微生物形态学检验课件
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微生物形态学检验-PPT
➢ 培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae
➢ 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性
伤寒沙门氏菌 S.typhi
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛
➢ 培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排 列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜
细菌分离培养及鉴定
➢ 细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便 于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验
➢ 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据
细菌形态与染色特点
➢ 染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等 ➢ 形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、
荧光假单胞菌 P.fluorescens
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养
琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营
养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis
➢ 形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大
微生物形态学检查(微生物学检验基本技术一
微生物形态学检查(微生物学检验基本技术一)随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1．普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油（浸）镜放大1000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2．暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3．相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4．荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。
滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。
医学微生物学实验形态学检查..共27页
1、不要轻言放弃，否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
医学微生物学实验形态学检查.. 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
医学微生物学实验形态学检查.. 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
微生物实验细菌的人工培养及形态学检查 ppt课件
微生物实验细菌的人工培养及形态学
36
检查
3、抗生素 青霉素 链霉素 庆大霉素
密集划线法 操作同化学消毒剂
青 霉 素
链
庆
霉
大 霉
素
素
微生物实验细菌的人工培养及形态学
37
检查
三、细菌的生化实验：
1.葡萄糖发酵试验：蓝色半固体培养基 对面两 小组，一组大肠杆菌，一组葡萄球菌
2. 吲哚试验：液体培养基，三菌均可。 3. 硫化氢试验：半固体无色培养基。
1）蓝色半固体培养基（溴麝香草酚蓝）
2）无色半固体培养基（醋酸铅）
3 ）基础液体培养基
微生物实验细菌的人工培养及形态学
16
检查
细菌动力鉴别
细菌生化反应鉴别
鉴别培养基
微生物实验细菌的人工培养及形态学
17
检查
三、各种培养基的接种
一）无菌操作
在医疗实践中或微生物试验中防止周围环 境中的微生物污染操作对象，同时防止操作对 象的微生物污染周围环境。
微生物实验细菌的人工培养及形态学
40
检查
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后 再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.接种操作为什么一定要在火焰旁边进行？
答：空气中存在有大量的微生物，而接种灯 的火焰旁能形成一个无菌区域，在这里操作，可 以避免杂菌污染。
微生物实验细菌的人工培养及形态学
2.调配PH：加入缓冲剂，保持PH稳定。
3. 消毒灭菌。
满足a充足的营养物质
b合适的PH值
就可制成基础培养基
c无菌
微生物实验细菌的人工培养及形态学
10
检查
（三）分类：1、按物理性状
《微生物形态》课件
病毒等，帮助医生确诊疾病。
疫苗研发
微生物是疫苗研发的重要来源，许 多疫苗都是通过提取微生物抗原制 成的，如流感疫苗、乙肝疫苗等。
药物治疗
微生物可以用于生产抗生素和其他 药物，如青霉素、头孢菌素等，用 于治疗各种感染性疾病。
在农业领域的应用
1 2
生物防治
利用有益微生物防治植物病虫害，如通过细菌、 真菌等微生物的拮抗作用抑制病原菌的生长繁殖 。
03
微生物的形态特征
细菌的形态与结构
总结词
多样且复杂
详细描述
