LFGB基础实验操作指南
血清白蛋白标准操作规程,1200字
血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白，其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。
以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。
一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括：白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。
2. 仪器包括：分光光度计、细管离心机等。
二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。
2. 血样采集后，立即置于无菌离心管中，以4,000转/分钟离心10分钟，将血浆分离。
3. 将血浆分装在无菌离心管中，分别标注，冷藏保存。
三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀，按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算，避免过量使用试剂。
2. 准备好所需标准品的稀释液，按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。
四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。
2. 试剂和样本准备：a. 在试验前半小时，将试剂和样本从冰箱中取出，适应室温。
b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀，避免生成气泡。
3. 试剂预热：取足够的试剂和样本，在试剂的使用温度下预热15分钟。
4. 光度计的调整：a. 打开分光光度计，选择合适的检测波长，适用于试剂盒中所使用的测量波长。
b. 将白色比色杯放入试槽中，调零，使显示屏上的光吸收值为0。
5. 基线测定：a. 将预热的白色比色杯置于试槽中，按下基线的按钮，待显示屏上的光吸收值稳定后，即可进行下一步操作。
b. 注意每次操作前都要进行基线测定，确保测量结果的准确性。
6. 样本和标准品的检测：a. 在预热的白色比色杯中，加入1.0mL的试剂，再加入0.01mL的样本，立即搅拌均匀。
b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。
c. 重复上述步骤，测量标准品的吸光度值，并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。
7. 结果的记录计算：a. 将吸光度值记录在结果表格中。
b. 根据标准曲线的结果，计算样本中的白蛋白浓度。
全国临床检验操作手册第四版
全国临床检验操作手册第四版
简介
本文档是全国临床检验操作手册第四版的概要介绍。
该手册是临床检验工作中的重要参考资料，旨在规范和统一临床检验操作流程，提高检验质量和效率。
目标
本手册的目标是为临床检验人员提供准确、全面、易于操作的操作指南，以确保临床检验工作的准确性和可靠性。
内容
全国临床检验操作手册第四版包含以下内容：
1. 检验仪器的操作方法和维护指南。
2. 不同临床检验项目的标本采集、处理和保存方法。
3. 标本运输和储存的规范要求。
4. 样品检验前的准备工作和注意事项。
5. 各类临床检验项目的操作步骤和结果解读方法。
6. 常见临床检验异常结果的分析和处理方法。
7. 质量控制和质量评价的要求和方法。
8. 临床检验结果报告的格式和内容要求。
9. 临床检验安全与风险管理的指导原则。
使用方法
临床检验人员在进行检验工作时，应按照全国临床检验操作手册第四版的要求进行操作。
在遇到操作上的问题或不确定之处时，可以参考手册中的相关章节进行查询和解决。
总结
全国临床检验操作手册第四版是一份重要的参考资料，为临床检验工作提供了规范和指导。
临床检验人员应熟悉并按照手册要求进行操作，以确保检验结果的准确性和可靠性。
布氏杆菌病虎红平板凝集操作流程
布氏杆菌病虎红平板凝集实验操作流程材料与试剂以布氏杆菌病平板凝集反应为例。
1．玻璃板、刻度吸管等。
2．布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清。
操作方法1．取洁净玻板一块，用玻璃铅笔划成方格，并注明待检血清号码。
2．取０.２ml吸管分别吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格内。
大规模检验时，可只做２个血清量，大动物用0.04ml和0.02ml，中小动物用0.08ml和0.04ml。
每检一个样品需换一只吸管。
3．每格内加布氏杆菌平板凝集抗原0.03ml，滴在血清附近，而不要与血清接触。
用牙签（或火柴杆）自血清量最小的一格起，将血清与抗原混匀，每份血清用一根牙签。
4．混合完毕，将玻板置凝集反应箱上均匀加温或采用别的办法适当加温，使温度达到３０℃左右。
3min～5min内记录结果。
结果判定＋＋＋＋：出现大的凝集块，液体完全清亮透明，即100％凝集。
＋＋＋：有明显的凝集片，液体几乎完全透明，即75％凝集。
＋＋：有可见的凝集片，液体不甚透明，即50％凝集。
＋：液体混浊，有小的颗粒状物，即25％的凝集。
－：液体均匀混浊，即不凝集。
以出现＋＋凝集的血清最高稀释倍数作为该份血清的凝集价。
大动物（牛、马、骆驼等）以0.02ml出现凝集价判为布氏杆菌病血清阳性，0.04ml出现凝集价判为可疑。
中小动物（猪、山羊、绵羊等）以0.04ml出现凝集价判为该份血清为布氏杆菌病阳性血清，0.08ml出现凝集价判为可疑。
注意事项1．每次试验必须以标准阳性血清和标准阴性血清进行对照。
2．加抗原前必须摇匀。
3．反应温度最好保证在30℃左右，3min～5min内判定。
如反应温度偏低，可适当延长判读时间。
4．如用两个血清量作试验，任何一个血清量出现凝集反应时，则需要用四个血清量重检。
5．平板凝集反应最好是用于初筛，如出现阳性或可疑反应，再用试管凝集反应进行复检，以定性。
6．平板凝集反应与试管凝集反应的关系。
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程(SOP)
目的:输血前进行检验查,可对有妊娠史,多次输血史,大量输血的病人进行不完全抗体的初选.
