ELISA实验报告
elisa实验报告结果分析
Elisa实验报告结果分析1. 引言Elisa（酶联免疫吸附实验）是一种常用于检测和定量分析生物样本中特定分子的方法。
本文旨在对实验结果进行分析，并根据分析结果得出结论。
2. 实验设计在本次实验中，我们选择了特定的生物分子作为目标，通过Elisa方法来检测样本中的该分子含量。
实验过程中，我们遵循了以下步骤： 1. 准备样本和试剂：收集样本并处理，准备所需的试剂。
2. 涂覆酶标板：将待测样本加入酶标板孔中，使样本中的目标分子与酶标板表面发生特异性结合。
3. 洗涤：去除未结合的物质。
4. 加入检测抗体：加入特异性抗体，与已结合的目标分子发生反应。
5. 加入标记物：加入标记物，用于检测目标分子的存在。
6. 洗涤：去除未结合的物质。
7. 反应底物：加入底物，观察颜色变化。
8. 停止反应：加入停止液停止反应。
9. 测量：使用酶标仪或光谱仪测量吸光度。
3. 结果分析根据实验结果，我们得到了一系列吸光度值。
下面我们将对吸光度值进行分析，并根据实验设计和已有知识得出结论。
3.1. 标准曲线分析实验中通常会使用一系列已知浓度的标准样品来构建标准曲线。
通过测量标准样品的吸光度值，我们可以绘制出标准曲线。
在实验中，我们可以使用标准曲线来确定未知样本中目标分子的浓度。
3.2. 样本浓度分析根据实验设计，我们在酶标板中加入了待测样本，并测量了其吸光度值。
通过标准曲线，我们可以将吸光度值转化为目标分子的浓度。
根据样本中目标分子的浓度，我们可以进行进一步的分析。
3.3. 结果验证为了验证实验结果的准确性和可靠性，我们可以进行重复实验或与其他方法进行比较。
此外，还可以进行质控实验来评估实验的可重复性和准确性。
4. 结论通过对Elisa实验结果的分析，我们得出以下结论： 1. 根据标准曲线分析，我们可以确定未知样本中目标分子的浓度。
2. 样本浓度分析结果显示，样本中目标分子的含量为X单位。
3. 实验结果经过验证，具有较高的准确性和可靠性。
elisa实验报告范文
elisa实验报告范文篇一：Elia实验名称：酶联免疫吸附剂测定实验原理：酶联免疫吸附测定是一种免疫测定技术。
测定中，先使抗原吸附在固相载体上，然后加待测的抗体，再用某种酶标记抗体，形成抗原-抗体-酶标记抗体的“双抗体夹心”，此时酶仍保有活性，同时标记抗体亦有免疫活性。
之后再加入酶的底物，在酶的催化下产生反应并产生有色物，颜色深浅与待测物质的量直接相关。
至此，酶的催化放大作用与免疫反应的特异性相完美结合，提高了测定的准确性与灵敏度。
实验材料与试剂：1．聚苯乙烯微量细胞培养板(平板,96孔)。
2．酶联免疫检测仪。
3．辣根过氧化物酶羊抗兔IgG。
4．包被液：0.05mol/L碳酸缓冲液（pH9.6）：Na2CO30.15g,NaHCO30.293g，蒸馏水稀释至100ml。
5．稀释液（PBS-Tween）：NaCl8g,KCl0.2g，KH2PO40.2g,Na2HPO4·12H2O2.9g,Tween-20，0.5ml，蒸馏水加至1000ml。
6．洗涤液：同稀释液。
7．封闭液：0.5%（质量分数）BSA（用PBS配制）。
8．邻苯二胺溶液(底物)：配制：0.1mol/L柠檬酸(2.1g/100ml),取6.1ml，0.2mol/LNa2HPO4·12H2O(7.163g/100ml),取6.4ml,加蒸馏水12.5ml,取邻苯二胺8mg（溶解）；临用前加30%（体积分数）H2O240μl。
9．终止液：2mol/LH2SO4。
实验步骤：１．包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释,一般为1~10μg/孔，每孔加200μl,37℃温育30min。
２．洗涤：倒尽板孔中液体，加200μl洗涤液，反复三次，最后将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。
３．加封闭液200μl，37℃温育30min。
４．洗涤同2。
５．加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释，每孔200μl。
同时作稀释液对照。
37℃温育30min。
elisa检测实验报告
elisa检测实验报告ELISA 检测实验报告一、实验目的本次 ELISA 检测实验的目的是定量检测样本中特定抗原或抗体的浓度，以评估实验对象的生理或病理状态。
二、实验原理ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种基于抗原抗体特异性结合反应的免疫测定技术。
其基本原理是将已知的抗原或抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）表面，然后加入待检样本，样本中的待测抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
