基因工程与细胞工程
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生物技术专题
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入 了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培 养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测 基因表达载体是否导入了农杆菌。
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养 基B分别还含有_氨__苄__青__霉__素__、四__环__素__(_氨__苄__青__霉__素__和__四__环__素__)。 从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是___4_和__6__菌落中 的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同 位素标记的__抗__盐__基__因___作探针进行分子杂交检测，又要用 一__定__浓__度__的__盐__水__浇__灌__烟__草__植__株__(_将__烟__草__植__株__移__栽__到__盐__碱__地__中__)_ 的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 __植__物__组__织__培__养___技术，愈伤组织经_细__胞__增__殖__和__分__化_____进而 形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加 __植__物__激__素__(生__长__素__和__细__胞__分__裂__素__)___。
细胞膜的流动性 给小鼠注射特定抗原
产生专一抗体的杂交瘤细胞
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考点一 基因工程 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切
位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性 基因。下列叙述正确的是( ) 【答案】C
A．图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B．在构建重组质粒时，可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA C．用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求 的重组质粒 D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长栏导目引
2.基因工程的原 2012全国新课标、山东、(2)以工农业生产、畜牧业生
理及技术Ⅱ 江苏、福建、天津、浙 产和医学实践中的具体事例为
3.基因工程的应 江、安徽
命题背景，考查植物组织培养
用Ⅱ
2011浙江、海南、山东、相关知识。
4.蛋白质工程Ⅰ 江苏、安徽、福建、北 2.备考指南：(1)表解比较法理
京
解限制酶、DNA连接酶和载
示意图。下列有关叙述，正确的是( )
【答案】D
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得 的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞 的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
跟踪训练 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考点二 动物细胞培养和植物组织培养 (2013·高考大纲全国卷) 关于动物细胞培养和植物组
织培养的叙述，错误的是( ) 【答案】B A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离 体培养增殖 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植 物脱除病毒
专题九 现代生物技术专题
跟踪训练 某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限 制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素 基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示， 请回答下列问题。
栏目 导引
•
9、要学生做的事，教职员躬亲共做； 要学生 学的知 识，教 职员躬 亲共学 ；要学 生守的 规则， 教职员 躬亲共 守。21 .7.2221 .7.22T hursday , July 22, 2021
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.7.2221.7.2 211:31:0411:31 :04July 22, 2021
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14、谁要是自己还没有发展培养和教 育好， 他就不 能发展 培养和 教育别 人。202 1年7月 22日星 期四上 午11时 31分4 秒11:31:0421.7. 22
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
跟踪训练 植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程 可用图解简单表示：
(1)原生质体的结构包括__细__胞__膜__、 __细__胞__质__、_细__胞__核__(_顺__序__可__颠__倒__) 三部分。 (2)培育胚状体利用了__植__物__组__织__培__养___ 这一项生物技术，培养基中除了含有 一定的营养物质外,还必须含有细胞 分裂素、生长素等植物激素，还需要 对培养基进行严格的__灭__菌____。 (3)从叶片的叶肉细胞到愈伤组织再分化形成胚状体，再继续 培养则可培育出完整的植株，这体现了__细__胞__的__全__能__性__。 栏目
的是_c_、__d_(_或__c_、__d_、__e_)_(用字母a～e回答)阶段，若为了获得三 七的细胞产物，则只需培养到__愈__伤__组__织________。若为了获
得三七的人工种子，则需要培养到___胚__状__体_______。
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考点三 植物体细胞杂交和动物细胞融合 (2013·高考重庆卷)下图是单克隆抗体制备流程的简明
(2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，
请完成设计方案：
①取__特__定__抗__原__刺__激__的__B_淋__巴_____细胞的细胞核，移植到去核
的___无__限__增__殖_______细胞中，构成重组细胞。
②将重组细胞在__体__外____条件下做大规模培养或注射到小鼠
__腹__腔____内增殖，以获得大量单克隆抗体。
•
