基因工程和蛋白质工程
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（1）DNA片段的直接提取
（2）用噬菌体或质粒直接从宿主细胞中将目 的基因携出
（3）使用相应的mRNA分离基因
二、基因载体
1.质粒——染色体以外的遗传单元
2.噬菌体——感染细菌的病毒
1.质粒——染色体以外的遗传单元
质粒是一种环状双链的DNA分子。自身在 细菌细胞中能不断复制繁殖。研究比较深入 的质粒有大肠杆菌的性因子（F因子）、大肠 杆菌素因子和抗药因子等
+
连接
质粒载体
重组DNA分子 经转化或病毒感染 导入宿主细胞
宿主染色体
对含有重组DNA 分子的选择 无性繁殖（克隆）
重组DNA分子合成和克隆过程
2.筛选——从大量受体细胞选出带有重组体 的细胞
（1）插入失活法 （2）放射性探针检测法 （3）R-环检测法 （4）免疫测定法
（1）插入失活法
在现在的基因工程操作中，所使用的载体 通常是经过加工改造的衍生物，它们要么带 有一个或几个可供选择的遗传标记，要么具 有被选择的遗传功能，这就使带有目的基因 与不带目的基因的细菌有明显区别，便于筛 选。
一、蛋白质工程的概念
蛋白质工程(protein engineering)：通过改造与 蛋白质相应的基因中的碱基顺序，或设计合成 新的基因，将它克隆至受体细胞中，通过基因 表达而获得具有新的特性的蛋白质技术
1、基因定点突变——定做新蛋白质 2、蛋白质设计——对天然蛋白质的修饰
蛋白质工程 举例：
定点突变技术：
如果外源DNA 插入，氨卞青霉素 抗性基因失活
如果外源DNA插 入，四环素抗性基 因失活
pBR322质粒结构
（2）放射性探针检测法
利用mRNA可与相应的DNA段落杂交，来检 测有外源DNA插入的重组体，是一种快速而 灵敏的方法。
（3）R-环检测法
在有利于形成R-环的条件下，使待检测的纯 化的质粒DNA，在含有mRNA的缓冲液中局部 变性。如若质粒DNA存在着与mRNA探针互补 的序列，mRNA就会取代DNA中一条链，与另 一条链形成双链杂交分子，从而形成R-环结 构，在电子显微镜下观察，可直接观察到R环。这样可检出重组体质粒DNA。
酶工程用于食品工业很有效。 啤酒、酱油、葡萄糖等都可用酶工 程生产。
二、生物工程在现代工、农、医领域中的应用
1.化工及冶金工业 2.轻工和食品工业 3.医药工业 4.农业和畜牧业 5.环保和能源工业
稀少珍贵的蛋白质药物
➢ 1982年，美国食品与药物管理局批准了首例基 因工程产品—人胰岛素投放市场——它标志了 基因工程产品正式进入到商业化阶段。
限制性内切酶切割DNA的方式
a.从识别序列的中间切开 b.在识别序列对称轴的左右两方进行切割 c.在识别序列对称轴的右边（5’-3’链）和对称轴
左边（3’-5’链）切开
a.从识别序列的中间切开
从识别序列的中间切开产生平齐末端（bluntends）， 如HaeⅢ
b.在识别序列对称轴的左右两方进行切割
1. 限制性内切酶
DNA重组即是将两种DNA分子经过切 割，选择适合的片段连接起来的过程
实现这一步，是在限制性内切酶发现 以后才实现的
限制性内切酶：一类核酸内切酶，可 以将外源DNA在特定位点切割降解 。以 后从细菌中分别分离出了I型和Ⅱ型两类 限制性内切酶。
限制性内切酶的命名
用细菌同名的第一个字母（大写）和种名的 前两个字母（小写）构成酶的基本名称。若酶 是从其中一种特殊菌株来，还在基本名称后加 上菌株名称符号。名称后的罗马数字，表示在 该特殊菌株中发现此酶的先后次序。如HaeII 是从（Haemophilus aegypticus）中提取的， 并且是从中发现的第二个酶。
➢ 人生长激素、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、 a-干扰素、纤维素酶、抗血友病因子、红细胞 生成素、尿激酶原、白细胞介素-2、集落刺激 因子、乙肝疫苗等等
畜牧业中的应用
➢ 动物疫苗、生长激素等
➢ 例：从转基因羊的羊奶 中提取出治疗心脏病的
药 物 tPA （ 组 织 溶 解 酶
原激活剂）。
种植业中的应用
