2020届 二轮复习 生物技术实践 课件 47 张 (全国通用)
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2020版高考生物二轮复习8生物技术实践课件
考点梳理 整合突破 整合考点 22 微生物的培养与应用及传统发酵技术的应用
1．图解识记微生物的培养、分离与计数(填图)
2．熟记微生物分离与计数的两个实例(填空) (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株：利用_选___择__培__养__基__筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法：___活__菌__计__数__法____和__显__微__镜___ 直接计数。 ③过程：土壤取样→___样__品__稀__释___→微生物的培养与观察。 ④鉴定方法：含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细 菌→指示剂_变__红___，则该菌能分解尿素。
回答下列问题。
(1) 在 Ⅰ 号 培 养 基 中 ， 为 微 生 物 提 供 氮 源 的 是 __牛__肉__膏__、__蛋__白__胨__。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物
是____X________________。 (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间
后 ， 不 能 降 解 X 的 细 菌 比 例 会 _____下__降_____ ， 其 原 因 是 _不__能__降__解___X__的__细__菌__因__缺__乏__碳__源__不__能___增__殖__，__而__能__降__解__X___的__细__菌__能_ _够__增__殖__________。
(4)平板划线操作：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基 表面连__续___划__线_的操作，将聚集的菌种逐__步___稀__释_分散到培养基的表
面。注意划线的方法(如图)。
(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不 同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在 稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细 胞，从而能在培养基表面形成_单__个__的__菌__落___。
高考生物二轮复习专题十三生物技术实践课件
参考答案
(1)脲酶 分解尿素的细菌是异 养生物 ,不能利用 CO 2 合成有机 物 为细胞生命活动提供能量 , 为其他有机物的合成提供原材 料 (2)尿素 其他两组都含有 NH 4 NO 3 ,能分解尿素的细菌和 不能分解尿素的细菌都能利用 NH 4 NO 3 ,不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养 , 作为缓冲剂保持细菌生长过程
【解析】(1)蛋白胨和苯酚都是含碳有机物,可以为酚 降解菌提供碳源。(2)将采集到的样品接种培养,随转 接次数增加而逐渐增加苯酚用量可以增大酚降解菌的 比例,以达到富集酚降解菌的目的。如果图中平板中菌 落过于密集,说明培养液中酚降解菌数量过多,需要进 一步稀释后再涂布,以便于菌落计数与分离。平板培养
3.食物中的纤维素(即膳食纤维)对人体的健康有重 要的作用,其主要存在于蔬菜和粗加工的谷类中,有促 进肠道蠕动,利于粪便排出等功能。但纤维素不能被 人体吸收,因为人体缺乏分解纤维素的酶。某校生物 兴趣小组开展了以下纤维素酶研究的工作,请回答下 列问题:
(1)纤维素酶是一种________酶,包括C 1 酶、C X 酶和 葡萄糖苷酶三种,其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖 的是________。 (2)自然界中不少微生物具有分解纤维素的能力。取 回的土样中含有多种微生物,兴趣小组在培养基中可 加入________来帮助筛选纤维素分解菌,目标菌落的 特征是存在着以该菌落为中心的
5.从生物材料中提取某些特定的成分 6.运用发酵加工食品的基本方法
热点一 微生物的分离、培养及应用 【示范题1 】(2017· 全国卷Ⅰ·T37)某些土壤细菌可 将尿素分解成CO 2 和NH 3 ,供植物吸收和利用。回答下列 问题: (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者 能产生______________。能分解尿素的细菌不能以尿
2020届 二轮复习 生物技术实践 课件 107 张 (全国通用)
接计数。 ③过程：土壤取样→ 样品稀释 →微生物的培养与观察。 ④鉴定方法：含 酚红 指示剂以尿素为唯一氮源的培养基→
细菌→出现 红色 透明圈，则该菌能分解尿素。
(2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理
即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→ 梯度稀释 →涂布平板→ 挑选菌落。
16．用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去除 蛋白质。( √ )
17．薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶做 原料，可采用水蒸气蒸馏法提取。( × )
18．用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃 取、浓缩、过滤。( × )
19．在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长 会导致胡萝卜素分解。( √ )
知识体系构建
教材热点扫描
1．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到 皿盖上。( × )
2．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接 种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。( × )
3．纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平 板划线法和稀释涂布平板法。( √ )
