大孔树脂分离荷叶生物碱

项目名称：大孔树脂分离荷叶生物碱
【任务分解】
生产订单
荷叶生物碱提取物100kg，总生物碱（Total Alkaloids）>4%，水分<5%，灰分<5%，国标检测；价格：￥400元/Kg。

工艺筛选
常规工艺
1、大孔树脂分离荷叶生物碱：树脂预处理→装柱→上样→洗脱→收集→回收溶剂→浓缩→干燥→荷叶生物碱。

流程分解
大孔树脂分离荷叶生物碱主要包括树脂预处理，静态吸附，动态吸附，三个工艺，我们今天学习这些常规、最基础的分离技术。

操作流程
①树脂预处理、装柱及平衡
预处理
用去离子水漂去树脂中细小颗粒树脂→湿法装柱→用2BV4%的HCL 溶液，以 5BV/H 的流速通过树脂层，并浸泡3小时，而后用去离子水以同样流速洗至水洗液呈中性（pH 试纸检测 pH=7）。

→用2.5BV 5%的NaOH 溶液，以 5BV/H 的流速通过树脂层并浸泡3小时，而后用去离子水以同样流速洗至水洗液呈中性（pH 试纸检测 pH=7）。

湿法装柱
于吸附柱内加入相当装填树脂 0.5 倍的水，然后将新大孔树脂投入柱中，把过量的水从柱底放出，并保持水面高于树脂层表面约 20 厘米，直到所有的树脂全部转移到柱中。

从树脂低部缓缓加水，逐渐增加水的流速使树脂床接近完全膨胀，保持这种反冲流速直到所有气泡排尽，所有颗粒充分扩展，小颗粒树脂冲出。

柱平衡
用2倍树脂床体积（2BV）的乙醇，以 2BV/H 的流速通过树脂层，并保持液面高度，浸泡过夜。

用2.5-5BV 乙醇，2BV/H 的流速通过树脂层，洗至流出液加水不呈白色浑浊为至。

从柱中放出少量的乙醇，检查树脂是否洗净，否则继续用乙醇洗柱，直至符合要求为止。

检查方法： a．水不溶性物质的检测取乙醇洗脱液适量，与同体积的去离子水混合后，
溶液应澄清；再在10℃放置30分钟，溶液仍应澄清。

b．不挥发物的检查取乙醇洗脱液适量，在200～400nm 范围内扫描紫外图谱，在250nm左右应无明显紫外吸收。

用去离子水以2BV/H 的流速通过树脂层，洗净乙醇。

②待分离液制备
称取粗荷叶生物碱提取物2.0g→超声波溶解于100ml 5%的乙醇溶液→抽滤→滤液备用
③静态吸附
取预处理好的树脂5ml（树脂层体积）→置125ml锥形瓶中→加入15ml荷叶生物碱待分离液→再加入25ml5%的乙醇溶液→使锥形瓶中液体体积达50ml→超声波振荡15min→静置15min→过滤树脂→滤液（Ⅰ）→树脂→加入45ml5%的乙醇溶液→过滤树脂→滤液（Ⅱ）→合并滤液（Ⅲ）→检测
滤后树脂→加入45ml95%的乙醇溶液→超声波振荡15min→静置15min→过滤树脂→滤液（Ⅳ）→树脂→加入45ml95%的乙醇溶液→过滤树脂→滤液（Ⅴ）→合并滤液（Ⅵ）→检测
G（树脂吸附量）=树脂吸附荷叶生物碱量/树脂层体积（mg/ml）
④动态分离（BV=70ml）
按照静态吸附结果，计算上样量。

上样体积=G*BV/20(ml) *20%
上样流速V0=1.0 BV/h，借助核算蛋白分析在线观察洗脱图谱，确定馏分分段界线。

洗脱条件如下表
流速（BV/h）乙醇浓度（%）洗脱体积（BV）检测点
2.0 20 0.5
*
0.5
1.5 40 *
0.5
*
0.5
0.5
1.5 60 *
0.5
*
0.5
*
0.5
2.0 80 *
1.0
*
检测方法
参照GB/T 8312-2002；
操作分工
1、单元模块前期操作，暂不按照公司开展；
2、每两人一组，最后出现单数，三人一组分工合作。

文献推荐
1. 王锋鹏. 生物碱化学[M]，北京：化工出版社，2008.
2. 史作清. 吸附分离树脂在医药工业中的应用[M]，北京：人民卫生出版社，2008.
3.中国期刊全文数据库，以关键词检索“荷叶生物碱”及“大孔树脂”，寻找文献.
4.在百度或谷歌中搜索“生物碱分离”，查看相关文献。