乙酸钠溶液(3molL,RNase-free,pH5.2)
乙醇醋酸钠纯化PCR产物
实验方法原理 核酸是多聚阴离子的水溶性化合物，可以与许多1价、2价离子结
合形成盐类，后者在有机溶剂中不溶解也不变性．在较低温度下形成沉淀．
实验材料 待纯化样本
试剂、试剂盒 醋酸钠缓冲液 无水乙醇 70%乙醇
实验步骤
实验试剂： 1. 3mol／L醋酸钠缓冲液，pH5.2：称取醋酸钠（NaAC·3H20）408.1g，由于800ml水中，用冰醋酸调节至pH5.2，加重蒸馏水至1000ml．分装后高压灭菌（以下称3mol/L醋酸钠缓冲液）． 2．无水乙醇及70％（V／V）乙醇． 实验操作： 1. 将含核酸的溶液用移液器转至一新的Eppendorf离心管，同时测量合算溶液的体积． 2. 加入1／10体积的3 mol／L醋酸钠缓冲液。使醋酸钠的终浓度为0.3mo1/L． 3. 混匀，置冰浴中15－30 min或一20℃30 min。 4. 4℃ 12000 r／min，离心15 min． 5. 手持Eppendorf成45度角，使核酸沉淀面向上，用微量移液器或连接真空泵的吸头不可接触沉淀物． 6. 向管中加入预冷的70%乙醇至2／3体积．混匀漂洗，以除去残余的盐． 7. 4℃12000 r／min离心 2min，如步骤5吸取上清液． 8. 不盖管盖置室温10－l5min或真空中2 min，使乙醇挥发。
经典实验室常用缓冲液配置方案
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
浓HClPH值7.4 约70ml7.6 约60ml8.0 约42ml4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer(pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
100ml1M Tris－HCl Buffer（PH7.4，7.6，8.0）500mM EDTA(PH8.0) 20ml2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
环状RNA的定量PCR检测实验方法
环状RNA 的定量PCR 检测实验方法1.介绍环状RNA（circRNA）已经在许多物种中被鉴定出来，包括人类，老鼠，线虫和腔棘鱼。
人们认为，部分环状RNA通过调节microRNA （miRNA）而起到调控基因表达的作用。
环状RNA调节基因表达的机制之一是通过作为miRNA的“海绵”，隔离miRNA并降低其可用性以降低靶mRNA的稳定性或翻译。
根据其他研究的分子功能，circRNA 也可以作为RNA结合蛋白（RBP）的海绵，提供组装RBP 的平台，并且与mRNAs相联结以在转录后调节其表达。
我们使用TRIzol 从这些细胞中分离总RNA，通过RNaseR 处理提高circRNA 的浓度，逆转录（RT）后通过实时定量（q）PCR分析鉴定circRNA。
使用从RT-qPCR 获得的数据来计算细胞之间的circRNA 表达的变化情况。
2. 材料注意：所有的试剂，材料和仪器应小心处理，使它们保持无核酸酶污染。
2.1RNA 分离1.增殖细胞（P）和通过癌基因诱导衰老（OIS）的衰老细胞（S）。
2.Dulbecco 的磷酸盐缓冲盐水（DPBS）3.涡流混合器。
4.细胞刮刀。
5.TRIzol? 试剂（储存在4°C）。
6.无核酸酶的水。
7.不含RNase的 1.5mL 微量离心管。
8.NanoDrop 分光光度计。
2.2通过RNase R提高circRNA 浓度通过RNase R处理以降解线性RNA，提高RNA样品中的circRNA 纯度。
1.从增殖细胞和衰老细胞分离的总RNA（参见RNA分离）。
2.无RNA酶的 1.5mL 微量离心管。
3.20U / μL RNase R.4.RNase R 10×反应缓冲液[0.2M Tris-HCl （pH8.0），1M KCl和1mMM gCl2] （包括酶）。
5.40 U / μ LRiboLock 核糖核酸酶抑制剂。
6.Eppendorf?Thermomixer?R.7.5:1 酸性苯酚- 氯仿。
乙酸钠溶液(2molL,pH4.8,无菌)
北京雷根生物技术有限公司
乙酸钠溶液(2mol/L,pH4.8,无菌)
简介：
乙酸钠也称醋酸钠、NaAc ，是常规分子生物学试剂。
乙酸钠溶液(2mol/L,pH4.8,无菌)主要由2M NaAc 组成，调节pH 至4.8，经高压灭菌，常用于DNA 或RNA 乙醇沉淀等。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 操作过程中注意无菌操作。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 R00748 Storage NaAc(2mol/L,pH4.8,无菌) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称 DC0032 Masson 三色染色液
NH0042 SSC 缓冲液(10×,pH7.0)
NH0053 变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
NE0022 SDS 溶液(10%)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
PW0111 Super ECL Plus 超敏发光液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
乙酸乙酸钠缓冲溶液ph计算公式
