大肠杆菌O157H7的风险监测

大肠杆菌O157∶H7的风险监测
文│韩海燕 蔡扩军（新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心） 王承（新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所）
大肠杆菌O157∶H7血清型是肠出血性大肠杆菌的代表菌株，为革兰氏染色阴性菌，具有较强的耐酸性，可产生大量的Vero毒素，是主要的致病因子，能引起人的出血性腹泻和肠炎，患者大多数急性起病，严重的感染者一周后可发生溶血性尿毒综合征，并可出现窦性心动过缓、惊厥和血小
板减少性紫癜等并发症，可导致死亡。

该病多发生于夏秋两季，主要以散发性为主。

大肠杆菌O157∶H7的携带者可能是海鸥、羊、猪、马、鹿、鸽子、牛、鸡等动物，畜禽肉食品供应链中牛肉是主要的传播载体。

为了解大肠杆菌O157∶H7在新疆维吾尔自治区乌鲁木齐地区畜禽肉供应链中的存在风险，本研究用荧光PCR方法对畜禽肉供应链的肉品以及环境拭子中的大肠杆菌O157∶H7进行监测，以期为保障本地区畜禽肉食
品安全提供技术支撑。

一、材料与方法
1.主要试剂。

大肠杆菌O157∶H7
荧光PCR检测试剂盒；细菌基因组DNA 提取试剂盒；改良EC肉汤。

2.主要仪器。

荧光PCR仪（ABI 7500型）；全自动核酸提取仪；II级生物安全柜；恒温培养箱；高压灭菌器。

3.取样环节及数量。

畜禽肉供
应链的五大环节一共取样量588份，各个环节取样数量见表1。

二、实验室检验
1.增菌。

将肉类样品（100克）
放入一次性培养皿，用弯剪和镊子取样品的中间和四周，剪碎，取25克样品加入到含有225毫升EC肉汤增菌液的均质袋中，于（36±1）℃培养18～24小时。

取环境拭子或粪便样品时，提前将6毫升EC肉汤在无菌操作台内分装至
离心管。

在采样地点，将离心管盖子快速打开，将涂抹好的环境拭子或粪便快速放入，盖上盖子，运输至实验室后在（36±1）℃培养箱内培养18～24小时。

2.荧光PCR检验。

取1～5毫升菌液，按照细菌基因组DNA提取试剂盒说明书提取细菌基因组DNA作为模板，根据大肠杆菌O157∶H7荧光PCR试剂盒
说明书对DNA模板进行PCR扩增，并对结果进行判定。

三、检验结果
经荧光PCR检测，588份样品中均未检出大肠杆菌O157：H7。

说明在此次检测过程中所取样品未发现受大肠杆菌O157：H7污染。

四、结论
所取的588份样品均未检
出大肠杆菌O157：H7，说明目前该地区在养殖、屠宰、运输、贮存、销售等环节上大肠杆菌O157：H7污染的风险较低。

但是有其他省市分离鉴定出大肠杆菌O157：H7相关文献报道，鉴于大肠杆菌O157：H7的对食品安全造成的危害性较大，需要密切关注。

在实地研究过程中发现，屠宰环节是畜禽肉供应链中食源性病原微生物污染风险最高的环节，如果操作不规范很容易造成细菌的交叉污染，相关部门和企业应加强对畜禽肉供应链涉及人员的宣传培训。

同时，建议有关部门建立畜禽交易市场、农贸市场、超市的清洗消毒规范，尤其对畜禽肉类直接接触的环境和物品进行规范的清洗和消毒，减少食源性病原微生物传播的概率。

基金项目：2018新疆兵团重大科技计划后补助项目（2018AA009）；乌鲁木齐市科技局渝乌科技合作项目（Y161220001）；新疆特种乳品牌保护项目
表1 各个环节取样数量表
运输车 冷库 超市、农贸市场 合计羊肉供应链 45 40 9 6 60 160牛肉供应链 30 30 6 6 60 132猪肉供应链 45 50 9 0 60 164鸡肉供应链 30 30 6 6 60 132合计
150
150
30
18
240
588
份
◎图1 荧光PCR检测结果
科技与推广Science and Technology Promotion
50
☆中国畜牧业。