Th1／Th2型细胞因子在药物流产绒毛和蜕膜组织中的表达
抗磷脂综合征对女性不孕及体外受精-胚胎移植助孕结局的研究进展
第 44卷第4期2023 年7月Vol.44 No.4July 2023中山大学学报（医学科学版）JOURNAL OF SUN YAT⁃SEN UNIVERSITY（MEDICAL SCIENCES）抗磷脂综合征对女性不孕及体外受精-胚胎移植助孕结局的研究进展郎曼凝，李维宏（重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心，重庆 400016）摘要：抗磷脂综合征（APS）是一种与抗磷脂抗体持续存在有关的自身免疫性疾病，其主要特征为血栓形成和妊娠相关疾病的发生。
APS可能通过影响卵巢功能、子宫蜕膜化等方式对女性的生殖功能造成不利的影响，并可能在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗中引起胚胎种植失败、胚胎种植后的妊娠丢失。
常规在不孕人群IVF-ET前进行APS的筛查、治疗尚存在争议，应对患者的风险进行个体化评估，采取相应的管理措施，提高患者的助孕成功率，降低妊娠期母胎风险。
本文综述了APS对不孕及IVF助孕结局的影响与人群的管理，为临床诊治提供新思路。
关键词：抗磷脂综合征；不孕；体外受精-胚胎移植中图分类号：R71 文献标志码：A 文章编号：1672-3554（2023）04-0582-05DOI：10.13471/ki.j.sun.yat-sen.univ（med.sci）.2023.0406Advances in the Effects of Antiphospholipid Syndrome on Female Infertility andOutcomes of Assisted Reproductive TechnologiesLANG Man-ning， LI Wei-hong（Reproductive Medical Center， The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University， Chongqing 400016， China）Correspondence to： LI Wei-hong； E-mail：*********************Abstract：Antiphospholipid syndrome （APS）is an autoimmune disease characterized by the persistent presence of antiphospholipid antibodies， which are associated with thrombosis and pregnancy-related complications. APS may have ad⁃verse effects on female reproductive function by affecting ovarian function，endometrialization，and other mechanisms，and may lead to embryo implantation failure and pregnancy loss during in vitro fertilization and embryo transfer （IVF-ET）treatments. The routine screening and management of APS before IVF-ET in infertile populations remains controversial and requires individualized risk assessment and appropriate management measures to improve the success rate of assisted reproductive technologies （ART） and reduce maternal and fetal risks during pregnancy. This review summarizes the effects of APS on female infertility and outcomes of ART， as well as the management of the population affected by APS， providing new insights for clinical diagnosis and treatment.Key words：antiphospholipid syndrome； infertility； in vitro fertilization and embryo transfer［J SUN Yat⁃sen Univ（Med Sci），2023，44（4）：582-586］抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome， APS）是一种自身免疫性疾病，是以血栓形成和/或病理妊娠为主要临床特征，以及实验室检查为持续性抗磷脂抗体阳性的一组症候群，其中产科抗磷脂综合征（obstetric APS，OAPS）的特征包括妊娠 10 周后胎儿丢失、反复早期流产、宫内生长受限或严重的先兆子痫［1-2］。
耐多药结核患者外周血Th1、Th2、Th17细胞及其细胞因子水平变化
doi ： 10. 3969/j. issn. 1002-266X. 2019. 26. 023 中图分类号:R521 文献标志码:A 文章编号：1002-266X(2019)26-0076-03
