中药川芎对成骨细胞增殖的影响研究
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中药川芎对成骨细胞增殖的影响研究
魏广治
【摘要】目的研究中药川芎对成骨细胞增殖的影响.方法以小鼠成骨细胞株
MC3T3-E1为实验对象,以川芎提取液干预作为观察组,以α-MEM培养液干预为对照组.比较两组干预24 h、48 h及72 h的成骨细胞增殖情况(CCK-8值)及ALP活性.结果干预后24 h、48 h及72 h观察组的CCK-8值及ALP活性均高于对照组(P<0.05).结论中药川芎可有效促进成骨细胞的增殖.
【期刊名称】《中国卫生标准管理》
【年(卷),期】2018(009)011
【总页数】3页(P104-106)
【关键词】中药川芎;西药;成骨细胞增殖;ALP;药物浓度;骨代谢
【作者】魏广治
【作者单位】黑龙江省医院南岗分院口腔科,黑龙江哈尔滨 150001
【正文语种】中文
【中图分类】R242
临床中关于口腔治疗相关的研究多见,关于口腔骨代谢方面的相关研究不断增多,牙周支持组织的破坏,如牙槽骨吸收﹑牙周袋的形成和进行性附着丧失,最后可导致牙松动和被拔除,而成骨细胞增殖作为在牙槽骨缺损重建中发挥重要作用的方面,对其进行的调节有助于牙槽骨骨小梁的改建,其中成骨细胞增殖情况(CCK-8值)
及ALP活性作为反应骨重建的重要指标,对其表达的监控结果可作为干预效果的
评估依据[1]。
中药川芎作为补骨强肾的重要药物,在骨髓功能促进中的作用较好,但是对于成骨细胞增殖的影响研究不足。
本研究就中药川芎对成骨细胞增殖的影响进行探究与分析,结果总结如下。
1 资料与方法
1.1 基本资料
以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为实验对象,以川芎提取液干预作为观察组,并以
α-MEM培养液干预为对照组。
1.2 方法
1.2.1 材料盐酸川芎嗪标准品购自北京亿诺辉科技发展有限公司;小鼠成骨细胞株MC3T3-E1购自上海中科院细胞库;二甲基亚砜购自Sigma公司;胎牛血清购自杭州四季青公司;CCK-8试剂盒购自上海博古生物科技有限公司;ALP试剂盒购
自南京建成生物工程研究所。
1.2.2 实验方法首先将小鼠成骨细胞株MC3T3-E1进行培养,稳定二氧化碳(5%)水平,在二氧化碳培养箱中进行培养(温度37℃,湿度95%),培养液更换间隔时间为2.0 d,细胞汇合度至80%~90%时采用0.25%胰蛋白酶进行消化细胞处理。
盐酸川芎嗪标准品采用对倍稀释法处理,制备10 μg/ml的川芎药液干预作为观察组,另以α-MEM培养液加入的空白对照组作为对照,观察组于干预24 h及48 h各检测1次,每次均设置5个复孔。
采用CCK-8试剂盒方法进行细胞增殖率的检测,并以多功能酶标仪读取波长4 50O D值,并以ALP试剂盒进行ALP活
性的检测。
统计与比较两组的检测值。
1.3 统计学分析
本研究软件为SPSS 20.0,计量资料进行t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
干预后24 h﹑48 h及72 h观察组的CCK-8值及ALP活性均高于对照组(P<
0.05),见表1。
表1 两组干预后24 h、48 h及72 h的CCK-8值及ALP活性比较组别 CCK-8值ALP活性(U/g prot)24 h 48 h 72 h 24 h 48 h 72 h观察组 0.99±0.02 1.16±0.07 1.27±0.04 0.41±0.01 0.67±0.03 0.59±0.02对照组0.72±0.04 0.80±0.02 0.83±0.04 0.25±0.01 0.46±0.01
0.40±0.01 t 值 13.500 11.057 17.393 25.298 14.849 19.000 P值<0.05 <0.05 <0.05 <0.05 <0.05 <0.05
3 讨论
口腔治疗过程中,较多患者面临牙槽骨重建的情况,而牙槽骨重建的细胞基础为破骨细胞与成骨细胞的平衡调节,其中成骨细胞的分化增殖是骨形成的关键,因此对其进行增殖状态的调节成为治疗的重点[2-4]。
另外,ALP作为成骨细胞分泌的一
类重要酶蛋白,在成骨细胞的早期分化反应中具有积极的反应作用,对ALP表达
的调控是重要的监测方面[5-7]。
近年来采用多种方式促进成骨细胞增殖的研究多见,而中药方面的相关研究也可见,其中中药川芎作为具有较好的补骨强肾的药物,对患者骨代谢的影响研究虽可见,但是对于成骨细胞增殖的促进作用研究及相关研究差异较大[8-10],未见其显著优势的研究,因此这些方面的影响探究仍十分必要。
本研究显示,干预后24 h﹑48 h及72 h中药川芎干预的CCK-8值及ALP活性
均高于α-MEM培养液干预的效果,干预后48 h高于其他时间,说明中药川芎的干预效果更为显著,这可能与中药川芎的氧自由基清除及骨代谢调节作用有关,因此在骨细胞增殖状态的提升方面有较好作用[11-12]。
综上所述,我们认为中药川
芎可有效促进成骨细胞的增殖。
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