2、基因工程的理论基础
1）物质基础——脱氧核苷酸 2）结构基础——规则的双ຫໍສະໝຸດ 旋结构 3）中心法则，共用一套遗传密码
细胞工程
1、细胞工程的概念
利用细胞融合技术把含有不同遗传物质 的细胞合成杂种细胞。并使之分裂生长成为杂 种生物。
它包括体细胞融合、核移植、细胞器摄 取和染色体片段的重组等。
细胞工程
操作水平：细胞整体水平或细胞器水平 目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品。
Agarrose gel
Nitrocellulose sheet
Transfer protein
Add radiolabled spesfic antibody , Wash to remove unboud antibody
Autoradiography
Autoradiogram Protein band detected by specific antibody
抗药因子（质粒）在其DNA上编码有某些酶 的基因，表达产生的酶对链霉素、氯霉素、磺 胺、青霉素、四环素、卡那霉素等药物能产生 生物化学修饰，使之钝化而失效
质粒的作用
质粒DNA能从细菌中提出来，又能再转入 细菌。这个过程称转化。转入的质粒DNA仍 能进行复制，这种性能为DNA重组技术提供 了重要的条件，即将一种外源基因与质粒重 组后，再转入细菌中去复制繁殖，使外源基 因得以增殖。
1.转化——带有目的基因的载体进入受体细胞
由质粒作载体形成的克隆，转入细菌时细菌预先要 在低温条件下用氯化钙处理，形成“感受态”细胞。即 增加细胞膜的通透性才能实现转化。
由噬菌体作载体的克隆，转入细胞的过程称为“侵 染”。因噬菌体具有自动侵入的功能。细菌不用预先 处理。
噬菌体感染大肠杆菌的途径
要插入的外来DNA
➢ 用携带外源基因的农杆菌Ti质粒转化植物原生质体， 使外源DNA与植物染色体DNA整合，通过原生质体 的培养分化成愈伤组织，最后发育成具有新性状的 完整植株—转基因植物
第二节 基因工程
基因工程是1973年由美国斯坦福大学科恩 和旧金山大学医学院的博耶创立的概念
基因工程包括DNA重组技术和其他使 基因结构得以定向改造的技术。本节 主要介绍DNA重组技术，大体上包括下 列5个步骤。
2、细胞工程的理论基础——细胞全能性 依据——生物体的每一个干细胞都包含有 该物种所特有的全套遗传物质。
异种 植物 细胞
异种 动物 细胞
植物体细 胞杂交
动物细 胞融合
杂种细胞
植物组 织培养
动物细 胞培养
转基因 动物细
植物
胞群
体细 胞细 胞核
去核 卵细 胞
体外 受精
核移植 重组细胞 受精卵
早期胚胎 胚胎移植 克隆动物 试管婴儿
太小不能被包装
DNA
用限制性内切酶 除去中间一段
与外源DNA连接
重组载体的体外包装
头部前体
多联体 COS DNA
COS
A蛋白 COS
带有外源DNA的 噬菌体
以噬菌体为载体 进行DNA克隆
成熟的颗粒
在宿主细胞内进行 DNA的装配过程
三、重组DNA的筛选及表达
1.转化——带有目的基因的载体进入受体细胞 2.筛选——从大量受体细胞选出带有重组体的细胞 3.表达——外源DNA在受体细胞的转录和翻译
基因工程
➢ 基因工程是指在微观领 域（分子水平）中，根 据分子生物学和遗传学 原理，设计并实施一项 把一个生物体中有用的 目的DNA(遗传信息)转入 另一个生物体中，使后 者获得新的需要的遗传 性状或表达所需要的产 物，最终实现该技术的 商业价值。
基因工程与建筑工程
基因工程
操作水平：DNA分子水平 目的：定向改变遗传物质或获得基因产物。
DNA重组的 技术路线
1、目的基因的制备 2、载体的构建 3、目的基因与载体 的重组 4、重组 体导入宿主 细胞进行扩增 5、克隆基因的鉴定
Foreign DNA to be inserted
+
Joining
Plansmid vector
Recombinant DNA molecule
Introduction into host cells by transformation
这些载体中有些只能复制扩增带入的外源基因； 有些可以使外源基因复制、转录和翻译出基因的蛋 白质产物，这种载体称为表达载体
