MDI一滴血检测方法及意义学习笔记
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MDI一滴血检测方法及意义学习笔记(一)
(2011-05-27 18:02:32)
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分类:MDI检测
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一滴血
红细胞
异型
白细胞
淋巴细胞
血小板栓
胆固醇结晶
学习笔记
目录
第一部分:活血分析
引言
样本收集和检查-------------------附图
正常血象- - - - - - - - - - - - - - - - - - - 附图(一)
血象观察目录
消化
1、缗钱状----------------------附图(二)
2、红细胞聚集--------------------附图(三)
3、蛋白质连接--------------------附图(四)
循环毒性物质
4、血小板聚集--------------------附图(五)
5、针状物----------------------附图(六)
6、乳糜颗粒---------------------附图(七)
7、原生质体---------------------附图(八)
8、动脉粥样硬化斑块-----------------附图(九)
晶状结构
9、红色晶体---------------------附图(十)
10、胆固醇的晶体与胆固醇盘状结构----------附图(十一)
免疫系统附图1、2、3、4、5、6、7、8、9
11、嗜酸性粒细胞增多- - - - - - - - - - - - - - 附图(十二)
12、高分叶嗜中性细胞----------------附图(十三)
13、白细胞的活力-------------------附图(十四)
14、L型细菌---------------------附图(十五)
15、杆菌-----------------------附图(十六)
16、支原体----------------------附图(十七)红细胞异形性
17、红细胞大小不均------------------附图(十八)
18、异形红细胞--------------------附图(十九)
19、椭圆形红细胞-------------------附图(二十)
20、小红细胞---------------------附图(二十一)
21、大红细胞---------------------附图(二十二)
22、靶形红细胞--------------------附图(二十三)
23、棘形红细胞--------------------附图(二十四)
24、锯齿状红细胞-------------------附图(二十五)
引言
活血分析是利用暗视野及相差显微技术确定血液状态的一种筛选试验,后者因其采用一项特殊技术而得名,这项技术可使照射在观察目标上的显微镜台下的聚光器光线散射,产生侧光效应。
这样就在暗视野背景下产生固体物质白色的映像。
美国生物学M1000系列显微镜具有相差、暗视野双重功能。
二者结合运用对细菌、真菌的区别,以及晶体结构的准确鉴别均十分有用。
而且,相差对于研究活细胞及其细微结构尤其有价值,而这些细微结构在普通光学显微镜下不易发现。
暗视野显微镜对观察微小,低对比度或透明晶体十分有价值。
而这些物体在普通光镜下无法看到。
通过观察各种各样血液活体成份,技术人员能帮助内科医生为病人制定出适合病人特殊需求的营养计划。
