高效液相色谱法测定酒石酸泰乐菌素有关物质的研究
兽药酒石酸泰乐菌素质检报告及产品说明-天下无喘
河南正大动物药业有限公司原料检验报告原料名称酒石酸泰乐菌素检验日期2012年05月20日规格5kg/桶报告日期2012年05月27日检品来源仓库待验区检验项目全检批号20120520 数量50kg检验依据《中国兽药典》2005年版一部检验项目标准规定检验结果项目结论【性状】本品应为白色淡黄色粉末本品为淡黄色粉末符合规定【鉴别】(1) 应呈正反应呈正反应符合规定(2) 应呈正反应呈正反应符合规定(3) 在有关组分项下记录的色谱中,供试品在有关组分项下记录的色谱中,供试品符合规定溶液泰乐菌素A峰的保留时间应与标准溶液泰乐菌素A峰的保留时间应与标准品溶液中泰乐菌素A峰的保留时间一致品溶液中泰乐菌素A峰的保留时间一致(4) 应呈正反应呈正反应符合规定【检查】酸碱度 PH值应为5.0～7.2 测得的PH为6.8 符合规定干燥失重减失重量不得过4.5%减失重量为2.8% 符合规定酪胺在570nm的波长处测定,供试品在570nm的波长处测定,供试品符合规定溶液的吸收度不得大于对照溶液的吸收度溶液的吸收度小于对照溶液的吸收度泰乐菌素按峰面积归一法计算,含泰乐菌素含泰乐菌素A为85%，泰乐菌素符合规定组分A应不底于80%,泰乐菌素A、B、C、D之和应不底于95% A、B、C、D之和为98% 符合规定【含量测定】按干燥品计算,每1mg的效价不得少于800泰乐菌素测得的结果为850IU 符合规定天下无喘主治：各种原因引起的呼吸道疾病主要成份：酒石酸泰乐菌素、强力霉素、交沙霉素、茶多酚、卡美丁、青黛等性状：本品为类白色至微黄色粉末药理作用：酒石酸泰乐菌素与强力霉素为新型的广谱抗菌剂，联用增强干扰酷胺TRNA与A位结合并且抑制菌体蛋白质的全成，从而起到杀灭细菌作用；卡美丁作为一种新型平喘化合物，具有见快、半衰期长、无残留、无毒副作用，并且增进体内分布吸收迅速、分布广、生物利用度高、排泄慢、有效血药浓度维持时间长，并能通过血脑屏障；常用于全身细菌性感染，并且彻底克服了由药物所致的再生障碍性贫血，不易产生耐药性。
泰乐菌素检测方法研究进展
受检标本（ 测定其 中的抗体或抗原） 和酶标抗原或 抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起 反应。用洗涤 的方法使固相载体上形成的抗原抗体
复合物与其他物质分开 ， 最后结合在 固相载体上 的 酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶
１ 微生物效价法
微生物效价法是经典的抗生素含量测定方法，
法、 高效液相 一 质谱联用法等泰乐茵素的检测分析的方法及进展。 关键词 ： 饲料； 乐菌素； 泰 检测方法 ［ 中图分类号】 ￥５ 。９ １ ８９７９ ［ 文献标识码］ Ａ ［ 文章编号］ １０ － ０ （０９ ０ － ４ ４ ０４６ ４ ２０ ）３ ０ １） ７ ０ ３
Ｒｅ ａ ｃ ｒ ｇ ｅ ｓｏ ｙ ｏ ｉ ｔｃｉ ｇ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｓ ｒ ｈ Ｐ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｔ ｌｓｎ Ｄｅｅ ｔ ｔ ｏ ｎ
畜牧兽 医杂志
第２ ８卷
第 ３期
２０ ０９年
４ １
泰乐 菌素检 测方 法研究进 展
张 眉 ， 龚月生 马国际 ，
（． １西北农林科技大学动物科技学院， 陕西 杨凌 ７２０ ；． １１０２ 陕西省畜牧推广总站）
摘 要： 本文主要综述 了近年来微生物法、 酶联免疫法、 紫外分光光度法、 生物传感器法、 高效液相色谱
［ 收疆 日期】 ２０・ － ０８１ ２ ２９ ［ 作者简介】 张眉（９ １ ， 陕西泾阳人 ， １７ 一）女， 硕士 ， 牧师， 畜 从 事饲料检测工作 。
３ 紫外分光光度法
一 一
紫外分光光度计 的原理是利用一定频率的紫外 可见光照射被分析的有机物质， ｆ 弓起分子 中价
电子的跃迁， 它将有选择的被吸收， 在紫外可见光的 范围内， 对于一个特定的波长 ， 吸收的程度正比于试 样中该成分的浓度 ， 因此可利用ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ量光谱可进行定
酒石酸泰乐菌素
酒石酸泰乐菌素Jiushisuan TailejunsuTylosin tartrate本品为泰乐菌素的酒石酸盐。
按干燥品计算，每1mg的效价不得少于800泰乐菌素单位。
【性状】本品为白色至淡黄色粉末。
本品在三氯甲烷中易溶，在水或甲醇中溶解，在乙醚中几乎不溶。
【鉴别】（1）取本品约3mg，加吡啶7.5ml、醋酐2.5ml使溶解，放置约10分钟，溶液应显绿色。
（2）取本品约3mg，加丙酮2ml溶解后，加盐酸1ml，溶液由淡红色渐变为深紫色。
（3）在泰乐菌素组分项下记录的色谱图中，供试品溶液泰乐菌素A峰的保留时间应与标准品溶液泰乐菌素A峰的保留时间一致。
（4）本品的水溶液显酒石酸盐鉴别（1）项的反应（附录23页）。
即：取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管的内壁成银镜。
【检查】酸碱度取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含25mg的溶液，依法测定（附录56页），pH值应为5.0～7.2。
酪胺取本品（约相当于泰乐菌素50mg），精密称定，加甲醇5ml使溶解，加10%吡啶溶液2ml与2%茚三酮溶液2ml，用锡箔密封，置85℃水浴中加热30分钟，迅速放冷，定量转移至25ml量瓶中，加水稀释至刻度，作为供试品溶液；精密量取每1ml中含酪胺35µg的酪胺甲醇溶液5ml，同法制备，作为对照品溶液。
