不同pH值条件下姬氏染液对血涂片染色效果的影响

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血液分析仪试剂作用原理及对检测结果的影响

一、三分类血液分析仪试剂作用原理及对检测结果的影响1、稀释液1.1 稀释液作用原理a) 稀释血液细胞，防止血液细胞聚集和粘连；b) 保持稳定的pH、ρ、OS等理化指标：根据仪器设计理念不同，稀释液的理化指标有很大的差异，不同的仪器在用电阻法原理(图1)测量样本时，设定的脉冲信号阈值不尽相同（稀释液区分为高渗、等渗、低渗），因此同一份样本在不同仪器上直方图fl不同。

以RBC直方图为例，灵敏度高的仪器配以理化指标稳定且范围精确的稀释液，可以将横坐标控制在60-150fl，反之，横坐标将会延伸到30-200fl甚至更宽，直方图会发生左移或者右移。

图11.2 稀释液对检测结果的影响稀释液是血液分析仪所有的测量环节都需要用到的试剂，稀释液的理化指标不合格,对仪器所有的检测结果都会造成影响。

常见影响有PLT本底高，WBC分类不好，HCT漂移（HCT是检验试剂质量的重要指标之一），由于MCV、MCH、MCHC是计算参数，因此对MCV、MCH、MCHC的检测结果也会造成严重影响。

2、溶血素2.1 溶血素作用原理a) 溶解红细胞，以利于白细胞计数：在以电阻法计数的三分类血液分析仪中，红细胞体积和白细胞体积有重合的区域，而且红细胞的个数是白细胞个数的近一千倍，因此在对白细胞进行电阻法计数时，必须加入溶血素，破坏掉红细胞，才能准确地对白细胞进行计数。

b) 作用于白细胞膜，可使白细胞膜穿孔，胞浆流失（检测内核），胞浆流失后的白细胞中，因为只剩下细胞核，淋巴细胞最小，单核细胞稍大，中性粒细胞反而以大细胞形式存在。

这样在电阻法对白细胞进行三分类的白细胞直方图上淋巴细胞在图形最左边区域，单核细胞在中间区域，粒细胞在直方图最右边区域。

（如图2）图2c) 检测血液中血红蛋白浓度：目前国际血液标准委员会(ICSH)推荐的测试血液中血红蛋白的参考方法是氰化高铁(HiCN)法，所以大多数血液分析仪均采用氰化高铁法检测血红蛋白。

当稀释的血液加入溶血素后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血素当中的氰化钾反应，形成氰化高铁血红蛋白溶液，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在530-550nm）下比色，吸光度的变化与样本中血红蛋白含量成正比。

姬姆萨染液使用说明书

PBS 前片子不要干，否则沉渣很多，导致染色不均；
3 染色：具体染色时间视细胞而定，一般 3~30min，染色时最好在镜下观察；
4 水洗：冲片时注意控制水流，太小会有细小的染液渣子附着，太大则有可能加重脱片。染
过片子也还可以修饰弥补。如果染色过浅，可复染；过深可用乙醇瞬时脱色。
5 镜检：显微镜下观察。
姬姆萨染液
500mL
说明书
1份
1
染料美蓝或天青结合，染紫蓝色；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色。
pH 对细胞染色有影响。细胞各种成分均含蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电
荷随溶液 pH 而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境
中负电荷增多，易与天青结合，染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用载
结果
细胞核被染成紫红色或紫蓝色，而细胞质则被染成浅红色。
注意事项
1. 染色工作液宜现用现配，旧染液染色效果不佳。工作液保存时间不宜超过 48h；
பைடு நூலகம்
2. 姬姆萨对 pH 极敏感，因此，PBS 的 pH 要准确，否则染色效果不佳。如用染色缸进行染
色时，随染色时间的延长，在染液表面常形成一层氧化膜（发亮）易附着在玻片上形成污秽，
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姬姆萨染液
姬姆萨染液（Giemsa Staining Solution）
姬姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。嗜酸性颗粒为
碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性
且不易除掉，尤其用的不是现配试剂时，更易于形成氧化膜。染色前应先用小片滤纸刮除液

血涂片标本瑞氏_姬姆萨混合染色方法的探讨

文章编号:1009-8488(2001)04-0217-01血涂片标本瑞氏-姬姆萨混合染色方法的探讨Study on Wright-Giemsa dying of blood-smear samples朱辛为1,李质馨2,王晓玉1,郭素红1,鲁质博2,刘晓东2(第四军医大学吉林军医学院:1.医学实验技术教研室,2.组织胚胎学教研室,吉林吉林132013)关键词:血涂片;标本;混合染色中图分类号:R446-39文献标识码:B为了使学员在组织学实验教学中观察到效果好、结构清晰的各种血细胞,选择良好的血涂片标本染色方法是十分重要的。