接着，加入酶标记的第二抗体（或抗原），形成抗原抗体酶标记抗体复合物。
最后，加入底物，酶催化底物反应生成有色产物，通过测定有色产物的吸光度值，即可定量分析样本中待测抗原或抗体的浓度。
三、实验材料与设备1、试剂包被缓冲液（碳酸盐缓冲液，pH 96）封闭液（含 1% 5% 牛血清白蛋白的 PBS 缓冲液）洗涤液（含 005% Tween-20 的 PBS 缓冲液）样本稀释液（PBS 缓冲液）标准品（已知浓度的抗原或抗体）酶标记的二抗（辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记）底物溶液（如 TMB 或 pNPP）终止液（如 2M 硫酸或 1M 氢氧化钠）2、仪器与设备酶标仪（能够读取 450nm 或 492nm 波长的吸光度值）恒温培养箱移液器（量程分别为20μL、200μL、1000μL）聚苯乙烯微孔板离心机四、实验步骤1、包被将已知浓度的抗原或抗体用包被缓冲液稀释至适当浓度。
向聚苯乙烯微孔板的每孔中加入100μL 稀释后的包被液，4℃过夜或 37℃孵育 2 3 小时。
2、封闭倒掉包被液，用洗涤液洗涤微孔板 3 次，每次浸泡 3 分钟，然后拍干。
每孔加入200μL 封闭液，37℃孵育 1 2 小时。
3、加样倒掉封闭液，用洗涤液洗涤微孔板 3 次，然后拍干。
将待检样本和标准品用样本稀释液进行梯度稀释。
向微孔板的每孔中分别加入100μL 稀释后的样本和标准品，空白对照孔加入100μL 样本稀释液。
37℃孵育 1 2 小时。
ELASA实验报告
ELASA是一种既特异有敏感的免疫测定法。
其原理是抗原或抗体能结合到固相载体的表面并保持免疫活性。
抗原或抗体与酶结合形成的结合物, 仍保持免疫和酶的活性。
结合物与相应的抗体或抗原反应后, 结合在免疫复合物上的酶在遇到相应的底物时可以催化底物水解、氧化或还原。
从而产生有色物质, 颜色反应的深浅与相应的抗体或抗原量成正比。
因此可以借助于颜色反应的深浅来定量抗体或抗原。
酶联免疫吸附试验夹心法是将已知的特异性抗体包被在固相载体上, 加入待测样本, 其中的相应抗原即可与载体上的抗体特异性结合, 洗去未结合的染料, 加入针对该抗原的酶标抗体, 洗去未结合的酶标抗体, 加入酶的相应底物, 由呈色反应测定抗原。
3.1号与3号反应结果呈阳性, 是因为乙肝抗原能与聚乙烯塑料反应板上包被的抗体、辣根过氧化物酶标记的抗乙肝表面抗原特异性结合形成免疫复合物, 酶可催化底物发生相应的反应, 从而产生有色物质, 实验结果呈阳性说明1号待测液中含有乙肝抗原。
2号与4号反应结果呈阴性, 是因为聚乙烯塑料反应板上包被的抗体、辣根过氧化物酶标记的抗乙肝表面抗原只能与乙肝抗原特异性结合为免疫复合物, 如果不含有乙肝抗原则不能形成免疫复合物, 酶也不会催化底物发生相应反应进而产生有色物质, 实验结果呈阴性说明2号待测液中不含乙肝抗原。
elisa技术实验报告
elisa技术实验报告实验目的：本实验旨在通过酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）技术，检测特定抗原或抗体的存在，以评估ELISA技术在生物医学研究和临床诊断中的应用。
实验原理：ELISA技术是一种基于抗原-抗体特异性结合的免疫学检测方法。
通过将抗原或抗体固定在固相载体上，利用酶标记的二抗体与待测物结合，通过酶催化底物产生可检测的信号，从而定量或定性分析目标分子。
实验材料：1. 96孔ELISA板2. 待测样本3. 特异性一抗4. 酶标记的二抗5. 底物溶液6. 终止液7. 洗涤缓冲液8. 标准品或阳性对照9. 酶标仪实验步骤：1. 准备96孔ELISA板，将标准品或阳性对照按照不同浓度稀释后加入板中，同时加入待测样本。
2. 将特异性一抗加入每个孔中，室温下孵育1小时。
3. 用洗涤缓冲液洗涤ELISA板，去除未结合的一抗。
4. 加入酶标记的二抗，室温下孵育1小时。
5. 再次用洗涤缓冲液洗涤板子。
6. 加入底物溶液，根据实验需要设定孵育时间。
7. 加入终止液，终止酶反应。
8. 使用酶标仪在特定波长下测定吸光度（OD值）。
实验结果：实验结果显示，随着标准品浓度的增加，OD值呈线性增加，表明ELISA实验具有较好的灵敏度和特异性。
待测样本的OD值与标准曲线进行比较，可以计算出待测物的浓度。
实验讨论：本次实验中，ELISA技术成功地检测了目标分子的存在，验证了其在生物医学研究中的实用性。
然而，实验中也存在一些可能影响结果的因素，如样本的稀释倍数、孵育时间和洗涤次数等。
在未来的实验中，需要进一步优化实验条件，以提高检测的准确性和重复性。
实验结论：通过本次ELISA实验，我们成功地检测了特定抗原或抗体的存在，证明了ELISA技术在生物医学研究和临床诊断中的有效性。
未来，我们将继续探索和优化ELISA技术，以满足更广泛的应用需求。
