王旭西安分析方法验证文字稿

准确度(Accuracy Accuracy) Accuracy
可用已知纯度的对照品做加样回收测定，即 于已知被测成分含量的供试品中再精密加入 一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法 测定。用实测值与供试品中含有量之差，除 以加入对照品量计算回收率。
准确度(Accuracy Accuracy) Accuracy
专属性（Specificity）
专属性有以下含义： 专属性有以下含义： 鉴别：确证被测物是否符合其特性。 鉴别：确证被测物是否符合其特性。 检查： 检查：确保采用的分析方法可检出被测物中 杂质或应控制物的准确含量，如有关物质、 杂质或应控制物的准确含量，如有关物质、 有毒成分、重金属、溶剂残留量等。 有毒成分、重金属、溶剂残留量等。 含量测定： 含量测定：提供样品中被测物含量的准确结 果。
实验方法 样品和对照取样的确定 测定方法的确定
结果判定
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
耐用性系指在测定条件有小的变动时， 耐用性系指在测定条件有小的变动时 ， 测定 结果不受影响的承受程度， 结果不受影响的承受程度 ， 为把方法用于常规 检验提供依据 开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。 开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。如 果测试条件要求苛刻， 果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明
专属性
线性关系和线性范围
验证的目的
证明采用的方法是否适合于相应的检测方法 新建立的检测方法、改变原检测方法、 新建立的检测方法、改变原检测方法、工艺 变更、 变更、处方变更等均须验证 验证过程和结果均应记载在标准起草或修订说 明中
需验证的分析方法类型
鉴别 限量检查 含量测定 溶出度、 溶出度、释放度 需控制的残留物、添加物等 需控制的残留物、
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
气相色谱 考察项目和具体操作要求 色谱柱 分流比 顶空进样平衡的时间及温度 结果判定
提取效率
中药为什么要验证提取效率 平衡提取和完全提取 提取效率验证的具体操作方法 结果判定
谢
谢！
分离纯化的耐用性 实验操作和考察项目 结果判定
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
薄层色谱 考察项目和具体操作要求 薄层板的考察 温度考察 湿度考察
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
液相色谱 考察项目和具体操作要求 不同色谱柱的考察 流动相pH值的考察 结果判定
需验证的分析方法类型
检查 验证项目 准确度 精密度 重复性 中间精密度 重现性② 重现性② 专属性③ 专属性③ 检测限 定量限 线性 耐用性 范围 鉴别 + + + 定量 + + +① + + + + + + 限度 + + + + 含量测定 + + +① + + + + +
①已有重现性验证，不需验证中间精密度。 ②重现性只有在该分析方法将被法定标准采用时做。 ③如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。
专属性（Specificity Specificity） Specificity
鉴别 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。不 含被测成分的供试品， 含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有 关化合物， 关化合物，均不得干扰测定 显微鉴别、 显微鉴别、色谱光谱鉴别等应附相应的代表性图象 或图谱。 或图谱。
定量限 （Limit of Quantitative, LOQ LOQ） Limit
实验方法 目测法 理化反应 薄层色谱法 信噪比法 偏差计算法
线性（Linearity Linearity） Linearity
线性系指在设计的范围内， 线性系指在设计的范围内，测试结果与 供试品中被测物浓度直接呈正比关系的 程度。 程度。
在加样回收试验中须注意对照品的加入量与供试品 中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之 内；加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的 相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差 回收率%=（C-A）/B×100% 式中 A为供试品所含被测成分量； B为加入对照品量； C为实测值。
准确度(Accuracy Accuracy) Accuracy
检测限 （Limit of Detection，LOD Limit Detection，LOD) 实验方法 目测法 理化反应 薄层色谱法 信噪比法 偏差计算法
定量限 （Limit of Quantitative, LOQ） Limit LOQ
定量限系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量， 定量限系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量 ， 其测定结果应具一定准确度和精密度。用于限量检查的 其测定结果应具一定准确度和精密度。 定量分析方法应确定定量限。 定量分析方法应确定定量限。
定义：在不同实验室由不同分析人员、不同设备 在不同实验室由不同分析人员、 测定结果之间的精密度
考察的目的： 考察的目的：当分析方法将被法定标准采用时，应 进行重现性试验
报告的数据： 报告的数据：标准偏差、相对标准偏差或可信限
专属性（Specificity Specificity
）
专属性系指在其他成分可能存在下， 专属性系指在其他成分可能存在下，采 用的方法能正确测定出被测成分的特 鉴别试验、限量检查、 性 。 鉴别试验 、 限量检查 、 含量测定 等方法均应考察其专属性。 等方法均应考察其专属性。
