常用生化试剂品名
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常用生化试剂品名
Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH 值为 6.8,7.4,8.0,8.8。
其PH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高一度,PH 值下降0.03。
EDTA:Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌合物,EDTA 在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。
尿素:(脲碳酰胺; 碳酰二胺脲)尿素:脲; 碳酰胺碳酰二胺脲)Urea (分子式: CH4N2O 分子量: 60.05 尿素易溶于水,在20℃时100 毫升水中可溶解105 克。
SDS:dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠:分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38 溶解性:溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。
健康危害:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。
可引起呼吸系统过敏性反应。
SDS 是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。
它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。
在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。
DTT:DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25 常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。
DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT 的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。
DTT 的用途之一是作为巯基化DNA 的还原剂和去保护剂。
巯基化DNA 末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。
这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA 在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA 溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA 的二聚化。
DTT 也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。
但DTT 往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温。
反之,根据DTT 存加热或加入变性剂,如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS)
在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。
1mol/L 二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml 小份贮存于-20℃。
DTT 或含有DTT 的溶液不能进行高压处理。
CHAPS:3-[(3-胆固醇氨丙基二甲基氨基:胆固醇氨丙基)二甲基氨基胆固醇氨丙基二甲基氨基]-1-丙磺酸丙磺酸分子式为C32H58N2O7,分子量为614.88 两性表面活性剂,CHAPS 是一种非变性的zwitterionic 去垢剂、蛋白质裂解液,用于增溶膜蛋白和裂解蛋白-蛋白之间的相互作用。
CHAPS 是两性离子去垢剂,分子结构中具有一个胆酸和硫代甜菜碱。
在紫外区的低吸光性成为用紫外方法检测膜蛋白的首选去垢剂,CMC 值均为8 mM。
常用于于双向电泳等实验。
原理:CHAPS 保护蛋白质的天然状态,可溶解膜蛋白,从而解除蛋白与蛋白质间的相互作用。
透析可除去。
PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,也称Phenylmethylsulfonyl fluoride ,或α-Toluenesulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml 溶于异丙醇(或无水乙醇)中;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO 进行配置,储存浓度同样为100mM 3)在室温可保存一年,一般保存在-20 度或4 度.;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100 或200mM;5)在水液体溶液中不稳定,30 分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。
(见水分解,使用前加入)
NOTES::1. PMSF 剧毒,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。
凡被PMSF 污染的衣物应予丢弃。
2. PMSF 在水溶液中不稳定。
应在使用前从贮存液中 3. PMSF 在水溶液中的活性丧失速率随pH 为碱性现用现加于裂解缓冲液中。
值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。
pH 值为8.0 时,20μmmol/l PMSF 水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF 溶液调节(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。
存:2-8℃可以存放数月之久。
欲长期保存,可冻存在-20℃ PMSF 的储
APS:ammonium persulfate 过硫酸铵:分子式为(NH4)2S2O8,分子量为228.20 健康危害:对皮肤粘膜有刺激性和腐蚀性。
吸入后引起鼻炎、喉炎、气短和咳嗽等。
眼、皮肤接触可引起强烈刺激、疼痛甚至灼伤。
口服引起腹痛、恶心和呕吐。
长期皮肤接触可引起变应性皮炎。
燃爆危险:本品助燃,具腐蚀性、刺激性,可致人体灼伤。
TEMED:N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine N,N,N',N'-四甲基乙二胺四甲基乙二胺分子式:(CH3)2NCH2CH2N(CH3)2,分子量为116.20。
用于配制PAGE 胶等。
TEMED 可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。
保存条件:4℃保存。
注意事项:易燃,有腐蚀性。
易挥发,使用后盖紧瓶盖。
穿实验服戴一次性手套操作。
β-巯基乙醇:ME 或βME -巯基乙醇:分子式为HOCH2CH2SH 分子量78.1 挥发性液体,具有较强烈的刺激性气味。
βME 通常用于二硫键的还原,可以作为生物学实验中的抗氧化剂。
它被广泛使用的原因是它的羟基使它能够溶解于水中,并且降低它的挥发性。
具有特殊臭味的无色透明液体,易溶于水、苯和醇。
由于β-巯基乙醇能够打开蛋白质的结构,它常常被用于蛋白质分析。
而β巯基乙醇也常常被用于保护蛋白质中自由的半胱氨酸巯基之间不会错误形成二硫键。
危险品!经皮肤、吞咽吸收有致命危险;刺激眼睛、呼吸道粘膜,引起慢性咽炎!