结核病是对人类健康危害严重的呼吸系统传染 性疾病，已成为了世界范围内关注的公共卫生问题 和社会性问题。我国结核病发病率位居世界第2 位，目前实施的结核病防治规划获得良好效果，但结 核病发病与死亡人数在法定报告传染性疾病中仍占 首位，这与耐药结核关系密切［1］。研究显示，结核 主要是T淋巴细胞特异性介导细胞免疫反应，因此 临床研究重点聚焦在细胞免疫分析。Thl主要介导 人体细胞免疫，可以分泌干扰素y(IFN-y)等细胞因 子;Th2则主要介导体液免疫反应，可以分泌白细胞 介素4(IL-4)、IL-5等细胞因子;生理情况下两者处 于平衡和协调之中,结核的发生与两者比例失衡密 切相关。Th17则属于CD4 +效应T细胞亚群，不同 于传统研究的Thl和Th2，具备独立的分化与基质, 可以产生IL-17.IL-10等细胞因子。目前，临床对于 耐多药结核(MDR-TB)患者中上述细胞亚群及其细 胞因子的报道较少见⑵。本研究分析了 MDR-TB 患者外周血Th1、Th2、Th17细胞及其细胞因子水平 变化，以期为临床提供指导和依据。现报告如下。 1资料与方法 1.1临床资料 选取2017年1月~2018年12月 在天津市海河医院治疗的无耐药肺结核患者67例 (肺结核组).MDR-TB患者45例(MDR-TB组)。纳
山东医药2019年第59卷第26期
耐多药结核患者外周血Th1、Th2、Th17细胞 及其细胞因子水平变化
叶静，吴琦，杜钟珍,梅早仙，侯志丽,李志华,孙海柏 (天津市海河医院，天津300350)
th细胞分类
th细胞分类TH细胞（T helper cells）是免疫系统中的一类重要的免疫细胞，起着调节和协调免疫反应的作用。
根据它们的功能和表面标志物的表达，TH细胞可以分为不同的亚群，包括TH1、TH2、TH17和Treg 等。
1.TH1细胞：TH1细胞主要参与细胞免疫应答。
它们分泌干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子β（TNF-β），能够激活巨噬细胞、促进细胞毒性T细胞的活化，并增强抗体的类别转换为IgG。
TH1细胞在抵御细胞内寄生病原体感染和细胞毒性反应中起重要作用。
2.TH2细胞：TH2细胞主要参与体液免疫应答。
它们分泌白介素4（IL-4）、IL-5、IL-9和IL-13等细胞因子，能够促进B细胞的活化和抗体的产生，尤其是IgE。
TH2细胞对于抵御寄生虫感染和过敏反应起重要作用。
3.TH17细胞：TH17细胞主要参与炎症和自身免疫反应。
它们分泌白介素17（IL-17）家族的细胞因子，能够吸引中性粒细胞和单核细胞等炎性细胞，参与炎症反应和组织损伤。
TH17细胞在抵御真菌和细菌感染中发挥重要作用，但在自身免疫性疾病中也可能发挥负面作用。
4.Treg细胞：Treg细胞（调节性T细胞）是一类具有免疫抑制功能的TH细胞亚群。
它们表达CD4和CD25等标志物，并分泌抑制性细胞因子，如转化生长因子β（TGF-β）和白介素10（IL-10），能够抑制其他免疫细胞的活化和免疫反应，起到维持免疫平衡和自身免疫耐受的作用。
TH细胞的分类和功能是相互联系和调节的，它们在免疫应答中协同作用，在免疫应答中，不同类型的TH细胞相互作用，形成复杂的调节网络。
例如，TH1细胞产生的干扰素γ可以促进巨噬细胞的活化和细胞毒性T细胞的增殖，从而增强细胞免疫反应。
与此同时，TH2细胞产生的细胞因子可以促进B细胞的活化和抗体的产生，增强体液免疫反应。
Treg细胞则发挥免疫抑制的作用，抑制其他免疫细胞的活化，以维持免疫平衡和避免过度免疫反应。
Fas-FasL系统在RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义
Fas/FasL系统在RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义【摘要】目的探讨反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织fas/fasl 的表达和研究其临床意义。
方法采用免疫组化法检测33例反复自然流产患者绒毛组织fas/fasl的表达水平，并以30例健康早孕组为对照。
结果反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织fasl低于对照组，数据经统计学比较具有显著差异（p0.05），而绒毛组织却无显著差异。
结论反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织的fas/fasl失衡可能是反复自然流产的原因之一，需加以重视。
【关键词】反复自然流产；蜕膜；绒毛组织；fas/fasl反复自然流产（rsa）是妇产科常见病，约40%～60%不明原因。
近年来多数研究表明，正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以th2体液免疫为主，而th1细胞免疫过强极有可能导致流产。
细胞凋亡已被公认为是引起免疫耐受的一个重要机理，其中致凋亡基因 fas 和其配体 fasl 在细胞凋亡中起关键作用。
妊娠期 th1/th2 型细胞因子失衡与 fas/fasl 介导的细胞凋亡关系密切。
本文主要研究本文研究rsa 患者蜕膜和绒毛组织fas、fasl 表达水平，探讨fas/fasl 系统在rsa 发病机制及对临床意义。
1资料与方法1.1一般资料从2010年10月至2011年10月在深圳市盐田区计生中心经过妇检，b超，尿hcg都正常无不孕，无死胎或流产史，要求人流的妇女30例为正常早孕组。
年龄25～36岁，平均（29.5±2.6）岁，孕周7～10周，平均（9.1±1.3）周，孕次2～4次，平均（2.5±1.2）次。
同期经我中心排除因遗传，感染及血型不合，抗精子抗体阳性等因素，确诊为rsa的妇女33例为研究组。
年龄26～37岁，平均（30.1±3.1）岁，孕周911周，平均（10.2±1.7）周，孕次3～7次，平均（5.1±2.2）次。