以往临床上常用瑞氏或姬姆萨两种染色方法,其主要特点为操作比较简单、染色时间也较短,但易受其pH、温度、时间等影响,往往达不到理想的教学要求。

笔者结合教学实践,经过反复实验认为,应用瑞氏-姬姆萨混合染色法制作教学血涂片标本,较单用一种染色方法效果好。

1材料与方法1.1材料染液配制:瑞氏染液 5.0ml,姬姆萨原液1.0ml,加磷酸盐缓冲液6.0ml(pH6.4~6.9)混合,如有沉淀生成,则应重新配制。

1.2方法新鲜血涂片自然干燥后,用甲醇固定2~3min,晾干后用瑞氏-姬姆萨混合液加等量磷酸盐缓冲液染色5~10min,蒸馏水反复冲洗,吹干;95%乙醇分色10~30s,无水乙醇脱水10~20s,二甲苯透明,中性树胶封片,显微镜下观察。

2结果红细胞呈桔红色;中性粒细胞核蓝色,颗粒收稿日期:2001-06-21;修回日期:2001-08-20作者简介:朱辛为(1959-),女(汉族),吉林省吉林市人,实验师,本科.呈紫色;嗜酸性粒细胞核呈蓝色,颗粒呈红色或桔红色;嗜碱性粒细胞核呈暗蓝紫色,颗粒呈深蓝黑色;淋巴细胞核深蓝紫色,胞质天蓝色;单核细胞核蓝紫色,胞质灰蓝色。

其中以嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞颗粒最清晰。

3讨论血细胞形态结构的观察,是组织学实验教学中较重要的内容,血涂片染色的质量,直接影响着教学效果。

姬姆萨原液使用说明书 Giemsa stain

北京索莱宝科技有限公司姬姆萨原液使用说明书Giemsa stain货号：G1015规格：100ml/500ml保存：本产品室温保存有效期至少三年。

工作液现用现配。

产品简介：姬姆萨染液是由天青与伊红组成。

各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。

嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，被染成粉红色；嗜碱性颗粒如细胞核蛋白或淋巴细胞胞浆为酸性物质，与碱性染料美蓝或天青结合，被染成紫蓝色；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，呈淡紫色。

各类成分由于自身特性与姬姆萨染液中不同物质结合呈现不同颜色从而得以区分。

本姬姆萨染色液以进口的姬姆萨色素染料为原料配制而成，可将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞染色图像。

主要用于显示血涂片中各种血细胞形态大小差异，染色效果好、染色力强、着色清晰。

染色步骤：（仅供参考）取姬姆萨原液1ml，加入0.01M磷酸盐缓冲液（PH6.8）9ml充分混匀，即为姬姆萨工作液，现用现配。

1.按常规方法制备血涂片，待血膜干后，用甲醇固定2～3min。

制备的血涂片需厚薄适宜，分布均匀，以免影响染色结果。

2.将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加姬姆萨工作液使其覆盖全部血膜，室温染色15～30min。

3.用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，晾干后镜检。

注意事项：1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.原液稀释后可能会出现少量沉淀，不影响使用；染色结束用水洗净即可。

3.如果染色过浓或者过淡，请自行调整染色时间或姬姆萨工作液浓度。

4.姬姆萨原液采用常规方法配制并用滤纸过滤，保存时不要接触到水，否则时间长了会失效。

5.PH对细胞染色有影响。

染色用载玻片必须清洁，无酸碱污染以免影响染色结果。

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染色酸碱性对厚血膜中疟原虫镜检的影响

臻塑熊凰．染色酸碱性对厚血膜中疟原虫镜检的影响董良菊(江苏省睢宁县李集中心卫生院，江苏徐州221221)脯要]目的：探讨染液的酸碱．挂对厚血膜中疟原虫形态的影响。