操作:
1、取3—5名“O”型正常人抗凝血(新鲜血常规抗凝血)进行等量混合。
2、用无菌生理盐水洗涤3—5次。
3、配制成2%红细胞悬液(上述离心沉淀红细胞1ml加生理盐水49mL混匀)待用。
4、取病人(受血者)血清或血浆100mL和2%红细胞悬液100mL等到量混合，然后离心，侄去上清液，混匀，倒在玻片上，显微镜观察是否凝集。
5、如有凝集，说明该受血者体内存在不规则抗体，毅然交叉配血不能进行。
6、如无凝集才能配血。
直接抗球蛋白试验流程
直接抗球蛋白试验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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抗球蛋白试验标准操作规程
抗球蛋白试验标准操作规程1.检验目的保证抗球蛋白试验符合要求。
2.检验方法本试验包括“直接抗球蛋白”和“间接抗球蛋白”试验。
2.1直接抗球蛋白试验2.1.1 原理患者体内若有与红细胞抗原不相合的不完全抗体存在，可与红细胞结合形成抗原抗体复合物。
但因不完全抗体分子量小，不能有效地连接红细胞，仅使红细胞处于致敏状态。
加入抗球蛋白血清，与红细胞上吸附的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼可见的凝集。
这种直接检测体内被抗体或(和)补体致敏红细胞的试验称之为直接抗球蛋白试验。
直接抗球蛋白试验主要用于检查受检红细胞是否在体内已被抗体或者补体致敏，用于新生儿溶血病，溶血性输血反应，自身免疫溶血性贫血，药物诱导溶血性贫血等检查。
2.1.2.标本EDTA抗凝的静脉血2.0ml。
2.1.3.试剂多特异性抗球蛋白试剂、抗IgG、抗C3d；2.1.4.器材离心机、小试管、刻度吸管或加样器（50～200µl）、37℃水浴箱等。
2.1.5.操作步骤2.1.5.1.取3支试管分别加入多特异性抗球蛋白试剂、抗IgG、抗C3d试剂各1滴，然后再加1滴受检者三洗后的2-3%红细胞悬液，混匀。
2.1.5.2. 各反应管以3000r/min离心10秒，持一定的角度轻轻地摇动试管直到松动所有细胞。
先用肉眼观察管底红细胞的凝集，再用低倍镜观察。
2.1.5.3.对照：用IgG致敏细胞（抗D血清加Rh阳性细胞，37℃水浴30分钟，洗3次配成3%红细胞盐水悬液）作为多抗及单抗IgG的阳性对照，阴性对照用正常人AB型血清与正常人“O”型红细胞反应。
2.1.6.结果判断先观察阴性和阳性对照管，阴性对照管无凝集，阳性对照管出现＋＋＋～＋＋＋＋凝集，说明检测管结果可信。
如被检测管凝集，直接抗球蛋白试验阳性，不凝集者为阴性。
如实验结果阴性要加试剂对照细胞检查，对照阴性实验结果可靠。
2.1.7．注意事项2.1.7.1.标本采取后应立即进行试验，延迟试验或中途停止可使抗体从细胞中丢失。
临床实验室操作指南
临床实验室操作指南目标本操作指南旨在提供临床实验室操作的简单策略，以确保独立决策并避免法律复杂性。
操作准则以下是在临床实验室中进行操作时应遵循的准则：1. 独立决策：作为临床实验室经营者，您应独立做出决策，不依赖用户协助。
2. 发挥专长：充分发挥您作为临床实验室经营者的专长，遵循您的职责和能力范围。
3. 简单策略：选择简单的策略，避免涉及法律复杂性的决策。
4. 确认可证实内容：在文档中引用的内容必须能够被确认和证实，避免引用不可证实的内容。
操作指南以下是一些建议的操作指南，以帮助您在临床实验室中进行决策和操作：1. 设立决策流程：制定一个明确的决策流程，确保决策的一致性和透明度。
该流程应包括收集信息、分析、讨论和最终决策的步骤。
2. 建立合规框架：确保您的实验室操作符合相关法律法规和行业标准。
建立合规框架，包括适当的许可和证书、实验室安全和质量管理等方面。
3. 培训和管理人员：确保实验室的工作人员具备必要的技能和知识，并定期进行培训以保持其专业水平。
同时，建立有效的人员管理制度，包括任务分配、绩效评估和激励机制等。
4. 实验室设备维护：定期检查和维护实验室设备，确保其正常运行和准确性。
建立设备维护记录和维修计划，及时修复故障并更换老化设备。
5. 样本管理和追踪：建立有效的样本管理系统，确保样本的准确标识、存储和追踪。
遵循样本处理和销毁的规定，保护患者隐私和数据安全。
6. 质量控制：建立质量控制程序，监测实验室操作的准确性和可靠性。
参与外部质量评估计划，及时发现和纠正潜在问题。
7. 数据管理：建立安全可靠的数据管理系统，确保数据的完整性和机密性。
制定数据备份和恢复计划，防止数据丢失或泄露。
8. 持续改进：定期评估实验室操作的效果和改进机会。
根据评估结果，制定改进计划并跟踪实施情况。
结论本操作指南为临床实验室经营者提供了简单策略和操作指南，以确保独立决策和避免法律复杂性。
遵循这些准则和指南，您将能够有效管理临床实验室并提供高质量的服务。
在线氮磷分析仪安全操作及保养规程
在线氮磷分析仪安全操作及保养规程一、操作规程：1.操作人员应穿戴个人防护装备，包括实验手套、护目镜和工作服等。
2.操作前应确保分析仪处于稳定的电源供应范围内，并进行必要的仪器校准与调试工作。
3.使用前，操作人员应对仪器进行仔细的检查，确保分析仪的所有部件都处于正常工作状态。
4.操作人员必须熟悉操作手册，了解仪器的使用方法和注意事项。
5.操作人员应遵守正确的样品处理方法，将待分析的水样正确取样，并按要求存放。
6.操作人员应按照操作手册的指导，正确调整分析仪的参数和设定各项分析条件。
7.在使用仪器时，严禁将手指或其他物体接近仪器的工作部件，以免发生危险。
8.每次操作结束后，应彻底清洁仪器，包括吹扫管道，清洗反应池等，以确保下次使用时的准确性和稳定性。
9.严禁在使用分析仪时饮食、吸烟、喝水等，杜绝一切可能造成仪器受污染的行为。
10.每次使用结束后，应及时排空仪器中的废液和废样，保持仪器的干净整洁。
二、保养规程：1.每天使用结束后，应按照操作手册的要求对仪器进行必要的清洁和保养。
2.定期检查仪器的供电线路是否破损，如有损坏应及时更换。
3.定期检查仪器的机械传动部分是否正常运行，如发现异常应及时进行维修或更换。
4.定期对仪器进行校准，确保仪器的分析准确性和稳定性。
5.保持仪器处于干燥、通风、无尘、无酸碱气体等环境中，避免仪器受潮、受灰尘污染等。
6.定期对仪器进行保养，清理仪器表面、探头、仪器内部以及管道等部件，确保仪器的清洁与卫生。
7.定期更换仪器的耗材、试剂和标准物质，以保持分析准确性和稳定性。
8.妥善保管仪器的使用记录、维修记录和校准记录，方便仪器维护和日常管理。
9.定期进行仪器的定期保养与检修，确保仪器的正常运行和使用寿命。
