外界因素对细菌的影响
8 第五章 第3节 环境因素对微生物生长的影响
环境因素 对微生物生长的影响
1
外界环境对微生物作用的三种情况
外界环境条件适宜时，微生物生长旺盛，代谢 作用加速 外界环境条件不太适宜，微生物生长缓慢，代 谢作用受到一定程度的抑制 外界环境不适宜的情况达到微生物难以忍受的 程度，微生物生命活动受到严重影响，可能发 生变异或死亡
2
灭菌、消毒、防腐与无菌
35
X射线 αβγ射线 宇宙射线
100~150 低于100 很短
辐射单位
拉德（rad）吸收电离能量的量度，1rad相当于 每克物料吸收1×10-5J的能量
格雷（戈，Gy）相当于102rad D值：活菌数减少一个对数周期所需的射线剂 量（×104Gy）
36
（一）紫外线
太阳光的杀菌作用 原理：核酸吸收紫外线变性 200~280nm 穿透力弱，用途：空气消毒 器材物体表面消毒 富含脂肪和蛋白质食品 注意防护
最低pH，最高pH 最适pH：微生物最适宜生长繁殖的pH值
菌类 最适pH值范围
细菌 放线菌
酵母 霉菌
7.0~7.6 7.5~8.5
3.8~6.0 4.0~5.8
一般细菌和病毒对氢离子比霉菌和酵母对氢 离子敏感
48
酸性食品与非酸性食品
分类 酸性食品 pH ＜4.5 易滋长微生物 酵母、霉菌
非酸性食品
21
巴氏消毒法：＜100 ℃ 61~65 ℃、30min，72~75 ℃、10~15min 71~75 ℃，15~16s 80~95 ℃，瞬时 适用对象：高温会导致品质下降的食品 牛奶、啤酒、果汁、蜂蜜等
22
高压蒸汽灭菌法 原理：密闭容器中使水受热产生蒸汽，蒸汽压 力越大，蒸汽的温度越高。 121℃， 15~20min，可杀灭绝大多数微生物， 包括有芽孢的细菌。 适用对象：无菌水及耐高热的食品和物品
第二节 外界因素对细菌的影响
第二节外界因素对细菌的影响细菌在自然界必然不断经受周围环境中各种因素的影响。
当环境适宜时，细菌能进行正常的新陈代谢而生长繁殖；若环境条件变化，可引起细菌的代谢和其他性状发生变异；若环境条件改变剧烈，可使细菌生长受到抑制或导致死亡。
因此掌握微生物对周围环境的依赖关系，在医疗实践中，一方面可创造有利条件，促进微生物的生长繁殖，从病理材料中分离培养病原微生物，有助于传染病的诊断以及制备疫苗，来预防某些传染病；另一方面，也可利用环境对细菌不利因素，抑制或杀灭病原微生物，以达到消毒灭菌的目的。
本节重点介绍外界环境对细菌不利因素，提高对消毒灭菌的认识以便在实际工作中加以应用。
消毒（Disinfection）杀灭病原微生物的方法。
用以消毒的药物称为消毒剂(Disinfectants)一般消毒剂在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。
对于芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
灭菌（Sterilization）杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法。
因此，灭菌比消毒的要求高；但在日常生活中，消毒和灭菌这两个术语往往通用。
无菌（Asepsis）物体上或容器内无活菌存在的意思。
无菌操作是防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。
例如，进行外科手术或微生物学实验时，须注意无菌操作。
防腐（Antisepsis）防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物称为防腐剂。
许多药物在低浓度时只有抑菌作用，浓度增高或延长作用时间，则有杀菌作用。
消毒与灭菌技术的选择，取决于多种因素。
在实际工作中应根据消毒灭菌的对象和目的要求不同，以及条件的不同，选择不同的合适方法。
一、物理因素各种物理因素对细菌都能产生一定的影响作用。
（一）热力灭菌高温对细菌有明显的致死作用。
热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。
但是，更细微的变化已发生于细菌凝固之前。
有人认为DNA单螺旋的断裂可能是主要的致死因素。
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验[目的]1．掌握皮肤消毒方法。
2．掌握标准纸片扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果的判读与解释及其临床意义。
3．掌握纸片扩散法的质量控制方法。
了解空气、水中细菌的检查方法。
4．熟悉人体皮肤、咽喉部细菌检查方法。
5．熟悉紫外线灭菌方法。
6．了解高压蒸汽灭菌方法一、细菌的分布检查[材料]普通琼脂平板，1％高层琼脂，无菌试管，1毫升无菌吸管，无菌平皿。
[方法]1．空气中的细菌检查取琼脂平板一个，打开皿盖，暴露于空气中10分钟，然后盖好，在平皿底面注明地点、班组，放入37℃温箱内培养24小时后观察结果，计算菌落数，并观察不同的菌落形态。
2．污水和净水中细菌数的检查（1）用无菌试管分别采取自来水和未经净化消毒处理的污水各一管。