方法：利用疟疾患者的血，推制血片，用酸廊1生不同的染液染制后油镜检测．结果：染液的酸碱度不同，染出的玻片的外观不同，厚血膜中疟原虫形态不同。

结论：不同酸碱度的染液染出的血片中疟原虫形态差异很大，我们要认真鉴荆。

联镧阙]疟原虫；酸哦j生疟原虫是能引起疟疾的一种孢子虫，我国五大寄生虫病之一。

寄生y-)t,体的疟原虫有间日疟原虫，--B疟原虫，恶性疟原虫和卵形疟原虫。

我国常见的为间日疟原虫和恶性疟原虫。

分别引起间日疟和恶性疟。

疟疾的传播媒介是按蚊，人是疟原虫的中间宿主。

疟原虫寄生于人体的肝细胞和血液的红细胞内，前者称红细胞外期，后者为红细胞内期。

疟疾发作的临床症状是由红细胞内期引起的。

末梢血液中查到疟原虫是疟疾诊断的三条标准之一。

疟原虫的鉴别主要根据红细胞中虫体的形态特征，大小及被寄生的红细胞的变化，但各种疟原虫除疟色素外均无色，所以必须染色后才能显示结构，分辨形态。

因此染制一张酸碱性合适，深浅适当的血片是疟原虫的镜检的重要环节。

以前所用的试剂用吉氏染粉配制，使用时1：20稀释，现稀释现用，—般都是稍偏碱。

现在多用省统一配发的姬氏试剂盒，使用时1：10稀释，染色后稍偏酸。

两种染液染出的玻片在显}我镜下看到的疟原虫有很大差别，特别是厚血膜。

因厚血膜原虫较密集，因而掌握不同染色程度的玻片上厚血膜中疟原虫的形态特点对疟原虫镜检意义重大。

我也曾找过有没这方面的报道，但没找到，所以把自己的，潦写出来与同仁们共同探讨。

1材料与方法1．1主要材料与试剂清洁为由迹的一端有磨砂的载玻片，边缘整齐的推片。

甲醇，吉氏染粉配制的染液和稀释液及省统一配发的吉氏染液试剂盒。

12研究对象疟疾病人的血采制的血片。

1．3采血制片自病人无名指尖采血，厚血膜的血量约为火柴头大小(4～5u1)，滴在玻片的右1屉处，以推片的一角涂成直径约0．8—1c m的圆形厚血膜，厚度以能清晰映出下面报刊上的铅字为宜：薄血膜的血量为厚血膜的1／4，滴于玻片中央，立即用边缘整齐光滑的推片与玻片之间成30一40度角平直向前推成薄血膜，厚度以镜下只见一层均匀紧密排列的红细胞为宜。

EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响

EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响曹加兴;赵玺龙;字灿忠;郑艳梅;王力【摘要】Objective To discuss the effects of Ph value changes in EA50 staining solution on the staining of exfoliated cervical cells, and to seek ways to improve the quality of Pap staining. Methods EA50 staining solution was treated with 1 mol/L Na2 CO3 solution and 1 mol/L HAC solution respectively, and the Ph values of the two kinds of staining solutions were determined. Observation was made in the staining results of exfoliated cervical cells in these EA50 staining solutions of different Ph values. Results In the solution of low Ph value, the staining of the cervical cells was not bright - colored, and the pigmentation of cytoplasm was abnormal with serious dyeing of red and hazy contrasting in coloring of red, yellow and green; In the solution of high Ph value, the staining was not bright - colored either, and the pigmentation of cytoplasm was abnormal with serious dyeing of green and hazy contrasting in coloring of red,yellow and green; In the solution of Ph 4. 0,the staining was bright - colored, and the pigmentation of cytoplasm was normal with clear contrasting in coloring of red, yellow and green. Conclusion The changes of Ph value in EA50 staining solution have obvious influence on effects of the Pap staining. If the Ph value of the staining solution is kept at about 4.0,the quality of Pap staining can be significantly improved.%目的探讨EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响,寻求提高巴氏染色质量的方法.方法用1 mol/L Na2CO3和1 mol/L HAC分别处理EA50染液,测定其pH值,观察宫颈脱落细胞在不同pH值EA50染液中染色的效果.结果宫颈脱落细胞在低pH值染液中着色不鲜艳,细胞质染色异常,表现为红染严重,红、黄、绿着色对比不清晰;宫颈脱落细胞在高pH值染液中着色不鲜艳,细胞质染色异常,表现为绿染严重,红、黄、绿着色对比不清晰;宫颈脱落细胞在pH值4.0左右染液中细胞着色鲜艳,细胞质染色正常,红、黄、绿着色对比清晰.结论 EA50染液pH值变化对巴氏染色效果有明显影响,稳定染液的pH值在4.0左右可显著提高巴氏染色质量.【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2012(022)006【总页数】3页(P608-610)【关键词】EA50染液;pH值;巴氏染色;宫颈脱落细胞【作者】曹加兴;赵玺龙;字灿忠;郑艳梅;王力【作者单位】665100,云南,普洱,解放军62医院检验病理科;成都军区昆明总医院病理科;665100,云南,普洱,解放军62医院检验病理科;665100,云南,普洱,解放军62医院检验病理科;成都军区昆明总医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R446巴氏染色是人体和动物脱落细胞学染色最常用的染色方法之一，广泛应用于呼吸系统、泌尿系统及女性生殖系统等脱落细胞学的诊断及微生物感染的鉴定等领域，特别在宫颈脱落细胞学诊断方面更具有独到之处〔1〕。