立即照紫外-可见分光光度法（附录26页），在570nm的波长处测定，供试品溶液的吸光度不得大于对照品溶液的吸光度。
干燥失重取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥至恒重，减失重量不得过4.5%（附录78页）。
炽灼残渣不得过2.5%（附录80页）。
重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录75页），含重金属不得过百万分之二十。
泰乐菌素组分照高效液相色谱法（附录36页）试验。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以2mol/L高氯酸钠溶液（用1mol/L盐酸溶液调节pH值至2.5+0.1）-乙腈（60：40）为流动相；检测波长为280nm。
高效液相色谱法检测鸡肉中的泰乐菌素
高效液相色谱法检测鸡肉中的泰乐菌素罗玉莹;王艳;李艳萍【摘要】建立了鸡肉中泰乐菌素的高效液相色谱检测方法.样品经甲醇提取,正己烷脱脂.流动相为甲醇:磷酸二氢钾(0.04 mol/mL,pH 2.5)溶液,流速为1 mL/min,等度洗脱.泰乐菌素浓度在2μg/mL~16μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数R2=0.9997.在2.0μg/mL,3.0μg/mL,4.0μg/mL3个添加水平下,回收率范围为96.33%~101.73%,精密度为4.41%.该方法灵敏,简单,快速且准确,适用于鸡肉样品中泰乐菌素残留量的检测.【期刊名称】《石油化工应用》【年(卷),期】2018(037)006【总页数】4页(P127-130)【关键词】高效液相色谱;泰乐菌素;鸡肉【作者】罗玉莹;王艳;李艳萍【作者单位】银川大学石油化工学院,宁夏银川 750105;银川大学石油化工学院,宁夏银川 750105;银川大学石油化工学院,宁夏银川 750105【正文语种】中文【中图分类】O657.7泰乐菌素（tylosin）是从弗氏链霉菌的培养液中获得的一种抗生素，称为大环内酯类抗生素[1]。
作为饲料添加剂，长期过量使用或使用不当的给禽畜使用抗生素，就会间接对人类的健康构成严重的危害，严重者可造成过敏性休克，甚至会危及到生命。
2006年欧盟成员国就全面禁止使用抗生素作为促生长剂[2]。
目前，大环内酯类兽药的检测方法主要有：微生物法[3，4]、气质联用法（GC/MS）[5]、超高效液相色谱-串联质谱法（UPLCMS/MS）[6]、高效液相色谱法（HPLC）[7]。
泰乐菌素对分离样品的要求极高，而高效液相色谱法不仅能实现很好地分离，准确进行定性和定量分析，还大大降低了分析成本[8]。
在牛奶、废水等介质中泰乐菌素检测都有研究，但有关鸡肉中泰乐菌素的检测，目前鲜见报道，所以本文利用高效液相色谱法，作为研究鸡肉中的泰乐菌素的检测方法。
高效液相色谱法检测泰乐菌素在肉鸡组织中的残留
第19卷第5期中 国 兽 医 学 报V o l.19,N o.5 1999年9月Ch inese Jou rnal of V eterinary Science Sep t.1999高效液相色谱法检测泰乐菌素在肉鸡组织中的残留孔 科1,袁宗辉1,范盛先1,王大菊1,卿柳庭1,周诗其1,杨尔宁2,操继跃1 (1.华中农业大学畜牧兽医学院湖北武汉430070;2.华中农业大学食品科技系)摘要:将肉鸡的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织制成匀浆,用乙腈、石油醚和二氯甲烷萃取、净化后,用乙腈定容。
以乙腈-甲醇-0.005mo l L磷酸二氢铵溶液(60∶30∶10)为流动相,用高效液相色谱检测。
本法对溶解于乙腈中的泰乐菌素的最低检测限为0.05m g L,在肉鸡各种组织中的最低检测限为0.10m g L。
标准曲线的线性范围为0.10～6.40m g L。
泰乐菌素质量浓度为0.10、0.80、6.40m g L时的批间变异系数分别为(2.3±0.2)%、(1.9±1.3)%、(2.6±0.9)%。
0.20、0.40、0.80m g L的泰乐菌素在以上4种组织的回收率均符合残留检测的要求。
结果表明,本法是一种灵敏、精密、可靠的检测肉鸡组织中泰乐菌素残留的分析方法。
关键词:泰乐菌素;肉鸡;残留;高效液相色谱法中图分类号:S859.84 文献标识码:A 文章编号:100524545(1999)0520489203 泰乐菌素(T ylo sin,C46H77NO17)作为一种动物专用的大环类酯类抗生素,在国内养鸡业中已广泛应用。
测定泰乐菌素在生物组织中残留的生物法[1,2],其最低检测限高。
近年来,国外已有报道用高效液相色谱法[3～6]检测泰乐菌素在猪[7]、牛[8]和肉鸡[9]组织中的残留。
但到目前为止,国内尚无有关泰乐菌素残留的可靠的检测方法。
本研究旨在建立一种方便、准确、可靠的检测肉鸡组织中泰乐菌素残留的方法。
泰乐菌素在提取工艺中溶液中的稳定性研究
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｙｌ ｔ ｏ ｓ ｉ ｎ； ｓ ｔ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ； ｐ ｏ ｔ ｅ ｎ ｃ ｙ
泰乐菌素 （ Ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ） ， 亦称泰农 、 泰乐霉素 ， 是美 国于 １ ９ ５ ９年从弗 氏链霉菌 （ Ｓ ｔ ｒ ｅ ｐ ｔ ｏ ｍ ｙ ｃ ｅ ｓ ｆ ｒ ａ ｄ ｉ ａ ｅ ） 的 培养液中获得的一种大环 内酯类抗生 素… 。泰乐
菌素为一种白色粉末结晶 ， 微溶于水 ， 呈碱性。产品 有酒石酸盐 、 磷酸盐 ， 易溶于水。其水溶液在 ２ ５ ℃、