Th1-Th2细胞基础知识
T h1/T h2细胞基础知识1)Th1/Th2分类：早在1986年，Mosmann等应用Th细胞克隆培养技术和细胞因子产生的不同，已发现小鼠CD4阳性细胞群是一个不均一的亚群，可分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群(见表1)。
后来在人类的CD4阳性细胞群中也发现了Th1，Th2两等，??个功能细胞亚群(见表2)。
Th1细胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-γ和TN F-β/介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，参与细胞免疫及迟发型超敏性炎症的形成，故亦称为炎症性T细胞，可被视为相当于TDTH细胞。
Th1细胞在抗胞内病原体(病毒、细菌及寄生虫等)感染中发挥重要作用。
在胞内细菌感染时，Th1细胞优先发育并引发吞噬细胞介导的宿主防御应答。
Th1细胞持续性强应答，可能与器官特异性自身免疫病、接触性皮炎、不明原因的慢性炎症性疾病、迟发型超敏反应等有关。
Th2细胞：Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-1 0,其主要功能为刺激B细胞增殖并产生抗体，与体液免疫相关。
在T/B细胞比例较低时，Th1细胞也可能辅助B细胞产生抗体(IgM、IgG2a和IgA类)。
在对蠕虫感染和环境变应原的应答中，主要是Th2细胞参与，以介导体液免疫应答为主。
过度的Th2细胞应答可能在遗传易感的过敏性特应症中起重要作用。
两类CD4+Th细胞对细胞因子的反应性各异：IFN-γ可诱导Th1细胞分化，但抑制Th2细胞增殖；IL-4诱导Th2细胞分化，但可与IL-13等一起抑制Th1细胞功能；IL-2则可同时引起Th1和Th2细胞增殖。
，可下调APC和Th1细胞活性，在诱导免疫耐受中起重要作用。
?除上述的Th 1和Th2细胞外，还有一类产生Th1和Th2样混合性细胞因子的Th0细胞。
Th 0亚群可能是从Th前体向Th1或Th2细胞分化过程中的一个中间阶段。
此外，期有人报道还存在CD4+Th3细胞，其主要分泌TGF-2)Th1/Th2生物学功能：(一)细胞毒性效应作用和辅助杀伤性T细胞作用1.Th1的直接杀伤作用表达Fasl、TRAIL的Th1通过分别结合表达Fas和DR4 /DR5的靶细胞，直接发挥细胞毒性作用，主要杀伤感染的靶细胞和肿瘤细胞。
对TH1和TH2的解读（原创）
对TH1和TH2的解读（原创）反复胎心消失？反复空孕囊？反复妊娠物落出？反复生化流产？出现这些情况，必须引起重视了，建议去医院检查筛选病因。
一般复发性流产的患者，筛查免疫方面问题时，医生会通过让其抽血检查Th1/Th2细胞因子，通过结果进行判读。
陆军军医大学第一附属医院(重庆西南医院)中医与风湿免疫科牟方祥那么问题来了？Th1/Th2细胞因子到底是么有什么意义呢辅助性T细胞CD4+细胞又称为辅助性T细胞，是人体内T细胞的一个亚群，CD4+T细胞可根据其分泌细胞因子的功能不同，可分为Th1和Th2两亚群。
正常情况下，辅助性T细胞1 (Th1) 和辅助性T细胞2 (Th2) 两类细胞有一定的比例，两者协调，使人体免疫保持平衡。
但机体发生功能异常时，常表现出平衡偏向其中一方。
一旦Th1/Th2之间的平衡状态被打破，将可能导致反复流产的发生。
TH1细胞释放引起炎症和抗病毒作用的细胞因子，如IL-1、IL-2、TNF-α、TNF-β和干扰素-γ等，这些细胞因子可促进T细胞介导的免疫反应。
在复发性流产中Th1细胞因子功能：1、免疫杀伤作用；2、导致胚泡异常着床；3、胚胎生长受限。
TH2细胞可产生促进体液免疫反应的细胞因子，如IL-4，IL-5，IL-6，IL-10 和IL-13等，以及特殊的“封闭抗体”，以确保妊娠成功。
在复发性流产中Th2细胞因子功能：1、抗炎作用；2、有利于妊娠。
总的来说TH1细胞因子起到免疫杀伤的作用，而相反Th2细胞因子起到免疫保护的作用。
正常妊娠时，母体内Th2细胞占优势。
进而发挥免疫保护作用维持妊娠。
当患者体内Th1细胞因子增加，Th1 / Th2 比值变化向 Th1 偏离时，就可能损伤胎盘滋养细胞及胎儿导致RSA （反复流产）的发生。
母胎界面局部Th1型免疫抑制和Th2型免疫优势的免疫特征在诱导和维持母体对胚胎的免疫耐受中发挥重要作用。
注重这种特别的免疫偏离现象，加以确切的调控,才能保障10月怀胎的成功。
Th1_Th2型细胞因子在不明原因早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达
早期自然流产是常见妊娠病理之一，其病因复杂，除遗传、内分泌、感染及子宫等因素外，国内有关报道原因不明者占自然流产总发病的40％～70％。
近年发现，许多原因不明的早期流产与免疫有关。
本研究从绒毛、蜕膜组织免疫表达差异着手，为探讨早期自然流产的免疫学机制提供新的思路。
1对象与方法1．1研究对象试验组：40例，入选标准：（1）既往有早期自然流产史；（2）无合并症，经妇科检查、内分泌检查、精液分析、血型及夫妇染色体G 显带核型分析等无异常，诊断为不明原因的流产；（3）现孕12周以内，无明显诱因再次表现为难免流产者。
对照组：40例，为要求人工流产者。
两组孕妇年龄19～35岁，孕12周以内，自然受孕，近半年未服用过甾体激素，无并发症及其他科室合并症的健康妇女，尿妊娠试验阳性，B 超提示宫内早孕。
所有病例来自本院妇产科门诊。
1．2取材清宫或人工流产时，取绒毛和蜕膜组织，祛除血块，5min 内于4％多聚甲醛固定2～4h ，20％蔗糖浸渍，次日于－20℃恒冷箱冰冻切片。
1．3试剂地高辛标记IL-2／IL-10探针及SABC 免疫组化试剂盒购自武汉博士德公司，抗体效价1∶100。