《临床检验基础》课件——第四讲血涂片的染色理论

图1-4 瑞氏染色原理示意图
试剂
01
02
03
Wright染液
瑞氏染粉0.1g, 甲醇60.0ml
甲醇：
有强大的脱水力，可将细胞固定为一定形态。增加细胞与染料接触表面积，提高对染料的吸附作用，增强染色效果。
磷酸盐缓冲液
（PBS，pH 6.46.8）：磷酸二氢钾（无水）0.3g，磷酸氢二钠（无水）0.2g, 蒸馏水加到1000ml。
临床检验基础
第四讲血涂片染色
目录
1
染色
2
观察
染色
பைடு நூலகம்
染色方法
01
02
03
瑞氏染色法
姬姆萨染色法
-
瑞氏吉姆萨染色
01Part One 瑞氏染色法
染料组成
1
碱性染料
为阳离子染料，能接受质子，细胞核的染料。如亚甲蓝、天青。能结合酸性物质并染色，如淋巴细胞及嗜碱性粒细
先将瑞特染料和吉姆萨染料充分研磨混匀，甲醇溶解倒入容器中，未溶解完的继续加入甲醇研磨，重复多次，最后把染液加至500ml。
染色方法
血片加滴加染液5滴，并立即将染液盖满血膜， 2min后加入pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液（同瑞氏染液） 10滴，10min后用流水冲洗干净，待干后镜检。
方法学评价
染色方法
A
B
C
D
用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。
加瑞氏染液覆盖血膜，固定
1min。
滴加等量或稍多的缓冲液，混匀，染色510分钟。
用清水冲洗，待干后镜检。。
质量控制
血膜要干透后才能染色，否则染色时易脱落. 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关，一般染液淡、

革兰染色涂片检查及结果影响因素浅析

革兰染色涂片检查及结果影响因素浅析革兰染色涂片检查是一项常规的微生物学实验技术，常用于细菌分类和鉴定。

本文将从革兰染色涂片检查的原理、实验步骤和结果影响因素三个方面进行浅析。

一、原理革兰染色涂片检查是一种常用的细胞壁染色方法，通过革兰染色剂的着色，根据细胞壁的结构特征，将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。

革兰氏阳性菌有较厚的细胞壁，革兰氏染色后呈现紫色，常见的包括链球菌、葡萄球菌等。

而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，革兰氏染色后呈现红色，常见的包括大肠杆菌、鲍曼不动杆菌等。

二、实验步骤1. 在玻璃片上涂取待检测细菌液体。

2. 用火焰将钢制火焰灼杯内的革兰染色液烧热至滚沸。

3. 用长枪头平行于涂片表面晕开革兰染色液，待液滴朝干垂直方向流过锡箔纸后，均匀晕开。

4. 在煤油火焰上加热，使革兰染色液蒸发干燥。

5. 将涂片沾上滴布，在沸水上蒸气加热8-10秒钟。

6. 用滤纸或干液棒沾取水分浸润的涂片，清洗过秤。

7. 在显微镜下观察菌落形态和革兰染色结果。

三、结果影响因素1. 培养情况：细菌在培养基上的生长情况会影响革兰染色涂片结果，如过度生长或生长不足都会导致结果出现误差。

2. 涂片技术：涂片的均匀性和涂片干燥程度会影响结果准确性，如涂片干燥不充分或涂片上细菌分布不均匀等，都会影响显微镜下观察的革兰染色结果。

3. 染色液的质量：革兰染色液的质量会直接影响结果的准确性，所以选择质量好的染色液很有必要。

4. 显微镜和操作人员：显微镜的放大倍数和仪器质量会影响观察结果的准确性，同时操作人员的操作技术也会影响最终结果是否准确。

总之，对于革兰染色涂片检查，要严格按照实验步骤操作，严格控制实验环境和操作技术，夯实基础知识，才能准确判断细菌的革兰氏染色结果。

2020厦门卫生事业单位备考：血涂片的染色方法

2020厦门卫生事业单位备考：血涂片的染色方法目前，临床对于细胞染色的方法有瑞氏染色法以及吉姆萨染色法，常用于细胞形态检查以及寄生虫检查，那么关于它们的染色原理以及步骤是需要我们重点掌握的。

