螺旋体和支原体
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原核微生物的构造和形态观察、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体
三、衣原体
３ 生活周期
四、立克次氏体
１ 立克次氏体概述 ➢ 是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。以节肢动物为传播媒介，可引起 斑疹伤寒，斑点热等传染病。1906年，美国病理学家霍华德·泰勒·立克次（ Howard Taylor Ricketts）（1871-1910年）首次发现洛基山斑疹伤寒的独特 病原体并被它夺取生命，故名立克次氏体。
微生物学基础
原核微生物的构造和形态观察
项目三 其它原核微生物
一、螺旋体
1 螺旋体的概述 ➢ 螺旋体（spirochete）是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核 细胞型微生物，以横向二分分裂繁殖； ➢ 对抗生素敏感； ➢ 依靠轴丝屈曲与收缩而运动； ➢ 在生物学位置上介于细菌与原虫之间； ➢ 在自然界中分布广泛，寄生或腐生，亦有的存在人体口腔或动物体内。
➢ 轴丝夹在细胞壁外鞘和细胞膜之间，可有２-100根以上的轴丝。
二、支原体
１
支原体的概述
➢ 支原体（mycoplasma）：没有细胞壁、高度多形性、能通过滤菌器、可用人 工培养基培养增殖的最小原核细胞型微生物，大小为0.1～0.3微米；
➢ 由于能形成丝状与分枝形状，故称为支原体，形成“油煎蛋”形菌落；
四、立克次氏体
２ 生物学特性 ➢ 呈多形性，球杆状或杆状，细胞大小为0.3～0.6μm×0.8～2.0μm，革兰染色阴 性； ➢ 介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物，没有核仁及核膜； ➢ 会通过蚤、虱、蜱、螨传入人体、引起斑疹伤寒、战壕热等疾病。
➢ 有细胞壁，有DNA和RNA；有核糖体，不能合成ATP,能量寄生； ➢ 衣原体可分为4种，即肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体和牛衣原体。
三、衣原体
螺旋体、支原体、衣原体、立克次体三菌四体一病毒(培训学习)
对干扰蛋白质合成的药物敏感（红、链、氯、强 力、螺旋等）
对作用于DNA合成的敏感（氧氟沙星等）
学习培训
8
致病机制
1、荚膜 2、顶端结构黏附 3、从细胞膜获得脂质和固醇作养料 4、产生有毒的代谢产物如神经毒素、
磷脂酶、核酸酶、H2O2、NH3等 5、超抗原
对人致病的主要有 肺炎支原体——原发性非典型性肺炎 解脲脲原体——泌尿生殖道感染
始体(initial body )在细胞内，不具感染性， 有繁殖能力，可发育成许多子代原体。个体大，无细胞壁。
形成包含涵体。
学习培训
26
原体（elementary body, EB） 小而致密
始体（initial body） [网状体（reticulate body, RB）]
大而疏松
有胞壁， 发育成熟
外斐反应
立克次体抗体
学习培训
22
衣原体chlamydia
一、概述 能通过细菌滤器、严格细胞内寄生的、独特
发育周期的原核细胞型微生物。
生物学分类处于立克次体和病毒之间。
现归属细菌。
学习培训
23
共同特征
① 0.2-0.4 μm，圆形或椭圆形； ② 有细胞壁，G-； ③ 二分裂繁殖，有独特的发育周期。
原体 始体（网状体） ④ 寄生在活的易感细胞内：柱状上皮和杯状上皮。 ⑤ 对多种抗生素敏感。
学习培训
24
包涵体(inclusion body):含繁殖的始体和子代原体的空泡。
学习培训
25
原体(elementary body EB)在细胞外，是发育成 熟的衣原体，具有高度的感染性，无繁殖能力。个体小， 有细胞壁。
螨
野生小 蜱 动物 学习培训
对作用于DNA合成的敏感（氧氟沙星等）
学习培训
8
致病机制
1、荚膜 2、顶端结构黏附 3、从细胞膜获得脂质和固醇作养料 4、产生有毒的代谢产物如神经毒素、
磷脂酶、核酸酶、H2O2、NH3等 5、超抗原
对人致病的主要有 肺炎支原体——原发性非典型性肺炎 解脲脲原体——泌尿生殖道感染
始体(initial body )在细胞内，不具感染性， 有繁殖能力，可发育成许多子代原体。个体大，无细胞壁。
形成包含涵体。
学习培训
26
原体（elementary body, EB） 小而致密
始体（initial body） [网状体（reticulate body, RB）]
大而疏松
有胞壁， 发育成熟
外斐反应
立克次体抗体
学习培训
22
衣原体chlamydia
一、概述 能通过细菌滤器、严格细胞内寄生的、独特
发育周期的原核细胞型微生物。