5、You have to believe in yourself. That's the secret of success. ----Charles Chaplin人必须相信自己，这是成功的秘诀。-Thursday, June 17, 2021June 21Thursday, June 17, 20216/17/2021
现代生物技术专题
•
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状， 这种新性状(变异性状)的来源属于___基___因__重__组_______。 (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不 会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能 __复__制____，也不能_表__达__(_合__成__抗__盐__基__因__的__m__R_N__A_)__。 (3)在构建重组质粒时，应选用__S_a_l_Ⅰ___和_H__in_d__Ⅲ__两种酶对 __质__粒____和___含__抗__盐__基__因__的__D_N__A_____进行切割，以保证重组 DNA序列的唯一性。
栏目
导引
专题九 现代生物技术专题
(3)也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制 备单克隆抗体，其思路如图所示。
①酶A是指_限__制__性__核___酸__内__切__酶__，酶B是指_D__N_A__连__接__酶____。 ②图中Ⅰ表示__目__的__基__因__(无__限__增__殖__调__控__基__因__或___p_r_G_)_，对Ⅱ进 行检测与鉴定的目的是__检__测__目__的__基__因__是__否__导__入__和__是__否__表__达__, Ⅲ所指的细胞具有的特点是 __既__能__无__限__增__殖__，__又__能__产__生__特__定__抗__体________。
•
10、阅读一切好书如同和过去最杰出 的人谈 话。11:31:0411 :31:041 1:317/2 2/2021 11:31:04 AM
•
11、一个好的教师，是一个懂得心理 学和教 育学的 人。21. 7.2211:31:0411 :31Jul- 2122-Ju l-21
•
12、要记住，你不仅是教课的教师， 也是学 生的教 育者， 生活的 导师和 道德的 引路人 。11:31:0411:3 1:0411:31Thur sday , July 22, 2021
•
15、一年之计，莫如树谷；十年之计 ，莫如 树木； 终身之 计，莫 如树人 。2021 年7月上 午11时 31分21 .7.2211 :31July 22, 2021
•
16、提出一个问题往往比解决一个更 重要。 因为解 决问题 也许仅 是一个 数学上 或实验 上的技 能而已 ，而提 出新的 问题， 却需要 有创造 性的想 像力， 而且标 志着科 学的真 正进步 。2021 年7月22 日星期 四11时 31分4 秒11:31:0422 July 2021
导引
专题九 现代生物技术专题
(4)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，
需要经过____C____。
①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④原代培养
⑤传代培养 ⑥植物体细胞杂交 ⑦细胞融合 ⑧脱分化
⑨再分化
A．①④⑤⑦⑧
B．②④⑤⑥⑧⑨
C．②⑧⑨
D．③⑥⑧⑨
(5)从图解可知，需要在培养基中加入激素调整细胞分裂分化
专题九 现代生物技术专题
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
第1讲 基因工程和细胞 工程
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考纲要求
三年考情
命题趋势
2013全国大纲、广东、 1.趋势分析：(1)多以最新基因
1.基因工程的诞 江苏、安徽、四川、福 工程研究成果为载体，考查基
生Ⅰ
建、全国Ⅰ
因工程的工具与操作程序。
•
3、Patience is bitter, but its fruit is sweet. (Jean Jacques Rousseau , French thinker)忍耐是痛苦的，但它的果实是甜蜜的。10:516.17.202110:516.17.202110:5110:51:196.17.202110:516.17.2021
专题九
•
4、All that you do, do with your might; things done by halves are never done right. ----R.H. Stoddard, American poet做一切事都应尽力而为，半途而废永远不行6.17.20216.17.202110:5110:5110:51:1910:51:19
增殖调控基因(prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗 体的制备提供了更为广阔的前景。请回答：
(1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、 __灭__活__的__病__毒__、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择 性培养的杂交瘤细胞，还需进行__体__外__培__养___和_抗__体__检__测___， 经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
•
17、儿童是中心，教育的措施便围绕 他们而 组织起 来。上 午11时3 1分4秒 上午11 时31分 11:31:0 421.7.2 2
• 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of opportunity. (Richard Nixon, American President )命运给予我们的不是失望之酒，而是机会之杯。二〇二一年六月十七日2021年6月17日星期四
植物的组织培 养Ⅱ
2013重庆、全国大纲、 体的作用。
全国Ⅱ、天津 2012浙 (2)实例分析法理解基因工程
江 2011江苏
的原理与过程。
1.动物的细胞培 养与体细胞克 隆Ⅰ 2.细胞融合与单 克隆抗体Ⅱ
2013重庆、全国大纲、 山东 2012山东、福建、安徽 2011江苏、安徽
(3)列表比较法理解两个不同：
植物组织培养和动物细胞培养
的不同、植物体细胞杂交与动
物细胞融合的不同。
(4)图解法理解单克隆抗体的
制备过程。
栏目 导引
限制酶 载体
基因表达载体的构建 目的基因的检测和鉴定
转基因动物 基因治疗 基因 可产生自然界没有 的蛋白质
专题九 现代生物技术专题
细胞的全能性
植物体细胞杂交 作物新品种的培育
细胞增殖 动物细胞核的全能性
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入 了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培 养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测 基因表达载体是否导入了农杆菌。