线性（Linearity Linearity） Linearity
实验方法 测定浓度的基本要求 配制方式 结果判定
范围（Range Range） Range
范围系指能达到一定精密度、 准确度和线性， 范围系指能达到一定精密度 、 准确度和线性 ， 测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确 范围应根据分析方法的具体应用和线性、 精密度结果及要求确定。 度、精密度结果及要求确定。
重复性(Repeatability) 重复性(Repeatability)
定义: 在相同操作条件下，由同一个分析人员在较 短的间隔时间内测定所得结果的精密度 实验要求： 在规定范围内，取同一浓度的样品，用6个测 定结果进行评价； 或设3个不同浓度9份样品，用9个测定结果进 行评价
重复性(Repeatability) 重复性(Repeatability)
考察的目的： 考察的目的：考察随机变动因素对精密度的影响 考察的变动因素: 考察的变动因素: 不同时间 不同分析人员 不同设备
中间精密度 (Intermediate precision)
实验方法
结果判定
重现性(Reproducibility Reproducibility) Reproducibility
试验方法：
测定份数的选择 样品取样量的设计 结果判定 实验中应注意的问题
中间精密度 (Intermediate precision) 在同一个实验室，不同时间由不同分析人员, 在同一个实验室，不同时间由不同分析人员, 用不同设备测定结果之间的精密度， 用不同设备测定结果之间的精密度，称为中 间精密度。 间精密度。
中药分析方法验证的内容和要求
国家药典委员会 王旭
中药分析方法验证的特殊性
与国际协调方法接轨（ICH） 中药方法学验证的特点 分析方法的建立与分析方法验证
中药提取纯化技术要求
提取方法 提取条件 提取方式 分离纯化 液-液萃取法 固液萃取法 沉淀法
中药分析方法验证实验项目
以前方法 回收率 精密度（仪器精密度） 重复性 2005版药典一部指导原则 准确性（回收率） 精密度 重复性 中间精密度 重现性 专属性 检测限 定量限 线性 范围 耐用性
范围（Range Range） Range
实验项目 含量测定 杂质检查 溶出度 含量均匀度
限度 标示量90-110% 9090 限度值 限度值 测试浓度
范围 8080-120% 限度值的50-120% 5050 限度值的中药和复方制剂） 中药和复方制剂
数据要求 在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个 测定结果进行评价；或设计3个不同浓度，每 个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定， 用9个测定结果进行评价，一般中间浓度加入 量与所取供试品含量之比控制在1:1左右。
准确度(Accuracy Accuracy) Accuracy
报告的数据：
样品中待测成分含有量 对照品加入量 测定量 回收率计算值（%） 相对标准偏差（RSD%）
专属性（Specificity Specificity） Specificity
含量测定和限量检查 以不含被测成分的供试品（ 以不含被测成分的供试品（除去含待测成分药材或 不含待测成分的模拟复方）试验说明方法的专属性。 不含待测成分的模拟复方）试验说明方法的专属性。 并标明相关成分在图中的位置， 并标明相关成分在图中的位置，色谱法中的分离度 应符合要求。 应符合要求。必要时可采用二极管阵列检测或质谱 检测进行验证
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
典型的变动因素 被测溶液的稳定性 样品提取方式 时间 分离纯化耐用性
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
被测溶液的稳定性 实验操作和考察项目 液相色谱和气相色谱 薄层色谱 结果判定
耐用性（Robustness Robustness） Robustness
线性（Linearity Linearity） Linearity
应在方法允许的尽可能宽的范围内测定线性关系。 可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备 一系列供试品的方法进行测定，至少制备5个浓度 的供试品，其最低浓度可约为定量限浓度。以测得 的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否 呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。如响应信 号与浓度不呈线性关系，必要时可经数学转换，再 进行线性回归计算。 数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。
准确度(Accuracy Accuracy) Accuracy
试验方法：
测定份数的选择 样品取样量和对照品加入量的计算 对照品加入方法的选择 测定结果的计算 结果判定 实验中应注意的问题
精密度（Precision Precision） Precision
精密度系指在规定的测试条件下， 精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供 试品， 试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度 包括： 包括： 重复性(Repeatability) 重复性(Repeatability) 中间精密度(Intermediate 中间精密度(Intermediate precision) 重现性(Reproducibility) 重现性(Reproducibility)
专属性（Specificity Specificity） Specificity
试验方法：
阴性干扰试验 色谱纯度试验 易混淆试验 结果判定
检测限 （Limit of Detection，LOD Limit Detection，LOD)
检测限系指供试品中被测物能被检 测出的最低量。 测出的最低量。