生物学分类处于立克次体和病毒之间。
现归属细菌。
学习培训
23
共同特征
① 0.2-0.4 μm，圆形或椭圆形； ② 有细胞壁，G-； ③ 二分裂繁殖，有独特的发育周期。
原体 始体（网状体） ④ 寄生在活的易感细胞内：柱状上皮和杯状上皮。 ⑤ 对多种抗生素敏感。
学习培训
24
包涵体(inclusion body):含繁殖的始体和子代原体的空泡。
学习培训
25
原体(elementary body EB)在细胞外，是发育成 熟的衣原体，具有高度的感染性，无繁殖能力。个体小， 有细胞壁。
螨
野生小 蜱 动物 学习培训
支原体、衣原体、立克次体、螺旋体
使用显微镜才能看到。
支原体的基因组是环状的DNA 分子，大小通常在500kb到 700kb之间。
支原体的分类
01
支原体可以分为两种类型：解脲 支原体（Ureaplasma urealyticum）和人型支原体（ Mycoplasma hominis）。
02
解脲支原体主要引起人类泌尿生 殖系统感染，而人型支原体则主 要引起人类呼吸系统和消化系统 感染。
立克次体的感染治疗方法主要包括使用抗生素，如四环素类药物、大环 内酯类药物等，但必须在Байду номын сангаас生指导下使用。对于严重病例，可能需要住
院治疗。
预防立克次体的感染主要通过避免接触感染源、注意个人卫生和环境卫 生等方式。
04 螺旋体
螺旋体的定义
螺旋体是一种细长、柔软、有动 力的微生物，具有多个旋转的细 胞壁结构。它们通常呈螺旋状，
支原体的感染症状及治疗方法
支原体感染的症状可以因人而异，但通常包括尿道疼痛、尿频尿急尿不尽、尿道 口分泌物增多等。
对于支原体感染的治疗，通常使用抗生素，如大环内酯类抗生素、四环素类抗生 素等。但需要注意的是，对于孕妇和儿童来说，有些抗生素是不适用的，需要在 医生的指导下进行治疗。
02 衣原体
衣原体的定义
立克次体的分类
立克次体可分为两个属：立克次体属和柯克斯体属。
立克次体属包括多种病原体，如普氏立克次体、莫氏立克次体和贝纳柯克斯体等， 它们分别引起流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒和恙虫病等。
柯克斯体属包括柯克斯体和查菲柯克斯体等，它们主要引起人或其他动物的恙虫病 。
立克次体的感染症状及治疗方法
立克次体的感染症状因病原体不同而异，但通常包括发热、头痛、皮疹 、淋巴结肿大等。
支原体的基因组是环状的DNA 分子，大小通常在500kb到 700kb之间。
支原体的分类
01
支原体可以分为两种类型：解脲 支原体（Ureaplasma urealyticum）和人型支原体（ Mycoplasma hominis）。
02
解脲支原体主要引起人类泌尿生 殖系统感染，而人型支原体则主 要引起人类呼吸系统和消化系统 感染。
立克次体的感染治疗方法主要包括使用抗生素，如四环素类药物、大环 内酯类药物等，但必须在Байду номын сангаас生指导下使用。对于严重病例，可能需要住
院治疗。
预防立克次体的感染主要通过避免接触感染源、注意个人卫生和环境卫 生等方式。
04 螺旋体
螺旋体的定义
螺旋体是一种细长、柔软、有动 力的微生物，具有多个旋转的细 胞壁结构。它们通常呈螺旋状，
支原体的感染症状及治疗方法
支原体感染的症状可以因人而异，但通常包括尿道疼痛、尿频尿急尿不尽、尿道 口分泌物增多等。
对于支原体感染的治疗，通常使用抗生素，如大环内酯类抗生素、四环素类抗生 素等。但需要注意的是，对于孕妇和儿童来说，有些抗生素是不适用的，需要在 医生的指导下进行治疗。
02 衣原体
衣原体的定义
立克次体的分类
立克次体可分为两个属：立克次体属和柯克斯体属。
立克次体属包括多种病原体，如普氏立克次体、莫氏立克次体和贝纳柯克斯体等， 它们分别引起流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒和恙虫病等。
柯克斯体属包括柯克斯体和查菲柯克斯体等，它们主要引起人或其他动物的恙虫病 。
立克次体的感染症状及治疗方法
立克次体的感染症状因病原体不同而异，但通常包括发热、头痛、皮疹 、淋巴结肿大等。
螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体知识点整理
螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体知识点一、螺旋体1.概念1)⼀类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、利用细胞壁和细胞膜间的轴丝运动活泼的原核细胞型微⼀物2)基本结构与细菌相似，有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖；对抗生素等药物敏感2.螺旋体的科和属3.钩端螺旋体1)钩端螺旋体属⼀属钩端螺旋体科，简称钩体。
