实验五_氢化可的松的抗炎作用及机制探讨

实验四 氢化可的松的抗炎作用及机制探讨
【目的和原理】炎症的基本病理改变是变性、渗出和增生。

大鼠足跖皮下注射致炎剂角叉菜胶，可引起大鼠足跖炎性肿胀。

通过测量踝关节处周长，可知肿胀程度，并可观察药物的抗炎作用。

PGE 是炎症介质，并在免疫调节中也起重要作用。

通过定量测定PGE 2含量，可知药物抑制PGE 2产生可能是其抗炎机制之一。

【实验对象】 雄性大鼠（120～180 g ）
【实验药品】① 甲醇
② 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液
③ 0.5% 氢化可的松注射液
④ N.S.
⑤ 1％ 角叉菜胶
【实验器材】天平、鼠盒、台式恒温水浴、721紫外可见分光光度计、台式离心机、注射器（0.5 ml 、2 ml ）、刻度离心试管(20 ml)、手套、软尺、手术剪
【实验方法】
取大鼠16只，称重，编号，随机分为给药组及生理盐水组，每组8只。

给药组腹腔注射氢化可的松0.6 ml/100g ，对照组腹腔注射等容量生理盐水，各组均在给药前测量右后足踝关节处周长。

给药15分钟后于右后足皮下向关节方向注射1％角叉菜胶0.1 ml/只，分别于注射后15′，30′，45′，60′，90′，120′测量每组大鼠右后关节处周长，计算肿胀度。

处死大鼠，在踝关节上0.5 cm 处剪下右后足，称重后放入刻度试管中，用生理盐水5 ml 浸泡1小时。

取出足爪，3000 rpm/min 离心浸泡液3分钟。

吸取上清液0.1 ml,加入0.5 mol/L KOH-甲醇溶液2 ml 后,将试管置于50℃恒温水浴中异构化20分钟。

然后用甲醇稀释至20 ml ，在278 nm 处测其光密度（OD ）值。

PGE 2含量以每克炎性组织相当的吸收光密度值表示。

【实验结果】
肿胀度= 注射角叉菜胶后周长－注射角叉菜胶前周长
足爪重
光密度值含量=OD PGE 2 1.计算出给药组与对照组右后足不同时间点的肿胀度，并将数据填入下表。

然后以肿胀度为纵坐标，时间为横坐标，绘出给药组与对照组作用时间曲线。

2.计算出给药组与对照组右后足PGE 2含量，并将数据填入下表。

对结果进行组间对照t 检验。

2
12121222211)(2)1()1(21n n n n n n s n s n s x x +⨯-+-+-=- )
(2
121x x s x x t --= 【注意事项】
1．用软尺量关节周长,应由专人来操作。

2.测量足跖或踝关节周长时,每次须在同一位置
3.剪下的肿胀足爪需剥皮、剪碎后再浸泡。