4．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。 (× )
(2) 酵 母 菌 液 体 培 养 时 ， 若 通 入 氧 气 ， 可 促 进 __菌__体__快__速__增__殖___(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产 生”)；若进行厌氧培养，可促进___乙__醇__产__生____(填“菌体快速增 殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。
(3)制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的 酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是 ____酵 __母__菌__可__以__分__解__面__粉__中__的__葡__萄__糖__，__产__生__二__氧__化__碳__，__二__氧__化_碳__ _是__气__体_，__遇__热__膨__胀__而__形__成__小__孔__，__使__得__馒__头__或__面__包__松_软__多__孔_______。
细菌→出现 红色 透明圈，则该菌能分解尿素。
(2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理
即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→ 梯度稀释 →涂布平板→ 挑选菌落。
16．用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去除 蛋白质。( √ )
17．薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶做 原料，可采用水蒸气蒸馏法提取。( × )
18．用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃 取、浓缩、过滤。( × )
19．在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长 会导致胡萝卜素分解。( √ )
知识体系构建
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1．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到 皿盖上。( × )
2．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接 种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。( × )
3．纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平 板划线法和稀释涂布平板法。( √ )
4．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。 (× )
(2) 酵 母 菌 液 体 培 养 时 ， 若 通 入 氧 气 ， 可 促 进 __菌__体__快__速__增__殖___(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产 生”)；若进行厌氧培养，可促进___乙__醇__产__生____(填“菌体快速增 殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。
(3)制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的 酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是 ____酵 __母__菌__可__以__分__解__面__粉__中__的__葡__萄__糖__，__产__生__二__氧__化__碳__，__二__氧__化_碳__ _是__气__体_，__遇__热__膨__胀__而__形__成__小__孔__，__使__得__馒__头__或__面__包__松_软__多__孔_______。
通用版高考生物二轮复习专题九生物技术实践专题上课课件
考点一 考点二 考点三
2.(2018海南卷,30)葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡 萄酒的两个简易装置如图所示。
考点一 考点二 考点三
回答下列问题。
(1)试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定,与乙装
置相比,用甲装置酿制葡萄酒的优点是
(答出两点即可)。
(2)葡萄汁装入甲装置时,要留有约1/3的空间,这种做法的目的是
中进行。与无氧
条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度
。
考点一 考点二 考点三
(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为
醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在
条件下才能完成。
(3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段
的温度
(填“低于”或“高于”)第二阶段的。
(10)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤:干燥、粉碎、萃取、浓缩、 过滤。( × ) 提示用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是:粉碎、干燥、萃取、过 滤、浓缩。
(11)从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小。 ( √) (12)尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用。 (×) 提示尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开,而不能再次使用。
(8)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌。( × ) 提示在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板。