2)常⼀的有问号钩端螺旋体、双曲钩端螺旋体、亚历⼀⼀钩端螺旋体及其他13个新种。
3)代表菌种为问号钩端螺旋体4)形态结构a)螺旋盘绕细致⼀规则，形似细⼀珍珠排列的细链。
⼀端或两端呈钩状。
b)电镜下钩端螺旋体为圆柱状结构，由外向内依次为鞘膜、胞壁和浆膜。
鞘膜由脂多糖和蛋⼀质组成。
胞壁与浆膜之间有⼀根由两条轴丝扭成的中轴，位于菌体⼀侧。
钩端螺旋体是以整个圆柱形菌体缠绕中轴而成c)运动活泼，常呈C、S或8字型d)Fontana镀银染色法背景为淡棕色，钩端螺旋体染成棕褐色e)其胞壁成分与革兰阴性杆菌相似，革兰染色为阴性5)培养&抵抗力a)营养要求复杂，常用Korthof培养基b)适宜生长温度28~30°Cc)人工培养基生长缓慢，液体培养基中呈半透明云雾状生长。
d)水或湿土中可存活数周至数月。
e)对干燥、热、日光直射的抵抗力较弱，56 °C10min或60°C1min死亡6)抗原a)与分型有关的抗原存在于螺旋体表⼀的表⼀抗原（P抗原），为蛋⼀质多糖的复合物，具有型特异性，是钩端螺旋体分型的依据。
b)存在于螺旋体内部的内部抗原（S抗原），是类脂多糖复合物，具有属特异性，为钩端螺旋体分群的依据7)致病性a)致病物质●类似细菌内毒素与外毒素、内毒素样物质(ELS)或脂多糖样物质(LLS)●溶血素细胞毒性因子(CTF)●细胞致病作用(CPE)物质b)疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力，细胞免疫为主c)人兽共患：传播途径经破损⼀肤或粘膜进⼀d)进⼀⼀液⼀量繁殖，引起钩体败⼀症，随后钩体侵⼀肝、脾、肾、肺、⼀、淋巴结和中枢神经系统等组织器官，引起相关脏器和组织的损害和体征e)临床上常⼀流感伤寒型、⼀疸出⼀型、肺出⼀型。
支原体、立克次体、衣原体螺旋体衣原体、螺旋体
支原体、立克次体、衣原体、螺旋体衣原体螺旋体支原体（Mycoplasma)是类无细胞壁，呈高度多形性，可通过细菌•是一类滤器，能在无生命培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物。
•含有DNA和RNA两种核酸，二分裂方式繁殖。
•对青霉素有耐药性。
对青霉素有耐药性与细菌L型的区别支原体L型细菌遗传上与细菌无关与原菌相关，常可回复细胞膜含胆固醇不含胆固醇在一般培养基中稳定在般培养基中稳定需高渗培养菌落小，0.1-0.3 mm 大，0.5-1 mm液体培养混浊度低有一定混浊度一、生物学性状1形态结构呈多形性（球形丝形）、生物学性状、形态结构：呈多形性（球形、丝形），Giemsa 染为淡紫色，G-。
细胞膜含固醇，有的支原体有荚膜或特殊顶端结构。
基因组为双链环状DNA ，分子量较小。
2培养营养要求高需加血清(1020%)、培养：营养要求高，需加血清(10-20%)及酵母浸液等。
PH 7.8-8.0，PH< 7.0死亡。
生长缓慢菌落小呈油煎蛋样二分裂繁殖缓慢，菌落小，呈油煎蛋样。
二分裂繁殖。
3、抗原结构：蛋白质和糖脂，交叉较少。
4、抵抗力：一般与细菌相似，对作用于蛋白质的抗生素敏感。
二、致病性与免疫性广泛分布于人、动物体内，对人致病的主要有：：肺炎支原体→原发性非典型肺炎。
泌尿生殖道感染溶脲脲原体,不育症,似淋病,称为非淋球菌淋病。
人型支原体粘附单核巨噬细胞CD4T AIDS 生殖器支原体穿透支原体侵入红细胞+T 免疫损伤AIDSIgM ，IgG ，可增强吞噬细胞功能，IgA 抵御再次感染。
细胞因子：TNF-α，IL-1，IL-6均可发挥作用。
（一）肺炎支原体①二分裂、出芽和分支、断裂。
②夏末秋初高发，经呼吸道感染，借末端的棒状结构吸附到呼吸道黏膜表面，不侵入组织和血液。
③引起原发性非典型肺炎（非细菌肺炎的1/2），间质炎症，症状轻，与胸片严重程度不符。
5-15岁年龄段易症症状轻与胸片严重程度不符515感④类脂质抗原和人体细胞膜有交叉，出现超敏反应，引起间质性肺炎等。
引起人类疾病的其它微生物：支原体 立克次体 衣原体 螺旋体
包涵体含糖原，被碘液染为棕褐色
免疫性
抗体持续时间短，免疫力不强，易造 成持续感染和反复感染。
防治原则
注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等。 治疗可用利福平、四环素和强力霉素等。
螺旋体（spirochete)
• 是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核 细胞型微生物。
• 基本结构类似细菌，有细胞壁、原始核质，二 分裂法繁殖，对抗生素敏感。
数月。
2、耐冷不耐热，致死点为56℃、10min或 60℃、1min。于－30℃经冻融后仍有部分 活存，4℃冰箱中放置14日依然生存良好。
3、0.2%来苏、1:2,000升汞、1%石炭酸，在 10-