（ １ ） 泰乐菌素发酵液 ； （ ２ ） 泰乐菌素滤液 ； （ ３ ） 泰 乐菌素Leabharlann 溶液 。 １ ． ２ 方 法
１ ． ２ ． １ 泰乐菌素发酵液 （ １ ） 取１ ０ ０ ｇ 聚铝 ， 加人 ３ ０ ０ ｍ Ｌ水， ８ ０ ￣ Ｃ 搅拌 １ ｈ 。
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｐ ｉ ｇ ｍｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ｉ ｎ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｓ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｉ ｆ ｂ ｒ ｏ ｉ ｎ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｄ ｅ ｔ ｅ ｍ ｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ｉ ｎ ａ ｃ ｅ ｒ ｔ ａ ｉ ｎ ｐ ｅ ｒ ｉ ｏ ｄ ｏ ｆ ｔ ｉ ｍｅ ｂ ｙ ＨＰ Ｌ Ｃ，ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｓ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｉ ｆ ｂ ｒ ｏ ｉ ｎ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ
高效液相色谱法测定复方泰乐菌素注射液组分含量
分 析测试 营养与饲料
高效液相色谱法测定 复方泰乐菌素注射液组分含量
武晋孝 J! 李淑琴 H! 宋艳红 J! 卢香玲 J! 王仲琴 J
LTLLLJY ^JI 山西省兽药监察所 " 山西太原
摘 要
LTLLH=%HI山西省疾病预防控制中心 " 山西太原
采用高效液 相 色 谱 法 测 定 复 方 泰 乐 菌 素 注 射 液 中 泰 乐 菌 素 和 氟 苯 尼 考 H 组 分 含 量 " 结 果 表 明 ) 该 制
注射液中泰乐菌素 ’ 氟苯尼考组分含量 ! 操作简便 !
E 摘自吉林畜牧兽医 F
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复方泰乐菌素注射液色谱图
H[ 泰乐菌素 T[ 泰乐菌素 _ :[ 泰乐菌素 ’
J[ 氟苯尼考
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" 方法与结果 HIJ 色谱条件
色 谱 柱 为 >?@ABCDE K41H 柱 " 取 高 氯 酸 钠 " 加
对照品溶液的制备 # 精确称取泰乐菌素 & 氟苯 尼 考 对 照 品 各 HL OU " 置 于 JLL O0 容 量 瓶 中 " 加
H
=I;AH& 9IJ 稳定性试验
在本试验 条 件 下 ! 样 品 溶 液 放 置 ;= M ! 泰 乐 菌 素 ’氟苯尼考 9 组分的含量测定结果 (9’G ’J ’L’;= M 各测定 ; 次 % 与放置 = M 相比基本不变 E 见表 <FN 其
高效液相色谱法测定黄酒中有机酸
陈化贮存技术等方面有关 。 因此 ， 测定黄酒中有机酸 的含量 对酒 的研 究 具有 重要 意义 。
有机 酸 的检测 方法 有很 多种 ，但 是 这些 方法 一
般要进行预分离 、 衍生化等繁琐 的前处理 ， 而且能达 到同时分离的有机酸种类较少【 ７ Ｊ 。 而高效液相色谱法 具有 ： 分离效率高 ， 选择性好 ， 检测灵敏度高 ， 操作 自 动化 ， 应用范 围广等优点。 所以选择用高效液相色谱
ｗ ｉ ｎ ｅ ｌ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｗ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｓ ｔ ． Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗ ｉ ｈ ｔ ｈ ｔ ｅ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ａ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ， ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｉ ｓ ｈ ｉ ｈ， ｇ ｈｉ ｔ ｓ
Ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ Ｌｉ ｑ ｕ ｉ ｄ Ｃｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ
ＹＥ Ｆｕ —ｒ ｏ ｎ ｇ ． ＣＨＥＮ Ｘｉ — ｄ ａ ｎ ． Ｎｉ Ｘｉ ａ — ｈｏ ｎ ｇ