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养 基B分别还含有_氨__苄__青__霉__素__、四__环__素__(_氨__苄__青__霉__素__和__四__环__素__)。 从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是___4_和__6__菌落中 的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同 位素标记的__抗__盐__基__因___作探针进行分子杂交检测，又要用 一__定__浓__度__的__盐__水__浇__灌__烟__草__植__株__(_将__烟__草__植__株__移__栽__到__盐__碱__地__中__)_ 的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 __植__物__组__织__培__养___技术，愈伤组织经_细__胞__增__殖__和__分__化_____进而 形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加 __植__物__激__素__(生__长__素__和__细__胞__分__裂__素__)___。
细胞膜的流动性 给小鼠注射特定抗原
产生专一抗体的杂交瘤细胞
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考点一 基因工程 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切
位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性 基因。下列叙述正确的是( ) 【答案】C
A．图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B．在构建重组质粒时，可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA C．用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求 的重组质粒 D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长栏导目引
2.基因工程的原 2012全国新课标、山东、(2)以工农业生产、畜牧业生
理及技术Ⅱ 江苏、福建、天津、浙 产和医学实践中的具体事例为
3.基因工程的应 江、安徽
命题背景，考查植物组织培养
用Ⅱ
2011浙江、海南、山东、相关知识。
4.蛋白质工程Ⅰ 江苏、安徽、福建、北 2.备考指南：(1)表解比较法理
京
解限制酶、DNA连接酶和载
示意图。下列有关叙述，正确的是( )
【答案】D
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得 的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞 的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
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跟踪训练 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限
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考点二 动物细胞培养和植物组织培养 (2013·高考大纲全国卷) 关于动物细胞培养和植物组
织培养的叙述，错误的是( ) 【答案】B A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离 体培养增殖 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植 物脱除病毒
专题九 现代生物技术专题
跟踪训练 某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限 制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素 基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示， 请回答下列问题。
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9、要学生做的事，教职员躬亲共做； 要学生 学的知 识，教 职员躬 亲共学 ；要学 生守的 规则， 教职员 躬亲共 守。21 .7.2221 .7.22T hursday , July 22, 2021
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.7.2221.7.2 211:31:0411:31 :04July 22, 2021
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14、谁要是自己还没有发展培养和教 育好， 他就不 能发展 培养和 教育别 人。202 1年7月 22日星 期四上 午11时 31分4 秒11:31:0421.7. 22
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
跟踪训练 植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程 可用图解简单表示：
(1)原生质体的结构包括__细__胞__膜__、 __细__胞__质__、_细__胞__核__(_顺__序__可__颠__倒__) 三部分。 (2)培育胚状体利用了__植__物__组__织__培__养___ 这一项生物技术，培养基中除了含有 一定的营养物质外,还必须含有细胞 分裂素、生长素等植物激素，还需要 对培养基进行严格的__灭__菌____。 (3)从叶片的叶肉细胞到愈伤组织再分化形成胚状体，再继续 培养则可培育出完整的植株，这体现了__细__胞__的__全__能__性__。 栏目
的是_c_、__d_(_或__c_、__d_、__e_)_(用字母a～e回答)阶段，若为了获得三 七的细胞产物，则只需培养到__愈__伤__组__织________。若为了获
得三七的人工种子，则需要培养到___胚__状__体_______。
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考点三 植物体细胞杂交和动物细胞融合 (2013·高考重庆卷)下图是单克隆抗体制备流程的简明
(2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，
请完成设计方案：
①取__特__定__抗__原__刺__激__的__B_淋__巴_____细胞的细胞核，移植到去核
的___无__限__增__殖_______细胞中，构成重组细胞。
②将重组细胞在__体__外____条件下做大规模培养或注射到小鼠
__腹__腔____内增殖，以获得大量单克隆抗体。
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5、You have to believe in yourself. That's the secret of success. ----Charles Chaplin人必须相信自己，这是成功的秘诀。-Thursday, June 17, 2021June 21Thursday, June 17, 20216/17/2021
现代生物技术专题
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专题九 现代生物技术专题