Tris饱和酚一般PH 大于7.8,用于DNA 的提取。
其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。
而Tris 的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。
同时,由于PH 值大于7,在碱性环境中DNA 处于水相,RNA 处于有机相。
从而分离上清,即可得到DNA。
本试剂是用Tris-Cl pH8.0 饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,溶液内加有抗氧化的8-羟基喹啉。
本品适用于分离DNA。
注意事项:Tris 平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。
如发现变为红
色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。
溴酚蓝:Bromophenol blue;Albutest 分子式为C19H10Br4O5S 同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。
用途】pH 指示剂,pH=3.0 时呈黄色,pH=4.6 时呈蓝紫色。
酸碱指示剂;非水滴定用指示剂,蛋白电泳染色;病毒化验等。
1%的溴酚蓝将托盘天平上称取1g 溴酚蓝定溶于100ml 无水乙醇中,转移入滴瓶中,贴标签备用。
0.05%的溴酚蓝配western blot 用的2*SDS 上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝,2-DE 中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。
实际上,溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将0.1g 溴酚蓝溶于100ml 水是有困难的。
下面是其较合适的配制方法:0.05%的溴酚蓝配制方法:取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L 氢氧化钠溶液3.0ml 使溶解,再加水稀释至200ml,即得。
变色范围pH2.8~4.6(黄→蓝绿)。
只是不知道加入NaOH 会不会影响2-DE 实验。
估计影响不大,因为指示剂用量毕竟很少。
1%溴酚蓝加1g 水溶性钠型溴酚蓝于100ml 水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。
考马斯亮蓝:Coomassie brilliant blue 考马斯亮蓝有G250 和R250 两种。
其中考马斯亮蓝G250 由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。
考马斯亮蓝R250 与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。
甲醇Methanol 分子式为CH3OH 分子量32.04 能与水、乙醇、乙醚、苯、酮、卤代烃和许多其他有机溶剂相混溶,但是不与石油醚混溶,遇热、明火或氧化剂易燃烧。
甲醇有较强的毒性,对人体的神经系统和血液系统影响最大,它经消化道、呼吸道或皮肤摄入都会产生毒性反应,甲醇蒸气能损害人的呼吸道粘膜和视力。
分子量670.02 溶解情况】微溶于水,易溶于甲醇、乙醇和苯,可自由溶于氢氧化钠溶液,
解毒方法
甲醇中毒,通常可以用乙醇解毒法。
其原理是,甲醇本身无毒,
而代谢产物有毒,因此可以通过抑制代谢的方法来解毒。
甲醇和乙醇在人体的代谢都是同一种酶,而这种酶和乙醇更具亲和力。
因此,甲醇中毒者,可以通过饮用烈性酒(酒精度通常在60 度以上)的方式来缓解甲醇代谢,进而使之排出体外。
而甲醇已经代谢产生的甲酸,可以通过服用小苏打(碳酸氢钠)的方式来中和。
急性甲醇中毒患者应及时送医院抢救。
误饮甲醇者,早期可用苏打水洗胃,以排除甲醇在胃内的贮留。