(9)薄荷油是挥发性物质,提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料,可 采用水蒸气蒸馏法提取。( × ) 提示由于薄荷油是挥发性物质,干燥的薄荷叶中的薄荷油由于挥发 而含量极少,鲜薄荷叶中薄荷油的含量高,因此提取薄荷油时应选 用鲜薄荷叶作原料。
(4)醋酸杆菌属于
核生物,其细胞结构中
2020届 二轮复习 生物技术实践 课件96张 (全国通用)
。
(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长
并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择
菌落进一步
纯化,选择的依据是
。
考点一 栏目索引
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
高考导航
(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进 一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、 预期结果和结论,即
②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明
;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明
。
考点一 栏目索引
答案 (1)W (2)乙 乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W 高考导航 (3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长,则说明该细菌能 利用空气中的氮气作为氮源 (4)①缓冲液 ②缓冲液不能降解W 酶E与天然酶降解W的能力相近
栏目索引 高考导航
第15讲 生物技术实践
知识联网 栏目索引 高考导航
易漏排查 栏目索引
1.(选修一P15知识拓展)牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料,含有糖、维生素和 有机氮等营养物质。牛肉膏主要提供碳源、氮源、磷酸高盐考导和航维生素等营 养。蛋白胨主要提供碳源、氮源和维生素。 2.(选修一P18知识拓展)微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方 法。虽然这些技术的操作方法各不相同,但是,其核心都是要防止杂菌的污 染,保证培养物的纯度。 3.(选修一P22知识拓展)每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。其中,C代表某一稀 释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 (mL),M代表稀释倍数。
。
(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙
2020届高考生物二轮复习教学课件：第1部分 专题14生物技术实践(共94张PPT)
第2轮 生物
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第一部分 专题突破方案
12．(教材选修1 P46“侧栏信息”)普通洗衣粉可能对环境造成怎样的影响？ 提示 普通洗衣粉中含有磷，含磷污水排放到水中可能导致微生物和藻类的大量 繁殖，造成水体污染。 13．(教材选修1 P48“侧栏思考题”)在本课题中你打算使用什么方法和标准判断 洗涤效果？ 提示 可在洗涤后比较污物的残留状况，如：已消失、颜色变浅、面积缩小等， 最好能进行定量的比较。 14．(教材选修1 P49“侧栏信息”)什么叫高果糖浆？它作为蔗糖的替代品，对人 类健康有什么益处？ 提示 高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆，它不会像蔗糖那样诱发肥胖、 糖尿病、龋齿和心血管等疾病。
辨析知识错点 ………………………………………………………………………………◎
1．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加
入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液。
( ×)
2．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌
水的培养基与接种培养物的培养基一起培养。
提示 将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理，可以保证底物和酶在混合 时的温度是相同的，避免了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度，从而影响果胶酶 活性的问题。
第2轮 生物
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第一部分 专题突破方案
10．(教材选修1 P44“侧栏思考题”)在探究温度或pH对酶活性的影响时，是否 需要设置对照？如果需要，又应该如何设置？为什么？
( √)
第2轮 生物
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第一部分 专题突破方案
02
突破核心考点
考点1 微生物的培养、分离与计数
1．(2018·全国卷Ⅱ·37)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避 免杂菌的污染。
二轮复习高中生物实验精品PPT课件
紫色 红色
红色 绿色 红色
蓝绿色
细菌氧化使之褪 色，检测污水中 好氧性细菌
鉴定试剂（鉴定化学反应，是否物质存在）
试剂 斐林试剂 苏丹Ⅲ（Ⅳ）试剂 双缩脲试剂 二苯胺试剂
鉴定物质
颜色变化
还原糖（葡、果） 砖红色
脂肪
橘黄色（红色)
蛋白质
紫色
DNA
蓝色
碘液 重铬酸钾溶液（H+）
淀粉 酒精
蓝色 橙色→灰绿色
不宜选择甜菜、甘蔗等，因为这些材料中主要的糖 类为不具还原性的蔗糖；(淀粉、蔗糖、纤维素 都是非还原性糖。)
②观察叶绿体和细胞质流动时，选择菠菜叶下表皮 稍带叶肉（叶表皮细胞没有叶绿体，而靠近下表 皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体）或用藓类 （叶片薄、叶绿体大），观察时应选择靠近叶脉 部位细胞（叶脉附近细胞中水含量丰富，细胞质 流动明显）；