1．4方法原位杂交检测滋养细胞IL-2／IL-10mRNA 表达，冰冻切片，0．01mol ／L PBS 浸泡，0．2mol ／L HCL 处理，1μg ／mL 蛋白酶K 消化，0．1mol ／L TEA 缓冲液浸泡，预杂交液封闭非特异性位点，每片滴加20μL 杂交液（含40％去离子甲酰胺，10％葡聚糖硫酸酯，1mg ／mL 鲑精DNA ，4×SSC ，地高辛标记探针），湿盒中42℃杂交16～24h ，2×SSC 洗涤3次，DAB 显色，细胞浆呈棕黄色即为阳性表达，常规设置阴性对照。
免疫组化采用SABC 法，操作程序按试剂盒说明。
1．5统计学分析计算机CMIAS 图像分析，每个样本取4个高表达视野进行检测，每个统计场面积881．26μm 2，分别读取阳性细胞数计算数密度（N ／S ），测定值以x ±s 表示，检验水准α＝0．05。
原因不明反复流产的免疫学病因及治疗
原因不明反复流产的免疫学病因及治疗申 华1 综述 马远方2 审校(1.河南省开封市妇产医院医学遗传科,475000 河南大学医学院,4750042.河南大学医学院天然药物与免疫工程实验室,475004)中图分类号:R714121 文献标识码:A 文章编号:1006-9534(2008)09-0008-03 反复流产(recurrent s pontaneous aborti on,RS A)是指连续发生2次及2次以上的自然流产,是妊娠期常见的并发症,近年呈上升趋势。
病因包括遗传因素、内分泌异常、内生殖器官解剖异常、自身感染因素、母体自身疾病、环境因素等。
除此之外,临床上仍有50%～60%患者病因不明,称为原因不明反复流产(unexp lained recurrent s pontaneous aborti on,UR2 S A)。
随着生殖免疫学的飞速发展,近年研究认为,大多数URS A是由免疫功能异常引起[1]。
从生殖免疫学观点来看,妊娠是一种成功的半同种移植,而流产则被认为是半同种移植的失败。
继而研究发现,反复流产患者夫妻间白细胞抗原相容性增强,由此导致妊娠妇女对胚胎父系同种抗原呈低识别或低反应,以致无法产生足够的保护性抗体或封闭抗体,而使胎儿遭受免疫打击而流产。
近年来的研究进一步证实,妊娠的成功有赖于妊娠妇女对妊娠半同种抗原所表现的一种免疫耐受,而正常的妊娠免疫耐受涉及诸多因素的相互影响和相互制约,其中任何一个环节出现障碍,都有可能导致妊娠的失败[2]。
一、病因1.白细胞抗原(HLA) HLA复合体位于人类第6号染色体短臂p21131和32区之间,跨度约为4000kb,分为HLA Ⅰ类、HLAⅡ类和HLAⅢ类3个区,与移植排斥反应有关的经典HLA基因位于HLA复合体的HLAⅠ类和HLAⅡ类区内[3]。
Ⅰ区有A、B、C3个位点,主要编码HLA-Ⅰ类分子,Ⅱ区有DR、DQ、DP3个位点,主要编码HLA-Ⅱ类分子。
th1细胞检测指标
th1细胞检测指标引言：TH1细胞是一类重要的免疫细胞，对于维持机体免疫平衡和抵抗感染起着关键作用。
TH1细胞检测指标是评估TH1细胞功能和炎症状态的重要方法，对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将详细介绍TH1细胞检测指标的相关内容。
一、TH1细胞概述TH1细胞是一类T辅助细胞，主要产生干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α），促进细胞免疫应答和促炎作用。
TH1细胞的发育和功能受多个因素调控，包括细胞因子、共刺激分子和信号通路等。
二、TH1细胞检测指标1. IFN-γ水平：IFN-γ是TH1细胞的典型标志物，其水平可以反映TH1细胞的活性和功能。
检测方法包括酶联免疫吸附检测（ELISA）、流式细胞术和免疫组化等，常用于评估TH1细胞功能和炎症状态。
2. TH1/TH2比值：TH2细胞是另一类T辅助细胞，产生IL-4、IL-5和IL-13等细胞因子，具有抗炎和免疫调节作用。
TH1/TH2比值反映了TH1和TH2细胞在免疫应答中的平衡状态，常用于评估机体的免疫功能。
3. CD4+和CD8+细胞比例：CD4+和CD8+细胞是辅助T细胞和细胞毒性T细胞的典型标志，CD4+/CD8+比值可以反映免疫系统的状态和功能。
TH1细胞主要表达CD4+标志物，因此CD4+细胞的比例可以间接反映TH1细胞的活性。
4. Cytokine分泌模式：TH1细胞主要产生IFN-γ和TNF-α等促炎细胞因子，而不产生IL-4和IL-13等抗炎细胞因子。
通过检测这些细胞因子的分泌模式，可以评估TH1细胞功能的偏向性。
5. T-bet表达水平：T-bet是TH1细胞特异性转录因子，调控TH1细胞分化和功能。
检测T-bet的表达水平可以间接反映TH1细胞的活性。
常用的检测方法包括实时定量PCR和免疫组化等。
三、TH1细胞检测在临床中的应用1. 免疫相关疾病：TH1细胞与多种免疫相关疾病的发生和发展密切相关。
通过检测TH1细胞检测指标，可以评估患者的免疫功能状态，指导临床诊断和治疗选择。
th1反应与th2反应
TH1反应与TH2反应一、引言T H1反应和TH2反应是免疫系统中两个关键的免疫反应类型。
这两种反应在调节炎症过程、细胞免疫和体液免疫等方面发挥着重要的作用。
本文将详细介绍TH1反应和T H2反应的特征、调控机制以及与疾病发生发展的关系。
二、T H1反应T H1反应是一种针对细胞内病原体的免疫反应。
在TH1反应中，细胞因子IF N-γ的产生被认为是关键因子。
这种反应主要由T细胞介导，具有以下特征：细胞因子产生：1.TH1细胞分泌的细胞因子主要包括IF N-γ、TN F-β、IL-2等，这些细胞因子能够激活巨噬细胞和细胞毒性T细胞，增强宿主对细胞内寄生病原体的清除能力。
免疫应答类型：2.TH1反应主要针对细胞内病原体，如细菌、病毒等，通过激活细胞免疫应答来清除感染。