参考文献：[1] Engvall E, Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) quantitative assay of immunoglobulin G. Immunochemistry. 1971;8(9):871-874.[2] Voller A, Bartlett A, Bidwell D. Enzyme immunoassays with special reference to ELISA techniques. Journal of General Virology. 1976;33(2):165-169.请注意，本实验报告是一个示例，实际实验应根据具体的实验设计和结果进行编写。
ELISA实验报告
ELISA实验报告实验目的：本实验旨在通过ELISA（酶联免疫吸附试验）技术来检测细胞培养上清液中的蛋白质含量，从而了解该细胞株的蛋白质表达水平，进一步研究相关的细胞分子机制。
实验原理：酶联免疫吸附试验是一种常用的免疫学实验方法，通过特异性抗体与待测物结合来实现对特定蛋白质的检测。
该实验主要分为三个步骤：包被抗原、特异性抗体结合和酶底物显色。
实验材料：1.待测细胞上清液2.包被抗原3.特异性抗体4.酶标记的二抗5.酶底物6.缓冲液7.清洗缓冲液8.吸光度测定仪实验步骤：1.包被抗原的处理：将抗原溶液加入微孔板孔中，使其均匀附着在孔壁上。
然后将孔中的液体弃去，用清洗缓冲液进行孔的清洗。
2.探针的结合：将待测样品加入已经包被抗原的孔中，使其与抗原结合。
然后将孔中的液体弃去，用清洗缓冲液进行孔的清洗。
3.酶标记的二抗结合：将酶标记的二抗加入已经含有特异性抗体的孔中，使其与特异性抗体结合。
然后将孔中的液体弃去，用清洗缓冲液进行孔的清洗。
4.酶底物加入：将酶底物加入到孔中，使其在酶的作用下发生显色反应。
5.吸光度测定：使用吸光度测定仪读取吸光度值，根据吸光度值可以推断待测样品中蛋白质的含量。
实验结果：经过ELISA实验，我们得到了待测细胞上清液中蛋白质的含量。
根据吸光度值和标准曲线的对照，我们可以计算出待测样品中蛋白质的浓度。
实验结论：实验分析：本次实验利用ELISA技术成功检测了待测细胞上清液中的蛋白质含量。
该方法具有高灵敏度、高特异性、操作简单等优点，可以在生物医学、生物工程等领域广泛应用。
但需要注意的是，ELISA实验在操作过程中需要严格控制实验条件，避免交叉污染和误差的产生。
实验改进：为了进一步提高实验的准确性和可靠性，可以进行以下改进：1.增加重复次数，提高数据的可靠性和稳定性；2.使用更加准确的仪器和试剂；3.对实验流程进行优化，减少操作的差异性。
总结：本次实验通过ELISA技术成功检测了待测细胞上清液中的蛋白质含量，得出了蛋白质表达水平较高的结论。
elisa实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除elisa实验报告篇一：eLIsA实验报告experiment:eLIsA(enzyme-linkedImmunosorbentAssay) Date:20XX.10.17objectives(1)LearneLIsAprinciple(2)mastereLIsAtechnology,quantitativelydetermineant ibodyandantigen.experimentalprincipleTheprincipleofeLIsAistomakeantigenorantibodycombine tothesurfaceofsomesolidphasecarrierandmaintainitsim munocompetence,andthenmaketheantibodyorantigentoconnectwithsomeenzymetobecomeenzymelabeledantigenorant ibodyinwhichtheimmunocompetenceofbothantigenorantibodyandenzymeisk ept.Inthedetermination,makethespecimentobetestedand enzymelinkedantigenreactwiththeantigenorantibodyont hesurfaceofsolidphasecarrierfollowingdifferenceproc edures.Throughwashing,antigen-antibodycomplexformed onsolidphasecarrierandothermaterialsareseparated.Fi nally,addingsubstrateintoenzymereaction,thesubstrat ewillbecatalyzedandbecomecoloredproduct.Theamountof producthasdirectrelationwiththeamountofenzymeonthes