控制 得出结论
（消除或平衡掉）
假设——预期——现象——结论
结论分析：结论与预期是否符合？
结论
符合---得到肯定的答案 定性分析 （往往是题目中要证明的）
不符合---得到否定的答案 （与题目中要证明的相反）
定量分析---肯定答案程度,找出变化的规律
（11）结论：2胚芽鞘具有3向光生长特4性
（2）几组对照实验？
低倍镜到高倍
观察细胞质流动
取材、直接制片
镜的转换、熟 正确选择观察 练使用高倍镜、的参照
有丝分裂观察
取材→解离→漂 洗→染色→制片
熟练进行对光、 对焦、调节视 寻找、识别观 野光线的强弱 察目标
观察质壁分离和 复原
取材、制片
等一系列操作 观察、对比
物质的鉴定（实验步骤及其顺序）
专题生物技术实践课件高三高考生物二轮复习
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可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
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要点整合·自测排查
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考点一 微 生 物 的培养与利用
一 、 理 教 材 ·固 基 础
1．图解识记微生 物的培养、分离与计数
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二、做真题·明考向 1．(2020·全国卷Ⅰ)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降 解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所 示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要 甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、 水、S和Y。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每
个平板上涂布100 μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不 超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_1_0_4___倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时， 某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是_S_的___浓__度__超__过___某__一__值__时__ _会__抑__制__菌__株__的__生__长_____(答出1点即可)。
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专题九 生物技术实践
[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的 选择作用。4.利用微生物发酵来生产特定产物及微生物在其他方面的应用。5.酶活力 测定的一般原理和方法。6.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。7.制备和应用固相化 酶。8.从生物材料中提取某些特定的成分。9.运用发酵加工食品的基本方法。10.测定 食品加工中可能产生的有害物质。11.蛋白质的提取和分离。
回答下列问题。 (1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微 生物提供碳源的有机物是________________。 (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的 细菌比例会____________，其原因是_____________________________________ __________________________________________________________________。 (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标 菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是________________。 (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮 酸 ， 则 在 有 氧 条 件 下 ， 丙 酮 酸 可 为 该 菌 的 生 长 提 供 ____________ 和 ____________。
2.(2019·包头质检)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。某生 物兴趣小组的同学设计如图所示的实验流程来分离纯化高效降解苯磺隆的微 生物。据此回答下列问题：
(1) 实 验 所 用 的 培 养 基 只 能 以 苯 磺 隆 作 为 ________ ， 原 因 是 _________________________________________________________________。 (2)对培养基进行灭菌，常采用的方法是________，检测灭菌是否彻底的方法是 ________________________________________________________________。 (3)图示分离纯化菌株时，所用的接种方法是________，由图推测该同学接种时 可 能 的 操 作 失 误 是 ________ 。 多 次 重 复 a 、 b 过 程 的 目 的 是 _________________________________________________________________。 (4) 为 测 定 所 获 微 生 物 降 解 苯 磺 隆 的 能 力 ， 其 基 本 思 路 是 _______________________________________________________________。
3.理解乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的数量(含量)随时间变化的曲线