此资料是我在网上收集整理的专为自己学习而编写的,每个章节指出技术人员观察什么内容,暗视野下的形态特点,以及这些特点出现的原因,提出辅助疗法,纠正不良状况,并根据其各自的特点,期望的结果分别列出建议。
应当注意,活体血液分析并不是作为诊断所用,美国生物学界并不提倡这样做。
该分析仅作为筛选试验,为病人提供预测的辅助疗法。
正是如此,美国生物学界推荐该分析方法作为筛选机体整个代谢是否紊乱,以及提供辅助疗法的一种手段。
用于活体血液分析的显微设备同样可以做干血片分析(HLB),后者同样也是美国生物学家布拉福德研究所开创的I.I.M.P技术的重要组成部分,两个试验均采用手指处的毛细血管血液。
研究显示:反应性的含氧有毒物质在众多疾病中起作用,引起代谢功能紊乱。
布拉福德研究机构在研究和测定这些有毒物质方面走在世界的前面。
现在能够检测出这物质相互反应产生独特的标记物,在血液中留下印记,这些标记物可以通过显微镜观察出来。
在血液中观察到的各种特殊的印记与不同的功能异常,病理状态有关,亦称“布拉福德-艾伦”效应。
HLB(干片法)正是为检查代谢紊乱所产生的标记物而设计的试验,而这些代谢功能紊乱则至少与一种以上疾病有关。
关于干学法以后再学习作笔记。
今天先发表活血法的观察和意义。
样本收集和检查
1、准备:活细胞观察主要使用自然光源、暗视野、相差镜头。
在使用暗视野时,以及相差镜头时,聚光器应当升到最高的位置。
暗视野选择“D”的位置,绿色的箭头意指相差。
2、玻片:盖玻片、采血针、洒精、乙醚、纱布和报告单应当放在易于拿取的位置,一旦指尖取血开始,制片应在30秒内完成,以免血液凝固。
3、病人的整个指尖均应用乙醇消毒,若要同时做干片检查,亦可用乙醚消毒。
4、选择指尖侧部为取血部位,因为指侧神经末梢较少,不易感觉到疼痛,同时采血针应该垂直于采血部位,以确保快速地采集到干净的血滴。
5、若要做干血片分析,指尖上的血滴应保持在指尖大约30秒钟。
6、制备干血片,放在一边让其自然干燥(一般需3-5分钟),同时避免灰尘污染血滴。
7、做活血分析:轻轻地从指尖上取一滴血,让血滴仅接触玻片,立即放一块盖玻片在血滴上面,轻轻地加压,直到血滴扩散开,做为活血分析样本。
做干血片要连续蘸5---6滴,如
下图。
制备干血片手法很重要,手法不能过重,又不能太轻,否则效果不好。
(见附图1)
附图1 制备的血片
8、活血分析时,先用目镜观察,选择一个较薄的适宜观察的区域,然后再用暗视野检查,观察显示屏上的细胞状态。
9、白细胞的观察:视觉估计一下白细胞总数在放大200倍时,每个视野在正常情况下应该有8-15个白细胞。
10 在电视屏幕上,扫描若干区域,让病人自己观察自己血液状况,花几分钟向病人解释存在的异常情况,并提出要纠正这异常,所需要的补充疗法。
应当记住:从制片到血液干燥大约需15分钟,所以,解释应该简短明了。
11 在做干血片分析时,用自然光作为光源,将旋转盘转到“F”的位置即可。
12 观察干血时,DIN20透镜,启动照相系统及SX-20附件,将患者干血片的状况摄下来(完整的干血片可参阅后续图文资料)。
正常血象图
附图2 血液中主要组成
附图3 活血检测所见
附图4 干血片
附图(一)
血象观察目录
消化
1、缗钱状
2、红细胞聚集
3、蛋白质链接
循环/毒性物质
4、血小板聚集
5、针状物
6、乳糜颗粒
7、原生质体
8、动脉粥样硬化斑状
晶状结构
9、红色晶体
10、胆固醇的晶体与胆固醇盘状结构
免疫结构
11、嗜酸性粒细胞
12、高分叶嗜中性细胞
13、白细胞的活力
14、L型细菌
15、杆菌
16、支原体
红细胞异形性
17、红细胞大小不均
18、异形红细胞
19、椭圆形红细胞
20、小红细胞
21、大红细胞
22、靶形红细胞
23、棘形红细胞
