金丹妇炎康胶囊对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎模型的影响
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金丹妇炎康胶囊对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎模型的影响
发表时间:2013-11-18T11:55:17.327Z 来源:《医药前沿》2013年30期供稿作者:魏云吴爱萍杨世平李燕飞周杨欧阳骏[导读] 盆腔炎是指女性生殖器官、周围结缔组织及盆腔腹膜所发生的炎症,为妇科较常见的疑难病,病情较复杂,致病的病原体不一。
魏云吴爱萍杨世平李燕飞周杨欧阳骏
(湖南医药工业研究所湖南长沙 410014)
【摘要】目的探讨金丹妇炎康胶囊对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎的作用。
方法SD大鼠,腹腔注射10%乌拉坦10ml/kg麻醉后,向子宫内注入25%苯酚胶浆0.2ml造模。
次日灌胃给药,连续给药21d,取血测定血液流变学各项指标,包括全血粘度(低切、中切、高切)和血浆粘度,然后处死大鼠,取子宫置10%甲醛中固定,进行组织切片,HE染色,光学显微镜下观察组织病理变化。
比较药物组与模型对照组差异的显著性。
结果大鼠子宫内注入苯酚胶后,子宫内膜上皮可见水肿及空泡样改变,固有层可见大量炎症细胞浸润及毛细血管扩张,全血粘度及血浆粘度增高,给予金丹妇炎康胶囊或妇科千金片,能明显减轻子宫组织病变程度,促进组织修复。
降低全血粘度降低及血浆粘度。
结论金丹妇炎康胶囊对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎具有治疗作用。
【关键词】金丹妇炎康慢性盆腔炎病理组织学血液流变学【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)30-0027-03 Experimental Study of the Effects of Jin Dan Fu Yan Kang on Chronic Pelvic Inflammatory Disease on Rats Modeled by Phenol Mucilage WEI Yun WU Aiping YANG Shiping LI Yanfei ZHOU Yang OU Yangjun (Hunan Institute of Pharmaceutical Industry,Changsha 410014,China)【Abstract】 Objective: To study the effects of Jin Dan Fu Yan Kang on rats with chronic pelvic inflammatory disease (CPID), which caused by phenol mucilage. Methods: Firstly, the SD rats are anaesthetized by intraperitoneal injection with 10% urethane solution (10ml/kg). The models of CPID were made by injection of 0.2ml of 25% phenol mucilage into uterus of rats. Then start filling rats’stomachs with drugs from the next day, and continue this step for 21 days. Then take the blood sample and measure the hemorheology indexes, including blood viscosity and plasma viscosity. After that, execute the rats, take the uterus and put it into 10% methanol solution to take tissue slice. Then do the HE stain and observe the pathological changes under optical microscope. Lastly, compare the result of drugged samples with the result of reference samples. Results: After injecting of 0.2ml of 25% phenol mucilage into uterus, there were some blisters appear on the epithelium on the rats’ endometria. Lamina propria showed inflammatory cell infiltration and telangiectasia. And there were some increases on blood viscosity and plasma viscosity. Jin Dan Fu Yan Kang or Fu Ke Qian Jin Pian significantly reduced the uterine tissue lesion, helped improving tissue repair, and reduced the blood viscosity and plasma viscosity. Conclusion: Jin Dan Fu Yan Kang has therapeutical effects on rats with chronic pelvic inflammatory disease (CPID), which caused by phenol mucilage. 【Key words】 Jin Dan Fu Yan Kang Chronic pelvic inflammatory disease Histopathology Hemorheology 盆腔炎是指女性生殖器官、周围结缔组织及盆腔腹膜所发生的炎症,为妇科较常见的疑难病,病情较复杂,致病的病原体不一。
中医学认为,血瘀是盆腔炎的主要病机,属于“热入血室”、“带下病”、“妇科瘤痕”等范畴。