题型 传统发酵技术的应用 (2019·四川宜宾二诊)回答下列关于生物技术实践的问题。 (1)某同学利用鲜苹果汁来制作果酒和果醋时，在发酵装置的排气口上连接的胶 管长而弯曲的目的是________________。利用果酒进行果醋发酵之前，需要调 整的发酵条件是________________。 (2)在泡菜的腌制过程中，需要进行密封发酵，原因是________________；并注 意控制腌制的________________等：还要跟踪检测腌制过程中产生的亚硝酸盐 的含量，其原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与________________发生重氮 化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
知识主线 思维串联
尿素 稀释涂布平板法
刚果红染色法 醋酸菌 乳酸菌
高压蒸汽灭菌法 平板划线法 碳源、氮源、水和无机盐
水蒸气蒸馏法 纸层析法鉴定
微专题1 微生物的培养与应用
1.培养基制备与微生物纯化技术
称量
灭菌 接种环
梯度稀释
提醒：①为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照： 随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基 上是否有菌落生成。 ②平板划线法只适用于微生物的纯化，不适合进行计数，并且在最后一次划线 的末端处的菌种最纯。
(3)腐乳制作过程中防止杂菌污染的措施有___________________________ ________________________________________________(答出两点即可)。 腐乳易被人体吸收的原因是_____________________________。 答案 (1)防止空气中微生物的污染 通入氧气，将温度设置为30～35 ℃ (2)乳酸菌是厌氧菌 时间、温度和食盐用量 对氨基苯磺酸 (3)用来腌制腐乳的玻璃瓶洗刷干净后要用沸水消毒；装瓶时操作要迅速、小心； 整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封；封瓶时，最好将瓶口 通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染(其他合理答案也给分) 毛霉等微生物产 生的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和 脂肪酸
解析 (1)根据目的菌株对生存环境的要求，应到相应的环境中去寻找，若要获 得耐热、抗辐射的菌体可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样。(2)一般培养基中 都含有水、碳源、氮源和无机盐，高压蒸汽灭菌可将物体内外所有的微生物杀 灭。为了保证培养基不被杂菌污染，pH调节应在灭菌之前。(3)可采用选择培养 增加耐热、抗辐射菌的浓度。微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划 线法，在进行平板划线时，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，因此第二 次以及其后的划线操作总是从上一次划线的末端开始，这样便于获得单个菌落。 为了筛选耐热、抗辐射的菌体，需将培养基放在高温辐射(50 ℃、紫外线照射 5 min)条件下培养。
3.(2019·天一大联考)有些耐热、抗辐射的细菌具有吸附重金属和降解芳烃类物 质的特性，极端干燥炎热的沙漠环境中耐热和抗辐射的细菌数量较多。请回 答下列相关问题： (1)若要获得所需菌株，可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样，原因是_______
_______________________________________________________________。 (2)培养微生物要制作培养基，虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有 ____________________________和无机盐，对培养基进行高压蒸汽灭菌的目 的 是 _______________________________________________________________ 。 培 养 细 菌 时 需 将 培 养 基 的 pH 调 至 中 性 或 微 碱 性 ， pH 调 节 应 在 灭 菌 之 ________(填“前”或“后”)。
固定化葡萄糖异构酶
固定化酵母细胞
3.加酶洗衣粉的洗涤效果的探究实验及变量分析
实验
自变量
因变量
无关变量
探究普通洗衣粉和加酶洗 洗衣粉种类(普通和
微专题3 酶的应用
1.图解酶的应用与固定化
2.比较固定化酶与固定化细胞
固定化酶
固定化细胞
固定酶的种类
一种
一系列
适用方法
化学结合法、物理吸附法
包埋法
酶既可与反应物结合，又可与
优点 产物分离，固定在载体上的酶 成本低、操作容易
特
可Байду номын сангаас复利用
点
一种酶只能催化一种或一类化 可能导致反应效率
缺点
学反应
下降
实例
醛→醋酸
氧
蛋白酶、脂肪酶水解 蛋白质、脂肪
15～18 ℃
18～20 ℃为宜 严 无氧呼吸产生乳酸
格无氧
2.把握控制杂菌的“四大措施” (1)通过发酵条件控制杂菌。 ①无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。 ②乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。 (2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。 (3)利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。 (4)利用香辛料控制杂菌：如腐乳、泡菜的制作。
答案 (1)根据目的菌株对生存环境的要求，需到相应的环境中去寻找(答案合理 即可) (2)水、碳源、氮源 杀灭培养基中的所有微生物，为所需微生物的培养提供一 个无菌环境 前 (3)选择 稀释涂布平板 线条末端细菌的数目比线条起始处要少，易得到单个 菌落 筛选得到耐热、抗辐射的菌体
微专题2 传统发酵技术的应用
1.理清“4”种传统发酵食品的制作技术
食品
菌种
呼吸类型
原理
控制条件
果酒
酵母菌
__有__氧__、__无__氧__ 有 氧 呼 吸 大 量 繁 18～25 ℃产生酒精前
殖，无氧呼吸
期有氧，后期无氧