olidphasecarrier,inotherwords,theamountofthemateria ltobetestedinthespecimen.Quantitativeanalysiscanbec onductedbasedontheshadeofcolorreaction.Thisdetermin ationhasaveryhighsensitivity.eLIsAcanbedividedintomainlyfourtypes:thedirectmetho d,indirectmethod,doubleantibodysandwichmethodandcom petitiveinhibitionmethod.Also,differentkindsofenzym eandsubstratecanbeusedineLIsA.DoubleantibodymethodisakindofeLIsAtodetermineantige ninthespecimen.Inthismethod,antibodyiscoatedonthesu rfaceofsolidphasecarrier.Antigeninthesamplebindswit hantibodyonthesolidphase,whileothermaterialsarewash edaway.Thenaddenzymelinkedantibodytobindtheantigenw hichareboundonthesolidphase.Afterwashing,superfluou santibodyiswashedaway.Thesubstrateisthenaddedtoprod ucecolorandthequantitativetestsareconducted.Inourexperiment,weadopteddoubleantibodysandwichmeth odtodeterminemousetumornecrosisfactoralpha(TnFα)withanti-mouseTnFα.TheenzymeandsubstrateweusedareAvidin-hRpandTmbre spectively.Reagentsandequipment(1)equipments40-wellreactionplatecoatedwithanti-mouseTnF α;liquidtransfergun(1ml,200μl);thermotank(37℃).(2)Reagentswashingliquid(pbsT);sealingfluid;antigen(1000pg/ml);anti-mouseTnFα;Tmb;Avidin-hRp;1mh2so4.methodofoperation(1)emptyoutthesolutionintheplateandcleantheplatewit hwashingliquidforthreetimes.Topupeachholeandflapona bsorbentpapertocleanawaytheremainingliquidineachhol e.Add200μlsealingfluidineachholeandputtheplatein37℃for30mins.(2)washtheplatefor3times.Addreagentsin8holesaccordi ngtothetable:(numberrefertothe(3)washtheplatefor3times,add100μlantibodyineachhole,puttheplatein37℃for30mins.(4)washtheplatefor3times,add100μlenzymeineachhole,puttheplatein37℃for20mins.(5)washtheplatefor5times,add100μlsubstrateineachhole,puttheplatein37℃for5mins.observethecolorationandtakeapicture.(6)Add50μl1mh2so4ineachhole,observethecolorchangeandtakeapic ture.notes:(1)Allreagentsshallbekeptindarkplaceat2-8℃.(2)Liquidfeedingshallbelimitedatthebottomofholesins teadofwall,withoutspillage.(3)whencleaningtheplatemanually,donotspillouttheliq uidintheholesincasethattheadjacentholespolluteeachothertocausefalsepositive.