全程C反应蛋白知识讲解
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全程C反应蛋白
全程C—反应蛋白测定
一、检测目的
全程C—反应蛋白包括超敏CRP和CRP。
CPR是一种急性时相反应蛋白,主要由肝脏合成,是在某些疾病的急性期出现在人血清中的一种特殊糖蛋白,具有激活补体,促进吞噬和免疫调理作用。
二、检测原理
本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测全血、血清、血浆样本中C—反应蛋白的浓度。
当样本与缓冲液混匀,并滴加到测试卡加样孔后,样本中的C —反应蛋白抗原和荧光标记的C—反应蛋白抗体结合形成反应复合物,反应复合物随层析作用沿着硝酸纤维素膜前移,被在硝酸纤维素膜检测线上的C—反应蛋白抗体捕获,样本中的C—反应蛋白捕获量与荧光抗体的信号强度正相关,通过荧光检测,可检测出样本中的C—反应蛋白的浓度。
三、试剂组成
试剂盒由测试卡、缓冲液、ID芯片组成。
仪器是广州万孚生物技术提供的免疫荧光检测仪。
四、储存条件
缓冲液和测试卡4℃—30℃保存(避免反复冻融)。
五、样本采集
全血、血清、血浆标本均可用于测试。
1、全血收集:采用抗凝管采血,或在采血管里先加入EDTA抗凝剂(不建议使用EDTA以外的抗凝剂),将采集血样加入并摇匀备用。
指尖,耳垂末梢可用全血取样器采集全血后应尽快进行测试;避免溶血!如不能及时检测,应置于4℃储存,7天以上的全血样本不适用于本试剂。
2、血清、血浆收集:取血后应尽快分离血清、血浆,以免溶血,分离后的血清、血浆应尽快进行测试,如不能及时测试可将标本置于4℃储存,超过3天应置于-20℃冷冻保存。
对冷藏或冷冻的样本,测试前须恢复至室温并充分混匀,避免反复冻融。
六、检验方法
1、准备
1.1)打开仪器的电源开关,仪器进入初始界面,若需用使用快捷模式测试,选择“快捷模式”;若需使用标准模式测试,选择“标准测试”;点击“卡出”按钮。
1.2)将试剂缓冲液从冷藏环境中取出,并平衡至室温(25℃)
1.3)从试剂盒中取出ID芯片,插入仪器的芯片端口。
1.4)撕开测试卡铝箔袋,取出测试卡。
2、取样
2.1)血清、血浆样本:用移液器吸取5μL样本。
2.2)全血样本:用移液器吸取8.5μL或用试剂配套的全血取样器吸取样本。
3、混匀
将缓冲液瓶盖打开并刺开封口膜,将样本加入到缓冲液中,充分混匀,并严格控制时间30s—1min。
4、加样
4.1)移液器加样:用移液器从上述容器中吸取75μL加入到测试卡的加样孔中。
4.2)全血取样器加样:将全血取样器倒置过来并将前2滴溶液滴至取样器盖中,并确保加样端无气泡,随后垂直滴加3滴到测试卡的加样孔中。
5、测试
5.1“快捷测试”模式:测试卡加样3min后,立即将测试卡插入仪器中,点击“测试”按钮,系统将自动读卡并给出测试结果。
5.2“标准测试”模式:测试卡加样时,即点击“测试”按钮,并在倒计时1min内将测试卡插入仪器中,系统将继续倒计时,并自动读卡给出测试结果。
5.3点击“打印”按钮,系统将自动将测试结果打印在打印纸上面。
6、退卡
将用过的测试卡从仪器中取出,并和多余的缓冲液及移液器枪头按传染性物品进行处理。
七、参考值
正常参考值:hsCRP:﹤1.0mg/L;CRP:﹤10mg/L。
八、质量控制
每个测试卡包含内部质控以满足日常质控的需要。
这一质控保证了测试卡被正确插入以及被免疫荧光检测仪正确识别。
不正确的内部质控会在免疫荧光检测仪上显示出错误信息,需要重新测试。
每日结束检验后,点击屏幕上的“退出”按钮,并关闭仪器的电源开关,等屏幕熄灭后,擦拭仪器的表面及屏幕。