乙酸乙酸钠缓冲溶液ph计算公式乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式缓冲溶液是指能够维持溶液pH值稳定的一种溶液。
在实验室中，乙酸乙酸钠缓冲溶液是常见的一种缓冲体系。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值可以通过一个简单的公式来计算。
乙酸乙酸钠缓冲溶液主要由乙酸和乙酸钠组成，乙酸是弱酸，乙酸钠是其盐。
在溶液中，乙酸可以与水分解产生乙酸根离子(CH3COO-)和H+离子，而乙酸钠可以与水分解产生乙酸根离子和Na+离子。
乙酸的离解方程式如下：CH3COOH ⇌ CH3COO- + H+乙酸钠的离解方程式如下：CH3COONa ⇌ CH3COO- + Na+在乙酸乙酸钠缓冲溶液中，乙酸和乙酸根离子相互转化，维持了溶液中乙酸根离子和乙酸的浓度比例，从而维持了溶液的pH值稳定。
乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式如下：pH = pKa + log ([A-]/[HA])其中，pH为溶液的pH值，pKa为乙酸的酸解离常数的负对数，[A-]为乙酸根离子的浓度，[HA]为乙酸的浓度。
pKa值是乙酸的一个重要参数，它表示了乙酸的酸性强弱。
pKa值越小，乙酸的酸性越强。
在实验中，我们可以通过测定乙酸和乙酸钠的溶液的pH值，然后利用公式计算出pKa值。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值可以通过改变乙酸和乙酸钠的浓度比例来调节。
当乙酸和乙酸根离子的浓度相等时，溶液的pH值等于乙酸的pKa值。
当乙酸根离子的浓度大于乙酸的浓度时，溶液呈碱性；当乙酸根离子的浓度小于乙酸的浓度时，溶液呈酸性。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值计算公式可以帮助我们预测和调节溶液的酸碱性，对于化学实验和生物实验中的pH控制非常重要。
通过合理选择乙酸和乙酸钠的浓度比例，我们可以制备出不同pH值的缓冲溶液，用于各种实验和研究领域。
总结一下，乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式为pH = pKa + log ([A-]/[HA])，其中pKa为乙酸的酸解离常数的负对数，[A-]为乙酸根离子的浓度，[HA]为乙酸的浓度。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
Tris-HCl、HEPES缓冲液区别知多少
在生物实验中经常会用到缓冲液，缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。
最常用到的缓冲液有很多，比如说磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液以及氨基酸缓冲液等等。
不同的缓冲液差别液很大，今天就来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的区别。
Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点
1、Tris-HCl缓冲液
Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。
1）Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强，可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液；对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
2）Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大，稀释10倍，pH变化大于0.1
温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.4
2、HEPES缓冲液
HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
1）HEPES缓冲液优点：
在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值，并对细胞无毒性作用。
2）HEPES缓冲液缺点：
在高浓度时对一些细胞可能有毒，与其他缓冲剂相比价格略贵。
试验室常用缓冲液配置方案
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCI (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCI配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4•将溶液定容至1 L。