10.对于长时间不使用的仪器，应进行特殊保养，比如断电、清洁、封存等，以保证再次使用时的准确性和稳定性。
通过遵守以上的操作和保养规程，操作人员能够高效、安全地操作在线氮磷分析仪，同时延长仪器的使用寿命和性能稳定性。
福建免疫分析仪操作方法
福建免疫分析仪操作方法
福建免疫分析仪操作方法包括以下几个步骤：
1. 启动仪器：按下仪器上的电源按钮，待仪器启动完成后进行下一步操作。
2. 准备样品：按照实验要求，准备好待测样品，并将其放置在样品架上。
3. 设定实验参数：根据实验需求，在操作面板上设置相应的参数，包括温度、时间、试剂种类和处理方法等。
4. 开始实验：按下“开始”按钮或者选择相应的实验程序后，仪器将自动进行实验过程。
5. 数据采集和分析：仪器会自动采集实验过程中的数据，并将其显示在仪器的屏幕上。
根据需要进行数据处理和分析，可以利用仪器自带的分析软件或者导出数据到计算机进行进一步分析。
6. 清洗和维护：实验完成后，根据仪器的要求进行清洗和维护工作，包括清洗试剂管道、更换废液等。
7. 关闭仪器：实验完全后，按下电源按钮，将仪器关闭。
需要注意的是，不同型号的福建免疫分析仪具体操作方法可能会有所区别，建议在操作之前详细阅读仪器的使用手册或请教相关专业人士。
抗体筛检试验操作规程
抗体筛检试验操作规程一、试验目的二、试验前准备1.安全措施：在进行试验前，操作人员应穿戴好实验室所要求的防护服、手套、口罩等个人防护用品，确保实验的安全进行。
2.仪器准备：确保所需要的实验仪器设备状态良好，无损坏或故障。
三、实验步骤1.样品准备：a.样品收集：采集患者的体液样本，按照规范的采样方法进行，避免外界污染。
b.样品处理：将样品离心，去除悬浮物，得到清澈的液体。
c.样品储存：如不能立即使用，应将样品进行适当的储存，避免变质和污染。
2.标本分配：根据试剂说明书的要求，将样品分配到不同的试管或孔板中。
3.添加试剂：根据试剂的使用说明书，按照要求将试剂依次加入样品中。
注意加入试剂的顺序和时间，避免因操作不当引起实验结果的误差。
4.摇动和舍弃：轻轻摇动试管或孔板，使样品和试剂充分混合，以保证试验的均一性。
然后，按照规定的程序舍弃废弃物，避免污染和交叉感染。
5.实验读数：将样品置于分光光度计或其他适当的仪器中，按照试剂说明书要求进行读数。
记录读数结果。
6.结果判定：根据标准曲线或指标值，对读数结果进行判定，确定阳性或阴性结果。
注意结果的解读要准确和可靠。
四、结果评估根据试验结果的阳性或阴性情况，评估样品中是否含有特定抗体。
阳性结果可能表示感染或其中一种疾病的存在，而阴性结果则表示无特异抗体存在。
五、记录和报告试验过程中应详细记录试验操作和结果，包括样品信息、试剂信息、实验步骤、读数结果等。
及时准确地完成实验记录和结果报告，以便后续的数据分析和报告撰写。
六、实验后处理试验结束后，及时清洗和消毒实验用具和工作台面。
将废弃物放入指定的处置容器中，并按照实验室的废物处理规范进行处理和处置。
七、实验验证为了保证试验结果的准确性和可靠性，应定期进行实验验证，对操作流程、试剂、仪器等进行检验和验证。
必要时，可以进行重复实验或对照试验，以确保试验结果的一致性和可靠性。
八、实验质控建立适当的实验质控体系，包括对试剂的质量控制、实验仪器的校准和验证、样品处理和分配的质控和实验数据的监控等方面。
地理实验操作规程
地理实验操作规程地理实验是地理学习中非常重要的一部分，它能够帮助我们更直观地理解地理现象和原理。
为了确保实验的顺利进行和实验结果的准确性，制定一套科学合理的地理实验操作规程是十分必要的。
以下将详细介绍地理实验的操作规程。
一、实验前的准备1、明确实验目的在进行实验之前，必须清楚地了解实验的目的是什么。
这有助于我们确定实验的重点和需要关注的结果。
2、选择合适的实验器材根据实验的具体内容，选择相应的实验器材。
例如，如果是进行地形模型的制作，就需要准备沙子、泥土、模型板等；如果是进行气候观测实验，就需要准备温度计、湿度计、风速仪等。
3、检查实验器材的完整性和可用性在实验开始前，要仔细检查所选用的实验器材是否完好无损，能否正常工作。
如有损坏或故障，应及时更换或维修。
4、准备实验场地确保实验场地整洁、安全，并且具备进行实验的条件。
例如，进行天文观测实验时，需要选择一个视野开阔、没有灯光干扰的场地。
5、熟悉实验步骤和方法在进行实验之前，要认真阅读实验指导书，熟悉实验的步骤和方法，了解可能出现的问题及解决方法。
6、做好个人防护根据实验的性质和要求，做好个人防护措施。
例如，进行化学实验时，要佩戴护目镜、手套等。
二、实验中的操作1、按照实验步骤进行操作严格按照事先熟悉的实验步骤进行操作，不得随意更改。
如果在实验过程中发现问题或有新的想法，应先暂停实验，经过思考和讨论后再决定是否继续。
2、准确测量和记录数据在实验过程中，要使用正确的测量工具和方法，准确测量各种数据，并及时、如实记录下来。
记录的数据要清晰、规范，便于后续的分析和处理。
3、注意实验安全始终将实验安全放在首位。
遵守实验室的安全规定，避免发生意外事故。
例如，在使用电器设备时，要注意防止触电；在使用化学试剂时，要避免接触皮肤和误食。
4、仔细观察实验现象在实验过程中，要仔细观察各种实验现象，注意细节。
对于一些不易察觉的现象，可以通过多次重复实验或使用辅助工具来进行观察。
低本底实验简易操作流程
低本底α、β测量仪操作流程
一本底测量：
1、将空盘放入仪器样品托盘，双击桌面WIN-8A图标进入主界面，点击仪器参数，置阈成功后，点本底测量，设置好测量周期和测量时间后（一般测量周期为8及以上，测量时间为3600），点确认，然后点击开始，结束后参数自动录入软件，无须人工手动输入。
本底测量应每季度一次为宜。
二用标准源刻度仪器
1.用天平称取160mg的Am241和K40各2份在样品盘中。
2.在称取的标准源中加入酒精，用玻璃棒将其铺均匀，如果颗粒较
大可用玻璃棒将其碾细。
3.将铺好的标准物质放到红外灯或干燥箱里稳定35°下烘烤大约30
分钟左右即可。
4.将制作好的2份标准物质Am241放到仪器样品测量抽盘中。
5.打开仪器进入系统，双击桌面WIN-8A程序图标。
6.进入程序后点仪器参数，置阈成功后点击确定。
7.点击测量---α标准源效率刻度
8.在弹出的工作条件设置中设置测量周期和测量时间，一般设置2
个周期，测量时间900s。
9.设置好后确认
10.点开始测量，两个小时后测量完毕将结果保存或打印。
11.测量β标准源效率和测量α标准源效率一样，不同的是在测量中
点β标准源效率刻度。
12.标准源刻度仪器不需要每次做水样之前都做，每一个季度做一次
即可。