其病情缠绵,易反复发作,严重影响妇女健康。
金丹妇炎康是由金刚藤、大血藤、丹参、地锦草、莪术、当归等中药组成的复方制剂。
功能清热解毒、活血利湿、祛瘀散结。
用于湿热瘀结所致的带下病、腹痛、癥瘕等症;慢性盆腔炎、阴道炎和附件炎等妇科炎症见上述症状者。
为探讨金丹妇炎康治疗慢性盆腔炎的作用及其机理,进行以下实验研究。
1 材料
1.1 药物金丹妇炎康胶囊,由湖南医药工业研究所提供,批号:20110901。
规格:0.48g/粒;妇科千金片,株洲千金药业股份有限公司,批准文号:国药准字Z43020027,批号:201103005。
1.2 动物 SD大鼠,60只,雌性,体重200-220g;动物提供单位:湖南斯莱克景达试验动物有限公司提供,生产许可证号为: SCXK (湘)2009-0004。
动物使用单位:湖南医药工业研究所,使用许可证号为:SYXK(湘)2010-0002。
1.3 仪器 SA-6000自动血液流变测试仪,北京赛科希德科技发展有限公司产品。
AB135-S分析天平,瑞士梅特勒公司产品。
TP-1200C电子天平,湘仪天平仪器设备有限公司产品。
Olympus BX51型光学显微镜,日本奥林巴斯有限公司产品。
1.4 试剂苯酚(AR),天津市恒兴化学试剂制造有限公司,批号:20101011。
羧甲基纤维素钠(AR),天津市恒兴化学试剂制造有限公司,批号:20100908。
2 方法
2.1 造模、分组及给药按文献[1-10]方法,SD大鼠, 60只,雌性,体重200-220g,随机分为6组,每组10只,(1)空白对照组(给予蒸馏水),(2)损伤模型组(给予蒸馏水),(3)妇科千金片组(7.20g生药/kg),(4)金丹妇炎康胶囊低剂量组(1.20g生药/kg)。
(5)金丹妇炎康胶囊中剂量组(2.40g生药/kg)。
(6)金丹妇炎康胶囊高剂量组(4.80g生药/kg)。
大鼠腹腔注射10%乌拉坦10ml/kg麻醉后,将大鼠固定于操纵台上,用1ml 注射器套上10号针头,将(2)-(6)组大鼠子宫内注入25%苯酚胶浆0.2ml(液化苯酚5ml,加1%羧甲基纤维素钠至20ml,配制成25%的苯酚胶浆),从大鼠阴道口插入约2cm,然后将苯酚胶浆注入大鼠子宫左右两侧内各0.1ml。
(1)组空白对照组按上述步骤用1mL注射器抽取0.2ml蒸馏水,注入子宫双侧内,以上各组注毕后用明胶海棉填塞阴道口,防止溢出。
造模后动物在温度22-25℃,湿度50-60%条件下正常饲养,次日开始灌胃给药,灌胃体积均为10ml/kg体重,连续给药21d。
2.2 指标检测各组大鼠于末次给药12h后(禁食、不禁水),腹主动脉取血测定血液流变学各项指标,包括全血粘度(低切、中切、高切)和血浆粘度。
计算各组平均值及标准差,用t检验进行统计学处理,比较各组之间差异的显著性。
然后处死大鼠,取子宫置10%甲醛中固定,乙醇脱水,石蜡包埋,切片制成4~5μm的组织薄片,HE染色,中性树胶封片,光学显微镜下观察组织病理变化。
按照炎症细胞的量及发生粘连的程度将炎症情况分为正常、轻度、中度及重度4级,用 “—”、“+”、“++”、“+++”来表示。
其中,“—”基本无炎症细胞浸润;“+”出现少量的炎症细胞浸润;“++”表示出现大量的炎症细胞浸润,并有少量粘连;“+++”表示出现大量的炎症细胞浸润,并有大量粘连。
用秩和检验进行统计学处理,比较药物组与模型对照组差异的显著性。
3 结果
3.1 对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎模型子宫组织形态学的影响
肉眼观察结果显示,正常对照组的子宫颜色、硬度正常,浆膜面末见肿胀、充血,模型对照组的部分子宫颜色暗红,浆膜面明显肿胀、充血,个别动物盆腔粘连,所有给药组子宫肿胀、充血等有不同程度减轻。
病理组织学结果显示,正常对照组:子宫内膜上皮排列整齐、固有层及肌层正常,子宫腺体正常,未见炎症细胞浸润(见图1)。
损伤模型对照组:子宫内膜上皮可见水肿及空泡样改变,固有层可见大量炎症细胞浸润及毛细血管扩张(见图2)。
妇科千金片组:子宫内膜仍可见轻度水肿,固有层可见散在炎症细胞浸润,其它正常(见图3)。
金丹妇炎康胶囊低剂量组:子宫内膜上皮水肿空泡样改变,固有层中可见大量散在的炎症细胞浸润,毛细血管轻度扩张(见图4)。
金丹妇炎康胶囊中剂量组:子宫内膜上皮基本正常,固有层中仍见较多数量散在的炎症细胞浸润,其它正常(见图5)。
金丹妇炎康胶囊高剂量组:子宫内膜上皮排列正常,固有层正常,但仍有小量散在的炎症细胞浸润,其它正常(见图6)。
上述镜检结果显示,以大鼠子宫内注入25%苯酚胶浆所致慢性盆腔炎模型成功。
妇科千金片组(7.20g生药/kg)及金丹妇炎康组(1.20-4.80g生药/kg)与损伤模型组比较,病变程度明显减轻(P < 0.01)。
见表1。
图1 正常组:子宫内膜上皮排列整齐、固有层及肌层正常,子宫腺体正常,未见炎症细胞浸润。
(HE染色 , 250×)
图2 损伤组:子宫内膜上皮可见水肿及空泡样改变,固有层可见大量炎症细胞浸润及毛细血管扩张。
(HE染色 , 250×)
3.2 对苯酚胶浆致大鼠慢性盆腔炎模型血液流变性的影响
损伤模型组与正常对照组比较,全血粘度及血浆粘度升高,提示动物血液粘度增加。
金丹妇炎康胶囊(1.20g生药/kg)与损伤模型组比较,全血粘度降低(P<0.05),金丹妇炎康胶囊(2.40-4.80g生药/kg)与损伤模型组比较,全血粘度及血浆粘度均降低(P<0.05,
P<0.01),妇科千金片(7.20g生药/kg)与损伤模型组比较,全血粘度及血浆粘度降低(P<0.05),提示金丹妇炎康胶囊具有活血化瘀的作用。
见表2。
4 结论
苯酚胶浆是化学性腐蚀烧伤剂,其所致的动物盆腔炎模型与人类盆腔炎的生物性因子(如细菌、病毒等)致炎不尽相同,但由于病理结果(炎性反应和炎性粘连)有相似之处,因此用苯酚胶浆法制造大鼠慢性盆腔炎模型常用于研究盆腔炎的治疗药物。
我们在此模型上观
察到金丹妇炎康胶囊对大鼠盆腔炎的抑制作用,用血液流变学指标及组织病理学检查指标考察了金丹妇炎康胶囊对大鼠子宫内膜病变的影响及血液流变学的影响。
结果表明,以苯酚胶浆子宫内注入法致大鼠慢性盆腔炎模型制作成功。
对此模型动物给予金丹妇炎康胶囊,能明显减轻子宫内膜组织病变程度,并能降低全血粘度、血浆粘度。
提示金丹妇炎康胶囊对盆腔炎具有一定的治疗作用。
参考文献
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