pBR322质粒的结构
2.噬菌体——感染细菌的病毒
以噬菌体或病毒为载体，将所需基因或含有此基 因的DNA片段转移给受体细胞的过程，称为转导。
我们常常采用噬菌体作为基因工程的载体，其 一它的遗传结构与功能知道得比较清楚；其二是易 于使细胞感染，易于使外源DNA导入宿主细胞。
已知丝氨酸是由TCT编码，只要把C改为G，就变成 半胱氨酸的密码TGT。于是用人工合成一段寡聚核苷酸引 物，引物里含有TGT外，其余均与基因部分互补。打开含 有被突变蛋白质基因的质粒的双条链成单链模板，用引物 与之互补链退火（假如退火在适宜温度下进行，约15个碱 基中，有一个碱基错配是可以容忍的）。然后由DNA聚合 酶延伸引物，由DNA连接酶将双链再连接成环，转入宿主 细胞复制，即产生两种子代质粒。一半的顺序中含有TCT 顺序，另一半含有TGT顺序。表达具有TGT顺序的质粒， 即可以产生在同一部位上半胱氨酸代替丝氨酸的蛋白质。
质粒自身的某些抗药基因成为从转化的细 菌中筛选它们的一种标记。除质粒外，噬菌 体、病毒也能通过“感染”将外源基因带入细 菌并进行复制。
目前所使用的质粒
目前实验中所使用的质粒、噬菌体和病毒载体种 类很多。但都是经过了人工改造，更适宜运用于 DNA重组技术。它们既保留了转化和感染活细胞 的能力，又具有多处携带外源DNA的酶切位点， 并含有特殊的筛选标记
3、主要技术 植物 细胞 工程 技术
动物 细胞 工程 技术
植物体细胞杂交 植物组织培养 动物细胞融合 动物细胞培养 单克隆抗体技术 核移植 胚胎移植
酶工程
酶工程是利用酶的特异催化功 能，在常温长压下将一种物质转化 为另一种物质，以获得高纯度的适 用之物。
该技术包括各种酶的开发和生 产。酶的分离和纯化技术等。
（4）免疫测定法
免疫法测定只能是所转移外源DNA必须表达 后才能进行，而且必须具备有效的特异性抗 体。
Southern和Western印迹法
DNA frangment
Electrophoresis
Transfer of DNA by blotting
32P-labled DNA probe
Autoradiography
二、蛋白质工程的一般技术
1、蛋白质工程的理论设计——蛋白质工程的前提 2、点突变法——基因修饰的方法 （1）基因的全化学合成 （2）基因直接修饰法 （3）盒式突变技术
三、蛋白质工程的应用
1、蛋白质工程酶—酶特性的改造 （1）改变酶的催化活性 （2）改变酶的底物专一性 （3）提高酶的稳定性 （4）酶的反应特性改变 （5）产生新酶 2、合理药物设计—蛋白质工程用于新药研制
Host chromateme
Cloning
Slection for cells coteining a recombinant DNA molecule
一、目的基因的获得 二、基因载体 三、重组DNA的筛选及表达
一、目的基因的获得
1.限制酶——特异性切割DNA的手术刀 2.取得目的基因的方法——分离法及合成法
即分别在5’-3’链和3’-5’链对称轴的左右方切开 ， 形成带有凸出的5’磷酸基团的粘性末端 （Cohesive ends），如EcoRⅠ
c.在识别序列对称轴的右边（5’-3’链）和对称 轴左边（3’-5’链）切开
形成带有凸出的3’羟基的粘性末端，如pstI
2.取得目的基因的方法 ——分离法及合成法
SDS-Polyacrylamide gel
Polymer sheet
Autoradiogram
3.表达——外源DNA在受体细胞中的转录和翻译
带有目的基因的载体转移到受体细胞成功并筛 选出来后，最终目的是要目的基因在受体细胞中
得以表达，产生具有功能性的蛋白质或肽。
第三节 蛋白质工程
一、蛋白质工程的概念 二、蛋白质工程的一般技术 三、蛋白质工程的应用
第十六章基因工程与蛋白质工程
第一节 生物工程概述 第二节 基因工程 第三节 蛋白质工程
第一节 生物工程概述
一、生物工程概念及研究技术 二、在现代工、农、医领域中的应用
一、生物工程的概念及研究技术 1.基因工程——在分子水平的遗传操作技术