(4)Theresultsareonlyvalidwithin30minsafterthetermin ationoftest.(5)experimentwastesshallbetreatedasinfectioussample s.Discussion(1)Fromtheresult,wecanseethegradientshadeofcolorati on,whichmeanstheshadeofcolorationisinproportiontoth econcentrateofantigen.Theexactshadeofcolorationcanb edetectedbyspectrophotometer,andbecomparedwiththest andardcurvetogettheconcentratevalue.(2)everytimewhencleaningtheplate,thewashingliquidmu stbecompletelyremoved.Questions(1)Analyzetheeffectofimpureenzymelabeledantibodytot hetestingresultofantigen.(DoubleAntibodysandwichmet hod)Iftheimpuritycannotbebondwithantigen,ithasnoaffectt otheresult;iftheimpuritycanbebondwithantigen,itwill causetheresultlowerthantherealconcentrate.(2)comparethemostsuitabletestingobjectsofIFAandeLIsA.IFAisusedinvivotolocateacertainantigen;whileeLIsAis usedinvitroconditiontodeterminethepresenceandconcen trateofacertainantigenorantibody.篇二：eLIsA英文版实验报告Test1.productionofantibody[principle]1.Inthespecialhumoralimmuneresponse,antigencanstimu lateimmunesystemtoproducespecificantibodies.eachant igenmoleculehasseveraldifferentantigenicdeterminant s,soitcanberecognizedbydifferentbcellsandthentheseb cellswillproducedifferentspecificantibodiesthatcanb indwithepitopesspecifically.Theimmunityserumproduce dbyusingantigentoimmuneanimalisamixtureofmanydiffer entantibodies,calledpolyclonalantibody.Themostcommo nmethodtoproducepolyclonalantibodyisusingpureantige ntoimmuneanimal.2.Thefactorsinfluencingproducingofantibodiesisrelat edtoantigenpurity,animal,amountofantigen,waysofinje ction,timesofimmunity,etc.primaryimmuneanimal,theantigenenteranimalforthefirs ttime,thebodywillproduceasmallamountantibodiesafter alatency,butwhensecondinjectionantigentotheanimal,t herewillbeafastresponsetotheantigenandalotantibodie swillbeproduced.sointhistest,useantigentoimmunemice 3times,thenwecandetectantibodiesintheserum.。
elisa实验报告
elisa实验报告随着科技的发展，实验方法也在不断更新和改进。
其中，酶联免疫吸附实验（ELISA）被广泛应用于生物学及临床医学研究中。
作为一种高效的检测方法，ELISA能够检测血清、尿液、唾液、细胞提取物等生物液、物质中的特定蛋白质，被广泛应用于病毒、癌细胞、蛋白质等方面的实验研究。
在本次实验中，我们通过ELISA方法检测了病毒包膜蛋白VP1在样品中的含量。
以下是实验流程及结果。
实验步骤1. 样品制备首先，需要使用人工合成的病毒包膜蛋白VP1来准备标准物质。