首先我们来学习瑞氏染色，一个染色的好坏决定片子的可看性，毕竟形态学检查是需要染色的辅助，才能便于我们检验人员的辨认细胞，判断患者病情。

对于瑞氏染色，我们的过程是：涂片--干燥--瑞氏染液A液--瑞氏染液B液--水洗--干燥--镜检，了解了大致步骤我们来具体学习。

1.原理：利用物理吸附作用和化学亲和性作用，由于各细胞成分的化学性质不同，所以对染料的亲和力也不同。

瑞士染液是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合材料，利用甲醛作为溶剂，将伊红（E）和美蓝（M）在溶液中解离，使得细胞分别按照其自身化学性质与所带离子利用物理吸附能力与所对应的有色物质结合而着色。

一般情况下，细胞内碱性物质与酸性染料伊红结合为红色，细胞内酸性物质与碱性染料美蓝结合为蓝色。

2.组成：A液是瑞氏染料、甲醇、甘油；B液是磷酸盐缓冲液。

3.步骤：干燥血涂片后，我们先滴加A液，使染液完全覆盖整个血膜，染色1min；再将B液滴加至A液上，滴加量为A液的2-3倍，利用洗耳球吹匀使其充分混合，染色3-10min，然后使用流水冲洗，干燥后镜检。

4.注意事项：①在涂片结束后需要等待干燥防止染色时细胞脱落。

②冲洗时需要利用流水冲洗，不可先倒掉染色后冲洗，否则会导致染液中的颗粒附着在玻片上影响镜检。

③对于染色过浅可以进行复染，染色过深可以进行冲洗和浸泡，也可以使用甲醛进行脱色冲洗。

④新配置的染液偏碱，需要放置室温或者37°下贮存一段时间，存放时间越久效果越好。

⑤甲醇容易挥发和氧化，所以染液存放时需要将容器塞紧严实。

就目前而言，瑞氏染色是临床最常用且简单的方法，但是传统的瑞氏染色过程较为繁琐，故而推出新的染色方法即吉姆萨染色方法，对于吉姆萨染色方法原理其实与瑞氏染色并无太大出入，但是在某些地方它们各自也有各自的优缺点，那么我们接下来看一看关于吉姆萨染色法。

Ehrlich苏木精染液pH值变化对组织染色的影响

Effect of pH Value Changes in Ehrlich Haematoxylin Staining Solution on the Staining of the Tissue Slices WANG Li， YANG Julun， ZHAO Wenxing， CHEN Yue， SONG Shuling， LI Tao（ Department of Pathology， Kunming General Hospital of Chengdu Military Area Command， Kunming 650032， China） Abstract］ Objective To investigate the effects of pH value changes in Ehrlich haematoxylin staining solution on the ［ tissue staining and to discuss techniques to improve the quality of HE staining． Methods Ehrlich haematoxylin staining soluthen pH values were determined． The tistion was treated with 2 mol / L NaOH solution and 2 mol / L HCl solution respectively， sue staining effects at different pH values in Ehrlich haematoxylin staining solution were observed． Results The karyon of the tissue slices in low pH values staining solution was blue or navy blue， clearly against its background， and the staining of karyon and cytoplasm contrasted sharply without any haematoxylin residues clung to the tissue slices； on the other hand， the karyon of not clearly agaisnt its background， and the the tissue slices in high pH values staining solution was grey blue or purple black， with many haematoxylin residues clung to the tissue slices． Conclusion staining of karyon and cytoplasm contrasted hazily， The changes of pH value in Ehrlich haematoxylin staining solution have great effect on the HE staining of the tissue slices， and keeping the pH value of staining solution in a low level can improve the quality of HE staining．［ Key words］ Ehrlich haematoxylin staining solution； pH value； Staining quality

血涂片制作实验报告

血涂片制作实验报告血涂片制作实验报告一、引言在医学领域，血涂片是一项常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和成分。

本实验旨在探究血涂片制作的方法和步骤，并观察不同染色剂对细胞的影响。

二、材料与方法1. 实验材料：- 血液样本- 血涂片- 血涂片玻璃片- 血涂片染色剂（如吉姆萨染色液、伊昔洛尔染色液）- 显微镜2. 实验步骤：1）取一滴新鲜的血液样本，放在血涂片玻璃片的一端。

2）将另一片玻璃片倾斜放在血涂片上，使血液沿着玻璃片的一侧均匀涂开。

3）将血涂片晾干，避免阳光直射。

4）将干燥的血涂片，分别放入吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液中浸泡，按照染色液说明书上的时间要求。

