分光光度法测定七味铁屑丸中铁的含量

分光光度法测定七味铁屑丸中铁的含量
杨康;黄荣增
【摘要】Objective To establish the method for determining the content of iron in Qiwei Tiexie Pills .Methods Qiwei Tiexie Pills were digested with concentrated sulphuric acid .Fe (Ⅲ) was reduced to Fe (Ⅱ) by hydroxylamine chloride at pH =4.5, and determined by spectrophotometer .Results The calibration curve was linear at the range of 1.6~16μg/mL and regression equation was y=0.0552x-0.0009,r=0.9998.The average recovery was 99.66%and RSD was 0.94%(n=6).Conclusion This method was simple, accurate and proper,with good reproducibility .It can be used for quality control of Qiwei Tiexie Pills .%目的：建立七味铁屑丸中铁的含量测定方法。

方法七味铁屑丸通过浓硫酸消化处理后，加入盐酸羟胺将其中的铁（Ⅲ）还原为铁（Ⅱ），在PH为4.5的条件下，用联吡啶分光光度法测定铁含量。

结果在1.6μg／mL～16μg／mL范围内具有良好的线性关系（r＝0.9998），回归方程为y＝0.0552x-0.0009。

平均加标回收率为99.66％，RSD＝0.94％（n
＝6）。

结论本法简便、准确、重现性好，为七味铁屑丸的质量控制和评价提供了依据。

【期刊名称】《光明中医》
【年(卷),期】2014(000)006
【总页数】3页(P1168-1170)
【关键词】七味铁屑丸;分光光度法;铁;质量标准
【作者】杨康;黄荣增
【作者单位】湖北中医药大学武汉430065;湖北中医药大学武汉430065
【正文语种】中文
七味铁屑丸由铁屑(诃子制)、寒水石(奶制)、藏木香、木香、甘青青蓝、红花、五
灵脂膏等七味药材组成，系治疗肝病、胃病的藏族验方［1］，收载于《中国药典》2010年版一部［2］。

该药具有行气活血，平肝清热止痛之功效，用于肝区疼痛，肝脏肿大［1，2］。

查阅文献，关于七味铁屑丸中铁含量测定没有相关文献报道，但是铁是本药中的主要组成部分，故本文根据《中华人民共和国药典》2010版附录VA紫外可见分光光度法，参考相关文献［3～5］，采用 2，2- 联吡啶作为显
色剂，建立七味铁屑丸中铁的含量测定方法。

1 仪器和试药
AT-201电子分析天平(d=0.01mg，瑞士);722型分光光度计(上海第三分析仪器厂);SK5200H超声波清洗机(上海科导超声仪器有限公司);七味铁屑丸(西藏自治区
制药厂);80μg/mL硫酸亚铁对照品溶液;缓冲溶液:六亚甲基四胺-盐酸缓冲溶液(pH=4.5);还原剂:1%盐酸羟胺;显色剂:0.2%2，2-联吡啶;水为双蒸水(自制);浓硫酸、氢氧化钠等其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果
2.1 溶液的配制
2.1.1 对照品溶液的制备取硫酸亚铁对照品约0.4g，精密称定，置100mL容量瓶中，加硫酸(1→20)1mL和水80mL使溶解，加水定容，摇匀，精密量取2mL，
置 100mL容量瓶中，加水定容，摇匀，即得(80μg/mL硫酸亚铁)(临用配制)。

2.1.2 样品溶液的制备取七味铁屑丸适量，研匀，取约0.7g，精密称定，置干燥
的烧瓶中，沿瓶壁缓缓加入10毫升浓硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将烧瓶置于电热套上，小火加热，待泡沸完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈黄色澄清透明后，继续加热0.5h，放冷，沿瓶壁缓缓加水稀释，振摇使
混合，放冷后，用氢氧化钠溶液调节pH为3～5，转移至100mL容量瓶中，加
水定容，摇匀，精密量取2mL，置100mL容量瓶中，加水定容，摇匀，即得。

2.2 最大吸收波长的选择吸取4.00mL对照品溶液，置于50mL容量瓶中，加
10mL水稀释，再分别加入5.00mL缓冲溶液、2.00mL 1%盐酸羟胺溶液、
2.00mL 0.2%2，2-联吡啶溶液，加水定容，摇匀。

10min后，用分光光度计，在500～550nm之间每隔2nm测定一次吸光度，根据实验数据绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。

结果(见图1)在526nm时吸收最大。

图1 吸光度－波长曲线
2.3 还原剂剂用量的选择取9只50mL容量瓶，各依次加入6.00mL样品溶液、
10mL水、5.00mL缓冲溶液、分别加入 0.00 mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.4mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL 1% 盐酸羟胺溶液，再加入
2.00mL 0.2%2，2-联吡啶溶液，定容，摇匀。

10min后，在波长为526nm处以不加盐酸羟胺的样品溶液作为参比溶液，分别测其吸光度，绘制吸光度-还原剂剂
用量曲线。

结果(见图2)还原剂剂用量在1.00～2.00mL时，吸光度值最大且稳定。

本文选择加入2.00mL 1%盐酸羟胺溶液。

图2 吸光度－还原剂用量曲线
2.4 显色剂用量的选择取9只50mL容量瓶，各依次加入6.00mL 80μg/mL对照品溶液、10mL水、5.00mL缓冲溶液、2.00mL 1%盐酸羟胺溶液后，再分别加入0.00 mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、、2.00mL、2.50mL 0.2%2，2- 联吡啶溶液，定容，摇匀。