取自来水样时，须先将水龙头用酒精灯烧灼灭菌，再将龙头完全开放，放水5分钟，然后用无菌试管以无菌操作采集水样。
（2）用无菌吸管吸取自来水及经适当稀释的污水各1毫升，分别放入两个无菌平皿内。
（3）将已溶化并冷至约45℃（手握琼脂管感觉热而不烫手）的高层琼脂1支，倾注入平皿内，盖好平皿，立即将皿底贴桌面轻轻摇动，使琼脂与水样均匀混合后（但勿溢出于皿外），静置桌面，待琼脂凝固。
（4）标记，皿底向上置于37℃培养24小时，取出观察结果。
比较自来水及污水内生长的菌落数。
3．皮肤及飞沫中的细菌检查材料：普通琼脂平板，血琼脂平板。
方法：（1）皮肤细菌检查取普通琼脂平板一块，用手指轻轻涂抹培养基表面，置37℃温箱中培养24小时，观察结果。
（2）飞沫中的细菌检查取血琼脂平板一个，打开皿盖，将培养基面置于口腔前约10厘米处，用力咳嗽数次，约30秒钟，然后盖上皿盖，置37℃温箱培养24小时，观察结果。
二、外界因素对细菌的影响（一）高压蒸汽灭菌法（示教）[材料] 手提式高压蒸汽灭菌器、电炉等构造：手提式高压蒸汽灭菌器是一双层金属圆桶，外层坚厚，顶端有厚盖，盖边有翅状螺旋，借此紧闭此盖，防止蒸汽外溢。
外界因素对细菌的影响实验报告
一、实验目的1. 了解外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
2. 掌握不同外界因素对细菌生长速率和形态的影响。
3. 分析外界因素对细菌生理特性的影响。
二、实验原理细菌的生长、繁殖和生理特性受到多种外界因素的影响，如温度、pH值、营养物质、氧气、湿度等。
本实验通过模拟不同外界环境条件，观察细菌的生长情况，探讨外界因素对细菌的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌菌种，牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、生理盐水、pH试纸等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、pH计等。
四、实验方法1. 分组实验：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌种分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，分为以下五组：（1）温度组：分别在30℃、37℃、45℃恒温培养箱中培养；（2）pH值组：分别在pH 4.0、6.0、8.0条件下培养；（3）营养物质组：在添加和未添加牛肉膏蛋白胨培养基条件下培养；（4）氧气组：分别在有氧和无氧条件下培养；（5）湿度组：分别在干燥和湿润条件下培养。
2. 观察与记录：观察不同组别细菌的生长情况，包括菌落形态、生长速率、颜色等，并记录实验数据。
3. 数据分析：对实验数据进行分析，比较不同外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
五、实验结果与分析1. 温度对细菌生长的影响：随着温度的升高，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率逐渐加快，菌落形态逐渐增大。
在45℃条件下，细菌生长最为旺盛。
2. pH值对细菌生长的影响：在适宜的pH值条件下，细菌生长良好；pH值过高或过低均会抑制细菌生长。
金黄色葡萄球菌在pH 6.0时生长最佳，大肠杆菌在pH 7.0时生长最佳。
3. 营养物质对细菌生长的影响：添加牛肉膏蛋白胨培养基的组别，细菌生长旺盛，菌落形态较大；未添加培养基的组别，细菌生长缓慢，菌落形态较小。
4. 氧气对细菌生长的影响：有氧条件下，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率较快；无氧条件下，细菌生长缓慢。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告摘要：本实验主要研究外界因素对细菌的影响，我们使用几种不同的方法研究了温度、pH值和紫外线对细菌的生长和复制的影响。
结果表明，在不同的温度下，细菌的生长和复制速率不同。
当温度较高时，细菌生长和复制速率较快。
在不同的pH值下，细菌的生长也有所不同。
细菌在pH值为7左右的中性条件下生长最好。
经过紫外线照射，细菌的生长也呈明显的受到抑制的趋势，紫外线照射的时间越长，细菌生长能力就越弱。
总的来说，外界因素对细菌的生长和复制有着显著的影响，我们需要了解这些影响以便更好地控制和使用细菌。
引言：细菌是一类单细胞原核生物，广泛存在于自然界中，在医学、环境科学等领域中有着广泛的应用。
对于细菌的生长和繁殖，其与环境因素密切相关。
本实验旨在研究外界因素对细菌生长和复制的影响，包括温度、pH值和紫外线照射等。
材料与方法：1. 材料：细菌溶液、培养基、三角量杯、试管、移液管、离心机、紫外线灯、温度控制箱、pH计、电子天平等。
2. 方法：(1) 温度对细菌的影响实验：准备好培养基和细菌溶液，分别取5ml细菌液，分别放入三个试管中，分别放置在20℃、30℃和40℃的温度箱中，过程中每隔1小时进行一次离心取样，记录细菌生长情况。