LFGB 塑胶_ 纸品_木材产品食品级测试
LFGB 塑胶产品食品级测试1．PA：LFGB –PAOver migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值Specific migration of aromatic amine 芳香胺迁移Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品2．PPLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PP 塑料制品要求:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Total Chromium 总铬含量Total Vanadium 总钒含量Total Zirconium 总锆含量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品3．PolyesterLFGB –Polyester 塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值测试Volatile organic matter (VOM) 有机挥发物总量Sensory test-taste and odour to the integrate product 感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品4. Acrylic:LFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Acrylic 塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值测试Volatile organic matter (VOM) 有机挥发物总量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品5. ABS,SAN料LFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –ABS, SAN塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值测试Volatile organic matter (VOM) 有机挥发物总量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品6. P．S．LFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PS 塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oilPeroxide value 过氧化值测试Volatile organic matter (VOM) 有机挥发物总量Sensory test-taste and odour to the integrate product 感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品7．LFGB –Acetal resins, POMLFGB –Acetal resins, POM 塑料制品要求测试项目: Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Total Zinc 总锌含量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品8．PELFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PE 塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Over migration for 3% acetic 3%全面迁移之3%醋酸浸取Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值Total Chromium 铬含量Total Vanadium 钒含量Total Zirconium 锆含量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品9．MelamineLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PP塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Over migration for 3% acetic 3%全面迁移之3%醋酸浸取Over migration for 10% ethanol 10%Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Overall migration in 95% ethanol as substitute of rectified olive oil 全面迁移之橄榄油替代物95%酒精浸取法Extractable formaldehyde甲醛溶出量测试Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品Special Migration of Melamine in 3% acetic acid11. PPLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PP塑料制品要求测试项目:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Over migration for 3% acetic 3% 全面迁移之3%醋酸浸取Over migration for 10% ethanol 10% 全面迁移之10%酒精浸取 Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Residual vinyl chloride monomer 氯乙烯单体测试Peroxide value过氧化值测试Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品12. PU/ TPULFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PU, TPU 