这种类型的免疫应答通常伴随着炎症反应，引发组织损伤和修复过程。
调节机制：3.T H1反应的发生受到多种因素的调节，包括细胞因子、转录因子等。
例如，I L-12和I L-18的产生可以刺激TH1细胞的分化和功能发挥，而转录因子T-b et则是TH1细胞分化的关键因子。
三、T H2反应T H2反应是一种针对细胞外病原体的免疫反应。
在TH2反应中，细胞因子IL-4、I L-5和I L-13的产生被认为是关键因子。
这种反应主要由T细胞介导，具有以下特征：细胞因子产生：1.TH2细胞分泌的细胞因子主要包括IL-4、I L-5、I L-13等，这些细胞因子能够激活B细胞和嗜酸性粒细胞，促进抗体产生和过敏反应的发生。
免疫应答类型：2.TH2反应主要针对细胞外病原体，如寄生虫等，通过激活体液免疫应答来清除感染。
这种类型的免疫应答通常伴随着抗体产生和过敏反应。
调节机制：3.T H2反应的发生受到多种因素的调节，包括细胞因子、转录因子等。
例如，I L-4的产生可以刺激T H2细胞的分化和功能发挥，而转录因子G AT A3则是TH2细胞分化的关键因子。
四、T H1反应与T H2反应的相互关系在某些免疫相关疾病中，TH1反应和TH2反应的失衡常常导致疾病的发生和发展。
IL_18在复发性流产患者蜕膜和绒毛组织中的表达
I L-18在复发性流产患者蜕膜和绒毛组织中的表达*李静,杨雪峰郑州大学第三附属医院妇产科 郑州市 450052摘要 目的 探讨IL-18在复发性流产(RSA)患者蜕膜和绒毛组织中的表达,研究IL-18与RSA的关系。
方法 选取20例RSA患者和20例正常妊娠要求人工流产患者,采用免疫组化法分别检测两组患者蜕膜和绒毛组织中I L-18表达。
结果 两组患者蜕膜组织中均有IL-18表达,R S A组主要表达于蜕膜间质细胞胞浆中,对照组主要表达在蜕膜腺体细胞胞浆中,两组中表达强度无统计学意义(P>0 05)。
两组患者绒毛组织中均有I L-18表达,均主要表达在细胞滋养细胞和合体滋养细胞胞浆中,R S A组中表达高于对照组(P< 0 01)。
结论 复发性流产患者蜕膜和绒毛组织中均有IL-18的表达。
R S A的发生可能与患者绒毛组织中I L-18的表达升高有关。
关键词 复发性流产;I L-18;蜕膜;绒毛中图分类号:R714 21 文献标识码:A 文章编号:1672-3422(2008)06-0008-03Expression of I L-18i n Hu m an V illi and Decidua ofRecurrent Spontaneous Aborti onLI J ing,YANG X ue fengThe Third Aff iliated H os p ital of Zhengzhou University,Zhengzhou450052,Ch i n aABSTRACT Objective To obser ve the expressi o n o f I L-18i n hu m an v illi and duc i d ua o f recurrent spontaneous abortion(RSA)patients.M et hods By i m m unohistoche m istry,expressi o n and d i s tribution o f I L-18w ere observed in20cases of nor m a l early pregnantw o m en and20cases o f recur-rent spontaneous aborti o n patients.R esults The expression o f I L-18w ere observed i n duc i d ua o f nor m al earl y pregnan tw o m en and recurrent spontaneous abo rtion patients,in RSA they w eve m a i n l y ob-served in cy toplas m of stro m al ce lls,i n no r m a l early pregnan twom en t h ey w eve m ainly obser ved in cy-top las m of the g land epithe li a.l They have no sign ificant d ifference(P>0 05). The expressi o n o f I L-18w ere observed i n villi o f nor m a l early pregnan tw o m en and recurren t spontaneous aborti o n pa-tients,they allw ere obser ved in the cytoplas m of cyto trophob last and syncytiotrophoblas,t i n recurren t spon taneous abortion patientsw ere higher si g nifican tl y than that in nor m a l early pregnantw o m en(P< 0 01).Conc l u sion The expression of I L-18w ere obser ved in both of duci d ua and v illi of recur-rent spontaneous aborti o n patients. The higher expressi o n o f hum an v illim ay be i n vo lved in the path-ogenesi s of RSA.The role o f I L-18in RSA need further study.KEY WORDS Recurrent spontaneous abo rtion;I L-18;Ducidua;V illi复发性流产(recurrent spontaneous aborti o n, RSA)是指连续发生两次或两次以上的自然流产,在人群中发生率约为1%。