(2) pH值对细菌的影响实验：将细菌溶液分别放入pH为4、5、6、7、8、9的培养基中，混合均匀后，进行培养，观察48小时内细菌的生长情况。
(3) 紫外线对细菌的影响实验：在细菌培养基中加入适量的细菌液，用紫外线灯照射不同时间（0、10、20、30分钟），然后观察细菌生长情况。
结果：1. 温度对细菌的影响实验结果表明，在温度为20℃的条件下，细菌生长缓慢，到48小时时，只有非常少的细菌复制了。
在30℃的条件下，细菌生长得更快，到48小时时，有很多细菌繁殖了。
在40℃的条件下，细菌的生长呈明显的停滞，只有很少数的细菌繁殖了。
2. pH值对细菌的影响实验结果表明，在pH为7左右的条件下，细菌的生长最好，在48小时后，培养液中细菌数量大大增加。
第5篇外界因素对微生物的影响
重金属极其盐类
是杀菌剂和防腐剂，作用最强的是Hg,Ag,Cu,作用机 理：使蛋白质变性，使酶失活。（与E的－SH结合。）
0·02－0·2％Hgcl2（升汞）溶液对大多数细菌有致死作用。 0·1－1％ AgNO3 可消毒皮肤，1％浓度新生儿点眼预防眼炎 CuSO4对真菌、藻类有强杀伤力，波尔多（CuSO4＋碳）防植物病害 另外还有砷，铋、锑的化合物是治疗梅毒的特效药。
微生物的形态、化学组成及新陈代谢等与一定的 外界化学因素密切相关。
各种化学物质对微生物的影响是不相同的，有的可 促进微生物的生长繁殖，有的阻碍微生物新陈代谢的 某些环节而呈现抑菌作用，有的使菌体蛋白质变性或 凝固面呈现杀菌作用。就是同一种化学物质，由于其 浓度、作用时的温度、作用时间的长短以及作用对象 的不同，或呈现抑菌作用，或呈现杀菌作用。
菌体内盐离子浓度升高。
各种微生物对干燥的抵抗力不一样。
多数微生物不耐干燥，常用干法保存草料和食 品类。
当牧草水分降至12-16%，可较长时间保存；
谷物类水分在14%以下，低于30℃可长保存； 若升温置30℃或湿度大于17%，或即使低于 10℃ ，但湿度高于19%，即会生霉。
二、 渗透压：
渗透压与微生物的生命活动有密切关系：
(二)化学物质的浓度
一般认为化学消毒剂的浓度愈大，其对微生物 的毒害作用愈强。但这不等于浓度加倍，杀菌力 也随之增加一倍。如0.5％的石炭酸只能做防腐剂， 而浓度增加到2—5％时，则呈现杀菌作用。消毒 剂浓度的增加是有限度的，超越此限度时，并不 一定能提高消毒效力，有时一些消毒剂的杀菌效 力反而下降，如无水酒精不如70％酒精的杀菌作 用强。
用冷冻法保存食品(肉品、乳品、蛋品及其他食品等)，可 经久不坏。但在冰冻前即被某种病原微生物污染时；因 病原微生物在冰冻的条件下能继续存活，故此种受污染 的冰冻食品更有传播疾病的危险性。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告外界因素对细菌的影响实验报告引言：细菌是一类微生物，它们广泛存在于我们周围的环境中。
细菌的生长和繁殖受到许多外界因素的影响，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质等。
本实验旨在研究这些外界因素对细菌生长的影响，并探讨其机制。
实验方法：我们选择了一种常见的细菌株作为实验对象，将其分成多个培养皿，每个培养皿中均加入适量的培养基。
然后，我们对不同组的培养皿施加不同的外界因素，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质。
在一定时间内观察细菌的生长情况，并进行定量分析。
实验结果：1. 温度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高温组、中温组和低温组。
结果显示，高温组的细菌生长速度最快，中温组次之，低温组最慢。
这是因为高温能够促进细菌代谢活动，加快细胞分裂和繁殖。
而低温则会抑制细菌的生长，使其代谢减缓。
2. 湿度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高湿度组、中湿度组和低湿度组。
实验结果显示，高湿度组的细菌生长速度最快，中湿度组次之，低湿度组最慢。
这是因为湿度足够高时，细菌能够更好地吸收水分和营养物质，促进细胞的正常代谢和生长。
3. 氧气浓度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高氧组、中氧组和低氧组。
结果显示，中氧组的细菌生长速度最快，高氧组次之，低氧组最慢。
这是因为细菌需要氧气参与细胞呼吸和能量代谢。
但过高或过低的氧气浓度都会对细菌的生长产生负面影响。
4. 营养物质对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为富营养组、中营养组和贫营养组。
结果显示，富营养组的细菌生长速度最快，中营养组次之，贫营养组最慢。
这是因为富营养环境能够提供细菌所需的大量营养物质，满足其生长和繁殖的需要。
讨论与结论：通过本实验的结果，我们可以得出以下结论：1. 温度、湿度、氧气浓度和营养物质都是影响细菌生长的重要外界因素。