2.细胞工程——遗传物质在细胞间的转移 3.酶工程——酶的改造和设计 4.生化工程——生物工程产品的最终取得手段
（2）用噬菌体或质粒直接从宿主细胞中将目 的基因携出
（3）使用相应的mRNA分离基因
二、基因载体
1.质粒——染色体以外的遗传单元
2.噬菌体——感染细菌的病毒
1.质粒——染色体以外的遗传单元
质粒是一种环状双链的DNA分子。自身在 细菌细胞中能不断复制繁殖。研究比较深入 的质粒有大肠杆菌的性因子（F因子）、大肠 杆菌素因子和抗药因子等
+
连接
质粒载体
重组DNA分子 经转化或病毒感染 导入宿主细胞
宿主染色体
对含有重组DNA 分子的选择 无性繁殖（克隆）
重组DNA分子合成和克隆过程
2.筛选——从大量受体细胞选出带有重组体 的细胞
（1）插入失活法 （2）放射性探针检测法 （3）R-环检测法 （4）免疫测定法
（1）插入失活法
在现在的基因工程操作中，所使用的载体 通常是经过加工改造的衍生物，它们要么带 有一个或几个可供选择的遗传标记，要么具 有被选择的遗传功能，这就使带有目的基因 与不带目的基因的细菌有明显区别，便于筛 选。
一、蛋白质工程的概念
蛋白质工程(protein engineering)：通过改造与 蛋白质相应的基因中的碱基顺序，或设计合成 新的基因，将它克隆至受体细胞中，通过基因 表达而获得具有新的特性的蛋白质技术
1、基因定点突变——定做新蛋白质 2、蛋白质设计——对天然蛋白质的修饰
蛋白质工程 举例：
定点突变技术：
如果外源DNA 插入，氨卞青霉素 抗性基因失活
如果外源DNA插 入，四环素抗性基 因失活
pBR322质粒结构
（2）放射性探针检测法
利用mRNA可与相应的DNA段落杂交，来检 测有外源DNA插入的重组体，是一种快速而 灵敏的方法。
（3）R-环检测法
在有利于形成R-环的条件下，使待检测的纯 化的质粒DNA，在含有mRNA的缓冲液中局部 变性。如若质粒DNA存在着与mRNA探针互补 的序列，mRNA就会取代DNA中一条链，与另 一条链形成双链杂交分子，从而形成R-环结 构，在电子显微镜下观察，可直接观察到R环。这样可检出重组体质粒DNA。
酶工程用于食品工业很有效。 啤酒、酱油、葡萄糖等都可用酶工 程生产。
二、生物工程在现代工、农、医领域中的应用
1.化工及冶金工业 2.轻工和食品工业 3.医药工业 4.农业和畜牧业 5.环保和能源工业
稀少珍贵的蛋白质药物
➢ 1982年，美国食品与药物管理局批准了首例基 因工程产品—人胰岛素投放市场——它标志了 基因工程产品正式进入到商业化阶段。
限制性内切酶切割DNA的方式
a.从识别序列的中间切开 b.在识别序列对称轴的左右两方进行切割 c.在识别序列对称轴的右边（5’-3’链）和对称轴
左边（3’-5’链）切开
a.从识别序列的中间切开
从识别序列的中间切开产生平齐末端（bluntends）， 如HaeⅢ
b.在识别序列对称轴的左右两方进行切割
1. 限制性内切酶
DNA重组即是将两种DNA分子经过切 割，选择适合的片段连接起来的过程
实现这一步，是在限制性内切酶发现 以后才实现的
限制性内切酶：一类核酸内切酶，可 以将外源DNA在特定位点切割降解 。以 后从细菌中分别分离出了I型和Ⅱ型两类 限制性内切酶。
限制性内切酶的命名
用细菌同名的第一个字母（大写）和种名的 前两个字母（小写）构成酶的基本名称。若酶 是从其中一种特殊菌株来，还在基本名称后加 上菌株名称符号。名称后的罗马数字，表示在 该特殊菌株中发现此酶的先后次序。如HaeII 是从（Haemophilus aegypticus）中提取的， 并且是从中发现的第二个酶。
➢ 人生长激素、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、 a-干扰素、纤维素酶、抗血友病因子、红细胞 生成素、尿激酶原、白细胞介素-2、集落刺激 因子、乙肝疫苗等等
畜牧业中的应用
➢ 动物疫苗、生长激素等
➢ 例：从转基因羊的羊奶 中提取出治疗心脏病的
药 物 tPA （ 组 织 溶 解 酶
原激活剂）。
种植业中的应用
2、基因工程的理论基础
1）物质基础——脱氧核苷酸 2）结构基础——规则的双ຫໍສະໝຸດ 旋结构 3）中心法则，共用一套遗传密码