5.咼温咼压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大, 温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10 开E Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA 配制量：1 L配制方法：1.量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3) 1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 咼温咼压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大, 温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4) 3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M醋酸钠配制量：100ml配制方法：1•称量40.8g NaAc 3H2O (或者24.6g无水NaAc)置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2•加入冰醋酸调节pH值至5.23•加去离子水将溶液定容至100ml4咼温咼压火菌后，室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4 配制量：1 L配制方法：2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
实验室常见缓冲液配制
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
值。
4.将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O（或者24.6g无水NaAc）置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
实验室常见缓冲液配制
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
值。
4.将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O（或者24.6g无水NaAc）置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
20几种常用试剂配置方法
（1）配制方法：在20ml纯水中（Milli-Ce水或相当级别的水）溶解54g Cacl2 ? 6H2O用0.22um滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20 ℃。
（2）说明：制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用纯水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45um孔径）过滤除菌，然后聚冷至0℃。
20、Tris缓冲液溶液
（1）配制方法：在800ml蒸馏水中溶解8g Nacl、0.2Kcl和3g Tris碱，加入0.015g酚红并用Hcl调pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在15 1bf/in2（1.034 × 10 5 Pa)高压下蒸汽灭菌l为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃，X-gal溶液无须过滤除菌。
（2）说明：小心，酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
11、10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）
（1）配制方法：用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20 ℃，如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。
15、5mol/L氯化钠
（1）配制方法：在800ml水中溶解292.2g Nacl加水定容至1L，分装后高压灭菌。
16、10%十二烷基硫酸钠（SDS）
（1）配制方法：在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68 ℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。
实验室常用试剂的配方
常用试剂的配方常用贮液与溶液 (1)1mol/L亚精胺（Spermidine） (1)1mol/L精胺（Spermine） (1)10mol/L乙酸胺（ammonium acetate） (1)10mg/ml牛血清蛋白(BSA） (1)1mol/L二硫苏糖醇（DTT） (1)8mol/L乙酸钾（potassium acetate） (1)1mol/L氯化钾（KCl） (1)3mol/L乙酸钠（sodium acetate） (1)0.5mol/L EDTA (1)1mol/L HEPES (1)1mol/L HCl (1)25mg/ml IPGT (1)1mol/LMgCl2 (1)100mmol/L PMSF (1)20mg/ml蛋白酶K（proteinase K） (1)10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free RNase） (1)5mol/L氯化钠（NaCl） (1)10N氢氧化钠（NaOH） (1)10％SDS（十二烷基硫酸钠） (1)2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol） (2)100％三氯乙酸（TCA） (2)2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷） (2)100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent） (2)10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） (2)100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） (2)20％PEG 