小鼠Th1Th2的检测方案
小鼠Th1Th2的检测方案小鼠Th1/Th2的检测检测原理小鼠Th1/Th2 细胞及Tc1/T c2 细胞与人的相似，均可分泌多种细胞因子:Th1 细胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-β/α等;Th2 细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6 和IL-10刺激素选用PMA(佛波酯)+ Ionomycin(离子霉素),Monensin(莫能星)将细胞因子阻止在细胞内高尔基体。
采用CD3 和CD8 反设门法，即CD3+CD8+代表T c，CD3+CD8-代表Th，在此基础上得到IFN-γ和IL-4 表达的百分率。
【试剂】PMA、Ionomycin、Monensin 和RPMI1640、固定剂、破膜剂、红细胞裂解液等CD3、CD8、IFN-γ、IL-4抗体管号加入的抗体注释1 空白对照2 CD3 荧光补偿3 CD8 荧光补偿4 IFN-γ荧光补偿5 IL-4荧光补偿6 CD3CD8 IFN-γIL-4 CD3+CD8- IFN-γ+为Th1 细胞CD3+CD8- IL-4+为Th2 细胞CD3+CD8+ IFN-γ+为T c1 细胞CD3+CD8+ IL-4+为Tc2 细胞【实验步骤】1) 全血标本：取90ul 肝素钠（不可用肝素锂、EDTA或枸橼酸钠）抗凝全血标本于试管中，用RPMI 1640稀释至600ul；2) 加入15μl 1μg/mlPMA 工作液+ 12μl 50μg/ml Ionomycin 工作液+ 10.2μl 0.1mg/ml Monensin 工作液，混匀3) 37℃，5% CO2 培养箱培养4～6 小时。
(不能超过6 个小时)4) 将己处理的全血分成6 管，每管100μl, 编号为1、2、3、4、5、65) 按上表加入0.25ug 抗CD3和0.5ug 抗CD8抗体, 室温，避光孵育15 分钟6) 每管中加入100μl固定液，室温，避光孵育15 分钟7) 每管中加入3mL PBS，1200 rpm 离心5 分钟，弃除上清。
雌激素及其受体与原因不明复发性流产
复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）是指与同一性伴侣连续发生3次或3次以上自然流产[1]，且大部分的流产都发生在早期妊娠未检测到胎心之前。
RSA病因复杂，常见的病因有感染因素、生殖道解剖异常、环境理化因素、染色体异常等。
但仍有50%病因不明，称为原因不明复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）。
妊娠生殖免疫学认为，胚胎携带1/2有异于母体的组织抗原，妊娠类似同种异体移植。
认为流产是妊娠妇女对胚胎免疫排斥的结果，进而导致同种异体移植失败[2]。
国内外研究URSA与雌激素受体（estrogen receptor,ER）介导的母胎界面的免疫耐受的相关性文章较少，且观点各有差异。
现将相关观点综述如下。
ER在人体内分布、分子结构与功能ER主要分2种亚型：ERα和ERβ。
ER在人体的各个组织器官均有表达，通过使用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、原位杂交及免疫组化等实验技术，明确了ERα和ERβ在人体不同组织（包括可再生组织和非再生组织）中的分布情况，并已有报道。
ERα和ERβ的组织分布和表达量随性别及年龄的不同而有区别：在两性的非再生组织中，ERα和ERβ同时大量存在的组织是中枢神经系统[3]。
ERα大量存在于肝组织中，ERβ则在心血管、肺、肠、胃肠连接处、骨组织中含量较高。
在女性可再生组织中，ERα和ERβ主要存在于卵巢及乳房中，而子宫中以ERα为主[4]。
在男性的可再生组织中，ERα和ERβ主要存在于睾丸中，前列腺中则以ERβ为主[5]。
ERα和ERβ在氨基末端和羧基末端存在明显的结构差异。
在氨基末端只有15％的同源性，活化功能域AF-1即位于此区域。
配体结合域（LBD）位于羧基末端，只有55％的同源性，提示在2种ER 与配基结合的特异性方面有明显差异，并且配体依赖性的活化功能域AF-2亦位于羧基末端[6]。
Th_1_Th_2细胞因子失衡致自然流产机理及治疗研究进展
p 文献综述p Th1/Th2细胞因子失衡致自然流产机理及治疗研究进展n耿会转1陆启滨2(1.南京中医药大学南京210046;2.江苏省中医院妇科南京210029)关键词:Th1/T h2细胞因子;自然流产;机理;治疗;综述中图分类号:R271.19文献标识码:A自然流产的发生机制至今不甚明确,应用免疫治疗能够使大多数妊娠得到继续,反应了自然流产的发生与免疫因素的相关性,近年来在生殖医学领域T辅助细胞(Th)成为研究的热点。
已经有不少研究表明,正常妊娠时以Th2型细胞因子为主[1],自然流产时出现向Th1型细胞因子偏移现象[2]。
现就Th1/Th2细胞因子平衡失调致自然流产的机理及相关治疗研究进展作一综述。
1机理研究1.1Th1、Th2细胞因子与妊娠1991年Ro m agnan i发现人类CD+4T细胞(表达CD4的T淋巴细胞)主要存在Th1、Th2两个亚群。
Th1细胞主要分泌白介素-2(I L-2),干扰素-C(I FN-C),肿瘤坏死因子-A(TNF-A),白介素-12(I L-12)等,Th2细胞主要分泌白介素-4(I L-4),白介素-10(I L-10)等。