细胞工程
1、细胞工程的概念
利用细胞融合技术把含有不同遗传物质 的细胞合成杂种细胞。并使之分裂生长成为杂 种生物。
它包括体细胞融合、核移植、细胞器摄 取和染色体片段的重组等。
细胞工程
操作水平：细胞整体水平或细胞器水平 目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品。
Agarrose gel
Nitrocellulose sheet
Transfer protein
Add radiolabled spesfic antibody , Wash to remove unboud antibody
Autoradiography
Autoradiogram Protein band detected by specific antibody
抗药因子（质粒）在其DNA上编码有某些酶 的基因，表达产生的酶对链霉素、氯霉素、磺 胺、青霉素、四环素、卡那霉素等药物能产生 生物化学修饰，使之钝化而失效
质粒的作用
质粒DNA能从细菌中提出来，又能再转入 细菌。这个过程称转化。转入的质粒DNA仍 能进行复制，这种性能为DNA重组技术提供 了重要的条件，即将一种外源基因与质粒重 组后，再转入细菌中去复制繁殖，使外源基 因得以增殖。
1.转化——带有目的基因的载体进入受体细胞
由质粒作载体形成的克隆，转入细菌时细菌预先要 在低温条件下用氯化钙处理，形成“感受态”细胞。即 增加细胞膜的通透性才能实现转化。
由噬菌体作载体的克隆，转入细胞的过程称为“侵 染”。因噬菌体具有自动侵入的功能。细菌不用预先 处理。
噬菌体感染大肠杆菌的途径
要插入的外来DNA
➢ 用携带外源基因的农杆菌Ti质粒转化植物原生质体， 使外源DNA与植物染色体DNA整合，通过原生质体 的培养分化成愈伤组织，最后发育成具有新性状的 完整植株—转基因植物
第二节 基因工程
基因工程是1973年由美国斯坦福大学科恩 和旧金山大学医学院的博耶创立的概念
基因工程包括DNA重组技术和其他使 基因结构得以定向改造的技术。本节 主要介绍DNA重组技术，大体上包括下 列5个步骤。
2、细胞工程的理论基础——细胞全能性 依据——生物体的每一个干细胞都包含有 该物种所特有的全套遗传物质。
异种 植物 细胞
异种 动物 细胞
植物体细 胞杂交
动物细 胞融合
杂种细胞
植物组 织培养
动物细 胞培养
转基因 动物细
植物
胞群
体细 胞细 胞核
去核 卵细 胞
体外 受精
核移植 重组细胞 受精卵
早期胚胎 胚胎移植 克隆动物 试管婴儿
太小不能被包装
DNA
用限制性内切酶 除去中间一段
与外源DNA连接
重组载体的体外包装
头部前体
多联体 COS DNA
COS
A蛋白 COS
带有外源DNA的 噬菌体
以噬菌体为载体 进行DNA克隆
成熟的颗粒
在宿主细胞内进行 DNA的装配过程
三、重组DNA的筛选及表达
1.转化——带有目的基因的载体进入受体细胞 2.筛选——从大量受体细胞选出带有重组体的细胞 3.表达——外源DNA在受体细胞的转录和翻译
基因工程
➢ 基因工程是指在微观领 域（分子水平）中，根 据分子生物学和遗传学 原理，设计并实施一项 把一个生物体中有用的 目的DNA(遗传信息)转入 另一个生物体中，使后 者获得新的需要的遗传 性状或表达所需要的产 物，最终实现该技术的 商业价值。
基因工程与建筑工程
基因工程
操作水平：DNA分子水平 目的：定向改变遗传物质或获得基因产物。
DNA重组的 技术路线
1、目的基因的制备 2、载体的构建 3、目的基因与载体 的重组 4、重组 体导入宿主 细胞进行扩增 5、克隆基因的鉴定
Foreign DNA to be inserted
+
Joining
Plansmid vector
Recombinant DNA molecule
Introduction into host cells by transformation
这些载体中有些只能复制扩增带入的外源基因； 有些可以使外源基因复制、转录和翻译出基因的蛋 白质产物，这种载体称为表达载体
pBR322质粒的结构