5）取出血涂片，用水轻轻冲洗，使多余的染色剂洗掉。

6）将血涂片晾干，然后放置在显微镜下观察。

三、结果与讨论1. 血涂片制作过程中，需要注意的细节：- 血液样本应新鲜，避免血液凝固。

- 血涂片制作时，玻璃片的倾斜角度要适中，以保证血液均匀涂开。

- 血涂片晾干时，应避免阳光直射，以免影响后续观察。

2. 不同染色剂对细胞的影响：- 吉姆萨染色液：吉姆萨染色液主要用于染色细胞核，使其呈现暗蓝色或紫色。

这种染色剂对红细胞、白细胞和血小板的染色效果较好，能清晰地显示细胞核的形态和细胞数量。

- 伊昔洛尔染色液：伊昔洛尔染色液主要用于染色红细胞，使其呈现橙红色。

这种染色剂对红细胞的染色效果较好，能够清晰地显示红细胞的形态和数量。

3. 观察结果：- 在吉姆萨染色液中染色的血涂片下，可以清晰地观察到红细胞、白细胞和血小板的细胞核，细胞核呈现暗蓝色或紫色。

- 在伊昔洛尔染色液中染色的血涂片下，可以清晰地观察到红细胞的形态和数量，红细胞呈现橙红色。

4. 结果分析：- 吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液分别适用于不同的细胞成分的观察和分析。

- 吉姆萨染色液适用于细胞核的染色，可以帮助研究者观察和计数细胞核的数量。

- 伊昔洛尔染色液适用于红细胞的染色，可以帮助研究者观察和计数红细胞的数量。

diffquik染色原理

diffquik染色原理Diff-Quik染色原理引言Diff-Quik是一种常用的染色技术，主要用于细胞学和组织学研究中的涂片染色。

该技术通过使用一系列染色试剂，将细胞核和细胞质染色成不同的颜色，从而使细胞结构更加清晰可见。

本文将介绍Diff-Quik染色的原理及其应用。

一、Diff-Quik染色原理Diff-Quik染色的原理基于细胞的酸碱性差异以及细胞结构的吸附性能。

具体步骤如下：1. 涂片固定：将待染色的细胞涂片经过适当的固定处理，固定细胞的形态和结构，防止其在染色过程中发生变形或破损。

2. 染色试剂：将涂片依次浸入三种染色试剂中，分别为嗜酸性染色剂、嗜碱性染色剂和背景染色剂。

嗜酸性染色剂主要染色细胞核，嗜碱性染色剂主要染色细胞质，背景染色剂则用于清晰显示细胞间的背景。

3. 染色时间控制：不同染色试剂的浸染时间需要控制得当，以保证染色效果的最佳表现。

一般来说，嗜酸性染色剂和嗜碱性染色剂的浸染时间较短，而背景染色剂的浸染时间较长。

4. 脱色：经过染色后，涂片需要进行脱色处理，以去除多余的染色试剂，使细胞结构更加清晰可见。

5. 封片：染色完成后，用透明的封片剂将涂片封装，以保护细胞结构并固定染色效果。

二、Diff-Quik染色的应用Diff-Quik染色技术广泛应用于细胞学和组织学研究中，具体包括以下几个方面：1. 细胞分类与计数：Diff-Quik染色可以使细胞的核和细胞质呈现出不同的颜色，便于观察和分类。

通过对染色后的细胞进行计数，可以获得细胞数量的信息，用于疾病的诊断和治疗。

2. 细胞形态分析：Diff-Quik染色后的细胞结构清晰可见，可以观察到细胞的形态特征，如核的形状、大小和细胞质的颜色等。

这些信息有助于研究细胞的发育、功能和病理变化。

3. 细胞核和细胞质的比例计算：通过Diff-Quik染色，可以定量计算细胞核和细胞质的比例，从而了解细胞的代谢状态和细胞功能的变化。

4. 细胞核的DNA含量分析：Diff-Quik染色后，细胞核的颜色深浅与细胞核内的DNA含量呈正相关。

瑞-姬氏混染在Cr(Ⅵ)诱导的HepG2细胞微核试验中的应用

瑞-姬氏混染在Cr(Ⅵ)诱导的HepG2细胞微核试验中的应用边寰锋;安飞云;钟才高;廖春华【摘要】背景与目的:将瑞-姬(Wright-Giemsa)氏混染法用于Cr(Ⅵ)诱导的HepG2细胞微核试验,探讨瑞-姬氏混染配比浓度和不同染色时间对染色效果的影响.材料与方法:以瑞-姬氏混染对HepG2细胞进行染色,采用不同的染液配比和染色时间,观察其对染色效果的影响.结果:3:1瑞-姬氏混染3-5 min可以获得较瑞氏或姬氏单一染色更好的染色效果.结论:瑞-姬氏混合染色法可应用于微核试验中的细胞染色,并可获得良好的染色效果.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2007(019)002【总页数】3页(P146-148)【关键词】瑞氏染色;姬氏染色;瑞-姬氏混染;双核;HepG2细胞【作者】边寰锋;安飞云;钟才高;廖春华【作者单位】中南大学公共卫生学院卫生毒理学系,湖南,长沙,410078;中南大学公共卫生学院卫生毒理学系,湖南,长沙,410078;中南大学公共卫生学院卫生毒理学系,湖南,长沙,410078;江西省疾病预防控制中心,江西,南昌,330029【正文语种】中文【中图分类】Q355微核是在细胞分裂过程中由于纺锤体功能受损，在有丝分裂后期滞留于子细胞胞质中的染色体或染色体断片，微核的检测可用于评价化学物质对染色体的损伤。