细菌的形态多样，包括球形、杆形、螺旋形等。结构方面，细菌主要由细胞膜、细胞壁和细胞质构成 ，有些细菌还含有鞭毛、菌毛等附属结构。
真菌的形态与结构
总结词
形态各异，结构简单
详细描述
真菌的形态多种多样，包括单细胞、多细胞及丝状体等类型 。结构上，真菌主要由细胞膜、细胞壁和细胞质构成，有些 真菌的细胞壁上还含有几丁质。
病毒的形态与结构
总结词
无细胞结构，形态单一
详细描述
病毒的形态通常为球形或杆形，由核 酸和蛋白质外壳构成，无细胞膜、细 胞壁等结构。病毒的复制过程需要在 宿主细胞内完成。
04
微生物的观察方法
显微镜观察法
光学显微镜
利用可见光和透镜组合放大物 体，观察微生物的形态和结构
。
暗视野显微镜
通过聚光镜和物镜的组合，使 视野变暗，突出显示微生物。
通过基因编辑技术，科学家可以创建具有特定形态特征的微 生物，进一步探索形态与功能之间的关系，为解决实际问题 提供新的思路和方法。
人工智能在微生物形态学中的应用
人工智能技术可以用于分析微生物的 形态特征，提高识别和分类的准确性 。
疫苗研发
微生物是疫苗研发的重要来源，许 多疫苗都是通过提取微生物抗原制 成的，如流感疫苗、乙肝疫苗等。
药物治疗
微生物可以用于生产抗生素和其他 药物，如青霉素、头孢菌素等，用 于治疗各种感染性疾病。
在农业领域的应用
1 2
生物防治
利用有益微生物防治植物病虫害，如通过细菌、 真菌等微生物的拮抗作用抑制病原菌的生长繁殖 。
03
微生物的形态特征
细菌的形态与结构
总结词
多样且复杂
详细描述
细菌的形态多样，包括球形、杆形、螺旋形等。结构方面，细菌主要由细胞膜、细胞壁和细胞质构成 ，有些细菌还含有鞭毛、菌毛等附属结构。
真菌的形态与结构
总结词
形态各异，结构简单
详细描述
真菌的形态多种多样，包括单细胞、多细胞及丝状体等类型 。结构上，真菌主要由细胞膜、细胞壁和细胞质构成，有些 真菌的细胞壁上还含有几丁质。
病毒的形态与结构
总结词
无细胞结构，形态单一
详细描述
病毒的形态通常为球形或杆形，由核 酸和蛋白质外壳构成，无细胞膜、细 胞壁等结构。病毒的复制过程需要在 宿主细胞内完成。
04
微生物的观察方法
显微镜观察法
光学显微镜
利用可见光和透镜组合放大物 体，观察微生物的形态和结构
。
暗视野显微镜
通过聚光镜和物镜的组合，使 视野变暗，突出显示微生物。
通过基因编辑技术，科学家可以创建具有特定形态特征的微 生物，进一步探索形态与功能之间的关系，为解决实际问题 提供新的思路和方法。
人工智能在微生物形态学中的应用
人工智能技术可以用于分析微生物的 形态特征，提高识别和分类的准确性 。
细菌的形态学检查—抗酸染色技术(微生物检验课件)
基本技能单项训练
抗酸染色技术
诊断活动性肺结核的金标准
• 患者王某，男，50岁，出现低热、咳嗽、咯痰二十余天， X线检查显示肺部有炎症病灶，初步判断为肺部感染。取 病人痰液标本送检验科微生物室检验。病人痰液带血丝。 请问该病人可能是何种病原菌感染？将如何鉴定？
学习目标
能力目标
会操作细菌抗酸染色 能正确观察细菌抗酸染色结果 知道细菌抗酸染色的临床意义 知道细菌抗酸染色的原理、影响因素
• 镜检时应按一定方向和顺序检查全部视野，发现结核分枝 杆菌便可报告结果。
• 检查为阴性结果，应复查3次以上方能报告结果。
作业
抗酸染色有几种操作方法？ 抗酸染色注意事项有哪些？ 比较抗酸染色与革兰染色的区别。
抗酸染色
Thank you!Fra bibliotek• 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，它包围在外
面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来
促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性
脱色剂脱色，故名抗酸染色(齐-尼氏抗酸染色法)。
实验材料
细菌：卡介苗 染液：石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美兰溶液 其它：接种环、酒精灯、载玻片等
染色步骤
1、细菌涂片标本的制备
涂片
干燥
2、染 色
固定
染色步骤
• 1）初染：用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高 处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应 再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。
• 2）脱色： 3%盐酸酒精脱色30秒至1分钟，用水冲洗。 • 3）复染：用碱性美兰溶液复染1分钟，用水冲洗后用吸水纸吸干。
素质目标
抗酸染色技术
诊断活动性肺结核的金标准
• 患者王某，男，50岁，出现低热、咳嗽、咯痰二十余天， X线检查显示肺部有炎症病灶，初步判断为肺部感染。取 病人痰液标本送检验科微生物室检验。病人痰液带血丝。 请问该病人可能是何种病原菌感染？将如何鉴定？
学习目标
能力目标
会操作细菌抗酸染色 能正确观察细菌抗酸染色结果 知道细菌抗酸染色的临床意义 知道细菌抗酸染色的原理、影响因素
• 镜检时应按一定方向和顺序检查全部视野，发现结核分枝 杆菌便可报告结果。
• 检查为阴性结果，应复查3次以上方能报告结果。
作业
抗酸染色有几种操作方法？ 抗酸染色注意事项有哪些？ 比较抗酸染色与革兰染色的区别。
抗酸染色
Thank you!Fra bibliotek• 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，它包围在外
面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来
促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性
脱色剂脱色，故名抗酸染色(齐-尼氏抗酸染色法)。
实验材料