24、锯齿状红细胞
1、红细胞缗钱状形成
红细胞缗钱状形成是指红细胞之间相互粘连,形成钱串状外观,红细胞缗钱状形成的多少与存在于全血的非对称的蛋白分子的量有密切关系。
这种蛋白分子中和了红细胞表面的电荷,减少了红细胞表面的斥力,使红细胞易于聚集,极度的红细胞缗钱状形成在蛋白代谢紊乱所形成的高蛋白血症的患者中容易看见。
红细胞双面微凹状结构有助于提高每个细胞的表面积,从而能够以最快、最有效地将氧气输送到全身。
当红细胞缗钱状形成后,红细胞有效的表面积大量减少,导致氧气输送发生极大障碍。
如果该状况不能及时纠正,患者就会出现疲乏、衰弱、昏睡。
在活血分析时,红细胞缗钱状形成表现为红细胞象钱币(硬币)叠成一串。
通过轻敲玻璃片,红细胞缗钱状形成很容易与红细胞聚集区分开。
当摇动时,红细胞缗钱状消失为单个散在的红细胞。
其形态与外观恢复正常。
而红细胞聚集则不会发生此种情况。
治疗建议:
由于缗钱状的形成是由于过多的蛋白及饱和脂肪酸存在于血液中,维生素B3有助于降解和消除这些蛋白,脂肪和碳水化合物,它亦有助于刺激盐酸的产生,帮助消化。
高蛋白血中的过量的蛋白可以通过进一步服用盐酸复合体而得到缓解,如果治疗无效,则应进一步
寻找病因。
附图(二)
2、红细胞聚集
红细胞聚集(形成红细胞团)较红细胞缗钱状更为严重。
因为它不仅限制了氧气的自由交换,而且减少了通过毛细血管的血流量。
此时,单个红细胞不仅一个个相互叠加,而且在血中形成红细胞团块。
若不采取治疗措施,则会形成大的血凝块。
在镜下,红细胞聚集不是单个红细胞成串状叠加,而是成堆排列。
这些团块经震动玻片时,不会分散开,团块的边缘粗糙而不规则。
红细胞聚集的主要原因是血浆中急性相蛋白的增加使红细胞之间的斥力减弱,高脂肪与高脂蛋白也与红细胞聚集有关。
治疗建议:
减少脂肪的摄入,增加维生素B3,必需的磷脂类的摄入,因为维生素B3有助于刺激肥大细胞产生肝素,而肝素可以抗凝,预防血液凝滞。
同时,维生素E亦对血块的降解有益。
附图(三)
3、蛋白质连接
蛋白质连接是蛋白异常导致红细胞表面电荷失衡,引起红细胞成特殊串状连接。
若不及时纠正,则会发展为典型缗钱状排列。
临床上,盐酸和维生素B3有助于改善此种状况。
附图(四)
血小板
镜下,血小板较小,大约2个微米(红细胞约7个微米),圆形或卵圆形。
在正常情况
下,各自分开,不动。
然而,因为布朗氏运动以及外部光的刺激,所以显得是活动的。
血小板起源于骨骼,在外周血中有8-11天的寿命,其功能是维持血管壁的完整性,每当血管壁损伤时,血小板就粘附在胶原上,自行聚集,形成一个塞子阻止血液从伤口中流出。
一旦损害发生,血小板亦释放血小板3因子(一种磷脂),以促进血液凝固。
由于相对小的血小板体积,以及脾脏红骨髓的结构,血小板随血流经过脾脏时速度减慢。
在正常情况下,1/3的循环血中的血小板可以在脾脏发现,若病理性脾大,80%-90%的血小板滞留在脾脏。
由于在最普通的情况下血液循环中的血小板数量也会变化很大,因此用显微镜计数血小板水平是困难且徒劳的。
血小板在月经前数量减少,特别是月经的第一天,从第三天开始慢慢回升,剧烈的运动可以引起血小板升高,可能是情绪紧张刺激脾脏的血小板释放入血。
登高时血小板增加。
冬天的血小板较夏天高,所以,血小板的量的变化,若无相应的临床表现,则无多大意义。
附图1 红圈内是血小板
附图2 图中粉红的是血小板
4、血小板聚集
在正常的循环血液中,血小板由于相互间的斥力,而单个散在于血液中,当细胞受损或血管破损时,血小板可以自行聚集。
引起血小板斥力减弱的原因,目前正在研究。
ADP、胶原、凝血酶均可使血小板发生聚集。
过量的脂肪亦可导致血小板发生聚集而形成团块,这团块可以堵塞血管,影响血液循环,导致中风和心脏病发作。
