nitro-5mercaptobenzoate,通过测定有色产物480nm处吸光度的变化速率，求得血清中胆碱酯酶的活性。
4 试剂及其他用品4.1试剂盒名称：胆碱酯酶试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。
胆碱酯酶活力判定标准
胆碱酯酶活力判定标准胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）是一种重要的酶类物质，在生物体中具有重要的生理功能。
它主要是在神经系统中发挥作用，通过降解神经递质乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）来调节神经信号的传递。
胆碱酯酶活力的检测是评估神经系统功能的一种重要方法。
胆碱酯酶活力的检测方法包括体外测定和体内测定两种。
在体外测定中，可以通过测定样品中酶催化降解底物乙酰胆碱所生成的产物酰胆碱酸（acetic acid）的释放量，来反映胆碱酯酶的活力。
常见的体外测定方法有刺激电极法、色谱法和酶联免疫吸附法等。
体内测定是通过测定动物体内胆碱酯酶活力来评估其功能状态。
常用的体内测定方法主要包括测定血浆或血清中酶活力、组织或细胞中酶活力、脑脊液中酶活力等。
胆碱酯酶活力的正常范围因检测方法、样本来源、性别、年龄等因素而有所差异。
一般来说，胆碱酯酶活力的正常参考范围是：1. 血浆或血清中酶活力：正常成年人的胆碱酯酶活力一般在0.4-1.2 U/mL之间。
2. 组织或细胞中酶活力：胆碱酯酶在不同组织和细胞中的活力差异较大，但一般都会显示较高的活力。
3. 脑脊液中酶活力：正常成年人的脑脊液中胆碱酯酶活力一般在低微的水平。
胆碱酯酶活力的异常变化可能与多种疾病和病理状态有关。
一些疾病和药物、毒物等因素可能引起胆碱酯酶活力的增加或降低。
例如，胆碱酯酶在神经系统中的活力降低可能与阿尔茨海默病等神经退行性疾病相关。
胆碱酯酶活力的增加可能与肝功能损害、某些药物中毒等有关。
此外，胆碱酯酶活力的检测在医学诊断中也具有一定的参考价值。
例如，胆碱酯酶活力的测定可用于鉴别肾上腺激素分泌过多的原因，可与尿儿茶酚胺、瘤胃癌相关的胆碱酯酶比较，以进行肿瘤的诊断。
此外，胆碱酯酶活力的异常变化还可能与某些遗传性疾病有关。
需要注意的是，在进行胆碱酯酶活力检测时，应遵循实验室的规范操作流程和标准方法，以确保测试结果的准确性和可靠性。
血清胆碱酯酶测定标准操作规程
血清胆碱酯酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清丁酰硫代胆碱法碱酯酶测定(缩写ChE)，组合项目申请：血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。
-20℃保存稳定6个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。
3 方法原理CholinsteraseButyrylthiocholine iodide+H20…………thiocholine+butyrate,Thiocholine+DTNB………2-nitro-5mercaptobenzoate,通过测定有色产物480nm处吸光度的变化速率，求得血清中胆碱酯酶的活性。
4 试剂及其他用品4.1试剂盒名称：胆碱酯酶试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。
纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较
纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较【关键词】 CHE；纸片法；速率法［摘要］目的：了解胆碱酯酶（CHE）纸片法和速率法两种方法的相关性，便于临床上对有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计。
方法：在日立7060全自动生化分析仪上测得CHE减少的标本(其中包括有机磷中毒患者、肝病患者、低蛋白血症等各类患者标本)，采用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9A文件方案，每天再从其中随机选取8份标本，并分别用纸片法和速率法按顺序1周~8周同时进行测定，再按相反顺序8~1重复测定，共测定5 d，记录结果，然后对两种方法得出的结果进行单位比较。
结果：纸片法的结果只有几个单位值，受主观因素影响，而速率法是国际单位数值大且较精确，要做统计学比较是不现实的，只能从数值上做粗略的估计。
纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下，纸片法的15 u~19 u 应该是速率法的1 000 u~2 000 u，纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 200 u~3 500 u，纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。
结论：纸片法是目测的试验，比色板只有简单几个单位值，而且受主观因素影响较大，误差较大，准确性和不高，难以标准化。
速率法不受人为因素影响，而且准确性和重复性高，易于标准化。
两者要做统计学比较是不现实的，只能从数值上做粗略的估计。
建议临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒的患者，进行疗效观察和预后估计时，动态观察CHE以速率法检测为准。
［关键词］ CHE；纸片法；速率法血清或血浆胆碱酯酶(CHE)是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。
过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE，现在由于全自动生化仪广泛应用，日常对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者测定CHE多采用速率法，但是夜间为了对有机磷中毒患者鉴别和中毒程度鉴定，测定CHE还多采用纸片法。
胆碱酯酶(CHE)测定操作规程
胆碱酯酶（CHE）测定操作规程一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中胆碱脂酶（CHE）的活性。
二、临床意义（一）概述胆碱脂酶可以分为乙酰胆碱酯酶和假性胆碱酯酶，前类亦称真性胆碱酯酶，主要存在于胆碱神经末梢突触间隙。
乙酰胆碱酯酶可以在神经末梢、效应器接头或突触间隙等部位终止乙酰胆碱作用。
（二）临床意义1. 病理性升高：肾病综合征，甲状腺功能亢进，糖尿病，脂肪肝，原发性家族性高CHE血症，血清CHE变异，原发性肝癌等。
2. 病理性降低：重症肝炎，慢性肝炎活动型，肝硬化，肝脓肿，各种癌，低蛋白血症(营养不良，贫血，感染，皮肌炎，急性心肌梗死)，遗传性血清CHE异常症，有机磷中毒(轻度中毒降低30%，中度中毒降低50%，重度中毒降低70%)，溃疡性结肠炎，肾功能不全，天疱疮，烧伤等。
（三）检验原理胆碱酯酶催化S-碘化丁酰基硫代胆碱水解，生成丁酸与硫代胆碱，硫代胆碱与黄色的铁氰化钾[Fe(CN)6]3-反应后形成无色的[Fe(CN)6]4-，在405nm吸光度下降的速率与标本中胆碱酯酶活性成正比。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。
CHE测定样品为不溶血的血清、血浆（肝素抗凝）。
样品应在低温条件下运输并及时测定。
不能使用EDTA抗凝剂的标本。
五、试剂（一）试剂组成不同批号试剂中各组份不能互换。
（二）试剂准备R1和R2试剂为即用型液体试剂，开瓶装载即可使用，用后应及时冷藏保存。
（三）试剂的保存及稳定性1. 不能冰冻试剂。
2. 未开瓶的R1和R2试剂应在2～8℃密闭避光贮存，稳定期为瓶签标示的有效期。
胆碱酯酶抑制法测定有机磷农药残留量
胆碱酯酶抑制法测定有机磷农药残留量胆碱酯酶抑制法测定有机磷农药残留量（本法参照GB/T 5009·199—2023）一、原理有机磷类（OPS）和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶（AchE）的活性具有很强的抑制作用。