8000/2.5M NaCl (2)20×SSC (2)DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 (3)甲酰胺（deionized formamide） (3)TE（用于悬浮和贮存DNA） (3)Tris缓冲液（Tris-HCl buffer） (3)30%丙烯酰胺溶液 (3)40%丙烯酰胺 (3)放线菌素D溶液 (4)0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液 (4)10mol/L乙酸酰溶液 (4)10%过硫酸铵溶液 (4)BCIP溶液 (4)2×BES缓冲盐溶液 (4)1mol/L CaCl2溶液 (5)2.5mol/L CaCl2溶液 (5)1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液 (5)脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 (5)0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液 (6)2×HEPES缓冲盐溶液 (6)IPTG溶液 (6)1mol/L乙酸镁溶液 (6)1mol/L MgCl2溶液 (6)β-巯基乙醇（BME）溶液 (7)NBT溶液 (7)酚/氯仿溶液 (7)10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液 (7)磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液 (7)1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液 (8)乙酸钾溶液（用于碱裂解） (8)3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液 (8)5mol/L NaCl溶液 (8)10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液 (8)20×SSC溶液 (8)20×SSPE溶液 (9)100%三氯乙酸溶液 (9)1mol/L Tris溶液 (9)Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/L Tris） (9)X-gal溶液 (9)PBS: (10)TBS： (10)枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）： (10)胰酶（Trypsin）： (10)胃酶（Pepsin）： (10)DAB： (10)AEC： (10)RIPA： (11)9、Blotto A： (11)10、Blotto B： (11)电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 (11)电泳缓冲液 (11)染料 (11)10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide） (11)凝胶上样液（gel loading solutions） (12)6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×甘油凝胶上样液（4℃贮存） (12)6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (13)10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） (13)常用培养基 (13)LB培养基 (13)SOC培养基 (13)TB培养基 (14)YPD培养基 (14)常用抗生素 (14)羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） (14)甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） (14)卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） (14)氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） (14)链霉素（streptomycin）（50mg/ml） (14)萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） (15)四环素（tetracyyline）（10mg/ml） (15)实验室常用贮存液的配制参数 (15)一、核酸及蛋白质常用数据 (15)2．常用核酸的长度与分子量 (15)3．常用核酸蛋白换算数据 (16)4．常用蛋白质分子量标准参照物 (17)5．常用DNA分子量标准参照物 (17)二、常用缓冲液 (18)1．分子克隆常用缓冲液 (18)2．磷酸缓冲液 (18)3．电泳缓冲液 (20)4．凝胶加样缓冲液 (21)5．各种pH值的Tris缓冲液的配制 (22)7．温度对常用缓冲液pH的影响 (24)三、常用酶的配制 (25)1．溶菌酶 (25)2．蛋白水解酶类 (25)3．