果醋 醋酸菌 腐乳 毛霉等 泡菜 乳酸菌
_有__氧__ _有__氧__ _无__氧__
糖→醋酸；酒精→乙 30～35 ℃ 严格有
解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源，而Ⅱ 号、Ⅲ号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有 机物是X。(2)因为Ⅱ号培养基中碳源只有X，相当于是选择培养基，只有能降解 X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行 计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的 有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖 (3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料
答案 (1)唯一碳源 只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培养基上正常生长和 繁殖，从而达到分离目的 (2)高压蒸汽灭菌法 将灭菌冷却后的培养基在恒温箱中倒置培养一段时间，观 察是否有菌落产生 (3)稀释涂布平板法 涂布不均匀 进一步筛选纯化获得高效降解苯磺隆的菌株 (4)将筛选出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中，检测单位时间内苯磺隆的分 解速率(合理即可)
[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的 选择作用。4.利用微生物发酵来生产特定产物及微生物在其他方面的应用。5.酶活力 测定的一般原理和方法。6.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。7.制备和应用固相化 酶。8.从生物材料中提取某些特定的成分。9.运用发酵加工食品的基本方法。10.测定 食品加工中可能产生的有害物质。11.蛋白质的提取和分离。
回答下列问题。 (1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微 生物提供碳源的有机物是________________。 (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的 细菌比例会____________，其原因是_____________________________________ __________________________________________________________________。 (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标 菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是________________。 (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮 酸 ， 则 在 有 氧 条 件 下 ， 丙 酮 酸 可 为 该 菌 的 生 长 提 供 ____________ 和 ____________。
2.(2019·包头质检)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。某生 物兴趣小组的同学设计如图所示的实验流程来分离纯化高效降解苯磺隆的微 生物。据此回答下列问题：
(1) 实 验 所 用 的 培 养 基 只 能 以 苯 磺 隆 作 为 ________ ， 原 因 是 _________________________________________________________________。 (2)对培养基进行灭菌，常采用的方法是________，检测灭菌是否彻底的方法是 ________________________________________________________________。 (3)图示分离纯化菌株时，所用的接种方法是________，由图推测该同学接种时 可 能 的 操 作 失 误 是 ________ 。 多 次 重 复 a 、 b 过 程 的 目 的 是 _________________________________________________________________。 (4) 为 测 定 所 获 微 生 物 降 解 苯 磺 隆 的 能 力 ， 其 基 本 思 路 是 _______________________________________________________________。
3.理解乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的数量(含量)随时间变化的曲线
题型 传统发酵技术的应用 (2019·四川宜宾二诊)回答下列关于生物技术实践的问题。 (1)某同学利用鲜苹果汁来制作果酒和果醋时，在发酵装置的排气口上连接的胶 管长而弯曲的目的是________________。利用果酒进行果醋发酵之前，需要调 整的发酵条件是________________。 (2)在泡菜的腌制过程中，需要进行密封发酵，原因是________________；并注 意控制腌制的________________等：还要跟踪检测腌制过程中产生的亚硝酸盐 的含量，其原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与________________发生重氮 化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
知识主线 思维串联
尿素 稀释涂布平板法
刚果红染色法 醋酸菌 乳酸菌
高压蒸汽灭菌法 平板划线法 碳源、氮源、水和无机盐
水蒸气蒸馏法 纸层析法鉴定
微专题1 微生物的培养与应用
1.培养基制备与微生物纯化技术
称量
灭菌 接种环
梯度稀释
提醒：①为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照： 随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基 上是否有菌落生成。 ②平板划线法只适用于微生物的纯化，不适合进行计数，并且在最后一次划线 的末端处的菌种最纯。