向样品中添加肯定量的乙酰（或丁酰）胆碱酯酶，假如样品中含有上述两大类农药，即会对酶的活性产生抑制作用。
当向含有农药的样品中添加底物（碘化硫代乙酰胆碱）和显色剂（二硫代二硝基苯甲酸）时，酶由于失去活性而不能催化底物分解并完成显色反应；相反，假如样品中不含农药，胆碱酯酶则能催化底物分解并完成显色反应。
通过分光光度计于412nm波长下比色，能测出颜色变化造成的吸光度之差，再通过吸光度的变化计算出酶的抑制率。
酶的抑制率越大，说明样品中残留农药的含量越高。
二、试剂1、磷酸盐缓冲溶液：3.2gKH2PO4和11.9gK2HPO4配成1000mL，PH8.0、2、显色剂：160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。
3、底物：取25.0mg碘化硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后4℃冰箱中保存备用，保存期不超过2周。
4、胆碱酯酶溶液：称取0.040g丁酰胆碱酯酶（粉剂）或乙酰胆碱酯酶，加入2mL磷酸盐缓冲溶液，溶解后低温保存，1周内可用。
三、仪器1、农药残留快速测定仪或分光光度计。
2、分析天平。
3、恒温烘箱。
四、测定步骤1、取蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm见方的碎片，取样1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲液振荡1～2min，倒出提取液，静置3～5min备用。
2、对比溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲液，再加入0.1mL胆碱酯酶溶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品测试时放置时间应一致）。
加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色，应立刻用1cm比色皿放入农药残留快速测定仪（或分光光度计），记录反应3min的吸光度变化值△A0、3、样品溶液测定：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对比溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值△At。
胆碱酯酶(CHE)测定试剂盒(丁酰硫代胆碱底物法)产品技术要求derui
胆碱酯酶（CHE）测定试剂盒
（丁酰硫代胆碱底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以蒸馏水为空白时，波长405 nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度≤ 0.5。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以蒸馏水为空白时，波长405 nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度变化率≤ 0.01。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试5000 U/L被测物时，吸光度变化率≥0.02。
2.4线性范围
2.4.1 试剂盒在100~12500 U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2 相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表 3 相对偏差或绝对偏差
2.5测量精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5.0%。
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤6.0%。
1
2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
胆碱酯酶CHE测定
胆碱酯酶CHE测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确2 原理碳化丁酰胆碱+H2O 胆碱酯酶硫代胆碱+丁酸硫代胆碱+亚铁氰化钾 (Ⅲ) 亚铁氰化钾（II）+胆碱胆碱酯酶催化水解硫代胆碱和碳化丁酰胆碱。
硫代胆碱与黄色亚铁氰化钾（III）反映生成无色的亚铁氰化钾（II），这种颜色的减少可以在405和415纳米之间测得。
3 标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2—80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4 试剂4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CHE试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1试剂盒组成如下:R1 焦磷酸缓冲液:92 mmol/L,pH 7.7；亚铁氰化钾（III）：2.4 mmol/L。
R2 GOOD缓冲液：10 mmol/L，pH 4.0；碳化丁酰胆碱：46 mmol/L；稳定剂4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期；机上稳定期：4周4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。
4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的CHE校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
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胆碱酯酶测定试剂盒（丁酰硫代胆碱底物法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中胆碱酯酶的活性浓度。
1.1产品型号/规格
1.2产品组成
试剂1：PBS 50mmol/L。
试剂2：丁酰硫代胆碱6mmol/L。
2.1 外观
试剂1为无色或略带黄色透明溶液；试剂2为无色或略带黄色透明溶液；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。
2.2 装量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1 试剂空白吸光度
在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.60。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率
在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白波光度变化率（ΔA/min）应不大于 0.002/min。
2.4分析灵敏度
测定4390U/L胆碱酯酶时，吸光度的变化率在（0.5910±0.0129）/min。
2.5 准确度
采用比对试验，相关系数r2≥0.95,相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 重复性
用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于5.0%。
2.6.2 批间差
试剂（盒）批间相对极差应不大于6.0%。
2.7 线性区间
试剂线性在[50，20000]U/L（37℃）区间内：
a) 线性相关系数|r|应不小于0.990；
b) [50，3000]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±300U/L；（3000，20000]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性
原包装试剂2～8℃避光保存有效期12个月，到效期后的样品检测试剂空白、准确度、线性区间应符合2.3、2.5、2.7的要求。