在镜下,血小板聚集表现为较大的血色团块,团块的边缘可以看清散在的血小板。
治疗建议:
减少脂肪的摄入,吃更多的鱼,少吃肉。
补充维C,因为维C可以保护胶原,加强血管的完整性,维生素E可以抑制凝血,预防血栓形成。
抗脂肪肝剂亦是十分重要的,这些制剂可以乳化血中过多的脂肪和胆固醇,有助于其代
谢和排泄。
效果较好的抗脂肪肝剂包括蛋氨酸和胆碱醇,蛋氨酸作为一种催化剂加速胆碱肌醇的作用。
二者联合作用可以降解由于蛋白代谢产生的胺(胺过多对人体有毒性作用)。
附图1 血小板聚集
附图2 血小板栓
附图3
附图4 巨血小板
附图(五)
5、针状物
针状物是血小板发生突变,使正常的圆盘状转变为针状物体,针状物在血中出现,清楚显示肝脏处于应激状态,这种状况是由于滥用药物、酗酒,或者由于脂肪的堆积而引起肝功活力减弱。
(1)针状体细、短,肝脏负荷过重;
(2)针状体呈网状结构:脂肪肝;
(3)针状体粗大、出现数量多,重度肝脏损伤;
治疗建议:
首先,消除药物与乙醇(酒精)对肝脏的损伤,为了促进肝细胞的再生,需进食高蛋白饮食。
维生素B复合体有助于蛋白与脂肪的代谢,新鲜的肝浓缩制剂可以刺激肝脏再生。
附图(六)
6、乳糜微粒
乳糜微粒是一种小的脂粒(直径大约1个微米)食物脂肪被消化后,被吸收入血,形成光镜下可以检查到的微粒,乳糜微粒中心是甘油三酯和胆固醇酯,周围存在有极性的蛋白,胆固醇和磷脂层。
血中的乳糜微粒在进食脂肪食物后,2-6小时内达到峰值。
在正常情况下,血中的乳糜微粒在10-12小时内被清除掉,过量的乳糜微粒在血中提示高脂蛋白血症。
而高脂蛋白血症,可能导致冠状动脉方面疾病,形成动脉粥样斑块,肝脾肿大,以及糖耐受不良。
在镜下,乳糜微粒是一种象雪花状的斑点。
在显示屏幕一个视野中看到1---3个为正常,
3---5个轻度,多于5 个时,考虑高于正常范围。
在严重的情况下,含有已乳化的乳糜微粒表现为白色雾状斑块,飘浮在各种血细胞之间。
禁食10---12小时仍有乳糜微粒,提示为高脂蛋白血症。
治疗建议:
为了消除高脂蛋白血症,需要减少胆固醇与甘油三酯的摄入,新鲜的肝脏、脾脏浓缩制剂可以刺激患者肝、脾的功能、以达到最大的效能。
新鲜的脑组织浓缩制剂亦有所帮助。
研究显示:脑苷脂类作为一种抑制剂可以抑制胆固醇的吸收。
抗脂肪肝制剂可以极大地加强血液中脂肪酸与胆固醇的降解与排泄,这些制剂可以使肝脏产生更多的卵磷脂,卵磷脂进一步转化为卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)。
LCAT不仅在脂蛋白代谢中起主要作用。
而且与脂蛋白脂酶协同作用。
帮助从血中将甘油三酯清除掉。
烟酸亦可通过抑制胆固醇的合成而降低血中的胆固醇水平。
钒亦可降低血中的胆固醇水平,但是其作用机制尚未明了。
附图1 正常血液(相差视野)
正常血脂全血标本
附图(七)
7、原生质体
原生质体的功能尚未完全明了,似乎与蛋白质核酸、脂质的合成有关。
同时显示免疫系统功能减弱。
在体积上较大,常常含有红色晶体,胆固醇晶体和其它的胆固醇晶体。
在镜下,呈透明,不规则形态。
这种原生质体结构可能是斑块形成的早期阶段,提示需要减少胆固醇的摄入。
明亮的脂质结晶体
附图(八)原生质体
8、动脉粥样硬化斑块
动脉粥样硬化斑块是一种最为严重的与胆固醇有关的结晶体,斑块的出现说明血液中含有较多的胆固醇,沉淀在动脉壁的过程属于晚期阶段。
提示动脉已经粥样硬化、动脉变硬。
不解决会引起动脉的急性梗死。
在镜下,斑块较大、不透明、可有十几个或几十个红细胞的体积那样大。
实际上,它是附着在动脉壁上动脉粥样硬化斑块中的一小块,脱落于血液中。
附图1
附图2 动脉粥样硬化斑块