塑料制品要求:Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值Specific migration of aromatic amine 芳香胺迁移Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品Total phthalateSpecific migration of phthalate (3% acid)Specific migration of phthalate (10% ethanol)Specific migration of phthalate (substitute of olive oil)Specific migration of isocyantes (3% acid)Specific migration of isocyantes (10% ethanol)13. PETLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –PET 塑料制品要求 :Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Over migration for rectified olive oil全面迁移之橄榄油浸取Peroxide value 过氧化值Total zinc content 锌含量Total lead content 铅含量Sensory test-taste and odour to the integrate product 感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品14. Silicone RubberLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Silicone Rubber 硅橡胶制品要求 : Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取(必做)Volatile organic matter (VOM)有机挥发物总量Peroxide value过氧化值Organotin content 有机锡化合物测试Sensory test-taste and odour to the integrate product 感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品15. Rubber, TPR, TPELFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Rubber, TPR, TPE 橡胶制品要求 : Over migration for distilled water全面迁移之去离子水浸取Overall migration in 3% acetic acid全面迁移之3%醋酸浸取法Over migration for 10% ethanol 10%全面迁移之10%酒精浸取Extractable formaldehyde 甲醛溶出量测试Total zinc content 锌含量测试Total lead content 铅含量测试Specific migration of aromatic amine 芳香胺迁移测试Nitrosamine and nitrosatable substances亚硝胺和亚硝基物质含量Sensory test-taste and odour to the integrate product感官测试-味道和气味与食品接触的整体产品16. PaperLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Paper 纸制品要求 :Pentachlorophenol (PCP) 五氯苯酚测试Extractable heavy metals (Pb,Cd,Hg,CrVI)*重金属（铅，镉，汞，六价铬）释出量** -not acceptable for the product in contact with dry food*-不适用于纸张与干性食品接触情况Preserving effect 抗菌成分迁移测试Formaldehyde 甲醛含量测试Extractable Glyoxal 乙二醛释出量测试Paper with color －Azo dyestuff带颜色的纸制品－偶氮染料测试Sensory test －taste and odour to the integrate product感官测试－味道和气味对于与食品接触的整体产品17. Baking paperLFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Baking paper 烘焙纸制品要求 :Appearance 外观Thermal stability热稳定性Preserving effect抗菌成分迁移测试Polychlorinated biphenyls (PCBs) 多氯联苯测试Extractable formaldehyde 甲醛溶出量测试18. Wood德国食品等级LFGB测试标准：LFGB Part 30 • LFGB Part 31LFGB –Wood木材测试项目:Pentachlorophenol (PCP)五氯苯酚Extractable Formaldehyde甲醛释出量Sensory test －taste and odour to the integrate product感官测试－味道和气味对于与食品接触的整体产品19. 规定食品包装印刷须用无味油墨欧洲国家对食品包装要求颇为严格，但目前对用于食品包装的印刷油墨尚无特定的法规。
IF实验操作步骤详解
IF实验操作步骤详解免疫荧光方法*重要提示：在开始实验前请查阅所用抗体的说明书中第一页应用（APPLICATIONS）部分，确认这支抗体已经验证过可用于你计划采用的本实验方法中的特定方案。
A.所需溶液和试剂NOTE: Prepare solutions with Milli-Q or equivalently purified water.注意：用Milli-Q超纯水或是相当级别的水配制溶液。
1.10 X磷酸盐缓冲液(PBS): 1升水中加入80 g 氯化钠 (NaCl), 2g 氯化钾(KCl), 14.4 g 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) and 2.4 g 磷酸二氢钾(KH2PO4)。
调整pH到7.4。