30min内可杀死钩体。 4、对青霉素敏感。
(二) 致病性与免疫性
• 引起人和动物的钩体病，流行范围最广 的人兽共患病。
• 种类繁多，广泛存在于自然界和动物体内。
分类
• 据螺旋体大小、螺旋数目、规则程度及螺 旋间距，将致病性螺旋体分为三属：
分类
• 疏螺旋体属:
有3-10个稀疏、 不规则螺旋 回归热螺旋体、 伯氏疏螺旋体；
• 密螺旋体属：
有8-14个细密、 规则的螺旋
梅毒螺旋体、 雅司螺旋体；
• 钩端螺旋体属：
Life cycle of a Chlamydia. Small, dark, elementary bodies (the only infectious stage of the chlamydial life cycle) attach to host cell(1)and enter by
phagocytosis. (2)The elementary bodies, enclosed within membrane-bound vacuoles, lose their thick walls and enlarge to become reticulate bodies(3). These reproduce by binary fission, rapidly filling the cell(4). The reticulate bodies condense to form infectious elementary bodies(5), which are then
免疫性
抗体持续时间短，免疫力不强，易造 成持续感染和反复感染。
防治原则
注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等。 治疗可用利福平、四环素和强力霉素等。
螺旋体（spirochete)
• 是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核 细胞型微生物。
• 基本结构类似细菌，有细胞壁、原始核质，二 分裂法繁殖，对抗生素敏感。
数月。
2、耐冷不耐热，致死点为56℃、10min或 60℃、1min。于－30℃经冻融后仍有部分 活存，4℃冰箱中放置14日依然生存良好。
3、0.2%来苏、1:2,000升汞、1%石炭酸，在 10-
30min内可杀死钩体。 4、对青霉素敏感。
(二) 致病性与免疫性
• 引起人和动物的钩体病，流行范围最广 的人兽共患病。
• 种类繁多，广泛存在于自然界和动物体内。
分类
• 据螺旋体大小、螺旋数目、规则程度及螺 旋间距，将致病性螺旋体分为三属：
分类
• 疏螺旋体属:
有3-10个稀疏、 不规则螺旋 回归热螺旋体、 伯氏疏螺旋体；
• 密螺旋体属：
有8-14个细密、 规则的螺旋
梅毒螺旋体、 雅司螺旋体；
• 钩端螺旋体属：
Life cycle of a Chlamydia. Small, dark, elementary bodies (the only infectious stage of the chlamydial life cycle) attach to host cell(1)and enter by
phagocytosis. (2)The elementary bodies, enclosed within membrane-bound vacuoles, lose their thick walls and enlarge to become reticulate bodies(3). These reproduce by binary fission, rapidly filling the cell(4). The reticulate bodies condense to form infectious elementary bodies(5), which are then
支原体与螺旋体.
实 验 六
2019/1/15
支原体与螺旋体
一、支原体集落 二、螺旋体的形态与染色 三、暗视野显微镜观察钩端螺旋体的动力
支原体集落
1 奋森螺旋体，有3-10个稀疏而规则的螺 旋，呈波状。 2 梅毒螺旋体，呈棕色，两端尖直，有 8~14个呈锐角弯曲而规则的螺旋 3 钩端螺旋体呈棕褐色，螺旋盘绕紧密 而规则，但分不清楚，一端或两端弯典 如钩状，体 2.假菌丝 3.厚膜孢子
1 2 白色念珠菌 3
絮状表皮癣菌
石膏样毛癣菌
犬小孢子菌
浅部真菌病标本直接镜检
一）实验目的 了解浅部真菌病临床标本直接镜检的方法。 二)实验材料 1、发癣或足癣患者的毛发或皮屑。 2、10～20%NaOH溶液。 3、载玻片、盖玻片等。
三）实验方法 1、将病发或皮屑放于载玻片上，滴加1～2滴10～ 20% NaOH溶液。 2、加以盖玻片。在弱火上微微加热，以下不沸为 度，（加速角质溶解，使标本透明）。 3、在盖玻片上轻轻加压，按一下盖玻片，用滤纸 吸去周围溢液。 4、先在低倍镜下观察到被检物后，转换高倍镜观 察。 四）实验结果 阳性标本常可看见明显的分枝菌丝或孢子。