附图(九)
治疗建议:
有许多与胆固醇水平升高和引起动脉粥样硬化的危险因素。
作为治疗的一部分,首先应该避免这些危险因素对机体所造成的影响。
每日摄入过多的脂肪是许多危险因素中较主要的危险因素。
为了减少这个因素,脂肪的摄入必须依据机体的需要而进行必要的调整。
应该提倡食用不饱和脂肪酸的代用品,目前研究发现:烹调过程产生的不利因素,如象氧化作用,可能使不饱和脂肪酸转化为饱和脂肪酸,因而升高了血中的饱和脂肪酸的含量。
(注:饮食中主要含饱和脂肪酸)。
调整饱和脂肪酸的摄入似乎是唯一肯定可以降低这个危险因素的方法。
其它的危险因素包括过食,抽烟,情绪紧张,缺乏锻炼,精制糖摄入太多。
降低胆固醇的摄入水平,经常监测血清中胆固醇的含量,为治疗提供基本数据,同时观察疗效。
研究发现:亚油酸作为辅助治疗可以降低血清中胆固醇的含量,对心脏病人服用该药,可以使胆固醇的含量降低18%。
亚油酸亦可以降低血压及抑制血小板聚集。
这两种因素均与冠状动脉粥样硬化有关。
卵磷脂对降低血清中胆固醇非常有效。
维生素C是另一个重要的辅助药物,能够降低心脏病患者血清中40%的胆固醇,这个效果是通过给予每个病人500mg/每天的剂量而获得。
若每天给予1g维生素C,则可显著降低血小板的聚集,数据显示这个水平为27%。
大剂量摄入强力抗氧化剂(如维E或OXY-5000)显示能够降低胆固醇水平,降低血小板聚集,抵抗血液凝固,减少甘油三酯在血中的含量。
作为一种抗氧化剂,它可以保护血管壁免受氧化物对血管壁的损伤。
一旦血管壁受损,胆固醇就可沉淀在血管壁,最终使血管壁变硬,造成动脉粥样硬化。
铬是一种重要的矿物质,能够降低胆固醇水平,研究显示:每日服用200mg铬可以显著地降低血中胆固醇的水平。
结晶与晶体结构
以自然光作光源,结晶与晶体结构无法看见。
然而,在暗视野与相差条件下,晶体很容易区别和认出。
这是由于暗视野光的散射作用,在暗视野条件下,光不是从镜下直接照射在物体上,而是从侧面照射在物体上,然后光向外反射,针对黑色的背景,晶体呈现花样的形状。
通过观察这些晶体的大小、形状、发光物体的颜色,每型晶体可以很容易区别出来。
9、红色晶体
在原生质体中,人们容易发现一些红色或橙色花样晶体。
这些晶体的存在提示肠中毒,或代谢吸收功能紊乱,红色是由于放线菌素—一种抗生素,由各种链霉素所产生。
附图1 胆固醇结晶
原生质体中有红色结晶
附图(十)红色结晶
10、胆固醇的晶体与胆固醇盘状结构
胆固醇晶体是最容易看见的晶体,除非大量地出现,否则没有太大特殊的意义。
由于近年来发表了不少关于胆固醇是致病因子方面的文章,所以,大多数人认为在血中发现胆固醇晶体是一种不良现象,实际上,胆固醇在血中出现完全是一种正常现象。
胆固醇是一种能在肝脏合成的固醇。
事实上,人体中20-80%的循环血中的胆固醇是在肝脏合成的,胆固醇是胆汁的正常成分,是各种固醇类激素的前体(例如性激素)。
另一方面,胆固醇亦是胆结石的一种主要成分,是心脏疾病和动脉粥样硬化的主要危险因素。
在暗视野下,胆固醇晶体表现为各种大小不一的白色固体物质,这些物质反白光,在相差条件下,能够确定晶体的结构。
在未空腹条件下的患者,每个视野看见2-3个较小的晶体是正常的,在空腹的患者中,血中的晶体数每2-3个视野中应该少于1-2个。
胆固醇盘状结构是指失去了在循环血中的形状,其结构已经拉长的胆固醇晶体。
这些晶体发白光,但形状变得更为方正,出现的意义提示动脉壁受损。
胆固醇盘状结构是动脉粥样硬化斑块形成的早期阶段,在正常情况下,它是不会出现的。
如果一经发现,则应减少胆固醇的摄入。
附图1
附图2
附图3
附图4
附图5 胆固醇盘状物
附图(十一)
免疫系统
白细胞数量、分类及活力改变