2.甲醛溶液，16%，无甲醇的类型，Polysciences, Inc. (cat# 18814) ，现配现用。
开封以后放在4°C避光保存。
使用时用PBS稀释。
3.二甲苯无水乙醇，组织学级，100%和95%。
1.蒸馏水(dH2O)2.封闭缓冲液：配制25ml时，2.5 ml 10X PBS和1.25ml正常血清（来源与二抗相同，例如正常山羊血清，正常驴血清）兑到21.25ml的蒸馏水中，混匀。
边搅拌边加入75µL Triton X-100(100%)。
3.抗体稀释缓冲液配置40ml时，取4 ml 10X PBS兑入36 ml 蒸馏水，混匀。
加入0.4 BSA，使溶解。
边搅拌边加入120µL Triton X-100(100%)。
4.10 mM柠檬酸钠缓冲液配置1L时，称取2.94g二水合柠檬酸三钠(C6H5Na3O7·2H2O)溶解在1L蒸馏水中。
调整pH为6.0。
5.1X PBS, 高盐(0.4M) (高盐PBS)：配置1L时，取100ml 10X PBS兑入900 ml蒸馏水，另加23.38 g NaCl，使溶解。
6.荧光素标记的二抗(推荐的二抗)注意：第一次使用不论是一抗还是荧光素标记的二抗时，都需要做滴定分析以判断何种稀释比例能在你的样品上得到最强的特异信号同时背景保持最低。
利巴韦林检验标准操作规程(外标法)
利巴韦林检验标准操作规程(外标法)1.目的：指导检验人员掌握正确的操作方法，以确保检测结果的准确性和可靠性。
2.适用范围：仅适用于本公司。
3.责任：质量控制部经理、化验室主任、化验员。
4.标准依据：利巴韦林内控质量标准5.内容：5.1.【性状】5.1.1.标准规定：本品为白色或类白色结晶性粉末；无臭，无味。
5.1.1.1.仪器：偏光显微镜，载玻片5.1.1.2.试液：液状石蜡5.1.1.3.操作方法：取本品少许，置载玻片上，加液状石蜡1滴使悬浮，在偏光显微镜下检视。
观察转动载物台时，是否呈现消光位和双折射现象，进行结晶性判断。
5.1.1.4.结果与判定：根据所观察的供试品外观与转动载物台时，是否呈现消光位和双折射现象进行判断，与上述描述相符者，判为结晶性粉末。
5.1.2.标准规定：本品在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚或二氯甲烷中不溶。
5.1.2.1.用具：小试管5.1.2.2.试剂：乙醚、乙醇、二氯甲烷5.1.2.3.操作方法：称取研成细粉的供试品，置于 25℃±2℃一定容量的溶剂中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒时，即视为完全溶解。
5.1.2.4.结果与判定：本品在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚或二氯甲烷中不溶，判为符合规定；否则，判为不符合规定。
5.1.3.比旋度5.1.3.1.标准规定：40mg/ml的水溶液比旋度为-35.0o至－37.0o。
5.1.3.2.仪器与用具：分析天平、旋光仪、温度计5.1.3.3.操作方法5.1.3.3.1.取本品2.0g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，制成每1ml中约含40mg的溶液，摇匀，使供试品溶液的温度控制在20℃±0.5℃。
用空白溶剂校正仪器零点，供试品溶液与空白溶液同一测定管，每次测定应保持测定管方向，位置不变，按比旋度测定法SOP测定，记录所测数据，旋光度读数应重复3次，取其平均值。
FIB-Clauss标准操作流程
纤维蛋白原(Clauss法)标准操作流程目录1 目的2 检测原理3 产品信息4 试剂准备5 试剂保存和稳定性6 警告和注意点7 样本收集和准备8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材9 质量控制10定标11定标方法 (如需要)12检测程序13结果计算14 结果解释15局限性/干扰16 参考范围17 性能特征18 参考文献1 目的此程序提供在ACL 8000，ACL 9000仪器上使用HemosIL™ Fibrinogen-C 试剂用于纤维蛋白原(Clauss法)定量检测。
2 测试原理将试剂加入稀释的样本中，试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，反应过程的速率和纤维蛋白原的浓度呈函数关系。
3 产品信息HemosIL™ Fibrinogen-C纤维蛋白原测定试剂盒包含：牛凝血酶： 8 x 2 mL (P/N8469110)或者10 x 5 mL(P/N20003900) 冻干牛凝血酶(35 UNIH/瓶) ，内含牛血浆白蛋白，CaCl 2，缓冲液和稳定剂。
异常质控血浆：2 x 1 mL 冻干人枸橼酸抗凝血浆，含低值的纤维蛋白原，缓冲液和稳定剂（仅P/N8469110含有）。
4试剂配制牛凝血酶：用2 mL （或5mL ） NCCLS II 型或相同质量的去离子水溶解1瓶牛凝血酶，盖上盖子，轻摇至完全溶解，15-25˚C 室温平衡30分钟，使用前充分颠倒混匀。
不可用力振摇。
异常质控血浆：每瓶用1 mL NCCLS II 型或相同质量的去离子水溶解。
盖上盖子，轻摇至完全溶解，15-25˚C 室温平衡30分钟，使用前充分颠倒混匀。
不可用力振摇。
5 试剂保存和稳定性未开封的试剂可稳定至2-8 o C 至试剂盒上标明的有效期。
牛凝血酶：复溶后于原瓶中2-8 o C 稳定3天；于原瓶中-20 o C 稳定1个月；在ACL 8/9000上（15o C ）稳定8小时。
为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂从仪器系统撤回，使用原瓶，保存于2-8 o C 。
肺炎链球菌分型技术-荚膜肿胀分型 Quellung Typing
荚膜肿胀分型试验
（Quellung Typing）
试验开始前，请准备：
1%甲基兰溶液。
试验步骤：
1.用无菌棉签刮取新鲜培养的细菌，溶于0.85%的NaCl溶液中，配制3.0麦氏
单位菌悬液。
2.分别吸取分型血清和1%甲基兰溶液各5µl于载玻片上充分混合。
3.在步骤2的混合液中添加5µl步骤1的菌悬液，混合均匀。
4.盖上盖玻片，室温下静置3min。
5.100x油镜下观察试验结果。
尽量在半小时内观察结果，勿要使两个玻璃片间
的液体干燥。
如果镜下观察：荚膜涨起可见（菌体自身肿胀）、菌体周围可见厚薄不等、边界清晰的无色环状物，为阳性试验结果。
将血清分型结果及时添加至Streptococcus pneumoniae isolates data bank。