他们分泌的细胞因子反过来作用于Th细胞,I L-4、I F N-r及I L-2的相互作用是维持Th1/Th2平衡的关键[3]。
1993年W eg m ann在小鼠母胎界面的研究发现正常妊娠的母胎界面上出现Th2偏移,以分泌I L-4,I L-5,I L-6,I L-10为主。
Rezae i等对自然流产的早期妊娠妇女和正常早孕妇女血清细胞因子水平及淋巴细胞表达细胞因子水平进行检测,发现血清I L-2、TNF-A水平显著高于正常,其淋巴细胞分泌的I L-2、I F N-C、TNF-A亦显著升高,认为升高的Th1细胞因子可做被看作预测妊娠结局的指标。
现代生殖免疫学认为,妊娠是成功的半同种移植过程,在母体免疫功能正常时,Th1/Th2细胞因子处于相对平衡状态,既保护母体不受外来微生物的侵犯,又对宫内胚胎移植物不发生免疫排斥反应,并维持妊娠的继续[4];对妊娠有不利作用的Th1细胞因子占优势,使正常的平衡被打破,细胞因子对妊娠的破坏作用就显现出来。
胎膜早破原因与血清中Th1Th2细胞因子变化的相关性研究
妊娠是最成功的同种异体自然移植。
妊娠期母体Th l/Th2免疫调节过程维持着一种微妙的、依据妊娠进程不断变化的平衡过程[1]。
胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)是产科常见的并发症。
发生的机制和原因目前尚不清楚。
损伤，宫颈口松弛，妊娠后期性交导致机械性损伤或引起感染，生殖道感染，可由细菌、病毒或弓形体等微生物引起；羊膜腔内压力异常(如羊水过多、多胎妊娠)，胎先露部与骨盆入口未很好衔接(如头盆不称，胎位异常等)，胎膜发育不良至菲薄脆弱等均可致胎膜早破。
另外，胎膜早破可能与Th l/Th2变异（平衡紊乱）有关。
为此，我们测定胎膜早破孕妇血清中Th1型细胞因子代表因子IFN-γ、IL-2及Th2型细胞因子代表因子IL-4、IL-10的含量，观察它们在胎膜早破患者血清中的变化,并分析Th1/Th2在胎膜早破发生中的部分机理。
现将结果报道如下。
1临床资料1.1一般资料选取2010年1月~2012年1月收住院分娩者，入院时未临产的胎膜早破孕妇86例。
平均年龄27.6岁，孕周28～38+6周，平均35.7周。
并随机抽取同期产科门诊定期产前检查，无临产、感染及破膜征象的正常孕妇100例为对照组，平均年龄28.3岁，孕周28～37周，平均36.1周。
所有孕妇均无产科及其他合并症。
胎膜早破组与对照组年龄及孕周相比，P>0.05无显著性差异。
阴道炎：如有白带增多，阴部瘙痒，分泌物涂片可见革兰氏阴性杆菌、加德纳菌、滴虫、霉菌、伴有尖锐性湿疣、宫颈糜烂。
血常规白细胞正常或高于正常，中性粒细胞正常或高于正常。
1.2绒毛膜羊膜炎的诊断标准[2]1)有症状者以胎膜组织病理检查呈炎症反应，产前或分娩24h后体温≥37.5℃，恶露臭味，白细胞计数升高为标准。
2)无症状者以胎膜病理结果呈炎症反应为标准。
1.3胎膜组织绒毛膜羊膜炎病理分期标准[3]I期：中性粒细胞浸润少、散在，几乎全部局限于绒毛板下纤维蛋白沉积物内，或胎膜的蜕膜层。
树突状细胞与妊娠免疫调节
2024年省级历史骨干教师培训心得总结，1800字今年参加省级历史骨干教师培训，对于提升自己的教学水平和专业素养有着非常大的帮助。
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影响不明原因复发性流产的相关因素及治疗新进展
影响不明原因复发性流产的相关因素及治疗新进展李仁燕;杨学妞;廖会姝;李练兵;马明福;谭桂香【摘要】不明原因复发性流产发生率约占复发性流产的50％.本文阐述了近年来影响不明原因复发性流产(URSA)的因素,细胞免疫、基因多态性与心理因素,以及相关治疗措施的研究进展,为进一步研究URSA及其有效治疗奠定基础.【期刊名称】《中国生育健康杂志》【年(卷),期】2016(027)003【总页数】5页(P279-282,292)【关键词】不明原因复发性流产;细胞免疫;基因多态性;心理因素【作者】李仁燕;杨学妞;廖会姝;李练兵;马明福;谭桂香【作者单位】400020重庆,国家卫生计生委出生缺陷与生殖健康重点实验室/重庆市人口和计划生育科学技术研究院;重庆市人口和计划生育科学技术研究院附属医院;重庆市人口和计划生育科学技术研究院附属医院;400020重庆,国家卫生计生委出生缺陷与生殖健康重点实验室/重庆市人口和计划生育科学技术研究院;400020重庆,国家卫生计生委出生缺陷与生殖健康重点实验室/重庆市人口和计划生育科学技术研究院;重庆市人口和计划生育科学技术研究院附属医院【正文语种】中文自然流产连续发生3次或3次以上的称为复发性流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)，也有人认为是发生于20周内的2次或2次以上的流产[1]。
RSA发生率占育龄妇女的1%～5%[2]。
目前已确定的RSA危险因素包括染色体、生殖道解剖、内分泌和自身免疫功能异常及生殖道感染等病因。
此外，仍有近50%的RSA原因不明，即不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA)[3]。
本文综述了近年来研究影响URSA的相关因素及其治疗的研究进展。
一、影响URSA的相关因素1.细胞免疫：在妊娠期胚胎发育的不同阶段，子宫局部的免疫环境不同，这种免疫环境的改变和转换对成功的妊娠十分重要。
TH1TH2细胞调节性T细胞和HLA-DR细胞流式细胞仪检测步骤