2. 不同的外界因素对细菌生长的影响程度不同，但一般来说，适宜的温度、湿度和氧气浓度以及富含营养物质的环境有利于细菌的生长和繁殖。
第三章外界环境因素对微生物的影响
冷冻保存 冻存微生物种时，必须迅速降低温 度，起用时也迅速融化。应尽力避免反复冷冻 与融化。 为减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内 加入10%左右的甘油、蔗糖或牛奶作为保护剂。 冷冻真空干燥（冻干）法 是保存菌毒种、疫
苗、补体、血清等的良好方法，可保存微生物
及生物制剂数月至数年不失活。
2. 高温
（2）湿热灭菌法
有煮沸灭菌、巴氏消毒、流通蒸汽灭菌、高压
蒸汽灭菌几种。
煮沸灭菌 煮沸10-20min可杀死所有细菌
繁殖体，芽抱常需煮沸1-2h才被杀死。手术器
械、注射器、针头及食具等可用此法。
巴氏消毒法
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
德国巴斯德1863年发明，以较低温度杀灭液
态食品中病原菌或特定微生物，尽量保持其营 养成分和风味的消毒方法。主要用于葡萄酒、 啤酒、果酒及牛乳等食品的消毒。
2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用，是天然杀菌因 素，紫外线是日光杀菌作用的主要因素。许多微 生物在直射日光下，半小时到数小时即可死亡。 芽抱的抵抗力强，经20h才死亡。 阳光暴晒消毒 在实践中，日光对被污染的土壤、 牧场、畜舍垫料及用具等的消毒均具有重要意义。
⑴光感作用(Photosensitization) 将某些荧光染料如美蓝、伊红、汞溴红、沙 黄等加入培养基中，能增强可见光线的杀菌作用， 这种现象称为光感作用。 ⑵光复活作用(Photoreactivation) 细菌受致死量的紫外线照射后，3h以内若 再用可见光照射，则部分细菌又能恢复其活力， 这种现象称为光复活作用；波长为510nm的可见 光对细菌的光复活作用最有效。
高温对微生物具有致死作用，常用于消毒和灭菌。
高温对使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，
导致细菌死亡。
外界环境对微生物的影响
外界环境对微生物的影响1.物理因素。
（1）温度：低温可使微生物的新陈代谢降低或相对静止，但多数微生物在低温环境中并不死亡，因此，在实际工作中常用低温保存菌种、培养基和食品等。
高温可杀死微生物，因此，高温被作为常用的消毒灭菌法。
高温消毒灭菌法有干热法和湿热法。
干热法包括焚烧、烧灼、干烤法。
湿热法包括煮沸法、流通蒸汽法、间歇灭菌法、高压蒸汽灭菌法和巴氏消毒法。
在同一温度和时间，湿热灭菌效果优于干热灭菌。
原因是湿热使菌体蛋白更易于凝固变性，穿透力也强，并且湿热蒸汽接触被灭菌物体时，由气态变为液态，同时放出潜热而提高物品的温度达到灭菌作用。
（2）日光与紫外线：日光有较好的杀菌效果，被褥、衣服等物品在日光下暴晒数小时，大部分细菌可被杀死。
日光的杀菌作用来自紫外线。
紫外线的杀菌波长为265~266nm，最易被细菌DNA吸收，从而干扰细菌DNA复制导致细菌的变异或死亡。
紫外线的穿透力差，故只能用于物体表面和空气消毒。
（3）电离辐射：足够剂量的高速电子X射线、y射线能破坏细菌的DNA，对细菌有致死作用。
照射时被照物品不升温，常用于导管、注射器等塑料制品和食物的消毒。
（4）过滤除菌：是一种机械除菌的方法，常用玻璃滤器和薄膜滤器等。
用于不耐热的血清抗毒素、抗生素、药液的除菌，亦可以用于实验室、手术室、无菌间、超净台的空气除菌。
2.化学因素。
（1）消毒剂：是指具有杀菌作用的化学药品。
消毒剂在低浓度时有防腐作用，在高浓度时有杀菌作用。
消毒剂对细菌和人体都有毒性作用，只能外用，不能口服。
消毒剂能影响细菌的化学成分、结构和生理活动。
如红汞、甲紫（龙胆紫）、乙醇、甲醛等，可使菌体蛋白变性或凝固；高锰酸钾、过氧化氢等改变菌体的酶蛋白，导致细菌代谢障碍而死亡；新洁尔灭、来苏儿、石碳酸等可改变细菌胞壁和胞膜的通透性，使胞浆外漏，细菌死亡；氯和碘酒能与菌体蛋白中的氨基结合，使细菌代谢障碍而死亡。
（2）防腐剂：生物制剂中常加入防腐剂抑制污染菌的生长。
实验——外界因素对细菌的影响
实验内容
物理消毒灭菌法 化学因素和生物因素对细菌的影响
目的要求
熟悉紫外线对细菌的杀灭作用。 初步掌握细菌对常用抗菌药物和化学
消毒剂敏感性测定的方法。 了解实验室常用灭菌器的使用方法。
一、紫外线对细菌的杀灭作用
【原理】 紫外线中波长为200～300nm者具有 杀菌能力。其中265～266nm的杀菌 作用最强，紫外线除日光中含有一部 分外，医学上使用的常以人工紫外线 灯产生；其杀菌机制是干扰细菌DNA 的合成。特点是穿透力较弱。
平板纸片法示意图
0.1％新洁尔灭 2%碘酒 1%龙胆紫
2%红汞
3．37℃孵育24小时，观察各消毒剂纸 片周围有无抑菌圈，比较各抑菌圈的 大小。
观察记录结果，并比较不同细对相同 化学消毒剂的敏感性以及同一细菌对 不同化学消毒剂的敏感性。
三、细菌对常用抗生素的敏感度测定