利用荚膜肿胀法，采用丹麦Statens Serum Institut公司生产的Pneumotest Kit对肺炎链球菌血清型/群进行鉴别，判定流程如下：
再将菌悬液分别与血清P-T反应；
交叉凝集判定具体血清型/群。
例如一份样品分别与血清B和R反应，则此标本为血清群3肺炎链球菌。
*Sørensen UBS., Typing of Pneumococci by Using 12 Pooled AntiAntisera, J. Clin. Microbiol. 1993; 31: 2097-2100.。
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目录Part1: 鱼类肌肉组织DNA的提取 (1)Part2：组织RNA的提取、纯化及反转录 (4)Part3：PCR (11)Part4：DNA的凝胶电泳 (17)Part5：蛋白质电泳 (22)Part6：RACE (25)Part7：切胶回收、连接转化、菌落PCR (27)Part8：原位杂交探针合成 (31)Part9：组织切片原位杂交（ISH） (34)Part10：HE染色 (37)Part11：整体原位杂交 (39)Part12：染色体制备 (42)Part13：荧光原位杂交（FISH） (44)Part1: 鱼类肌肉组织DNA的提取实验准备：样品：牙鲆或者半滑舌鳎肌肉组织(活鱼解剖及取样见视频)；保存方式：-80℃或梯度乙醇保存（95%-75%）；耗材：枪头（最好减掉尖端头部部分），1.5mlEP管，50ml离心管；仪器：水浴锅，冷冻离心机，研钵, 剪刀，镊子，酒精喷壶；试剂：液氮，TNES，蛋白酶K，平衡酚，三氯甲烷，异戊醇，异丙醇，无水乙醇，NaAc，TE缓冲液, RNaseA；试剂配制：1. 裂解缓冲液TNES125mM NaCl；10mM Tris-HCl, pH 7.4；10mM EDTA；SDS 0.5%；Urea 4M；2. 蛋白酶K粉末溶解后分装于1.5ml EP管，工作浓度20mg/ml；3. 平衡酚（索莱宝）作用：使蛋白质变性，同时抑制了DNase的降解作用。
用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA 联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。
蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。
优点：有效变性蛋白质；抑制了DNase的降解作用；缺点：酚与水相有一定程度的互溶，大约10％～15％的水溶解在酚相中，因而损失了这部分水相中的DNA；不能完全抑制RNase的活性；注意：使用后及时放回4℃避光保存；溶液颜色变深，偏红时，酚已经被氧化，失效，及时更换；4. 氯仿/异戊醇：体积比24:1氯仿：克服酚的缺点；加速有机相与液相分层；酚易溶于氯仿中，因此最后用氯仿抽提去除核酸溶液中的迹量酚；异戊醇：减少晃动时产生的气泡。
异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。
另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定；5. 饱和NaAc：3M, pH 5.2300ml H2O + 122.472g NaAc·3H2O或100ml H2O+24.609g NaAC，用NaOH，HAc调pH.6. 1× TE缓冲液（pH7.4）10mmol/L Tris-Cl（pH 7.4），10mmol/L EDTA (pH 8.0)实验步骤：1. 裂解液氮研磨法：肌肉组织置于研钵中，加入液氮，仔细研磨成粉末状，越细越好，将粉末分装于1.5mlEP管中，加到刻度线100ul处。
加入550ul TNES，6ul蛋白酶K,56℃水浴，直到裂解液澄清，若需过夜，将水浴锅调至37℃过夜；机械剪碎法：取肌肉组织加入550ul TNES，6ul蛋白酶K, 56℃水浴 20-30min，使用小剪刀将组织剪碎，尽可能细小，再56℃水浴过夜，直至裂解液澄清；2. 抽提蛋白加入1:1的平衡酚：氯仿/异戊醇（24:1）各300ul，轻轻晃动20min，再13000rpm/min，20min；溶液分层，上层为水相，含有DNA；下层为有机相；中间是蛋白层；使用剪过的枪头小心的吸取上清，注意不要吸到蛋白层，加入TE补足600ul。
重复上一步骤，直至水相和有机相之间无蛋白层；3.去除残留酚取上清，加入TE补足600ul，加入氯仿/异戊醇（24:1）600ul，轻轻晃动20min，再13000rpm/min，10min；重复上一步骤（可不选）；4. 沉淀DNA取上清，加入异丙醇700ul，饱和NaAc 50ul，置于-20℃ 3h，再4℃，13000rpm/min，10min；5. 清洗沉淀预冷的70%乙醇 1ml洗涤沉淀，4℃，13000rpm/min，10min；预冷的无水乙醇 1ml 洗涤沉淀，4℃，13000rpm/min，10min；6. 溶解DNA通风橱或超净台干燥沉淀至无水乙醇全部挥发，加入20ul 1×TE 缓冲液溶解沉淀；7. 消化RNA加入RNaseA（具体工作浓度见商品说明），37℃消化1h；8. 电泳检测上样量1ul，λDNA浓度梯度估计样品的浓度；9. 样品保存于-20℃。
注意事项：1. 抽提蛋白时，必须轻轻转动EP管，轻柔混匀，禁止剧烈晃动，否则DNA会断裂，影响提取效果；2. 沉淀干燥时，待沉淀开始变透明时加TE溶解。
干燥过度，影响DNA的溶解；备注：牙鲆各组织图片Part2：组织RNA的提取、纯化及反转录实验准备：样品：牙鲆或者半滑舌鳎各组织(取样见视频)；耗材：枪头，200ulEP管, 1.5mlEP管，2.0mlEP管, 手套；注意：枪头盒需用报纸包好，注明大小及正面；需要高温高压蒸气灭菌40min；仪器：电动匀浆器（Fisher Scientific）,冷冻离心机，剪刀，镊子，酒精喷壶，保温盒，瓷勺；注意：镊子及匀浆器的转子需180℃烘烤4小时以上；试剂：液氮，三氯甲烷，异丙醇，无水乙醇，TRIzol（Invitrogen），DEPC处理水；注意：使用超净台中专用于提RNA的试剂；试剂配制：DEPC处理水：DEPC母液用超纯水稀释一千倍，即1ml DEPC溶于1L超纯水中。
溶解时，DEPC 不会很快溶解，开始时以小球的形式存在于溶液中，因此要在磁力搅拌器上搅动直到小球消失为止。
新鲜配制的DEPC水需要高温高压蒸气灭菌40min，进行灭活。
灭好的DEPC水最好分装起来，避免多次使用带来污染，可长期保存于4℃或-20℃。