无DNA酶的RNA酶 (25)四、常用抗生素溶液 (25)五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 (26)六、常用凝胶的技术参数 (27)1．葡聚糖凝胶的某些技术数据 (27)2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 (29)3．琼脂糖凝胶的技术数据 (29)4．各处凝胶所允许的最大操作压 (30)5．琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 (30)6．染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (30)7．染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (31)七、氨基酸的特性 (31)八、遗传密码 (32)九、常用酸碱技术参数 (33)1．常见的市售酸碱的浓度 (33)2．各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 (34)常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法
乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法乙酸-乙酸钠缓冲溶液是一种常用的生物化学实验室用溶液，用于在生物学和生物化学研究中稳定pH值。
它具有减少pH值变化的作用，常用于实验室中进行酶活性的测定，DNA/RNA的电泳以及细胞培养等实验中。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制是实验室中常见的操作，也是实验室基本技能之一。
下面，我将为大家介绍乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法，希望对你有所帮助。
1.缓冲溶液的原理在生物化学实验中，缓冲溶液通常用来稳定试剂的pH值，以避免pH值的变化对实验结果造成影响。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液是一种酸性缓冲溶液，其pH值可以在较宽的范围内进行调节。
当加入酸或碱时，乙酸和乙酸钠会相互反应，从而使pH值保持相对稳定。
2.配制乙酸-乙酸钠缓冲溶液的原料准备配制乙酸-乙酸钠缓冲溶液需要准备以下原料和设备：-乙酸（冰醋酸）-乙酸钠（醋酸钠）-蒸馏水-稀盐酸和稀氢氧化钠溶液-电子天平-量筒或移液器-磁力搅拌器- pH电极和pH仪3.配制步骤接下来，我将介绍乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制步骤，包括具体的操作方法及注意事项。
3.1准备0.1 M的乙酸-乙酸钠缓冲溶液(1)首先，准备0.1 M的乙酸溶液。
称取适量的乙酸（冰醋酸），例如用电子天平称取1 mol的乙酸，溶解于适量的蒸馏水中，得到1升的0.1 M乙酸溶液。
(2)接着，准备0.1 M的乙酸钠溶液。
同样地，称取适量的乙酸钠（醋酸钠），例如用电子天平称取1 mol的乙酸钠，溶解于适量的蒸馏水中，得到1升的0.1 M乙酸钠溶液。
3.2调配pH值(1)取一定体积的乙酸溶液并倒入一个容器中，然后用pH仪测量其pH值。
(2)根据所需的实验pH值，向乙酸溶液中加入适量的乙酸钠溶液，同时用pH仪监测pH值的变化。
根据实际情况逐渐调整pH值，直到达到所需的值。
3.3验证pH值(1)使用pH仪和pH电极仔细测量调配好的乙酸-乙酸钠缓冲溶液的pH值，并记录下来。
3.4调整体积(1)最后，如果需要，可以根据需要将缓冲溶液的体积调整到所需的值，例如1升。
乙酸钠溶液(3molL,pH5.2)
乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2)
产品简介：
乙酸钠也称醋酸钠、NaAc，是常规分子生物学试剂。用于 DNA 乙醇沉淀等。
产品组成：
编号 名称 R00737 100ml R00737 500ml 1份 Storage
NaAc(3moΒιβλιοθήκη /L,pH5.2)使用说明书
RT
主要成分：主要由 3M NaAc 组成，调 pH5.2。 操作步骤（仅供参考） ：
1、按具体实验要求使用。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。 相关产品：
产品编号
NH0042 NH0053 NE0022 NE0045 NE0056 NR0001 R00017 R00038 R00063 R00195
产品名称
SSC 缓冲液(10×,pH7.0) 变性鲑鱼精 DNA(10mg/ml) SDS 溶液(10%) 盐酸胍溶液(8mol/L) 乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2,RNase free) DEPC 处理水(0.1%) EDTA 溶液(0.5mol/L,pH8.0) IPTG(50mg/ml) MES buffer(0.05mol/L,pH6.0) Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0)
ph5.5的乙酸乙酸钠缓冲液的配制方法
标题：ph5.5的乙酸乙酸钠缓冲液的配制方法一、概述在生物化学和生物实验中，常常需要使用缓冲液来稳定溶液的pH值，使实验条件更加稳定。
乙酸乙酸钠缓冲液是一种常用的缓冲液之一，其pH值通常在4.5-5.5之间。
在本文中，我们将介绍如何配制pH5.5的乙酸乙酸钠缓冲液，希望能为实验工作者提供帮助。