以滤纸圆片浸沾一定稀释度的药物， 贴附于已涂满被测细菌的琼脂平板培 养基上，孵育后，因药物的抑菌作用 及渗透性，纸片周围可以有抑菌圈出 现，据根抑菌圈的有无和大小，以测 知该菌对这些药物的敏感性，但准确 度不如试管法。
3．打开两皿皿盖，在离水银灯约1米处， 直接受紫外线照射30分钟后，以镊子 取出纸片，将纸片投放消毒缸内，盖 好皿盖，37℃孵育24小时后观察生长 情况。
观察记录结果
二、常见化学消毒剂的杀菌作用
【材料】 1．菌种：葡萄球菌、大肠杆菌18～24
小时肉汤培养基。 2．培养基：琼脂平板。 3．0.1％新洁尔灭、1％龙胆紫、2％ 碘
料、玻璃器材、传染性污物及细菌培 养物等都可用本法消毒灭菌。
（三）干热灭菌器
干热灭菌器（干烤箱）是由双层铁板制成 的长方形或正方形金属箱，外壁内层装有 隔热的石棉板。在烤箱中装置电热线圈， 上有小孔，按插温度计供通空气用，箱前 有铁门及玻璃门，箱内有金属板架数层， 电热烤箱的前下方装有温度调节器，可以 保持所需的温度（见图3-5）。
包头医学院《微生物学和微生物检验》习题集及答案第4章 外界因素对细菌的影响
第4章外界因素对细菌的影响一、名词解释消毒、灭菌、无菌、无菌技术、防腐、消毒剂、化学疗剂、卫生清理二、填空题1.湿热灭菌法包括高压蒸汽灭菌法、、和。
2.湿热杀菌的优点是：、、。
3. 紫外线的杀菌机理是，导致细菌变异和死亡。
但因紫外线的穿透力弱，不能透过玻璃、纸张等，因而紫外线常用于和的消毒灭菌。
4. 影响化学消毒剂消毒的因素包括：、、细菌的种类和数量及环境中的的影响。
5. 一般高压蒸汽灭菌的压力是，其温度达到，维持时间为，即可杀灭所有微生物（包括细菌的芽胞）。
三、单选题A型题：1.外科手术衣服、敷料、普通培养基的灭菌常采用：A.紫外线照射B.流通蒸汽法C.煮沸法D.巴氏消毒法E.高压蒸汽灭菌法2.血清、抗生素、抗毒素等液体物质的除菌应采用：A.干热灭菌法B.湿热灭菌法C.紫外线灭菌法D.过滤除菌E.超声波杀菌3.最常用、最有效的灭菌方法是：A.干烤B.焚烧C.高压蒸汽灭菌D.紫外线杀菌E.过滤除菌4.干烤灭菌的最适温度和时间是：A. 160~170℃2hB. 100℃30minC. 121.3℃15minD. 80~100℃2hE. 60~70℃2h5.杀菌效果最好的酒精浓度为：A. 50%~60%B. 70%~75%C. 80%~85%D. 90%~95%E. 纯酒精6.关于紫外线杀菌，不正确的是：A.紫外线的杀菌作用与波长有关B.紫外线可破坏细菌DNA的构型C.紫外线的穿透力弱，所以对人体无损害D.适用于空气和物体表面的消毒E.一般用低压的水银蒸汽灯作紫外线杀菌7.紫外线杀菌的最佳波长为：A. 200nmB. 220nmC. 245nmD. 265nmE. 280nm8.关于高压蒸汽灭菌法不正确的是：A.是效果最好的灭菌方法B.是目前应用最广泛的灭菌方法C.可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物D.通常的压力为1.05kg/cm2(1.03×105Pa)E.通常温度为151.3℃9.关于湿热灭菌法，不正确的是：A.是最常用的灭菌法B.在相同温度下，湿热杀菌效果比干热好C.在湿热状态下，菌体可吸收水分使蛋白质易于凝固D.湿热比干热的穿透力弱E.蒸汽有潜热存在10.将牛奶加热71.7℃ 15~30s的目的是：A.抑制牛奶中的杂菌B.防止微生物在牛奶中生长繁殖C.杀灭牛奶中的病原微生物D.杀灭牛奶中的所有微生物E.使牛奶不含活菌11.各概念中，含义相同的是哪一对？A.消毒—灭菌B.无菌—无菌操作C.毒血症—病毒血症D.病原菌—致病菌E.带菌者—带菌状态B型题A.紫外线照射B.高压蒸汽灭菌法C.巴氏消毒法D.滤过除菌E.焚烧12.生理盐水灭菌用13. 室内空气消毒灭菌用14. 酒和牛奶消毒用15. 血清的除菌用四、问答题1. 湿热灭菌的原理如何？共有哪些湿热灭菌的方法？各适宜于哪些物品的消毒灭菌？2. 高压蒸汽灭菌的原理如何？适宜于哪些物品的灭菌？3. 简述紫外线的杀菌机理、特点、适宜对象及使用注意事项。
细菌的分布及外界因素对细菌的影响
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二、细菌在自然界的分布
微生物和其他生物一样，与外界环境有着密切的联 系。外界环境适宜，就生长繁殖；条件改变过于剧烈， 使微生物的主要代谢发生障碍，或菌体蛋白质变性凝固， 会导致生长停顿，甚至死亡。在医学上常用的人工方法， 造成微生物极为不利的环境，来达到杀灭微生物的目的。
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（一）土壤中的细菌
每秒钟超过200，000次振动的声波不被人耳感受， 称为超声波。微生物对强度高的超声波很敏感。
（五）干燥
多数细菌的繁殖体在空气中干燥时很快死亡。有些 细菌抗干燥力较强，尤其有蛋白质等物质保护时。
（六）低温
多数细菌耐低温。在低温状态下，这些细菌的代谢
减慢，当温度如回升到适宜范围又能恢复生长繁殖，故
低温常用作保存菌种。