真 菌
一、真菌基本形态及菌落特点 二、浅部真菌病临床标本直接镜检
真菌菌落特点
酵母型菌落 如：新型隐球菌菌落。圆形、较大、白色、边缘整齐， 表面湿润光滑，与一般细菌菌落相似。 类酵母型菌落 如：白色念珠菌菌落。圆形、较大、白色、菌落底 层有假菌丝长入培养基内。 丝状菌落 如：絮状表皮癣菌菌落。表面有不规则隆起和浅 沟，并有白色棉絮样气中菌丝，菌落的基底背面呈 茶褐色。
1) 将待检血清及 TRUST 抗原于试验前置 (23— 29℃)中平衡片刻。 2)分别吸取阴性和阳性对照各1滴(50μ 1)加到 反应卡的二个圆圈内并铺匀。 3) 吸取待检血清或血浆 ( 不需灭活 )1 滴，分别 滴加于卡片上的另一个圆圈内并铺匀。 4)轻轻摇匀抗原，用专用滴管针头垂直滴加抗 原1滴于血清圈内。 5)摇动卡片8min，立即用肉眼观察结果。 1)阴性：呈粉红色均匀分散沉淀物。 2)阳性：出现粉红色凝集块，根据凝集程度记 录+～++++。
2019/1/15
支原体与螺旋体
一、支原体集落 二、螺旋体的形态与染色 三、暗视野显微镜观察钩端螺旋体的动力
支原体集落
1 奋森螺旋体，有3-10个稀疏而规则的螺 旋，呈波状。 2 梅毒螺旋体，呈棕色，两端尖直，有 8~14个呈锐角弯曲而规则的螺旋 3 钩端螺旋体呈棕褐色，螺旋盘绕紧密 而规则，但分不清楚，一端或两端弯典 如钩状，体 2.假菌丝 3.厚膜孢子
1 2 白色念珠菌 3
絮状表皮癣菌
石膏样毛癣菌
犬小孢子菌
浅部真菌病标本直接镜检
一）实验目的 了解浅部真菌病临床标本直接镜检的方法。 二)实验材料 1、发癣或足癣患者的毛发或皮屑。 2、10～20%NaOH溶液。 3、载玻片、盖玻片等。
三）实验方法 1、将病发或皮屑放于载玻片上，滴加1～2滴10～ 20% NaOH溶液。 2、加以盖玻片。在弱火上微微加热，以下不沸为 度，（加速角质溶解，使标本透明）。 3、在盖玻片上轻轻加压，按一下盖玻片，用滤纸 吸去周围溢液。 4、先在低倍镜下观察到被检物后，转换高倍镜观 察。 四）实验结果 阳性标本常可看见明显的分枝菌丝或孢子。
真 菌
一、真菌基本形态及菌落特点 二、浅部真菌病临床标本直接镜检
真菌菌落特点
酵母型菌落 如：新型隐球菌菌落。圆形、较大、白色、边缘整齐， 表面湿润光滑，与一般细菌菌落相似。 类酵母型菌落 如：白色念珠菌菌落。圆形、较大、白色、菌落底 层有假菌丝长入培养基内。 丝状菌落 如：絮状表皮癣菌菌落。表面有不规则隆起和浅 沟，并有白色棉絮样气中菌丝，菌落的基底背面呈 茶褐色。
1) 将待检血清及 TRUST 抗原于试验前置 (23— 29℃)中平衡片刻。 2)分别吸取阴性和阳性对照各1滴(50μ 1)加到 反应卡的二个圆圈内并铺匀。 3) 吸取待检血清或血浆 ( 不需灭活 )1 滴，分别 滴加于卡片上的另一个圆圈内并铺匀。 4)轻轻摇匀抗原，用专用滴管针头垂直滴加抗 原1滴于血清圈内。 5)摇动卡片8min，立即用肉眼观察结果。 1)阴性：呈粉红色均匀分散沉淀物。 2)阳性：出现粉红色凝集块，根据凝集程度记 录+～++++。
第四篇 螺旋体、支原体、衣原体、立克次体
繁殖方式 抵抗力
弱
均 为 二 分 裂
弱 弱 弱 (梅毒螺旋体极 弱, 50℃5’, 4 ℃ 3天)
微生物的大小比较
A、大肠杆菌噬菌体 ( 65 ×95nm ) 衣原体 390nm A
立克次体 450nm
葡萄球菌 (1000nm） 牛痘病毒 300×250n m C D E G
B、腺病毒 (70nm ) C、脊髓灰质炎病毒 (30nm ) F D、乙脑病毒 ( 40nm ) E、蛋白分子 (10nm ) F、流感病毒 ( 100nm )
螺旋体(spirochete) 支原体(mycoplasma) 衣原体(chlamydia) 立克次体(rickettsia )
生物学性状的比较 定义 致病性与免疫性 综合性思考题
支原体
可通过滤菌器
立克次体
衣原体
始体0.5~1um 可通过滤菌器
螺旋体
大小 0.2~0.3um， 0.3～0.6×0.8～2um 原体0.2～0.4um 较大
钩端螺旋体
致病过程
钩体
接触疫水、土壤， 经破损皮肤黏膜侵入
局部繁殖 血(钩体血症) 多脏器损害：
心血管 肝脏、肾脏、脾脏 中枢神经系统
早期：寒热酸痛一身乏，眼红腿痛淋巴大
免疫性：
• 病后免疫力持久
• 病后部分病人肾脏中可继续带菌，并且 尿液排菌。
预防：
目前用全细胞死疫苗 对象是疫区人群
引起人类感染的主要支原体
定义：用普通变形杆菌的菌株抗原代替立克次体抗原， 检测患者血清中有无立克次体抗体的非特异性凝集反应， 以辅助诊断斑疹伤寒、恙虫病等。
引起人类感染的立克次体
普氏立克次体
人虱
支原体与螺旋体.