二、准备工作1. 实验室天平2. 蒸馏水3. 乙酸（冰乙酸）4. 碳酸钠5. 磁力搅拌器6. 磁力搅拌棒7. pH计8. 10mL、50mL和100mL三种容量瓶9. 烧杯10. 称量瓶三、配制步骤1. 计算所需物质的量根据所需制备的缓冲液体积和配制所需pH值，使用韦恩图（Henderson-Hasselbalch equation）计算所需的乙酸和乙酸钠的量。
具体计算公式如下：（1）乙酸的质量 = C1*V1*M1其中，C1为所需乙酸的浓度（mol/L），V1为所需溶液的体积（L），M1为乙酸的摩尔质量（g/mol）。
（2）乙酸钠的质量 = C2*V2*M2其中，C2为所需乙酸钠的浓度（mol/L），V2为所需溶液的体积（L），M2为乙酸钠的摩尔质量（g/mol）。
2. 称量乙酸使用天平称量所需的乙酸，并加入10mL容量瓶中。
3. 称量乙酸钠使用天平称量所需的乙酸钠，并加入10mL容量瓶中。
4. 添加蒸馏水分别向乙酸和乙酸钠中加入蒸馏水，使体积达到10mL，摇匀溶解。
5. 调整pH值使用pH计检测溶液的pH值，若不足5.5，逐滴加入盐酸或氢氧化钠调节pH值至所需的5.5。
6. 验证溶液验证调节后的溶液pH值是否达到5.5，确认无误后，将溶液转移到50mL容量瓶中。
7. 验证溶液浓度使用浓度计或pH计验证缓冲液的浓度是否符合预期。
8. 校正体积如有必要，校正缓冲液的体积，使其达到预期的体积。
9. 放置将制备好的缓冲液储存在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射。
四、注意事项1. 乙酸和乙酸钠均为腐蚀性物质，使用时需戴手套、护目镜等防护设备。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法
乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法乙酸和乙酸钠是一对共存于溶液中能够形成缓冲作用的酸碱对。
乙酸是一种弱酸，乙酸钠是其对应的盐。
当乙酸和乙酸钠在适量的水溶液中共存时，可以形成乙酸-乙酸钠缓冲溶液。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液具有一定的缓冲能力，可以维持溶液的酸碱性质在一定范围内稳定。
配制乙酸-乙酸钠缓冲溶液的方法主要分为以下几个步骤：1.准备所需实验器材和试剂：-乙酸（CH3COOH）：纯度一般要求在99%以上。
-乙酸钠（CH3COONa）：纯度一般要求在99%以上。
-电子天平：用于准确称量试剂。
-稀释瓶：用于配制溶液。
-磁力搅拌器：用于搅拌溶液。
2.计算所需乙酸和乙酸钠的质量：-首先，需要确定所需乙酸-乙酸钠缓冲溶液的浓度和体积。
-然后，根据乙酸和乙酸钠的摩尔质量（乙酸的摩尔质量约为60.05 g/mol，乙酸钠的摩尔质量约为82.03 g/mol）以及所需浓度和体积，计算乙酸和乙酸钠的质量。
3.称取乙酸和乙酸钠的质量：-使用电子天平准确称取所需的乙酸和乙酸钠的质量。
-考虑到乙酸和乙酸钠的质量不同，可以根据比例关系调整乙酸和乙酸钠的质量。
4.加入适量的溶剂：-将乙酸和乙酸钠分别加入稀释瓶中。
根据实验所需溶液的体积确定加入的溶剂的量，一般可以选择蒸馏水或去离子水。
-注意，在配制溶液时可以根据需要适当调整乙酸和乙酸钠的质量，以达到所需的浓度和体积。
5.搅拌溶液：-使用磁力搅拌器将溶液充分搅拌，以确保乙酸和乙酸钠充分溶解。
6.调整溶液酸碱性质：-根据所需的酸碱性质，可以使用酸碱指示剂或pH计进行测量，并根据需要加入少量的酸或碱来调整溶液的pH值。
7.测定溶液浓度：-可以使用分光光度计、滴定法或其他适用的分析方法测定溶液的浓度。
值得注意的是，以上步骤仅为一种基础的乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法，具体操作过程中应根据实际需要和实验室条件进行调整和改进。
乙酸-乙酸钠缓冲溶液在实验和工业生产中具有广泛的应用。
它可以用于调节酸碱性质，维持溶液的稳定性，防止酸碱度的变化对实验结果的影响。
RNA提取实验操作步骤注意事项及问题指南
RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过水配制）。
操作步骤：1. 匀浆处理a. 植物组织:以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.，大约100mg 叶片使用1 ml Trizol.b. 动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过Trizol体积10%.c. 单层培养细胞.直接在培养板中加入Trizol裂解细胞,每10cm2面积加1ml Trizol.用取样器吹打几次.注意:Trizol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定.如果Trizol 加量不足,可能导致提取RNA中有DNA污染.d.细胞悬液:离心取细胞，每5-10×106动物、植物与酵母细胞或每107细菌细胞加1ml Trizol。
加Trizol前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
一些酵母与细菌细胞可能需要匀浆仪处理。
e.血液处理:直接取新鲜血液,加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10min，10 000rpm 离心1min。
弃上清，收集白细胞沉淀。
每1ml血液收集白细胞沉淀中加入1ml Trizol。