除菌滤器简称滤菌器，将液体或空气通过含有微细 小孔的滤器，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过， 大于孔径的的物体不能通过。它们可用陶瓷、硅藻土、 石棉或玻璃屑等制成。主要用于一些不耐热的血清、毒 素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、 支原体和细菌的L型。
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（四）超声与超声波
1．将血平板培养基打开，在距口腔10cm，面对培 养基用力咳嗽3~5次，再盖上平皿。
2．用沾过生理盐水的棉签在咽喉处轻轻擦拭，即 咽拭子，然后在血平板培养基上用平板分离化线法接种。
3．将上述两个培养板均置37℃培养箱24h，观察培 养基中菌落的数目及菌落的形态特点。
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（三）皮肤表面细菌的检查
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四、实验
（一）物理因素对细菌的影响 1．温度灭菌试验 【原理】 温度高低对细菌生长繁殖关系非常密切，温度过高 过低都会影响细菌的生长，甚至死亡。细菌生长繁殖的 最适温度一般为37℃，低与此温度是细菌的代谢缓慢， 生长受到抑制，但仍可生长；而高温则可杀死细菌。
第二节 外界因素对微生物的影响
第四章微生物与外界环境第二节外界环境因素对微生物的影响外界环境因素与微生物的关系是十分密切的。
在适宜的环境条件下微生物能正常的生长发育，当环境条件不适宜或发生显著变化时，可以抑制微生物的生长，甚至导致微生物死亡。
在畜牧业科研和生产中我们经常利用不同的环境因素来处理微生物。
在具体介绍本节内容之前，首先介绍几个重要概念：消毒(disinfection)：应用理化方法杀灭物体中的病原微生物的过程称消毒。
用于消毒的化学药品称为消毒剂。
消毒只要求达到无传染性的目的，而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
灭菌(sterilization)：利用理化方法杀灭物体中所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子等）的过程。
无菌(asepsis)：指环境或物品中没有活的微生物存在的状态。
无菌操作(asepsis operate)：防止微生物进入机体或其他物品的操作方法称无菌操作或无菌法。
防腐(antisepsis)：防止和抑制微生物生长繁殖的过程称为防腐或抑菌。
用于防腐的化学药物称为防腐剂或抑菌剂。
一、物理因素对微生物的影响影响微生物的物理因素主要有温度、干燥、渗透压、射线和紫外线、超声波、过滤除菌等。
（一）温度温度是微生物生长繁殖的重要条件。
温度适宜，微生物生长繁殖良好；而温度过高或过低，则生长受到抑制，甚至死亡。
根据细菌对生长温度的要求，将其分为嗜冷菌、嗜温菌和嗜热菌三类（见表1-1）。
1.高温对微生物的影响高温是指比最高生长温度还要高的温度。
高温对微生物有明显的致死作用，其原理是高温使菌体蛋白变性或凝固，酶失去活性，导致微生物死亡。
实践中,据此原理设计的高温消毒和灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌两大类。
（1）干热灭菌法①火焰灭菌法以火焰直接灼烧杀死物体中的全部微生物的方法。
分为灼烧和焚烧两种，灼烧主要用于耐烧物品，如接种环、试管口、金属器具等的灭菌；焚烧常用于烧毁的物品，直接点燃或在焚烧炉内焚烧，如传染病畜禽及实验感染动物的尸体、病畜禽的垫料及其他污染的废弃物的灭菌。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告细菌外界因素实验影响外界因素对细菌的影响影响细菌生长的因素篇一：实验微生物的细胞计数实验十微生物的细胞计数目的要求了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。
微生物个体生长的时间较短，很快进入分裂繁殖阶段，个体生长难以测定。
它们的生长一般以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。
群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。
测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数法、光电比浊法等。
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于具有确定面积和容积的血球计数板上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。
横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为1mm，深为0.1mm，容积为0.1mm3。