作用：RNase的化学修饰剂，它和RNase的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性。
注意：DEPC气味芳香浓烈，强挥发性，有毒，需在通风橱中操作。
使用时要戴乳胶手套和口罩。
如果不慎溅到皮肤或眼睛，应立即用大量清水冲洗，如果感到不适，就医。
TRIzol法原理：TRIzol是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，在样品裂解或匀浆过程中，TRIzol能保持RNA完整性。
加入氯仿后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。
取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA。
主要成分：1. 苯酚主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。
苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性；因此TRIzol中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase。
2. 0.1%的8-羟基喹啉抑制RNase，与氯仿联合使用可增强抑制作用；3. 异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。
4. β-巯基乙醇主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
注意：TRIzol对人体有害，使用时应戴一次性手套，注意防止溅出。
实验步骤：提取1. 按50-100mg组织/mlTRIzol的比例加入相应的TRIzol，电动匀浆，室温放置5min，使其充分裂解；注意：此时可放入-70℃长期保持；2. 12000rpm 离心5min；可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃12000×g离心5分钟，取上清。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。
取澄清的匀浆液进行下一步操作。
3. 按200ul氯仿/ml TRIzol加入氯仿，振荡混匀（摇晃混匀）15s,室温放置15min；4. 4℃ 12,000g离心15min；样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。
RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
5. 吸取上层水相，至另一离心管中；6. 按0.5ml异丙醇/ml TRIzol加入异丙醇,轻轻混匀，室温放置5-10min（为取得更好沉淀效果，可于-20℃沉底1-2h）；7. 4℃ 12,000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底；（此时可去制RNA胶）8. 按1ml 75%乙醇/ml TRIzol加入75%乙醇（DEPC水配制），温和振荡离心管，悬浮沉淀；9. 4℃,8000g离心5min，尽量弃上清；10. 室温晾干或真空干燥5-10min；11. 用50ul DEPC水溶解RNA样品，55-60℃,孵育5-10min；12. 测OD值定量RNA浓度；13. 电泳检测RNA条带；注意事项：1. 实验操作均在超净台进行，使用前70%酒精擦拭超净台台面，开紫外灯灭菌30min。
提取操作前，要用70%酒精擦拭移液器，离心机转子，并在实验过程中保持台面的清洁。
要勤换手套，避免RNase的污染。
2. 使用电动匀浆器后，转子要用DEPC水清洗三次以上，再匀浆下一个样品，最好同一批次是同一个组织，避免组织间的交叉污染。
使用后，要及时清洗转子，锡箔纸包好，置于180℃烘箱中烘4h以上，以备下次使用。
3.分层后，千万不要吸取中间界面；若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，则弃下层酚相。
4. RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。
5. OD值的指标：纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9，表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白质、酚等污染）纯RNA：OD260/OD280≈2.0（＜1.7时表明有蛋白质或酚污染；＞2.0时表明可能有异硫氰酸残存）6. RNA没有降解的，电泳观察会有2-3条带，自上而下分别为28S，18S，5S（有时看不到，卵巢的很亮）。
其中28S的亮度约是18S的两倍。
实验步骤：纯化-去DNA去除RNA中残留的DNA，利用DNase I2. 混匀，瞬离，37℃反应1-2h；3. 检测DNA是否除干净：取反应液1ul作为模板，利用β-actin引物做PCR反应，跑尽量多点的循环（40—45）。
因为设计的β-actin引物是一对跨内含子的引物，若反应液中无DNA，则在700bp左右无条带（通常400bp左右会有条带）；若700bp左右有条带，说明反应液中残留DNA，需继续去除。
实验步骤：纯化-去蛋白质DNA去除干净后再除蛋白，利用博迈徳的RNA clean清洁纯化试剂盒（室温下迅速进行）1. 冰上，RNA样品加入RNase-free water，补足至100ul，加入350ulRC溶液，混匀；2. 加入250ul无水乙醇，混匀，无需离心；3. 将溶液及可能的沉淀一并转入吸附柱RA中（吸附柱置于收集管中），4℃12,000rpm离心30-60s，弃除收集管中废液，将吸附柱放回收集管中；4. 向吸附柱RA中加入350ul去蛋白液RW1，12,000rpm离心30-60s，弃去废液，将吸附柱重新放回收集管中；5. 向吸附柱RA加入500ul漂洗液RW（确保已加入无水乙醇），室温静置2min，12,000rpm离心30-60s，弃去废液，将吸附柱重新放回收集管中；6. 重复步骤5一次；7. 4℃ 13,000 rpm离心2min，尽量除去漂洗液，以免影响下游反应；8. 将吸附柱RA转入新的RNase-free离心管中，向吸附膜中间部位悬空滴加50-80ul RNase-free HO（65--70℃预热），室温下放置2min，12,000rpm离心21min，即可得RNA溶液。