(3)腐乳制作过程中防止杂菌污染的措施有___________________________ ________________________________________________(答出两点即可)。 腐乳易被人体吸收的原因是_____________________________。 答案 (1)防止空气中微生物的污染 通入氧气，将温度设置为30～35 ℃ (2)乳酸菌是厌氧菌 时间、温度和食盐用量 对氨基苯磺酸 (3)用来腌制腐乳的玻璃瓶洗刷干净后要用沸水消毒；装瓶时操作要迅速、小心； 整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封；封瓶时，最好将瓶口 通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染(其他合理答案也给分) 毛霉等微生物产 生的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和 脂肪酸
解析 (1)根据目的菌株对生存环境的要求，应到相应的环境中去寻找，若要获 得耐热、抗辐射的菌体可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样。(2)一般培养基中 都含有水、碳源、氮源和无机盐，高压蒸汽灭菌可将物体内外所有的微生物杀 灭。为了保证培养基不被杂菌污染，pH调节应在灭菌之前。(3)可采用选择培养 增加耐热、抗辐射菌的浓度。微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划 线法，在进行平板划线时，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，因此第二 次以及其后的划线操作总是从上一次划线的末端开始，这样便于获得单个菌落。 为了筛选耐热、抗辐射的菌体，需将培养基放在高温辐射(50 ℃、紫外线照射 5 min)条件下培养。
3.(2019·天一大联考)有些耐热、抗辐射的细菌具有吸附重金属和降解芳烃类物 质的特性，极端干燥炎热的沙漠环境中耐热和抗辐射的细菌数量较多。请回 答下列相关问题： (1)若要获得所需菌株，可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样，原因是_______
_______________________________________________________________。 (2)培养微生物要制作培养基，虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有 ____________________________和无机盐，对培养基进行高压蒸汽灭菌的目 的 是 _______________________________________________________________ 。 培 养 细 菌 时 需 将 培 养 基 的 pH 调 至 中 性 或 微 碱 性 ， pH 调 节 应 在 灭 菌 之 ________(填“前”或“后”)。
固定化葡萄糖异构酶
固定化酵母细胞
3.加酶洗衣粉的洗涤效果的探究实验及变量分析
实验
自变量
因变量
无关变量
探究普通洗衣粉和加酶洗 洗衣粉种类(普通和
微专题3 酶的应用
1.图解酶的应用与固定化
2.比较固定化酶与固定化细胞
固定化酶
固定化细胞
固定酶的种类
一种
一系列
适用方法
化学结合法、物理吸附法
包埋法
酶既可与反应物结合，又可与
优点 产物分离，固定在载体上的酶 成本低、操作容易
特
可Байду номын сангаас复利用
点
一种酶只能催化一种或一类化 可能导致反应效率
缺点
学反应
下降
实例
醛→醋酸
氧
蛋白酶、脂肪酶水解 蛋白质、脂肪
15～18 ℃
18～20 ℃为宜 严 无氧呼吸产生乳酸
格无氧
2.把握控制杂菌的“四大措施” (1)通过发酵条件控制杂菌。 ①无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。 ②乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。 (2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。 (3)利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。 (4)利用香辛料控制杂菌：如腐乳、泡菜的制作。
答案 (1)根据目的菌株对生存环境的要求，需到相应的环境中去寻找(答案合理 即可) (2)水、碳源、氮源 杀灭培养基中的所有微生物，为所需微生物的培养提供一 个无菌环境 前 (3)选择 稀释涂布平板 线条末端细菌的数目比线条起始处要少，易得到单个 菌落 筛选得到耐热、抗辐射的菌体
微专题2 传统发酵技术的应用
1.理清“4”种传统发酵食品的制作技术
食品
菌种
呼吸类型
原理
控制条件
果酒
酵母菌
__有__氧__、__无__氧__ 有 氧 呼 吸 大 量 繁 18～25 ℃产生酒精前
殖，无氧呼吸
期有氧，后期无氧
果醋 醋酸菌 腐乳 毛霉等 泡菜 乳酸菌
_有__氧__ _有__氧__ _无__氧__
糖→醋酸；酒精→乙 30～35 ℃ 严格有
解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源，而Ⅱ 号、Ⅲ号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有 机物是X。(2)因为Ⅱ号培养基中碳源只有X，相当于是选择培养基，只有能降解 X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行 计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的 有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖 (3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料
答案 (1)唯一碳源 只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培养基上正常生长和 繁殖，从而达到分离目的 (2)高压蒸汽灭菌法 将灭菌冷却后的培养基在恒温箱中倒置培养一段时间，观 察是否有菌落产生 (3)稀释涂布平板法 涂布不均匀 进一步筛选纯化获得高效降解苯磺隆的菌株 (4)将筛选出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中，检测单位时间内苯磺隆的分 解速率(合理即可)