免疫系统--实际上几个不同的系统在功能上相互联系。
它是机体抵抗病毒、细菌、病原的第一道防线,而白细胞形成机体免疫系统的基础,白细胞分成三个系列(根据其起源和功能)粒细胞系列、淋巴细胞系列、单核细胞列。
粒细胞系列起源于骨髓。
包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞。
这些细胞在血中的生存期变化较大,从30小时到几天。
在这段时间中,粒细胞担负起抗菌的任务。
淋巴细胞起源于淋巴结,脾脏及淋巴组织丰富的器官,在血中的生存期大约2天到200天,生存的长短取决于淋巴细胞的型别(淋巴细胞分T淋巴细胞、B淋巴细胞)。
以及机体自身稳定状态,淋巴细胞是复杂的免疫过程的一部分,在血中,淋巴细胞可与入侵的病原相互作用,进而启动机体的免疫反应,淋巴细胞亦可以产生抗体,有免疫记忆功能,当第二次遇见相同抗原,可以迅速地增强对抗原的清除。
单核细胞来原于骨髓的网状细胞。
单核细胞在血中生存1-3天,随后进入组织,进入组织后的单核细胞被称为巨噬细胞,其主要功能是清除消化后的红细胞、残渣、色素和细菌。
依据机体自身状况,巨噬细胞的生存期从几个星期到几个月不等。
在活血分析时,白细胞是一类有颗粒的细胞,外形可以是圆形,亦可不规则,根据血细胞的种类不同,其大小可以是周围红细胞一样大小,也可以是红细胞的两倍。
白细胞超过20个为过多。
淋巴细胞
淋巴细胞是血细胞中最小的细胞、灰色、浆中有颗粒,核呈圆形、卵圆形,有轻度凹陷,核染色质微密,细胞核居中或偏位。
在健康成人,淋巴细胞占整个白细胞总数的34%,在儿童,淋巴细胞比率略偏高。
淋巴细胞在血中生存期大约2---200天。
淋巴细胞增高可能由于急性感染:如象百日咳、传染性单核细胞增多症,或急性传染性淋巴细胞增多症,淋巴细胞增多亦可能由于慢性感染:如象结核病、传染性肝炎、先天性梅毒。
若为淋巴细胞性白血病,其分类淋巴细胞很容易达到100%。
附图1 T淋巴细胞
附图2 B淋巴细胞
单核细胞
单核细胞体积较淋巴细胞大,胞浆更为丰富,在浆中易见空泡,核呈肾形,可分2-3叶核。
单核细胞在白细胞分类中,仅占4%左右。
单核细胞增多见于某些细菌感染,如结核病,亚急性心内膜炎,原虫、立克次氏体感染亦可引起单核细胞增多。
若为单核细胞性白血病,则单核细胞增加极为显著。
附图3 单核细胞
巨噬细胞
巨噬细胞摄入和破坏颗粒或衰老的细胞,包括细菌,巨噬细胞作细胞介导的免疫又被称为巨噬细胞,在免疫过程中经T淋巴细胞而激活。
虽然巨噬细胞通常存在于组织内。
但是,如果发生严重的感染,在外周血中亦可查见少许巨噬细胞。
另外,在红斑狼疮患者及某些溶血性贫血亦可在外周血中查见巨噬细胞。
巨噬细胞体积比单核细胞略大。
胞内含有摄入的红细胞和其它的包涵物,可以见到不规则的胞浆和伪足。
附图4 巨噬细胞
杆状核粒细胞
杆状核粒细胞的特点是核呈U型,核染色质致密,胞浆含有颗粒,亦可见到空泡。
在正常人外周血中,杆状核粒细胞的总数不超过3%,若杆状核粒细胞增加,则可能为外伤、阑尾炎或者急性失血。
附图5 杆状核粒细胞
附图6 杆状核粒细胞
分叶核粒细胞
分叶核粒细胞指的是核呈分叶状的粒细胞,在正常情况下,核常分2-5叶,核中间由一个细丝相连。
分叶核粒细胞的体积比单核细胞略小。
分叶核粒细胞亦可被称为PMNS,它是多形核粒细胞的简称,或可用英文“Polys”表示。
在正常情况下,分叶核粒细胞占56%。
引起Polys增高的原因很多:急性感染,尤其是葡萄球菌感染,引起分叶核粒细胞增多。
某些杆菌、真菌、病毒、寄生虫、化学试剂中毒(如铅、汞)肾上腺素、昆虫的毒液均可引起分叶核粒细胞增多,恶性肿瘤可引起Polys急剧增加。
附图7 分叶核粒细胞。