色谱柱的制备

确定固定液、担体及溶剂量
– ①．先计算出柱管的容积在过量20%~40%即为载体的 量（Ms）; 柱管容积：Vc=лd²L/4=3.14×0.4² ×200/4=25.6(ml); 实际用量: Vs=25.6×(1+0.4)=35.84mL=36mL。 用量筒量取粒度合格的担体36mL，并称出担体的质量 （ms）。 – ②． 由担体的量根据配比确定固定液的质量（mL）。 配比即固定液与固定相之比，配比为5%，即： Ml=Ms×（5/100） 在分析天平上用100mL烧杯称出mlg固定液。 溶剂用量:一般以体积计，为载体体积的0.8~1.2倍即可。
实验目的
– 了解色谱柱的制备过程。 – 练习用真空泵抽法装填色谱柱。
实验原理
– 1.的分离是在色谱柱中进行的，制备一根分离 性能好的色谱柱，是完成色谱分析的键。 – 2.一根填充柱的步骤：1.选择固定相（选择固 定液、载体、确定配比）剂
– 仪器;90色谱仪、真空泵、分液漏斗、圆底烧瓶、 量筒、烧杯、不锈钢柱2mx¢4mm、玻璃棉、 纱布等。 – 试剂：邻苯二甲酸二壬酯、6201红色硅藻土 (60~80目)、丙酮。
载体预处理
– 称取100g60~80目的6201红色硅藻土担体于 400ml烧杯中，加入6mol/L的盐酸溶液，浸泡 20~30min，然后用水洗至中性，抽滤后转移 入蒸发皿中，在105°c烘箱内烘干至4~6h。 取出冷却后，用60~80目标准分子筛出去过粗 或过细的筛分，并保存在干燥器中备用。 （若为已经预处理过的市售载体，则不必酸洗， 只要烘干即可）。
操作步骤
– 制备一根2mx¢4mm不锈钢螺旋柱 固定液：邻苯二甲酸二壬酯； – 载体：6201红色硅藻土(60~80目)； – 配比：5%。
清洗和干燥色谱柱管
– 用20%左右的氢氧化钠温热溶液反复抽洗柱管 3~4次，用自来水抽洗，再用10%盐酸抽洗至 中性。 – 试漏烘干。将柱子一端堵住，另一端通入气体， 用肥皂水检漏。若无漏气，再将柱管用蒸馏水 清洗至无氯离子，抽去水后放入烘箱中120° 烘干。
老化
– 将柱子的进口段接到色谱仪的汽化室（原来接 漏斗的一端），另一端连接一段细管线后放空， 通氮气，缓慢升温至110°c,在此温度下维持 4~8h,冷却后将柱子的另一端与检测器相连， 再次升温老化直至走基线平稳，说明老化处理 完成，可用于分析。
涂渍固定液涂渍固定液活化担体配制溶液涂渍除溶剂干燥装填柱子装填柱子在柱子的一端塞上一小段玻璃棉用一块纱布包扎后通过三通活塞开关和缓冲瓶接真空泵减压抽气柱管另一端接一小漏斗向漏斗中连续加固定相并用小木棒轻轻敲打柱管边敲抽边敲不要使固定相断流
色谱柱的制备
指导老师：甘黎明 学生：赵玉勇 兰州石化职业技术学院石油化学工程系工业分析与检验
涂渍固定液
– 活化担体-配制溶液-涂渍-除溶剂-干燥
装填柱子
– 在柱子的一端塞上一小段玻璃棉，用一块纱布 包扎后，通过三通活塞开关和缓冲瓶接真空泵 减压抽气，柱管另一端接一小漏斗，向漏斗中 连续加固定相，并用小木棒轻轻敲打柱管，边 抽边敲，不要使固定相断流。当固定相不在进 入时，取下漏斗，在此端塞入一小段玻璃棉， 做好进气端和出气端的标记。