刺激剂配方：【试剂】PMA贮存液：PMA 溶于DMSO(二甲基亚砜)，浓度为0.1mg/ml，-20oC 保存工作液：贮存液1:100 稀释于RPMI 1640(不含小牛血清-FBS)或PBS(无菌，无NaN3)中，此时为1μg/ml工作浓度：25ng/ml细胞培养：每100μl 反应体系加工作液2.5 μl 工作液Ionomycin贮存液：Ionomycin 溶于DMSO，浓度为1mg/ml，-20oC 保存工作液：贮存液1:20 稀释于RPMI 1640(不含小牛血清-FBS)或PBS(无菌，无NaN3)中，此时为50μg/ml工作浓度：1μg/ml细胞培养：每100μl 反应体系加工作液2 μl 工作液BFA(Brefeldin A)贮存液：BFA 溶于DMSO，浓度为5mg/ml，-20oC 保存工作液：贮存液1:10 稀释于RPMI 1640(不含小牛血清-FBS)或PBS(无菌，无NaN3)中，此时为0.5mg/ml工作浓度：10μg/ml细胞培养：每100μl 反应体系加工作液2 μl 工作液Monensin贮存液：Monensin 溶于甲醇，浓度为50mg/ml,为加速溶解，可置于40oC 到43oC 水浴。
4oC 保存至少4个月工作液：贮存液1:500 稀释于RPMI 1640(不含小牛血清-FBS)或PBS(无菌，无NaN3)中，此时为0.1mg/ml工作浓度：1.7 μg/mlTreg检测步骤1、取2ml全血，1：1PBS稀释；2、取复温后的人淋巴细胞分离液3ml，置于离心管；3、将4ml稀释后的血液缓铺于淋巴细胞分离液之上；4、1500rpm离心30min，取中段白色淋巴细胞层；5、加PBS2ml后，1500rpm离10min，去上清，加300μlDMEM培养基6、取A（同型对照管）,B（检测管）两管，分别加上液100μl，分别均加入2.5μlCD4／CD25(2.5μl)混合抗体，4度避光孵育30min；7、加2ml冷的 PBS，后1500rpm离心5min，去上清；8、旋涡震荡重悬细胞后加入1ml的固定/破膜工作液(Foxp3 Fixation/Permeabilization，1：3稀释，concentrated 与diluted 配合使用，现配现用)，并再次旋涡混匀；9、4℃避光孵育60分钟；10、加入2ml Permeabilization Buffer(Cat.No 00-8333，此为10X，须与蒸馏水1：10稀释成工作液)工作液离心洗涤细胞并弃去上清液；11、重复第10步操作洗涤细胞；12、加入正常大鼠血清2ul，在避光4℃孵育15分钟；13、封闭液无需洗去，分别在A管中直接加入的荧光标记Rat IgG2a抗体2.5ul，B管中直接加入的荧光标记FOXP3抗体2.5ul，避光4℃孵育至少45分钟。
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ｇｍｍａ ＮＦ一７ ａ ，Ｉ ）／白介素一４（ｎｅｌｕ ｉ一４ Ｌ一４ 、白介素一１ Ｉｔｒ ｕ ｉ一１ ： Ｌ一１ ）为代表 ，采用原 Ｉｔｒ ｋｎ ，Ｉ ｅ ） ０（ｎｅｌ ｋｎ ０ Ｉ ｅ ０
位 杂交及 免疫 组化方法对 ４ Ｏ例药 物流产患者绒毛和蜕膜 中 Ｉ ２ ＮＦ一 Ｌ一 、Ｉ 、Ｉ ４ Ｌ一１ Ｌ一 、Ｉ ０的表达进行检测 （ 实
验组 ） ，利 用计 算机 Ｃ ＡＳ系统 ，表达指标 以阳性数密度 （ Ｓ ＭＩ Ｎ／ ）计算 ，并 与 ４ Ｏ例 正常人 工流产的绒 毛和蜕膜 组织 比较 （ 照组） 对 。结果 原位 杂交显示 实验组 绒毛组织 几 一２ Ｎ 、Ｉ Ｆ一７ Ｌ一４ 、Ｉ 、 一１ Ｏ分 别 为 ［（ ． ０ ± ００３ ０ ０ １ 、（．０ ＋０００７、（． ±００ 、（．３ ４００８ ］ ． ０ ） Ｏ０２７ ．０ ） ０Ｏ ．） Ｏ０１ －．０ ） ，与对照组 ［（． ０ －０ ０ １ 、（ ． ０ ±０ ００７ 、 ｏ ０ ２７＋ ． ０ ） ０ ０ ２８ ． ０ ） －
（． － ． ） （． ４ ４０ ０ １］ 比 较 ，Ｉ Ｏ ０４ ０ 、 Ｏ ０ ２ － ． １ ） ＝０ Ｌ一１ 异 有 统 计 学 意 义 （ ＜ ０ ０ ） Ｏ差 Ｐ ． ５ 。蜕 膜 组 织 实 验 组 几 一２ 一 、Ⅱ
几 一４ Ｌ一１ （ ． ±ｏ Ｏ 、（． 土０ ｏ ／ ｏ０ ９ ． １ ） Ｏ ０ ８ ． １ ） 与对照组 ［Ｏ Ｏ ． ） （ ． ± 、Ｉ Ｏ［ Ｏ ｏ ． ） Ｏ Ｏ ． ） （． ２ ±００ ０ 、（ ． ２ ±０ ０ ０ ］ （ ． ±０ Ｏ 、 ０ Ｏ ０ ０ ／ ０ ０ １ ． ０ ） ０ ０ ２ ． ０ ） 比较 ，差异无统计 学意义 （ ＞Ｏ ０ ） ． ） （． ３ 士０ ０ ５ 、（． ３ ±０ ０ ６ ］ Ｐ ． ５ 。免疫 组化结果 显示与原位 杂交
生国妇产科Ｉ 盘查 晦
生 月 蕞ｌ 卷 第 ２ ０ 期
Ｃ ｉ Ｊ ｌ ｂｔ ｙ ｅ ｌ Ｍａｃ ２０ ， ｏ １， ｏ２ ｈ ＣｉＯ ｓ ｔ ｎｃ ｒｈ ０９Ｖ １ ０Ｎ ． ｎ ｎ ｅＧ ｏ Ｔ ｌ Ｔ ２型细 胞 因子 在 药 物 流 产 绒 毛 ｈ／ｈ 和 蜕 膜 组 织 中 的表 达
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夏革 清 王泽 华 吴超英
【 要 】 目的 了解 米 非 司酮 药 物 流 产 局 部 绒 毛 、蜕 膜 组 织 中 Ｔ ｌ Ｔ ２型 细 胞 因 子 的表 达 ，进 一 步 探 讨 摘 ｈ／ ｈ
药物流产 发病机制 。方法
Ｔ １Ｔｈ 细胞 因子 以 白介素 一２ （ｎｅｌｕ ｉ ｈ ／ ２型 Ｉｔｒ ｋｎ一２ Ｌ一２ 、干 扰素 一 （ｎｅｆｒｎ ｅ ，Ｉ ） Ｉｔｒ ｏ ｅ
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一
致 。结 论
绒 毛 组 织 Ｔｈ ／ ２型 细胞 因 子 与 流 产 有 关 ，蜕 膜 组 织 Ｔ １ Ｔ ２型 细 胞 因 子 与 药 物 流 产 无 关 ，绒 毛 １Ｔｈ ｈ／ ｈ
组织Ｔｈ ／ ｈ 平衡 失调是米非司酮导致流产 的机制之一 。 １Ｔ ２
【 键 词】 Ｔｈ ／ ｈ ；米 非 司酮 ；胎 盘 免 疫 关 １Ｔ ２