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ， Ｏ ｎ Ｓ ｈ ａ ｏ ｘ ｉ ｎ ｇ ｒ ｉ ｃ ｅ ｗ ｉ ｎ ｅ ｉ ｎ ７ ｋ ｉ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｏ ｒ ｇ ｎｉ ａ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ（ ｏ ｘ ａ ｌ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ， ｔ ａ ｒ ｔ ａ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ， ｍ ｌ ａ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ 。ｌ ａ ｃ ｉ ｔ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ，ａ ｃ ｅ ｉ ｔ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ，Ｌ 一 ，ｃ ｉ ｔ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ，ｓ ｕ ｃ ｃ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ）ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｄ ，Ａ ｎ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｎ ａ ｉ ｆ ｏ ｎ ￣ｓ ｔ ｎｄ ａ ａ ｒ ｄ ｍｅ ｈ ｔ ｏ ｄ ｏ ｆ
食品中偏酒石酸的高效液相色谱法检测研究
２ Ｈ ａ ｈＤ ｐ ｒ ｅ ｔ ｆ ｕｉ ｅｈ ｏｏｙＢｏｏｉ ｌ ｎ ｉ ｅ ｎ ｎｔｕｅ ｆｚｏ ５ ０ ２ Ｃ ｉａ ． ｅｌ ｅ ａｔ ｎ ｊ ｎＴ ｃ ｎ ｌ ｉ ｇｃ ｇ ｅ ｒ ｇＩｓｔｔ ， ｈ ｕ３ ０ ０ ， ｈｎ ） ｔ ｍ ｏＦ ａ ｇ ｌ ａＥ ｎ ｉ ｉ ｕ
Ｒ Ａ— ｒａｉ Ａ ｉ Ｏ Ｏ ｇｎｃ ｃｄ色谱柱 为分 析柱 ，确立了食品 中偏酒石酸 的高效液相色谱检测法 。通过试验 ，考察 了 ９种
常见有机 酸对食 品中偏酒 石酸检测的影响 ，结果显 示 ，在试 验条件 下 ，９种有机 酸不会 对偏酒 石酸 的检 测造
成影 响。对方法 的回收率 和精 密度作 了分 析探讨 ，结果在所 确定 的实验 条件下 ，峰面积 和标 准溶 液在 ０ １～ ． ２ ｍ ／ Ｌ范围内呈 良好 线性 关 系 ，线 性 系数 大 于 ０ ９ ９ ０ ｇｍ ．９ ，回收 率处 于 ９ ． ％ ～１０ ０ ，变 异 系 数均 小 于 ００ ０．％
甲 醇 、 甲 酸 （ 谱 纯 ，德 国 ｍ ｒｋ公 司 ） 色 ｅｃ ，
硫 酸 （ 级 纯 ，上 海 试 一 化 学 试 剂 有 限 公 司 ） 优 ，
水 为 超纯 水 ，其余 试剂 均 为分析 纯 。 草酸 （ 级纯 ，中 国 医药 集 团上 海 化 学 试 剂 优
排斥色谱柱 ， 填料为磺化 的聚苯 乙烯 一二乙烯苯 共 聚 物 ，带有 ８ 交 联 氢 ，ｐ 范 围为 １～ ３ ％ Ｈ ，适
高效液相色谱法测定酒石酸美托洛尔缓释片中有关物质含量
流动相 ， 流速 为 １ｍ ・ ｉ～， ｌ ｍｎ 紫外检测波 长为 ２ ３ｎ 以外标法定量 。结果 ２ ｍ，
匀， 作为对照品溶液。照色谱条件进行测定， 取对照溶液 １ ０
注入液相色谱仪 ， 调节 检测 灵敏度 ， 主成 分色谱峰 的峰高为 使 满量程的 ２％ 一 ５ ， ０ ２ ％ 再精密量取供试品溶液 、 对照溶液各 １ ０
Ｔ ｅ ｆ ｗ ｒ ｔ ａ ． ｈ ｏ ａｅ ｗ ｓ１ ０ ｍｌ・ｍｉ ． ｈ ｅ ｅ ｔ ｎ ｗａ ｅｅ ｇｈ Ｗａ ２ ｍ． ｓ ｌｓ Ｃ ｎｅ ｔ ｆ ｅｅ ａ ｔｍａｅ ａ ｓｉ ｈ ｅ ａｃ ｅ ｆｓ ｍ— ｌ ｎ～ Ｔ ｅ ｄ ｔ ｃｉ ｖ ｌ ｎ ｔ ｓ ２ ３ ｎ Ｒｅ ｕ ｔ ｏ ｔｎ ｌｖ ｎ ｔｒ ｌ ｎ ｔ ｒ ｅ ｂ ｔｈ ｓｏ ａ ｏ ｏｒ ｉ ｐ ｅ Ｗ ｅ ｓ ｔａ ％ ． ｎ ｌ ｓｏ Ｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｉ ｅ ｓ ｈｇ ｌ ｐ ｃｆ ｅｆ ｉｎ ｎ ｅ ｒ ｄ ｃｂ ｅ ｉ ａ ｌｓ ｈ ｎ １ ｓ Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ ｈ ｔ ｏ ａ ｙ， ｉ ｈｙ ｓ ｅ ｉ ｃ， ｆ ｃｅ ｔ ｄ ｒ ｐ ｏ ｕ ｉｌ ｓ ｉ ｉ ａ Ｋｅ ｒ ｓ ｒ ｌ ｖ ｎ ｔ ｒ ｌ ＨＰ Ｃ； ｔｐ ｏ ｏ ａｔａｅ ｓ ｓａｎ ｄ ｒ ｌａ ｅ ｔ ｌ ｔ ｙ ｗｏ ｄ ：ｅ ｅ ａ ｔ ｍａ ｅ ａ ； Ｌ ｍｅｏ ｒ ｌｌ ｒ ｔ ｕ ｔ ｉ ｅ ｅｅ ｓ ａ ｅ ｉ ｔ ｒ ｂ
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泰乐菌素高效液相色谱检测方法的建立
泰乐菌素高效液相色谱检测方法的建立作者：王丽霞李生龙陈砀桐王君来源：《安徽农业科学》2020年第20期摘要 [目的]为了更加简便快速地检测出产品中泰乐菌素的含量，建立了泰乐菌素高效液相色谱检测方法。
[方法]检测波长290 nm，流速 0.6 mL/min，进样量20 μL，色谱柱选用C 18，柱温30 ℃，流动相选用乙腈∶甲醇∶0.025 mol/L磷酸二氢铵=25∶30∶5。
[结果]进样浓度在0.5～50.0 μg/mL与峰面积呈良好的线性关系（R2=0.999 9）;回收率较高，均在80%以上，变异系数在允许范围内（0～5%）;仪器重现性试验中，对照品连续进样10次，峰面积RSD为1.55%。
[结论]高效液相色谱法检测泰乐菌素及其制剂的含量准确可靠，稳定性、重复性好，精密度高，适用于兽药企业对泰乐菌素及其制剂质量自控。