在微核的检测过程中，细胞染色的质量对微核的观察有重要的影响。

目前常用的是姬姆萨（Giemsa）染色法，虽然胞核着色清楚，但胞浆着色较淡，有时细胞边界不清，不利于微核的正确辨认。

考虑到瑞氏（Wright）染料对胞浆染色较好，能否结合瑞氏、姬氏染料的染色特点，控制适当的比例与染色时间，获得满意的染色效果。

为此我们在评价六价铬[Cr（Ⅵ）]诱导肝癌细胞株HepG2细胞DNA损伤过程中，采用瑞-姬（Wright-Giemsa）氏混染法用于微核的检测，探讨瑞-姬氏混染配比浓度和不同染色时间对染色效果的影响。

瑞氏-姬姆萨染液使用说明

瑞氏-姬姆萨染液编码名称规格单位北京华越洋生物GT79355 瑞氏-姬姆萨染液100ml 瓶瑞氏-姬姆萨染液说明：华越洋瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液，兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点，主要应用于血液和骨髓涂片染色。

各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同，因此，标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。

姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，着色清晰，色泽纯正，但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。

瑞氏染色对细胞核着色程度适中，细胞核结构和色泽清晰艳丽，对核结构的识别较佳，但对胞浆着色较差，故采用瑞氏姬姆萨混合染色，具有染色效果好，对比清晰，操作简便等特点。

瑞氏-姬姆萨染液操作说明：华越洋瑞氏-姬姆萨染液可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。

具体方法请根据自己需求参考既有文献，瑞氏-姬姆萨染液以涂片为例，仅供参考。

1、取涂片、自然干燥。

2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3 滴覆盖整个标本涂片，染1-2 分钟。

3、滴加等量0.01M磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8），轻轻晃动玻片, 与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀，染色3-5 分钟。

4、水洗、吸干、镜检。

5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明，细胞核着色呈深浅不同的紫红色，胞浆呈浅红色，胞浆中颗粒区分明显。

瑞氏-姬姆萨染液注意事项：1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。

冲洗时间不能过久，以防脱色。

3、染色对pH 十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。

4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。

染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

瑞氏-姬姆萨染液相关染色液：名称规格名称规格中性红染色液(0.33%）500ml结晶紫水溶液(0.1%)100ml中性红染色液(0.5%）500ml核固红染色液(0.1%)100ml中性红染色液(0.1% 常规染色)100ml天狼星红染色试剂盒2*50mLTTC染色液（0.4%）500ml0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液100mLMasson三色染色试剂盒7×50ml茜素红S染色液(1%,pH4.2)100mL普鲁士蓝染色试剂盒2*50ml0.2%核固红染色液100ml尼氏染色液(焦油紫法)2*100ml改良Lillie-Mayer苏木素染色液100ml吕氏碱性美蓝染色液（0.4%）100ml改良Lillie-Mayer苏木素染色液500ml亮绿SF染色液100ml Ehrlich苏木素染色液100ml溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液100ml Ehrlich苏木素染色液500ml饱和油红O染色液100ml苏木素伊红混合染色液(一步法)100mlVan Gieson 染色液50ml苏木素伊红混合染色液(一步法)500mlVan Gieson 染色试剂盒3×50ml改良Harris苏木素染色液100mlSchiff试剂50ml改良Harris苏木素染色液500ml茜素红S染色液（0.2%）100ml Mayer苏木素染色液100ml煌焦油蓝染色液100ml Mayer苏木素染色液500ml2% TTC染色液100ml苏木素伊红(HE)染色液2×100ml革兰氏染色液试剂盒4×10ml苏木素伊红(HE)染色液2×500ml醋酸洋红染色液100ml Core苏木素染色液100ml姬姆萨原液100ml Core苏木素染色液500ml姬姆萨工作液100ml Carazzi苏木素染色液100ml瑞氏-姬姆萨复合染液100ml Carazzi苏木素染色液500ml瑞氏染液50ml Delafield苏木素染色液100ml结晶紫染色液(2.5%)10ml Delafield苏木素染色液500ml结晶紫染色液(1%)10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1)100ml结晶紫染色液(0.1%)10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1)500ml荚膜染色液（试剂盒）50ml×2Gill苏木素染色液(Gill No.2)100ml芽孢染色液（试剂盒）50ml×2Gill苏木素染色液(Gill No.2)500ml鞭毛染色液（试剂盒）100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3)100ml石炭酸复红染液(苯酚品红染液)100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3)500ml改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液)100ml Heidenhain铁苏木素染色液3×100ml 抗酸染色液（试剂盒）50ml×3天青石蓝苏木素染色液2×50ml 吕氏碱性美蓝染色液（0.1%）100ml改良MacConaill铅苏木素染色液140ml卢戈碘液（革兰氏染色）10ml苏木素无水乙醇溶液(5%)100ml番红染色液（沙黄）10ml苏木素无水乙醇溶液(10%)100ml卢戈碘液（标准碘液）100ml伊红染色液(进口水溶)100ml Mayer'苏木素染液(免疫组化)10ml伊红染色液(进口水溶)500ml HE染色液(试剂盒)3×10ml伊红染色液(水溶)100ml Cole氏苏木素染色液(常规染色)100ml伊红染色液(水溶)500ml Weigert苏木素染色液2×50ml伊红染色液(水溶,5%)100ml AB-PAS染色试剂盒50ml*6伊红染色液(醇溶)100ml糖原PAS染色液（过碘酸-雪夫染色液）50ml×2伊红染色液(醇溶)500ml糖原PAS染色液试剂盒（过碘酸-雪夫染色液）50ml×4Scott蓝化液500ml伊红染色液100ml氨水溶液(0.1%)500ml标准阿利新蓝染色液3×50ml氨水溶液(0.3%)500ml阿利新蓝染色液(pH2.5)100ml氨水溶液(0.5%)500ml阿利新蓝染色液(pH=1.0)（试剂盒）3×50ml氨水溶液(1%)500ml碱性品红乙醇溶液(5%)100ml天青石蓝B染色液50ml碱性品红水溶液(1%)100ml天青石蓝B染色液100ml。

