MAD-MB-231细胞培养

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1.2 方法
1.2.1 细胞培养
人乳腺癌MDA-MB-231细胞在含有10%太牛血清的RPMI-1640培养液中,于37℃
、5%CO2培养箱中常规培养,用含0.02%EDTA的胰酶消化传代。

实验分组如下:
对照组:细胞中加入含有0.1%DMSO培养液
实验组:细胞用不同浓度芹菜素(20、40、80、160µmol/L及半数IC5038.1µmol/L)处理。

1.2.2芹菜素对MDA-MB-231细胞增殖的影响
1.取处于对数期生长期的MDA-MB-231细胞常规消化,用含10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养基配置成5.0×104个/mL细胞悬液。

2.每孔接种100℃µL细胞悬液,每浓度设6个平行样,在37、5%CO2培养箱中培养过夜。

3.吸出培养液,每孔加入含有0、20、4、80、160µmol/L的芹菜素RPMI 1640培养液200µL,在37、5%培养箱个、分别培养24h,48h、72h后加入MTT(5g L-1)20µL,继续培养4H 后吸出上清,每孔加入DMSO150微升,震荡溶解10分,待结晶完全溶解后,在酶联免疫测定仪上选择波长570nm处,以试剂对照组调零,测定各孔吸收值OD
4.细胞存活率=实验组OD/对照组OD×100%
生长抑制率=(1-实验组OD/对照组OD)×100%
IC50值用Logit法计算:
IgIC50=xm*I(p-pm-pn)/4),设xm=ig最大剂量,I=IG(最大剂量/相邻剂量),P:阳性反应率之和,pm:最大阳性反应率,pn:最小阳性反应率。

1.2.3光镜形态学观察
1.。

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