计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。
两种都共有400个小方格。
实验内容1、镜检计数室对计数板进行镜检。
若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风吹干后才能进行计数。
2、加样品在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自动进入计数室，静置5分钟。
3、计数将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。
每计数室计5个中格（四角和中间）。
计数原则：计上不计下，计左不计右。
芽体占母细胞一半时算一个。
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释倍数为B，则计算公式如下：(1) 25个中方格的计数板计算公式(2) 16个中方格的计数板计算公式(4) 清洗血球计数板计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。
若不干净，则必须重复洗涤干净为止。
实验十一外界因素对细菌的影响实验目的：1、了解紫外线杀菌原理及特点。
2、了解药物敏感实验的操作与判断。
3、学会对单糖发酵分解产物的观察。
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验细菌是微生物中最广泛分布的一类生物，它们存在于各种环境中，包括土壤、水体、大气、动植物体内等。
这种广泛的分布主要受到外界环境因素的影响。
为了研究细菌的分布规律以及外界因素对细菌的影响，可以进行以下实验。
实验目的：1.研究细菌在不同环境中的分布情况；2.探究外界因素对细菌生存和繁殖的影响。
实验材料和方法：2.方法：a.准备细菌培养基，保持无菌状态；b.将不同环境样品（如土壤、水）分别收集到无菌容器中；c.从不同环境样品中分别取一定量的样品，通过无菌注射器滴入无菌培养皿中；e.将培养皿密封并置于适当的温度和光照条件下培养；f.观察培养皿中的细菌生长情况，记录相关观察结果。
实验结果与讨论：细菌分布在不同环境中的情况会有所差异。
一般而言，细菌在土壤和水体中分布广泛。
而在其他环境中，如大气中和动植物体内的分布相对较少。
这是因为土壤和水体提供了较丰富的营养物质和适宜的生存条件，因此更适合细菌的生长和繁殖。
此外，实验还可以进一步探究外界因素对细菌生存和繁殖的影响。
外界因素包括温度、光照、湿度、氧气浓度等。
通过改变这些因素，可以观察细菌生长情况的变化，从而判断它们对细菌影响的程度。
例如，可以进行以下实验：1.不同温度下的细菌生长情况：在不同温度条件下分别培养细菌，观察细菌生长的速度和数量；2.光照条件对细菌生长的影响：在不同光照条件下培养细菌，观察细菌在有光和无光条件下的生长情况；3.不同湿度条件下的细菌生长情况：在不同湿度条件下培养细菌，观察细菌生长的速度和数量；4.氧气浓度对细菌生长的影响：在不同氧气浓度条件下培养细菌，观察细菌在高氧和低氧条件下的生长情况。
通过不同的实验设计，可以揭示细菌在不同环境中的分布规律以及外界因素对细菌生存和繁殖的影响。
这些实验结果对于了解细菌的生态环境以及控制细菌感染和疾病的发生具有一定的意义。
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利用密闭高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 加热后随着锅内的压力持续必增高， 温度随之上升，杀菌力亦随之增强， 而达到杀菌和杀灭芽胞的目的。 常用15磅（121℃）30min
• 灭菌对象
普通培养基 生理盐水 玻璃器皿 手术器械 工作服 实验动物尸体
第二节 化学因素对细菌的影响
一、消毒剂 消毒剂使用范围： 体表（皮肤、粘膜、伤口） 器械 排泄物 周围环境
第四章 外界环境因素对细菌的影响
致病菌可随污染的环境经一定途径侵 入机体引起疾病（传染病）；又可从患 病动物体、带菌动物、及病亡动物体排 出污染环境。因而，细菌在自然界中受 许多环境因素的影响，其生命活动与外 界因素有着及其密切的关系。
当环境条件适宜时，能促进细菌的生长繁 殖，当环境条件改变时，其代谢随之发生 相应变化。 由于外因素作用的强度和时间的不同，可 引起细菌的变异、生长繁殖抑制、甚至死 亡。
低温常用于保存菌种。 但是，反复冻融对微生物不宜。 各种细菌对低温的抵抗力亦不同。
㈡ 高温对细菌的影响
高温对细菌有明显的至死作用。
影响高温灭菌的因素： 细菌对高温的耐受性与细菌种类、 发育时期、菌体浓度及细菌所处界质 有关。 分类
1、干热灭菌法：
灭菌对象为玻璃器皿、金属器械及 不宜遇水的油、脂、凡士林等。 • 分类： 烧灼、焚烧灭菌法 热空气灭菌法 红外线、微波
（二）碱类消毒剂 碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和 病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒 的消毒： 10-20%石灰乳 20-30%草木灰水 1-3% NaOH