浅析染液PH值和保险粉含量对靛蓝染色的影响

浅析染液PH值和保险粉含量对靛蓝染色的影响牛仔服以其独特的服用性能和天然磨旧的外观，一直深受广大消费者的喜爱，特别是近几年来人们回归自然心态的日益浓重，牛仔服已不再是年轻一代的钟爱，它以其独特的魅力，受到社会各个年龄层次人们的喜爱。

牛仔布大多由靛蓝染经纱，用白纬纱交织而成，此外，也有套色染经纱的。

靛蓝属于还原染料，它具有还原染料的特征，即经碱性还原成隐色体上染纤维。

常用烧碱作为碱剂，保险粉作为还原剂。

靛蓝在染色过程中受到多种因素和工艺参数的影响，以靛蓝染液的PH值和还原状态为主要因素，因此染色过程中对PH值或还原状态的控制，成为能否染好牛仔布的一大关键。

本文通过两组不同实验，分别调节染液PH值和保险粉含量，通过纱样颜色和数据分析，研究靛蓝染色过程中颜色和色光的变化。

此外，实际生产过程中出现的问题和解决办法也一并讨论，从而对靛蓝染色有更好的指导作用。

1实验与讨论1.1染液PH值对靛蓝染色的影响靛蓝不溶于水，对纤维的亲合力很低，必须在碱性溶液中，用还原剂将靛蓝还原成可溶于水的隐色体钠盐而上染纤维，经氧化再转变为不溶性的靛蓝而固着在纤维上，因此碱在靛蓝染色中不可或缺，具有非常重要的作用。

根据实际生产情况，本组实验分六次完成，在其它参数（靛蓝含量、保险粉含量、车速、轧车压力等）基本不变的条件下，约以0.5的等差提高染液PH值，研究靛蓝染色过程中颜色和色光的变化。

1.1.1实验仪器、试剂和设备：容量瓶、移液管、锥形漏斗、锥形瓶、量筒、400g/l的烧碱、85%的保险粉、0.1N I2溶液、0.25N HCl溶液、酸碱PH计、723N分光光度仪、球经小样机1.1.2染色工艺流程：煮炼一道→水洗两道（室温淋喷）→靛蓝七道染色及氧化（室温）→水洗两道（室温淋喷）→烘干普通牛仔布常用纱83.3tex 纱，每束10根头份（共六束60根），取车间正常染液，即靛蓝含量约1.0g/l、烧碱含量1.4-1.6 g/l、保险粉含量0.61-0.74 g/l、PH值10.70左右，放入小样机染槽中，配好煮炼液，测试染液各项含量，做好准备工作，以5m/min的车速开车，开车过程中保持染液各含量一致，开出纱样为实验一纱样。