2. 将匀浆样品在15-30℃放置5mim，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 可选步骤:4 ℃10 000rpm离心10min，取上清。
如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可离心去除。
离心得到沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织样品时，上层是大量油脂，应除去。
取澄清匀浆溶液进行下一步操作。
4. 每使用1ml Trizol加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈震荡15s，室温放置3min。
如不能涡旋混匀，可手动颠倒混匀2min代替。
溶液配制表
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
100%三氯乙酸溶液在装有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。
磷酸缓冲液（phosphate buffer）按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。
配制1 mol/L 的磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
2．磷酸缓冲液（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※Tris缓冲液（Tris-HCl buffer）将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。
各种pH值的Tris缓冲液的配制某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml。
真核细胞rna提取的实验报告范文
真核细胞rna提取的实验报告范文本方法利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，采用有机溶剂抽提去除蛋白质。
通过选择性沉淀RNA分子去除DNA。
1.样品处理⑴组织样品处理：取新鲜的组织样品称重后，剪碎成约1cm2的组织块直接加入匀浆液中进行RNA提取，或液氮中速冻-70℃保存。
⑵贴壁培养细胞处理：用PBS洗细胞一次，吸干溶液后将培养板快速移至液氮中冷冻后转到-70℃保存；或加入1ml匀浆至培养板中直接裂解细胞，然后将粘稠的裂解液进一步匀浆。
⑶悬浮培养细胞处理：离心收集细胞，用PHS悬浮漂洗再田心收集，若不立即提取RNA，则可经液氮速冻后转至一70℃贮存备用。
2．加l倍体积盐酸胍匀浆液[至准备好的样品细胞中，高速匀浆1min。
3．匀浆液5000g，室温离心10min。
4．将上清移至一个干净离心管中，加入0.1体积的3mol／L乙酸钠（PH5.2），混匀，再加5体积预冷的乙醇，立即充分混匀，-20℃放置至少2小时。
5．5000g 0℃离心10分钟沉淀核酸，弃上清液，室温干燥。
6，每个提取RNA的组织或细胞样品中，加入l0～15min盐酸胍匀浆液Ⅱ，搅拌溶解。
7．加入2.5体积预冷的乙醇，立即充分混匀，-20℃至少放置2小时。
8．5000g 0℃离心10分钟沉淀核酸，去上清，室温挥发乙醇。
9．按每克组织细胞加5min的比例．分两次加入0.02mol／L EDTA(pH8.0) 先加1／2体积EDTA振荡l～2分钟，3000g离心2min．吸出上清．再加另一个1/2体积的EDTA振荡l一2分钟．合并两次核酸溶解液。
．10．用等体积氯仿—正丁醇(4：1)抽提核酸溶液，5000g室温离心l0min，5000g室温离心10min。
吸出上清至另一个干净离心管中。
11．加3倍体积lmol／L乙酸钠 (PH7.0) 混匀，-20℃放置1h以上，此时RNA将选择地沉淀，而DNA仍为溶解状况。
12．5000g，0℃离心20min，沉于管底的是RNA。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
北京雷根生物技术有限公司
乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2,RNase free)
简介：
乙酸钠也称醋酸钠、NaAc ，是常规分子生物学试剂。
用于RNA 乙醇沉淀以及与RNA 相关实验等，经RNase free 处理，已高压灭菌。
本试剂主要由NaAc 组成。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据具体实验要求操作。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 操作过程中注意无菌操作，并应注意避免RNase 污染。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 NE0056 NE0056 Storage NaAc(3mol/L,pH5.2,RNase free) 100ml 500ml RT
使用说明书 1份 编号
名称
DC0032 Masson 三色染色液 NH0053 变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
OR0001 pH 标准缓冲溶液(pH=4.00)
PS0013 RIPA 裂解液(强)
PW0053 Western 抗体洗脱液(碱性)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)
TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。