关键词泰乐菌素;高效液相色谱法;检测方法;含量测定中图分类号 S859.84 文献标识码 A文章编号 0517-6611（2020）20-0206-04doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.20.055Establishment of HPLC Method for Determination of TylosinWANG Li-xia，LI Sheng-long，CHEN Dang-tong et al （Anhui Huaao Biotechnology Co.，Ltd.，Hefei，Anhui 231131）Abstract [Objective] In order to detect the tylosin content in the product more simply and quickly， a tylosin high performance liquid chromatography method was established.[Method]The detection wavelength was 290 nm，and the flow rate was 0.6 mL/min，and the injection volume was 20 μL，and the liquid chromatography was carred out by C 18，and the column temperature was30 ℃.With the mobile phase was acetonitrile∶methanol∶0.025 mol/L ammonium dihydrogenphosphate=25∶30∶45.[Result]The injection concentration of 0.5-50.0 μg/mL h ad a good linear relationship with the peak area （R2=0.999 9）; the recovery rate was above 80%， and the coefficient of variation was within the allowable range （0-5%）.In the instrument reproducibility test，ten successive injections of reference，the peak area RSD was 1.55%.[Conclusion]The detection of tylosin and its preparations by high performance liquid chromatography is accurate and reliable， with good stability， reproducibility and high precision. It is suitable for veterinary drug companies to control the quality of tylosin and its preparations.Key words Tylosin;High performance liquid chromatography;Detection method;Content determination泰樂菌素（tylosin）是一种大环内酯类抗生素 [1]，以淡黄色或白色粉末存在，易溶于水[2]。
HPLC法测定酒石酸泰万菌素有关物质的研究
HPLC法测定酒石酸泰万菌素有关物质的研究作者：郭强功包洁华童玉凤陆建中来源：《中国化工贸易·下旬刊》2019年第08期摘要：目的建立酒石酸泰万菌素有关物质的检测方法。
方法采用高效液相色谱法，色谱柱：C18柱，流动相：A相：0.06mol/L乙酸铵（冰乙酸调pH至3.6，再用磷酸调pH至3.0），1L乙酸铵溶液中加四丁基氢氧化铵0.75mL；B相：乙腈，梯度洗脱。
结果该方法能够有效的检测出酒石酸泰万菌素的杂质，方法简便、准确、重现性好。
关键词：HPLC；有关物质；梯度洗脱酒石酸泰万菌素是新一代的大环内脂类药物，以泰乐菌素为原料，经过乙酰化，异戊酰化，醇解反应，形成乙酰异戊酰泰乐菌素。
是一类广谱抗菌药，在泰万菌素的临床作用中，对于治疗猪气喘病、猪痢疾和猪增生性肠炎效果显著，安全性高，无不良反应。
然而，在《中国兽药典》中未见有关酒石酸泰万菌素方面的方法检测，在《兽药质量标准》中有使用HPLC测定酒石酸泰万菌素A组分的收载，有关物质方面检测方法尚无相关报道。
然而随着科技不断进步和市场竞争的加剧，对兽用药不在是只提高组分，对溶剂残留和有关物质已经越来越受到广泛关注。
由于抗生素发酵及提取过程中产生较复杂的组分，使用组分的方法检测对A组分能完全分离，但对一些杂质组分不能充分洗脱。
本文参考ICHQ2（R1）和《实用高效液相色谱法的建立》的指导原则，研究并确立了梯度洗脱高效液相色普法测定酒石酸泰万菌素中的有关物质，能达到对有关物质有效分离。
1 仪器与试剂1.1仪器岛津LC-20AT，电子天平。
1.2 试剂①酒石酸泰万菌素标准品（批号：0912066，来源：EcoAnimalHealthIed）酒石酸泰万菌素（批号：E131150302，由宁夏泰瑞制药股份有限公司提供）；②乙腈、四丁基氢氧化铵、醋酸铵；③乙酸铵溶液：称取乙酸铵4.62g，加水稀释至1000mL，摇匀，即得。
2 方法与结果2.1 色谱条件用C18（250mm×4.6mm，5μm）为色谱柱，流速为1.0mL/min；波长：280nm；柱温：30℃；流动相：A相：0.06mol/L乙酸铵（冰乙酸调pH至3.6，再用磷酸调pH至3.0），1L乙酸铵溶液中加四丁基氢氧化铵0.75mL，0.45um滤膜过滤即得。
高效液相色谱法检测泰乐菌素残留
泰乐菌 素标 准储 备 液 ： 准确 称 取 适 量泰 乐 菌 素标
准 品 ， 甲醇配成 １ ０ 用 ０ ０ｍｇ・ － 的标 准储备液 ，℃避 Ｌ１ ４ 光保 存 ， ０ ０ ｌ・Ｌ １ 酸 盐 缓 冲 溶 液 （ Ｈ 一 用 ． ４ ｍｏ －磷 ｐ ６ ５ 一 乙腈 （ ０： ０ 稀 释 至适 当浓度 ， 为 标 准工 作 ．） ７ ３） 作 液 ， ℃冰箱 保存 。 ４