细菌：卡介苗 染液：石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美兰溶液 其它：接种环、酒精灯、载玻片等
染色步骤
1、细菌涂片标本的制备
涂片
干燥
2、染 色
固定
染色步骤
• 1）初染：用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高 处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应 再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。
• 2）脱色： 3%盐酸酒精脱色30秒至1分钟，用水冲洗。 • 3）复染：用碱性美兰溶液复染1分钟，用水冲洗后用吸水纸吸干。
素质目标
微生物学检验绪论和细菌形态结构PPT课件
课件制作 陆曙梅
芽孢电镜图
课件制作 陆曙梅
芽孢革兰染色图
课件制作 陆曙梅
球菌
课件制作 陆曙梅
杆菌
课件制作 陆曙梅
弧菌
螺菌
螺形菌
课件制作 陆曙梅
溶菌酶作用点
肽聚 糖
M
M
M
M
M
M
G
G
G
G
G
G
M
M
M
M
M
M
G
G
G
G
G
G
G+菌肽聚糖 青霉素作用点
G－菌肽聚糖
G+菌和G-菌细胞壁比较
磷壁酸
脂多糖
G+菌细胞壁
课件制作 陆曙梅
细菌在自然界分布
土壤中的细菌：有芽孢的致病菌引起创伤感染 水中的细菌：水中的病原菌主要引起消化道传染 病 水、食品卫生细菌学检测指标： 细菌总数＜100个/ml；大肠杆菌3个/ml 空气中的细菌：空气中的病原菌引起呼吸道传染 病；空气中的细菌可引起培养基、生物制品的污 染。
课件制作 陆曙梅
课件制作 陆曙梅
菌群失调常见菌
球菌：金黄色葡萄球菌、粪肠球菌 杆菌：以革兰阴性菌为主，如铜绿假单 胞菌、大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠 杆菌等 厌氧菌 真菌：白色念珠菌、曲霉菌、毛霉菌等
课件制作 陆曙梅
实验室检查原则
细菌总数测定 直接计数法 电子计数法 分离划线半定量法 各部位正常菌群的检测
课件制作 陆曙梅
细菌在正常人体的分布
有细菌寄居的部位 皮肤、口腔、呼吸道、胃肠道、泌尿生殖 道、眼结膜 正常人体无菌的部位 血液、膀胱、子宫腔以及其它组织器官内
课件制作 陆曙梅
肠道中的正常菌 群
芽孢电镜图
课件制作 陆曙梅
芽孢革兰染色图
课件制作 陆曙梅
球菌
课件制作 陆曙梅
杆菌
课件制作 陆曙梅
弧菌
螺菌
螺形菌
课件制作 陆曙梅
溶菌酶作用点
肽聚 糖
M
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G
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G
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G+菌肽聚糖 青霉素作用点
G－菌肽聚糖
G+菌和G-菌细胞壁比较
磷壁酸
脂多糖
G+菌细胞壁
课件制作 陆曙梅
细菌在自然界分布
土壤中的细菌：有芽孢的致病菌引起创伤感染 水中的细菌：水中的病原菌主要引起消化道传染 病 水、食品卫生细菌学检测指标： 细菌总数＜100个/ml；大肠杆菌3个/ml 空气中的细菌：空气中的病原菌引起呼吸道传染 病；空气中的细菌可引起培养基、生物制品的污 染。
课件制作 陆曙梅
课件制作 陆曙梅
菌群失调常见菌
球菌：金黄色葡萄球菌、粪肠球菌 杆菌：以革兰阴性菌为主，如铜绿假单 胞菌、大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠 杆菌等 厌氧菌 真菌：白色念珠菌、曲霉菌、毛霉菌等
课件制作 陆曙梅
实验室检查原则
细菌总数测定 直接计数法 电子计数法 分离划线半定量法 各部位正常菌群的检测
课件制作 陆曙梅
细菌在正常人体的分布
有细菌寄居的部位 皮肤、口腔、呼吸道、胃肠道、泌尿生殖 道、眼结膜 正常人体无菌的部位 血液、膀胱、子宫腔以及其它组织器官内
课件制作 陆曙梅
肠道中的正常菌 群
细菌的形态学检查—革兰染色技术(微生物检验课件)
制备涂片标本→染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色
革兰染色操作步骤
滴水 取菌 涂片 固定 结晶紫（1min）
乙醇脱色 水洗 碘液（1min） 水洗
水洗 复红0.5min 水洗 干燥 镜检
革兰染色操作步骤
革兰染色操作步骤
革兰染色结果
革兰阴性杆菌
革兰阳性链球菌
革兰染色结果
革兰染色结果
影响革兰染色结果的因素
复合物结合牢固，另外，其等电点较低，结合的碱 性染料多而牢固，因而染成紫色。
结晶紫初染
革兰染色操作步骤
碘液媒染 乙醇脱色
复红复染
全部紫色
全部紫色
G- 菌无色 G+ 菌紫色
G- 菌红色 G+ 菌紫色
革兰染色各步骤时细菌的颜色
涂片制备
❖ 涂片： ❖ 干燥： ❖ 固定：通常用火焰加热固
定，将已干燥ห้องสมุดไป่ตู้涂片在火 焰中迅速通过3次，以手 背皮肤接触玻片不烫为佳。
基本技能单项训练
革兰染色技术
•
患者王某，男，63岁，入院后经气管插管手术48h后
出现发热、咳嗽、咯痰，X线检查显示有较新炎症病灶，初
步判断为肺部感染。取病人痰液标本送检验科微生物室检
验。病人痰液呈砖红色似果酱样，粘稠。请问该病人可能
是何种病原菌感染？将如何鉴定？
革兰染色的临床意义
可将细菌分为两大类，是对细菌进行鉴定的 最基本的检验技术，可将细菌分为革兰阳性 菌和革兰阴性菌。
细菌革兰染色原理
通透性机制： G+菌细胞壁结构致密，脂类含量少，乙醇不易
透入，反而可使细胞壁脱水形成一道屏障，阻止 染料从细胞内渗出；G-菌细胞壁较疏松，含脂类 物质多，易被乙醇溶解，使其通透性增大，细胞 内的结晶紫―碘复合物易被溶解渗出易脱色。
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