1) 将待检血清及 TRUST 抗原于试验前置 (23— 29℃)中平衡片刻。 2)分别吸取阴性和阳性对照各1滴(50μ 1)加到 反应卡的二个圆圈内并铺匀。 3) 吸取待检血清或血浆 ( 不需灭活 )1 滴，分别 滴加于卡片上的另一个圆圈内并铺匀。 4)轻轻摇匀抗原，用专用滴管针头垂直滴加抗 原1滴于血清圈内。 5)摇动卡片8min，立即用肉眼观察结果。 1)阴性：呈粉红色均匀分散沉淀物。 2)阳性：出现粉红色凝集块，根据凝集程度记 录+～++++。
新型隐球菌墨汁涂片
1.菌体 2.假菌丝 3.厚膜孢子
1 2 白色念珠菌 3
絮状表皮癣菌
石膏样毛癣菌
犬小孢子菌
浅部真菌病标本直接镜检
一）实验目的 了解浅部真菌病临床标本直接镜检的方法。 二)实验材料 1、发癣或足癣患者的毛发或皮屑。 2、10～20%NaOH溶液。 3、载玻片、盖玻片等。
三）实验方法 1、将病发或皮屑放于载玻片上，滴加1～2滴10～ 20% NaOH溶液。 2、加以盖玻片。在弱火上微微加热，以下不沸为 度，（加速角质溶解，使标本透明）。 3、在盖玻片上轻轻加压，按一下盖玻片，用滤纸 吸去周围溢液。 4、先在低倍镜下观察到被检物后，转换高倍镜观 察。 四）实验结果 阳性标本常可看见明显的分枝菌丝或孢子。
梅毒螺旋体镀银染色
奋森氏螺旋体革兰染色
钩端螺旋体镀银染色标本片。
暗视野显微镜下苍白密螺旋体 （暗视野，放大1000倍）
2019/1/15
检查： （一）镜检螺旋体 早期：硬性下疳。70% 二期：梅毒疹。 100% 晚期：全身反应。（二）甲苯胺红不加热血清试验 (toluidie red unheated serum regain test，TRUST)采用VDRL抗原混悬于含有 特制的甲苯胺红溶液中，与血清中反应 素反应，出现肉眼可见的凝集块。
螺旋体、支原体ch16-18
2.血清学试验
用已知Ag作凝集试验、补体结合试验、中和试验
衣原体（Chlamydia）
衣原体是一类严格细胞内寄生的原核细 胞型微生物，介于立克次体和病毒之间， 可引起人和家畜的衣原体病。
一、生物学特点
１．革兰氏阴性，圆形或椭圆形 ２．含DNA和RNA两种核酸 ３．有由粘肽组成的细胞壁 ４．细胞内寄生（鸡胚或细胞培养、动物接种） ５．独特的发育周期，并以二分裂方式繁殖 ６．对某些抗生素敏感
谢谢
一、形态与染色
具有多形性、可塑性和滤过性。无鞭毛，革兰氏染色 呈阴性，着色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡 紫色。
霉形体的细胞膜具有三层结构，内、外层主要是蛋白质， 中间层主要是脂质 (固醇含量高）。
二、培养特性
营养要求较高，需牛心浸液，酵母膏，辅酶I、氨基酸等。
生长缓慢，菌落呈“荷包蛋状”（猪肺炎霉形体除外）， 菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在培养基表 面，较透明。
一、生物学特性
1. 多形性，主要是球杆状。 2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通过细菌滤器。 3.革兰氏阴性，有细胞壁 4.专性细胞内寄生 5.以二分裂方式繁殖 6.对理化因素抵抗力不强，
尤对热敏感 7.主要寄生于节肢动物中，
通过叮咬感染人和动物
二、微生物诊断
1.分离培养
病料接种易感动物腹腔,分离毒株作鸡胚或细胞培 养,结合血清学试验
可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，有些菌株 可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长，不一定引起 细胞病变，但可妨碍病毒的细胞培养。
液体培养基中，生长数量少，不易见浑浊，仅有 小颗粒沉于管底。
三、与细菌L型的区别
支原体 •遗传上与细菌无关 •细胞膜含高浓度固醇 •在一般培养基中稳定 •生长慢，菌落小
用已知Ag作凝集试验、补体结合试验、中和试验
衣原体（Chlamydia）
衣原体是一类严格细胞内寄生的原核细 胞型微生物，介于立克次体和病毒之间， 可引起人和家畜的衣原体病。
一、生物学特点
１．革兰氏阴性，圆形或椭圆形 ２．含DNA和RNA两种核酸 ３．有由粘肽组成的细胞壁 ４．细胞内寄生（鸡胚或细胞培养、动物接种） ５．独特的发育周期，并以二分裂方式繁殖 ６．对某些抗生素敏感
谢谢
一、形态与染色
具有多形性、可塑性和滤过性。无鞭毛，革兰氏染色 呈阴性，着色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡 紫色。
霉形体的细胞膜具有三层结构，内、外层主要是蛋白质， 中间层主要是脂质 (固醇含量高）。
二、培养特性
营养要求较高，需牛心浸液，酵母膏，辅酶I、氨基酸等。
生长缓慢，菌落呈“荷包蛋状”（猪肺炎霉形体除外）， 菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在培养基表 面，较透明。
一、生物学特性