摘 要 ： 立 了酵母 培 养物 和饲 用酶 制 剂 中 残 留泰 乐 菌 素 的 高效 液 相 色谱 检 测 方 法 。 采 用 Ｄａ ｎｉ 钻 石 ） （ 建 ｉ ｍｏ ｓ （ ｌ Ｃ ５
ｍ，５ ｍＸ４ ６ｍｍ） 相 色谱 柱 ， 用 正 己烷在 索 氏提 取 器 中脱 脂 ， 甲醇 为提 取 液 ， 动相 为 ０ ０ ｌ Ｌ 磷 酸 盐 １０ｍ ． 反 利 以 流 ． ４ｍｏ ・
器 厂 ； Ｓ １Ｎｉ 电热 恒 温 水 浴 锅 ， 京 长 源实 ＨＨ． Ｙ２ 一 型 北
验设 备厂 ； 一 １ ０型 紫 外 分 光 光 度 计 ， ＵＶ １ ０ 上海 美 谱 达
仪 器有 限公 司 。
１ ２ 溶 液 的 配 制 ．
物添加 剂使 用规范 》 中规 定每 吨饲 料 的泰 乐 菌 素添 加 量 （ 以有效成 分计 ） ： １ ～ １ ０ｇ 鸡 ４ ０ｇ 连 均 是 猪 Ｏ ０ ， ～５ ， 用 ５ ， 药 ５ｄ ～７ｄ 休 。 作 者在此 运用 高效液 相色谱 法检 测利用 泰乐 菌素 药渣生产 的酵 母 培 养 物 和 饲 用 酶 制 剂 中泰 乐 菌 素 含 量 ， 开发利用 抗生 素药渣 提供依 据 。 为
物和饲 用酶 制剂 。我 国农 业部 于 ２ ０ 年发 布《 料药 ０１ 饲
酒石酸泰乐菌素质量标准
酒石酸泰乐菌素质量标准酒石酸泰乐菌素是一种常见的抗生素，广泛应用于医药和兽药领域。
为了保证酒石酸泰乐菌素的质量安全，制定了一系列的质量标准，以确保其在生产和使用过程中的有效性和安全性。
一、外观和性状。
酒石酸泰乐菌素应为白色或类白色结晶性粉末，无异物和杂质。
其性状应稳定，不易受潮、不易挥发，能够在常温下保存较长时间。
二、含量测定。
酒石酸泰乐菌素的含量应符合国家标准规定，一般来说，含量测定的方法是采用高效液相色谱法（HPLC），确保每批产品的含量稳定可靠。
三、溶解度。
酒石酸泰乐菌素的溶解度应符合国家标准规定，一般来说，其溶解度应在特定温度下达到一定的浓度，以确保在使用过程中能够充分溶解并发挥药效。
四、微生物限度。
酒石酸泰乐菌素作为一种抗生素，其微生物限度应符合国家标准规定，确保产品不受微生物污染，保证使用安全。
五、有关物质。
酒石酸泰乐菌素产品中不应含有对人体有害的有关物质，如重金属、有毒物质等，确保产品符合国家卫生标准。
六、稳定性。
酒石酸泰乐菌素在不同环境条件下的稳定性应符合国家标准规定，确保产品能够在有效期内保持稳定的药效和质量。
七、包装。
酒石酸泰乐菌素的包装应符合国家标准规定，确保产品在运输和储存过程中不受污染和损坏，保证产品的质量安全。
八、贮存。
酒石酸泰乐菌素的贮存条件应符合国家标准规定，一般来说，产品应存放在阴凉干燥处，避免阳光直射和高温，以确保产品的质量稳定。
综上所述，酒石酸泰乐菌素的质量标准涉及到产品的外观和性状、含量测定、溶解度、微生物限度、有关物质、稳定性、包装和贮存等多个方面，只有严格按照国家标准执行，才能保证产品的质量安全，为广大患者和养殖户提供安全有效的药品和兽药。
高效液相色谱法检测猪肝中泰乐菌素残留
2024年第3期品牌与标准化Analysis of Tylosin Residue in Pig LiverUsing High Performance Liquid Chromatography MethodJI Yuan(Liaoning Inspection,Examination &Certification Centre,Shenyang 110036,China)Abstract :This study aimed to establish an HPLC analysis protocol for detecting tylosin residues in pig liver.Methods ：The samples were extracted by dichloromethane,purified by centrifugation and stratification,determined by high performance liquid chromatography and quantified by external standard method.Results ：The recoveries were ranged from 71.15%to 108.09%for tylosin residues with 3spiked levels of 60,100and 200µg/kg.The RSDs were below 10%(n =6).Conclusion ：The proposed method is fast,accurate,which is suitable for detecting tylosin residues in pig liver.Keywords :pig liver;high performance liquid chromatography;tylosin高效液相色谱法检测猪肝中泰乐菌素残留纪源（辽宁省检验检测认证中心，辽宁沈阳110036）【摘要】该研究旨在开发一种用于检测猪肝中泰乐菌素残留量的高效液相色谱（HPLC ）检测方法。
酒石酸泰乐菌素残留蛋白质检验方法的建立
酒石酸泰乐菌素残留蛋白质检验方法的建立孙丽美;张现峰;张兆峰;刘龙坦【摘要】酒石酸泰乐菌素是我国目前常用的一种兽用大环内酯类抗生素[1]，亦称泰农、泰乐霉素，可由放线菌属弗氏链霉菌经发酵提取而得到，有泰乐菌素碱、磷酸盐和酒石酸盐3种形态。
本文建立的酒石酸泰乐菌素残留蛋白质的检验方法适用于酒石酸泰乐菌素残留蛋白质的限度检测[9]。
分析验证表明该方法准确、可靠，重复性好，可用于控制酒石酸泰乐菌素中残留蛋白质的检测。