10min后，以加入0.00
mL0.2%2，2-联吡啶溶液的作为空白，在波长为526nm处分别测其吸光度，绘
制吸光度-显色剂用量曲线。

结果(见图3)显色剂用量在1.00～2.50mL时，吸光度值最大且稳定。

本文选择0.2%2，2-联吡啶用量为2.00mL。

图3 吸光度－显色剂用量曲线
2.5 缓冲溶液用量的选择取6只50mL容量瓶，各加入 5.00mL样品溶液、10mL 水，再分别加入
3.50mL、
4.00mL、4.50mL、
5.00mL、5.50mL、
6.00mL六亚
甲基四胺 -盐酸缓冲溶液(pH=4.5)，再加2.00mL 1%盐酸羟胺溶液，最后加入
2mL 0.2%2，2-联吡啶溶液，定容，摇匀。

10min后，在波长为526nm处分别
测其吸光度。

结果(见图4)加入缓冲溶液4～6mL时吸光度最大，且稳定。

本实验选泽缓冲溶液体积为5.0mL。

图4 吸光度－缓冲溶液用量曲线
2.6 显色时间的选择取1只50mL容量瓶，依次加入5.00mL 80μg/mL对照品溶液、10mL水、5.00mL缓冲溶液、2.00mL 1%盐酸羟胺溶液、2.00mL0.2%2，
2-联吡啶溶液，定容，摇匀。

以试剂作为空白，在526nm处每隔5min测定一次吸光度。

结果显色反应较快，10min后吸光度已达到最大且稳定，30min内几乎
没有变化。

故选择显色时间为10min。

2.7 线性关系考察取7只50mL容量瓶，各加入0.00 mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL 80μg/mL对照品溶液，加10mL水稀释，再分别加入5.00mL缓冲溶液、2.00mL 1%盐酸羟胺溶液、2.00mL0.2%2，2-联吡啶溶液，定容，摇匀。

10min后，在波长为526nm处分别测其吸光度，绘制
标准曲线。

结果表明，在1.6～16μg/mL浓度范围内，线性关系良好(r=0.9998)，回归方程为 y=0.0552x-0.0009。

2.8 精密度试验取1只50mL容量瓶，依次加入5.00mL 80μg/mL对照品溶液、10mL水、5.00mL缓冲溶液、2.00mL 1%盐酸羟胺溶液、2.00mL0.2%2，2-联
吡啶溶液，定容，摇匀。

10min后在526nm处连续测定6次。

结果RSD为
0.2%。

2.9 重复性试验取同一批号样品(批号:100101)细粉约0.7g，共6份，分别按照样品溶液制备方法制备样品溶液，分别精密量取5 mL，置于50mL容量瓶中，照2.8项下方法依次加入各种试剂并测定。

结果铁平均含量(以硫酸亚铁计)为
0.5740g/g，RSD为1.6%。

2.10 加标回收试验取已知含量同一批号样品(批号为100101，铁含量以硫酸亚铁计为0.5740g/g)细粉约0.35g，共6份，精密称定，分别精密加入一定量的硫酸亚铁对照品后，按照2.9项下的方法处理并测定。

结果(见表1)平均回收率为99.66%，RSD=0.94%(n=6)。

表1 加标回收试验结果 (%)编号取样量(g)原有量(g)加入量(g)测得量(g) 回收率平均值RSD 1 0.3418 0.1962 0.2039 0.4028 101.3 2 0.3721 0.2136 0.1894 0.4022 99.58 3 0.3236 0.1857 0.2115 0.3941 98.53 4 0.3824 0.2195 0.1746 0.3936 99.71 99.66 0.94 5 0.3508 0.2014 0.2183 0.4168 98.67 6 0.3372
0.1936 0.2047 0.3987 100.2
2.11 样品中铁的含量测定取3批七味铁屑丸，分别按照样品溶液制备方法制备样品溶液，按照2.9项下的方法处理并测定，代入回归方程计算样品中铁的含量。

结果见表2。

表2 七味铁屑丸中铁的含量测定结果(以硫酸亚铁计)批号铁含量(g/丸)1 100101 0.5740 2 100102 0.5109 3 100103 0.5482
3 讨论
3.1 试验对样品溶液制备方法进行了考察，比较了文献中的几种消解方法，结果表明本文用浓硫酸消化方法效果较好，便于操作。

3.2 试验还对显色pH值进行了考察，结果pH值在3～5之间，吸光度最大，且稳定，本文选择pH值为
4.5。

3.3 本文采用分光光度法测定该制剂中铁的含量，方法简便、准确、选择性好、可作为该制剂的含量测定方法。

参考文献
［1］青海省藏医药研究所藏医药经典文献集成编委会.居米旁医著集［M］.北京:
民族出版社，2006:119-120.
［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:425-426.
［3］杨威，莎木嘎，杨秋林，等.用2，2-联吡啶分光光度法测定蒙药珍宝丸中铁含量［J］.内蒙古农业大学学报，2011，32(2):259-262.
［4］张奇凤，刘琴，姚兴.参茸黑锡丸中微量元素的测定［J］.光谱学与光谱分析，2004，24(3):366-367.
［5］杨晓明，王虹，穆卫东，等.分光光度法测定中草药中铁的含量［J］. 微元素与健康研究，2007，24(2):26-27.。