超过3 日者,可用发汗剂及泻药。
遇到视力紊乱时,应反复进行腰椎穿刺,以预防视神经萎缩,并给以大量维生素 B 族和血管扩张剂,或给以氧气吸入和少量多次输血。
也可采用针刺和中药等治疗。
丙烯酰胺Acrylamide 分子式CH2=CHCONH2 分子量71.08 人体可通过消化道、呼吸道、皮肤黏膜等多种途径接触丙烯酰胺,丙烯酰胺进入体内又可通过多种途径被人体吸收,其中经消化道吸收最快。
进入人体内的丙烯酰胺约90%被代谢,仅少量以原形经尿液排出。
丙烯酰胺进入体内后,会在体内与DNA 上的鸟嘌呤结合形成加合物,导致遗传物质损伤和基因突变。
丙烯酰胺具有神经毒性作用。
神经毒性和生殖发育毒性。
丙烯酰胺在体内和体外试验均表现有致突变作用,可引起哺乳动物体细胞和生殖细胞的基因突变和染色体异常,如微核形成、姐妹染色单体交换、多倍体、非整倍体和其他有丝分裂异常等,显性致死试验阳性。
并证明丙烯酰胺的代谢产物环氧丙酰胺是其主要致突变活性物质。
硫脲Thiourea;Thiocarbamide ;分子式CH4N2S;SC(NH2)2 溶于冷水、乙醇、微溶于
乙醚。
吸入、食入、经皮吸收。
健康危害:本品反复作用时,可抑制甲状腺和造血器官。
有可能引起变态反应。
吸入本品粉尘对上呼吸道有刺激性,出现胸部不适、咳嗽等。
对眼有刺激性。
口服刺激胃肠道。
慢性影响:长期接触出现头痛、嗜睡、无力、面色苍白、面部虚肿、基础代谢降低、白细胞减少等。
对皮肤有损害,出现皮肤瘙痒、手掌出汗、皮炎及皲裂等。
碘乙酰胺:iodacetamide,2-Iodoacetamide 或2-Iodoacetamide ,分子式为:C2H4INO5S,储存温度:2-8℃分子量:184.96 性质:白色至黄色结晶。
熔点95℃。
溶于热水,易分子量76.12
溶于乙醇,冷藏保存。
碘代乙酰胺用于有机合成,在蛋白组学中组氨酸和
半胱氨酸的烷基化试剂,用于多肽测序以及酶抑制剂等,蛋白组学级试剂。
硫酸铵:ammonium sulfate 化学式:(NH4)2SO4 出蛋白质等。
侵入途径:吸入、食入、经皮吸收。
健康危害:对眼睛、粘膜和皮肤有刺激作用。
皮肤接触:脱去污染的衣着,用大量流动清水冲洗。
眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。
就医。
吸入:脱离现场至空气新鲜处。
如呼吸困难,给输氧。
就医。
食入:饮足量温水,催吐。
就医。
Triton X-100聚乙二醇辛基苯基醚分子式: C14H22O(C2H4O)n 乙烯氧基单位平均值为每分子9 或10 为646.86
低熔点琼脂糖(Low Metling Agarose)low melting-temperature agarose )多糖链上引入羟乙基后的琼脂糖。
由于其能在30℃左右成胶,约65℃熔化,熔化温度低于大多数双链DNA 熔点。
利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。
胶凝温度(4%):≤35℃湿度:≤10% 硫酸盐:≤0.15% 熔化温度(4%):≤65℃凝胶强度(4%)≥500g/cm2
两性电解质:ampholyte 同时带有可解离为负电荷和正电荷基团的电解质。
如氨基酸。
近无色至浅黄色透明液体。
用途:用于生物大分子蛋白胨和酶的等电聚焦电泳。
原理:它在大于其等电点的pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的pH 环境中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动。
这种泳动只有在等于其等电点的pH 环境中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。
甘氨酸:氨基乙酸:Glycine:Aminoacetic acid 分子量75.07 结构式NH2CH2COOH 分子量分子量:132.16 应用于生化,盐析的常用盐,可以盐析初步从发酵等上游产物中分离纯化矿物油mineral oil。