【期刊名称】《兽医导刊》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】1页(P82-82)【关键词】酒石酸泰乐菌素;检验方法;分析【作者】孙丽美;张现峰;张兆峰;刘龙坦【作者单位】山东鲁抗生物制造有限公司，山东济宁 273517;山东鲁抗生物制造有限公司，山东济宁 273517;山东鲁抗生物制造有限公司，山东济宁 273517;山东鲁抗生物制造有限公司，山东济宁 273517【正文语种】中文1.1 仪器高效液相色谱仪（Ultimate3000，赛默飞世尔（戴安）中国有限公司）；电子天平1.2 化学试剂磷酸二氢钠（国药集团化学试剂有限公司提供，分析纯），磷酸氢二钠（天津市凯通化学试剂有限公司提供，分析纯），氯化钠（国药集团化学试剂有限公司提供，分析纯），BSA（上海伯奥生物科技有限公司提供，生化试剂）。
乙腈，甲醇均为色谱纯，由天津市凯通化学试剂有限公司提供。
1.3 酒石酸泰乐菌素残留蛋白质检测方法色谱柱：凝胶排阻柱（TSKgel G2000SWXL，5μm，7.8 mm ID×30 cm，Column No. A00126）；流速：1.0ml/min；检测波长：215nm；柱温：25℃；流动相：0.02M磷酸盐缓冲液（称取约0.59g磷酸二氢钠、5.8g磷酸氢二钠、9g 氯化钠用水溶解并稀释至1000ml，混合均匀，用0.45μm的滤膜过滤），进样量：10μl。
2.1 系统适用性试验取系统适用性标准品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
高效液相色谱法测定废水中泰乐菌素残留量
高效液相色谱法测定废水中泰乐菌素残留量李红英【摘要】The residual Tylosin in wastewater has been detected. After the wastewater sample passed through ODS-SPE solid-phase extraction column for separation and purification, HPLC is used for its determination. The solution of acetonitrile and 0.5% of phosphoric acid is in moving phase and the Tylosin is determined by UV at 282 nm. This method has very good linear relativity between 0.2-5.0 g/L,the correlation coefficient R2 is 0.999 3,recovery rate 95.4%-101%, relative standard deviation 3.4%-4.2%, and detective limit 0.088 7 mg/L.%对废水中残留的泰乐菌素进行了检测.废水水样经ODS-SPE固相萃取柱分离净化后,采用高效液相色谱进行测定.以乙腈和0.5％磷酸溶液为流动相,在282 nm处对泰乐菌素进行紫外检测.该方法在0.2～5.0 g/L之间有良好的线性相关性,相关系数R2=0.999 3,回收率为95.4％～101％,相对标准偏差为3.4％～4.2％,方法检出限为0.088 7 mg/L.【期刊名称】《工业水处理》【年(卷),期】2012(032)001【总页数】3页(P72-74)【关键词】高效液相色谱;固相萃取;泰乐菌素【作者】李红英【作者单位】宁夏大学化学化工学院,宁夏银川750021【正文语种】中文【中图分类】X832随着环保意识的逐渐增强，人们越来越关注抗生素在环境中的积蓄、转移、转化和对各种生物及人类健康的影响，成为一个新的研究热点。
发酵液中泰乐菌素测定方法的研究
发酵液中泰乐菌素测定方法的研究戚 薇 王建玲 韩英素 杜连祥(食品工程系) 摘要:对发酵液中泰乐菌素含量的两种测定方法(即薄层层析法和高效液相色谱法)进行了比较研究,结果表明,这两种方法都具有较好的分离效果和较高的回收率,回收率分别为95.9%和90.3%。
说明除了高效液相色谱法外,薄层层析法是一种简易又实用的测定方法。
关键词: 泰乐菌素 回收率 薄层层析 高效液相色谱STUDY ON THE METHODS OFDETERMINATION OF TYLSIN IN THE FERMENTED BROTHQi Wei Wang Jianling Han Yingsu Du Lianxiang Abstract :A co mpariso n study for determinatio n of ty losin content w it h the T L C metho d and the HPL C method has been car ried out.It w as fo und t hat the tw o methods had g oo d seper ation effect and high r ecov ery .T he r eco ver y obtained by the T L C met ho d wa s higher than that by the HP L C metho d.T hey w er e 95.9%and 90.3%,r espectively.T he r esults show ed that besides the HP L C method,the T LC metho d w as simple and pr act ical fo r quant itative estim ating t ylosin in the fermented bro th.Key words:Ty losin ,Recovery ,TLC ,HPLC 泰乐菌素(tylosin)是弗氏链霉菌产生的一种大环内酯类抗生素。