1. 多形性，主要是球杆状。 2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通过细菌滤器。 3.革兰氏阴性，有细胞壁 4.专性细胞内寄生 5.以二分裂方式繁殖 6.对理化因素抵抗力不强，
尤对热敏感 7.主要寄生于节肢动物中，
通过叮咬感染人和动物
二、微生物诊断
1.分离培养
病料接种易感动物腹腔,分离毒株作鸡胚或细胞培 养,结合血清学试验
可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，有些菌株 可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长，不一定引起 细胞病变，但可妨碍病毒的细胞培养。
液体培养基中，生长数量少，不易见浑浊，仅有 小颗粒沉于管底。
三、与细菌L型的区别
支原体 •遗传上与细菌无关 •细胞膜含高浓度固醇 •在一般培养基中稳定 •生长慢，菌落小
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微生物特性
形态结构 螺旋细密而规则,菌体一端或两端弯 曲呈问号或C、S形 基本结构：外膜 内鞭毛（两根） 原生质圆柱体
微生物特性
抗原构造
属特异性抗原 只存在钩端螺旋体属中
血清学诊断，分类及抗原结构分析
群特异性抗原 型特异性抗原 菌体脂质多糖复合物 表面抗原，多糖蛋白复合物
血清群和血清型分类
性传播疾病，亦可通过母婴传播
致非淋菌性尿道炎（NGU）、男性不育 前列腺炎或附睾炎，阴道炎、宫颈炎，可致流产
致病机制：侵袭酶、毒性产物有关
微生物特性
形态结构: 液体培养基中以球形为主，能通过微孔滤膜； 没有细胞壁，革兰染色阴性，Giemsa 染色呈紫蓝色。 培养特性 营养要求高 培养基：牛心浸液+胆固醇+酵母+尿素等 温度：35-37℃，PH：5.5-6.5 气体环境: 95％N2和5％CO2 很小“荷包蛋”样菌落 水解尿素产氨，不分解葡萄糖和精氨酸
肺炎支原体(M. pneumoniae )
临床意义 呼吸道感染病原体，经飞沫传染 间质性肺炎，原发性非典型性肺炎 肺炎支原体是青少年急性呼吸道感染的主要病 原体之一，表现为上呼吸道感染综合症，也可 引起其他系统的肺外并发症。
流行特点：间歇性，长时期缓慢播散，可持续
数月至一年
感染呈全球性分布，平时散在发病，3-5年出
微生物学特性
培养特性
营养要求高，需加入10％-20％动物血清，还需
添加酵母液、组织液、核酸提取物和辅酶等，
形成“荷包蛋”状菌落
与细菌L型生物学性状的区别（表19-1）
生化反应：利用葡萄糖、精氨酸（-）、尿素 （-）、吸附红细胞 （表19-2）
“荷包蛋”状菌落
抵抗力
支原体耐冷 对热和干燥敏感 对ß-内酰胺类抗生素不敏感 对红霉素、多西环素、螺旋霉素等抗 生素敏感
微生物特性
抗原构造 多糖抗原和蛋白质抗原
脲酶抗原—种特异性抗原
抵抗力
对渗透作用敏感，对热敏感, 对作用细胞壁 的抗生素不敏感，对影响胞浆蛋白合成的抗菌 药物敏感。
微生物检验
检验程序：图19-5
标本采集：尿液、前列腺液、精液、分泌物、羊水、血液等
直接检查 核酸检测：敏感、稳定可靠、快速简便，将成为临床快速 诊断的重要试验手段。 ELISA：可测定血清型别及IgG类型，敏感、特异性强，有
现一次地区性流行
微生物学特性
形态结构：短细丝状，长2-5um，近细胞丝状体
尖端有一球状的特殊结构。典型的肺炎支原体类
似酒瓶状，没有细胞壁，仅有细胞膜。革兰染色
阴性，Giemsa 染色呈淡紫色。
抗原构造：细胞膜中的糖脂抗原和蛋白质抗原。 糖脂抗原抗原性强、特异性较差。 170k的DPI 膜蛋白和43kD的菌体蛋白特异性强。支原体PI 膜蛋白是其主要型特异性抗原，其抗原性常用 生长抑制试验(growth inhibition test, GIT) 与代谢抑制试验(metabolism inhibition test, MIT)鉴定。
早期(1周内)血液阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。 感染6-10天取血可检出抗体，第3-4周达最高水平。 尸检：肝、肾、脑、肺等
微生物检验
直接检查
直接显微镜检查：差速离心，取沉淀涂片，暗 视野检查或采用Fontana 镀银染色镜检 核酸检测
微生物检验
分离培养 取血液、尿液、CSF等接种Korthof 培养基 鉴定 已知诊断血清鉴定血清群和血清型 抗体检测 病初和发病3-4周采双份血清 显微镜凝集试验：>1:300或双份血清效价增高4倍以上 间接凝集试验：单份血清标本活性碳凝集效价>1：8， 乳胶凝集效价>1：2，双份血清效价增高4倍以上更有诊 断价值 ELISA：被检血清OD值为阴性对照的2倍 动物试验 分离钩端螺旋体的敏感方法 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔接种
抵抗力
抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感 ，4 ℃ 3天死亡 对青霉素，四环素，红霉素，庆大霉素或砷剂敏感
微生物检验
检验程序：图18-5 标本采集 下疳分泌物、皮疹渗出液、淋巴结穿刺液、 组织块（制成组织悬液） 标本要及时检查
微生物检验