2.噬菌体——感染细菌的病毒
以噬菌体或病毒为载体，将所需基因或含有此基 因的DNA片段转移给受体细胞的过程，称为转导。
我们常常采用噬菌体作为基因工程的载体，其 一它的遗传结构与功能知道得比较清楚；其二是易 于使细胞感染，易于使外源DNA导入宿主细胞。
已知丝氨酸是由TCT编码，只要把C改为G，就变成 半胱氨酸的密码TGT。于是用人工合成一段寡聚核苷酸引 物，引物里含有TGT外，其余均与基因部分互补。打开含 有被突变蛋白质基因的质粒的双条链成单链模板，用引物 与之互补链退火（假如退火在适宜温度下进行，约15个碱 基中，有一个碱基错配是可以容忍的）。然后由DNA聚合 酶延伸引物，由DNA连接酶将双链再连接成环，转入宿主 细胞复制，即产生两种子代质粒。一半的顺序中含有TCT 顺序，另一半含有TGT顺序。表达具有TGT顺序的质粒， 即可以产生在同一部位上半胱氨酸代替丝氨酸的蛋白质。
质粒自身的某些抗药基因成为从转化的细 菌中筛选它们的一种标记。除质粒外，噬菌 体、病毒也能通过“感染”将外源基因带入细 菌并进行复制。
目前所使用的质粒
目前实验中所使用的质粒、噬菌体和病毒载体种 类很多。但都是经过了人工改造，更适宜运用于 DNA重组技术。它们既保留了转化和感染活细胞 的能力，又具有多处携带外源DNA的酶切位点， 并含有特殊的筛选标记
3、主要技术 植物 细胞 工程 技术
动物 细胞 工程 技术
植物体细胞杂交 植物组织培养 动物细胞融合 动物细胞培养 单克隆抗体技术 核移植 胚胎移植
酶工程
酶工程是利用酶的特异催化功 能，在常温长压下将一种物质转化 为另一种物质，以获得高纯度的适 用之物。
该技术包括各种酶的开发和生 产。酶的分离和纯化技术等。
（4）免疫测定法
免疫法测定只能是所转移外源DNA必须表达 后才能进行，而且必须具备有效的特异性抗 体。
Southern和Western印迹法
DNA frangment
Electrophoresis
Transfer of DNA by blotting
32P-labled DNA probe
Autoradiography
二、蛋白质工程的一般技术
1、蛋白质工程的理论设计——蛋白质工程的前提 2、点突变法——基因修饰的方法 （1）基因的全化学合成 （2）基因直接修饰法 （3）盒式突变技术
三、蛋白质工程的应用
1、蛋白质工程酶—酶特性的改造 （1）改变酶的催化活性 （2）改变酶的底物专一性 （3）提高酶的稳定性 （4）酶的反应特性改变 （5）产生新酶 2、合理药物设计—蛋白质工程用于新药研制
Host chromateme
Cloning
Slection for cells coteining a recombinant DNA molecule
一、目的基因的获得 二、基因载体 三、重组DNA的筛选及表达
一、目的基因的获得
1.限制酶——特异性切割DNA的手术刀 2.取得目的基因的方法——分离法及合成法
即分别在5’-3’链和3’-5’链对称轴的左右方切开 ， 形成带有凸出的5’磷酸基团的粘性末端 （Cohesive ends），如EcoRⅠ
c.在识别序列对称轴的右边（5’-3’链）和对称 轴左边（3’-5’链）切开
形成带有凸出的3’羟基的粘性末端，如pstI
2.取得目的基因的方法 ——分离法及合成法
SDS-Polyacrylamide gel
Polymer sheet
Autoradiogram
3.表达——外源DNA在受体细胞中的转录和翻译
带有目的基因的载体转移到受体细胞成功并筛 选出来后，最终目的是要目的基因在受体细胞中
得以表达，产生具有功能性的蛋白质或肽。
第三节 蛋白质工程
一、蛋白质工程的概念 二、蛋白质工程的一般技术 三、蛋白质工程的应用
第十六章基因工程与蛋白质工程
第一节 生物工程概述 第二节 基因工程 第三节 蛋白质工程
第一节 生物工程概述
一、生物工程概念及研究技术 二、在现代工、农、医领域中的应用
一、生物工程的概念及研究技术 1.基因工程——在分子水平的遗传操作技术
2.细胞工程——遗传物质在细胞间的转移 3.酶工程——酶的改造和设计 4.生化工程——生物工程产品的最终取得手段