（三）其它常用消毒剂
0.1%升汞用于非金属器械消毒 0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和创伤消毒 70－75%乙醇用于体表和体温表的消毒 1－3%碘液用于粘膜消毒 5－10%碘液可杀灭放线菌
笼或阿诺氏（Arnold）流通蒸汽 灭菌器，在1个大气压下，用 100℃左右的水蒸汽，30min，可 杀灭繁殖体。用于食品、食具及 不耐用高温的物品消毒。
③间隙灭菌法：
• 利用连续3次的流通蒸汽消毒法， 达到彻底 灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭 菌器）内，加热（约100℃）15-30min，取 出置室温24h，次日重复灭菌。连续3次（10 磅20min）。 • 用于一些不宜100℃以上，温度灭菌物质， 以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、牛乳、 血清等培养基的灭菌。
概念
消毒： 指用化学或物理的方法，杀灭物体中 的病原微生物的方法。 灭菌： 指用物理或化学的方法，杀灭物体中 所有微生物的方法。 防腐： 指用化学药品防止或抑制细菌生长繁 殖的方法（又称抑菌）。
无菌： 是没有活菌的意思，指采取杜绝一切微 生物进入动物体或物体的方法（无菌技 术或无菌操作）这是防止手术感染及人 工培养杜绝杂菌污染的有效措施。
消毒剂杀菌机制：
①使菌体蛋白变性沉淀。 ②与菌体内的酶类结合，影响细胞代谢或 酶丧失活性。 ③降低菌细胞的表面张力，使胞浆膜通透 性示增加，菌体破裂溶解。
常用消毒剂种类
• 酸类消毒剂 • 碱类消毒剂 • 其它消毒剂
OH-
H+
-SH 醇脱水 Hg
（一）酸类消毒剂
无机酸（三大强酸）具有腐蚀性。但硼酸腐 蚀性较小（杀菌力亦弱），常用1-2%硼酸 用粘膜消毒。 有机酸如甲酸，醋酸，乳酸等均有杀菌作用， 常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。
抗生素的作用原理
①抑制细菌细胞壁的合成，如青霉素 ②影响细菌细胞膜的通透性，如多粘菌素 ③抑制菌体蛋白质的合成，如氯、四 ④抑制细菌核酸合成，如灰黄霉素。
抑菌作用： 某些物质或因素具有阻碍细菌生长的作用。 杀菌作用： 某些物质或因素具有杀灭细菌生长的作用。 抗菌作用： 药物具有的抑菌或杀菌作用。 过滤除菌： 通过滤器过滤后，液体或气体中无任何细菌 存在的方法。
第一节物理因素
一、温度对细菌的影响 ㈠ 低温对细菌的影响 细菌对寒冷的抵抗力较强。 因此，低温不能用于灭菌。
2、湿热灭菌
①煮沸消毒法：
• 温度在100℃左右，3-5min杀灭繁殖体， 芽胞煮沸3h以上。若在水中加入2-5%酚， 则10-15min可杀灭芽胞；若在水中加入12%Na2CO3，可提高沸点既可促进芽胞的摧 毁，亦可防止生锈。 • 灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械
②流通蒸汽消毒法：
又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸
二、防腐剂
用于防腐的药物称为防腐剂。生
物制剂（如疫苗、类毒素、抗毒 素等）中常加入防腐剂，以防止 杂菌生长。常用防腐剂有0.5%石 炭酸、0.01%硫柳汞和0.1～0.2% 甲醛等。
第三节
生物因素对细菌的影响
寄生；一种生物从另一种生物获营养，赖以 生存，并对后者呈现有害作用者。 共生：两种生物生活在一起，互为有利， 互不损害者。 拮抗：两种生物生活在一起，一种生物能产生 一种对他种生物呈现毒害作 用的物质，抑制或杀灭他种生物者。
④巴氏消毒法：
指利用不太高的温度，杀死食品中的病原 菌及一般杂菌，同时又不致严重损害营养 物质和风味的消毒方法。 牛奶（酒类）常用此法杀死其中的结核杆 菌或巴氏杆菌。 方法有3：
一是61.1-62.8℃，15-30min。 二是71.7℃，150-30s。 三是96℃，6S
⑤高压蒸汽灭菌法：
0.2－0.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人 造纤维消毒及皮肤消毒。 3－5%酚、3-5%来苏儿用于环境消毒或 空气消毒。 甲醛杀菌力较强，常用于器械消毒。40% 甲醛溶液用于烈性传染病的消毒， 4－10%甲醛溶液浸泡30min可杀灭繁殖体 及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上，可杀 灭芽胞体。消毒房间：1－2ml福尔马林 /m³ 加等量水薰蒸或加入真菌、螺 旋体的一类病毒。 噬菌体分布广泛。噬菌体有严格的宿主特 异性，只寄居于易感宿主菌体内。 噬菌体对理化因素的抵抗力较强。 噬菌体感染菌细胞后可引起细胞裂解。
二、抗生素
某些微生物在代谢过程中产生的一类杀灭 或抑制另一种微生物的化学物质叫抗生素。 抗生素来源：主要为放线菌，少数为细菌 和真菌或某些植物。