标本直接检查
直接显微镜检查：暗视野显微镜检查
（适用Ⅰ、Ⅱ期梅毒）
快速血浆反应素环状卡片试验（Rapid Plasma Reagin circle card, RPR），可进行半定量，进行疗效评价和判 断是否有再感染。 注意：假阳性、假阴性问题
抗体检测
密螺旋体抗原试验 不能区别不同种的密螺旋体及所致疾病 荧光密螺旋体吸收试验(FTA－ABS)：具高度特异性和敏 感性，适用于早期梅毒的诊断，可持续数年至终身。 梅毒螺旋体荧光抗体双染色试验(FTA-ABS-DS)：对早期 和晚期梅毒均有很高敏感性和特异性，且阳性出现时间早，
伯氏疏螺旋体
回归热螺旋体 赫姆疏螺旋体 奋森疏螺旋体
莱姆病
流行性回归热 地方性回归热 多种口腔感染
硬蜱
体虱 软蜱 条件致病
分类与命名
Ⅴ钩端螺旋体：螺旋细密规则，一端或两端弯 曲呈钩状
问号钩端螺旋体
钩端螺旋体病 接触疫水
Ⅷ密螺旋体：8-14个细密规则的螺旋，菌体硬 直，两端尖
梅毒螺旋体 雅司螺旋体
测IgM，特异性尚不理想。
冷凝集试验：冷凝集素是支原体感染后机体产生的一类IgM
型自身抗体，非特异试验。效价>=1:64为阳性,效价越高或
双份血清4倍以上升高，近期感染的可能性越大。
溶脲脲原体
Ureaplasma urealyticum ,Uu 非淋病尿道炎患者的尿道分泌物中分离得到 寄居于人泌尿生殖道，男性尿道、阴茎包皮和女性阴道， 偶可自呼吸道分离出。 临床意义
疏螺旋体
有3~10个稀疏而 不规则的螺旋， 呈波状，运动活 泼
伯氏疏螺旋体
莱姆病的主要病原体， 主要传播媒介是硬蜱
分类
DNA同源性分析莱姆病菌株 伯氏疏螺旋体：美国和欧洲 伽氏疏螺旋体：欧洲和日本 埃氏疏螺旋体：欧洲和日本 分类尚未统一，一般以伯氏疏螺旋体作为莱姆 病病原体的统称。
生物学特性
螺旋体和支原体
螺旋体（Spirochete）
一类Байду номын сангаас长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核
细胞型微生物，生物学地位介于细菌与原虫之间。
分类与命名
分类依据：大小、螺旋数目、螺旋规则程度和 螺旋间距
分类与命名
一目一科：螺旋体目
螺旋体科：分为8个属（Ⅰ-Ⅷ）(表18-1)
Ⅰ疏螺旋体：3-10个稀疏不规则的螺旋，波纹状
人型支原体 Mycoplasma hominis
寄居于生殖道，女性多见 性接触传播 形态结构与溶脲脲原体相似；固体培养基上呈 典型“油煎蛋状”菌落；分解精氨酸，不分解 尿素和葡萄糖。 四环素与林可霉素敏感 微生物检验与溶脲脲原体相似
穿通支原体 M. penetrans
临床意义
Mpe感染可能是爱滋病的辅助致病因素
微生物检验
检验程序（图19-3）
标本采集：咽试子、痰、支气管分泌物、鼻咽
洗液等；快速接种、转运培养基
标本直接检查
涂片检查：G染色不易着色
电子显微镜观察无细胞壁
核酸检测：PCR检测肺炎支原体DNA
微生物检验
培养与鉴定： 培养基：牛心浸液+20％小牛血清+新鲜酵母浸液 +美兰、醋酸陀、青霉素 初次培养：液体培养基中增菌；生长后转种固体 培养基，观察菌落(致密圆形菌落或油煎蛋样菌落)
奋森疏螺旋体 专性厌氧，常与梭形梭杆菌寄生于人类口腔牙 龈部，条件致病菌，奋森咽峡炎、牙龈炎、口 颊坏疽、溃疡性口腔炎；革兰染色镜检或直接 暗视野观察
密螺旋体
螺旋细密、规则、两端尖，数目多
致病性
苍白螺旋体 苍白亚种 地方亚种 极细亚种 品他螺旋体 梅毒 地方性梅毒 雅司病 品他病 性传播 污染餐具 直接接触皮肤 皮肤损伤
梅毒螺旋体
临床意义
梅毒的病原体，人是唯一传染源
传播途径 母婴传播
性传播
输血传播
获得性梅毒，临床上分为三期：初期、中期、晚期
先天性梅毒
微生物学特性
形态与染色
8-14个致密而规则小螺旋，两端尖直，运动活泼 Fontana 镀银染色染成棕褐色 暗视野观察形态和运动方式
培养特性
不能在无活细胞人工培养基中生长繁殖
早期诊断意义。
免疫斑点试验：敏感、特异性强，快速，不需特殊仪器。
微生物检验
培养与鉴定
增菌：液体培养基(含酚红和尿素)
阳性转种新的液体培养基和固体培养基（尿素 和MɡSO4 ） 涂片作G染色、姬娒萨染色和细胞壁染色观察菌 体形态，根据形态和生化反应作出初步鉴定，
MIT和GIT作进一步鉴定。
抗体检测：意义不大
标本直接检查
直接显微镜检查：暗视野显微镜观察形态和 运动，简便直观但检出率极低 核酸检查：PCR 快速，敏感性高 分离培养：BSK复合培养基 2-3周可观察生长， 甚至需培养12周
抗体检测
间接免疫荧光法（IFA）：操作简便实用，但 类风湿关节炎及其他螺旋体病可出现假阳性。 ELISA：方便快捷，但全菌体ELISA特异性差， 仅用作筛选。
培养特性
营养要求较高，常用含10％兔血清的Korthof 培养基
最适生长温度28-30℃ ，在人工培养基中生长缓慢
微生物特性
抵抗力 对热抵抗力弱，对来苏、升汞、石碳酸
等敏感，对青霉素敏感
但是夏秋季酸碱度中性的湿土或水中可 存活20天，甚至数月
微生物检验
检验程序: 图18-2 标本采集
血液、CSF、尿液、疫水
一类缺细胞壁、形态多样、能通过除菌 滤器，在无生命培养基中能生长繁殖的 最小原核细胞型微生物。