高效液相色谱仪检测饲料中泰乐菌素方法的研究的开题报告
高效液相色谱仪检测饲料中泰乐菌素方法的研究的开题报
告
标题：高效液相色谱仪检测饲料中泰乐菌素方法的研究
摘要：
泰乐菌素是一种广泛应用于畜禽养殖中的抗生素药物。
虽然泰乐菌素对畜禽生长有促进作用，但过度使用会对人体健康和环境造成不利影响。
在目前的国内外法规和
控制标准中，泰乐菌素的使用和残留量都得到了严格的监管。
因此，开发一种高效、
准确、灵敏而经济实用的检测方法，对于保障食品安全和人类健康具有重要意义。
本研究旨在建立一种高效液相色谱仪检测饲料中泰乐菌素的方法。
首先，通过文献调研、实验室试验和优化方法，建立泰乐菌素的提取及前处理方法。
其次，通过调
节色谱柱、流动相等液相色谱检测条件的参数，建立泰乐菌素的分离和测定方法。
最后，通过实验验证该方法的准确性、灵敏度和回收率。
预计通过本研究建立的高效液相色谱仪检测饲料中泰乐菌素的方法，将能够满足国内外对食品中残留泰乐菌素的检测要求，同时具有高效、准确、灵敏和经济等优点，具有广泛的应用前景。
关键词：泰乐菌素，高效液相色谱仪，饲料，检测方法。
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中 国兽 药 杂 志
・ ３ ５・
高 效 液 相 色谱 法 测 定 酒 石 酸 泰乐 菌 素有 关 物质 的研 究
包 洁华 ， 张金 霞 ， 郭强功 ， 张 萍
（ 宁夏 泰瑞 制 药 股 份 有 限公 司 ， 银川 ７ ５ ０ １ ０ １ ）
限和定 量 限 、 线 性和 范 围、 耐用 性 、 及 溶 液 稳定 性 进 行 考 察 。 结 果 显 示 ， 杂 质 Ａ、 Ｎ、 Ｏ、 Ｒ、 Ｓ峰 峰 面
积 与其对应浓度呈线性关 系， 其相 关系数 ｒ 均大于 ０ ． ９ ９ ９ ， 各项 考察指标 均符合 要求。结果证 明
该 分 析 方法 能 科 学 、 合 理 的分 析 、 控 制 酒 石 酸泰 乐 菌素 有关 物 质 ， 可 以持 续 、 准确 地 反 映酒 石 酸 泰 乐 菌 素 的特 性 。
Ｂ Ａ Ｏ Ｊ ｉ ｅ — ｈ ｕ ａ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｊ ｉ ｎ — ｘ ｉ ａ ，Ｇ Ｕ Ｏ Ｑ ｉ ａ ｎ ｇ — ｇ ｏ ｎ ｇ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｐ ｉ ｎ ｇ
（ Ｎｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａ Ｔ ａ ｉ Ｒ ｕ ｉ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ． ， Ｌ ｔ ｄ ，Ｙ ｉ ｎ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ ７ ５ ０ １ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ Ｏ ｔ ｔ ｙ ｌ ｏ ｓ ｉ ｎ ｔ ａ ｒ ｔ ｒ ａ ｔ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ＥＰ ｄ ｉ ｓ ｃ ｕ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｄ ｒ ａ ｆ ｔ ． Ａｔ ｔ ｈ ｅ
［ 收稿 日期］２ ０ １ ４ — １ ０ — ２ ９ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １ ０ ０ ２ — １ ２ ８ ０（ ２ ０ １ ５ ） ０ ２ — ０ ０ ３ ５ — ０ ５ ［ 中图分类号 ］ ￥ ８ ５ ９ ． ７ ９ ６
［ 摘 要 ］ 依 据 欧洲 药典 讨 论 稿 中酒 石 酸 泰 乐 菌 素 有 关 物 质 的检 测 方 法 ， 在２ ８ ０ ｎ ｍ 波长 处 ， 以
中国兽药杂志高效液相色谱法测定酒石酸泰乐菌素有关物质的研究宁夏泰瑞制药股份有限公司银川750101收稿日期20141029文献标识码a文章编号10021280201502003505中图分类号s859796依据欧洲药典讨论稿中酒石酸泰乐菌素有关物质的检测方法在280nm波长处以ph55的磷酸盐缓冲溶液乙腈水10流动相以ph的磷酸盐缓冲溶液水乙腈10流动相进行梯度洗脱并对专属性准确度精密度检测限和定量限线性和范围耐用性及溶液稳定性进行考察
ｍ ｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ Ａ， ｐ Ｈ ５ ． ５ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｔ ｅ ｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ — ｗ ａ ｔ ｅ ｒ — ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ（ １ ０： ４ ０： ５ ０ ，
）ａ ｓ ｔ ｈ ｅ
ｐ Ｈ ５ ． ５ 的磷 酸 盐 缓冲 溶 液 一 乙腈 一 水（ １ ０： ２ ７ ． ５： ６ ２ ． ５ ， ｖ ／ ｖ ） 为 Ａ流 动相 。 以ｐ Ｈ ５ ． ５的磷 酸 盐缓 冲 溶液一 水 一乙腈 （ １ ０： ４ ０： ５ ０ ， ｖ ／ ｖ ） 为 Ｂ流 动相 进 行 梯 度 洗脱 ， 并对专属 性、 准确度、 精 密度 、 检 测
［ 关键 词 ］ 高效 液相 色谱 法 ； 酒石 酸泰 乐菌 素 ； 梯度 洗脱 ； 有关 物质
ห้องสมุดไป่ตู้
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