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状， 这种新性状(变异性状)的来源属于___基___因__重__组_______。 (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不 会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能 __复__制____，也不能_表__达__(_合__成__抗__盐__基__因__的__m__R_N__A_)__。 (3)在构建重组质粒时，应选用__S_a_l_Ⅰ___和_H__in_d__Ⅲ__两种酶对 __质__粒____和___含__抗__盐__基__因__的__D_N__A_____进行切割，以保证重组 DNA序列的唯一性。
栏目
导引
专题九 现代生物技术专题
(3)也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制 备单克隆抗体，其思路如图所示。
①酶A是指_限__制__性__核___酸__内__切__酶__，酶B是指_D__N_A__连__接__酶____。 ②图中Ⅰ表示__目__的__基__因__(无__限__增__殖__调__控__基__因__或___p_r_G_)_，对Ⅱ进 行检测与鉴定的目的是__检__测__目__的__基__因__是__否__导__入__和__是__否__表__达__, Ⅲ所指的细胞具有的特点是 __既__能__无__限__增__殖__，__又__能__产__生__特__定__抗__体________。
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10、阅读一切好书如同和过去最杰出 的人谈 话。11:31:0411 :31:041 1:317/2 2/2021 11:31:04 AM
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11、一个好的教师，是一个懂得心理 学和教 育学的 人。21. 7.2211:31:0411 :31Jul- 2122-Ju l-21
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12、要记住，你不仅是教课的教师， 也是学 生的教 育者， 生活的 导师和 道德的 引路人 。11:31:0411:3 1:0411:31Thur sday , July 22, 2021
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15、一年之计，莫如树谷；十年之计 ，莫如 树木； 终身之 计，莫 如树人 。2021 年7月上 午11时 31分21 .7.2211 :31July 22, 2021
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16、提出一个问题往往比解决一个更 重要。 因为解 决问题 也许仅 是一个 数学上 或实验 上的技 能而已 ，而提 出新的 问题， 却需要 有创造 性的想 像力， 而且标 志着科 学的真 正进步 。2021 年7月22 日星期 四11时 31分4 秒11:31:0422 July 2021
导引
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(4)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，
需要经过____C____。
①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④原代培养
⑤传代培养 ⑥植物体细胞杂交 ⑦细胞融合 ⑧脱分化
⑨再分化
A．①④⑤⑦⑧
B．②④⑤⑥⑧⑨
C．②⑧⑨
D．③⑥⑧⑨
(5)从图解可知，需要在培养基中加入激素调整细胞分裂分化
专题九 现代生物技术专题
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第1讲 基因工程和细胞 工程
栏目 导引
专题九 现代生物技术专题
考纲要求
三年考情
命题趋势
2013全国大纲、广东、 1.趋势分析：(1)多以最新基因
1.基因工程的诞 江苏、安徽、四川、福 工程研究成果为载体，考查基
生Ⅰ
建、全国Ⅰ
因工程的工具与操作程序。
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3、Patience is bitter, but its fruit is sweet. (Jean Jacques Rousseau , French thinker)忍耐是痛苦的，但它的果实是甜蜜的。10:516.17.202110:516.17.202110:5110:51:196.17.202110:516.17.2021
专题九
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4、All that you do, do with your might; things done by halves are never done right. ----R.H. Stoddard, American poet做一切事都应尽力而为，半途而废永远不行6.17.20216.17.202110:5110:5110:51:1910:51:19
增殖调控基因(prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗 体的制备提供了更为广阔的前景。请回答：
(1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、 __灭__活__的__病__毒__、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择 性培养的杂交瘤细胞，还需进行__体__外__培__养___和_抗__体__检__测___， 经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
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17、儿童是中心，教育的措施便围绕 他们而 组织起 来。上 午11时3 1分4秒 上午11 时31分 11:31:0 421.7.2 2
• 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of opportunity. (Richard Nixon, American President )命运给予我们的不是失望之酒，而是机会之杯。二〇二一年六月十七日2021年6月17日星期四
植物的组织培 养Ⅱ
2013重庆、全国大纲、 体的作用。
全国Ⅱ、天津 2012浙 (2)实例分析法理解基因工程
江 2011江苏
的原理与过程。
1.动物的细胞培 养与体细胞克 隆Ⅰ 2.细胞融合与单 克隆抗体Ⅱ
2013重庆、全国大纲、 山东 2012山东、福建、安徽 2011江苏、安徽
(3)列表比较法理解两个不同：
植物组织培养和动物细胞培养
的不同、植物体细胞杂交与动
物细胞融合的不同。
(4)图解法理解单克隆抗体的
制备过程。
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限制酶 载体
基因表达载体的构建 目的基因的检测和鉴定
转基因动物 基因治疗 基因 可产生自然界没有 的蛋白质
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细胞的全能性
植物体细胞杂交 作物新品种的培育
细胞增殖 动物细胞核的全能性