将标准物质分别加入含有5% BSA的PBS缓冲液中，配置不同浓度的标准曲线样品，分别为100 ng/ml、50 ng/ml、10 ng/ml、5ng/ml和0 ng/ml。
2. 包被ELISA板将96孔ELISA板添加200 uL/well的coating buffer，放置于4℃下孵育过夜。
第二天将ELISA板洗涤3次，每次250 uL/well的PBS缓冲液，并用吸头吸干。
3. 比色反应将每个标准曲线样品和样品加入各对应孔中，分别孵育1h。
然后将ELISA板洗涤3次，每次250 uL/well的PBS缓冲液，并用吸头吸干。
添加200 uL/well的酶化抗体，并于室温下孵育1h。
接下来，将ELISA板洗涤3次，每次250 uL/well的PBS缓冲液，并用吸头吸干。
加入200 uL/well的酶标记物，并于室温下孵育1h。
将ELISA板洗涤3次，每次250 uL/well的PBS缓冲液，并用吸头吸干。
加入200 uL/well的底物，于室温下孵育30min。
随后，加入50 uL/well的终止剂，用多功能酶标仪在450 nm波长下测量各标准曲线样品的OD值。
数据处理在对比各标准曲线样品的OD值与曲线的线性函数后，将检测到的样品OD值带入曲线线性函数中，计算出其含量。
实验结果本次实验结果表明，我们成功使用ELISA方法检测出了样品中病毒包膜蛋白VP1的含量。
ELISA实验报告
ELISA实验报告一、实验目的ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种广泛应用于生物医学研究和临床诊断的免疫学技术。
本次实验的目的是通过 ELISA 方法检测样本中特定抗原或抗体的含量，熟悉 ELISA 的实验原理、操作步骤，并对实验结果进行分析和解读。
二、实验原理ELISA 的基本原理是将已知的抗原或抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微量反应板）表面，然后加入待检样本，使其中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
洗去未结合的物质后，再加入酶标记的第二抗体或抗原，形成抗原抗体酶标抗体复合物。
最后加入底物，通过酶催化底物显色，根据颜色的深浅来定量测定样本中抗原或抗体的含量。
三、实验材料1、试剂包被缓冲液（pH 96 的碳酸盐缓冲液）洗涤缓冲液（含 005% Tween-20 的 PBS 缓冲液）封闭液（含 1% BSA 的 PBS 缓冲液）样本稀释液（PBS 缓冲液）酶标抗体工作液底物溶液（TMB 溶液）终止液（2 M 硫酸溶液）2、仪器酶标仪移液器恒温箱微量反应板3、样本待检血清样本四、实验步骤1、包被用包被缓冲液将抗原稀释至适当浓度，每孔加入100 μL，4℃过夜包被。
2、洗涤次日，弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤 3 次，每次 3 分钟，拍干。
3、封闭每孔加入200 μL 封闭液，37℃孵育 1 小时，洗涤 3 次。
4、加样将待检血清样本用样本稀释液进行梯度稀释，每孔加入100 μL，同时设置阴性对照和阳性对照，37℃孵育 1 小时，洗涤 3 次。
5、加酶标抗体每孔加入100 μL 酶标抗体工作液，37℃孵育 1 小时，洗涤 5 次。
6、显色每孔加入100 μL 底物溶液，37℃避光显色 15 分钟。
7、终止每孔加入50 μL 终止液，终止反应。
8、测定使用酶标仪在 450 nm 波长处测定各孔的吸光度值（OD 值）。
五、实验结果1、原始数据记录各孔的 OD 值，如下表所示：｜样本|OD 值|｜｜｜｜阴性对照|0085|｜阳性对照|1258|｜待检样本 1|0325|｜待检样本 2|0158|｜待检样本 3|0685|2、结果判断计算阴性对照和阳性对照的平均 OD 值，分别记为 OD 阴平和 OD阳平。
ELISA实验报告(两篇)
引言概述:ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种常用于测定抗体或抗原的定量和定性的快速、敏感和特异性的实验技术。
本文将继续讨论ELISA实验的一些重要内容，包括实验操作步骤、控制样品的使用、结果分析和解释。
通过深入了解这些实验细节，我们可以更好地理解ELISA的原理和应用。
正文内容:一. 实验操作步骤1. 准备样品和标准曲线- 收集所需的样品，可以是血清、尿液或细胞上清等。
- 确定需要测定的抗体或抗原，并准备相应的标准曲线。
2. 处理样品- 样品处理包括离心、稀释或加热等步骤，以去除可能干扰测定的物质。
3. 准备实验板- 将酶标板预先涂覆上抗体或抗原，然后用非特异性蛋白质阻断剂进行阻断。
4. 加入样品和标准曲线- 将处理后的样品和标准曲线加入预先涂覆抗体或抗原的孔中。
5. 孔洗涤和加入检测抗体- 通过洗涤孔来去除非特异性结合物质。
- 加入检测抗体，它可以是与标准曲线中的抗体相同的抗体或与待测物质结合的抗体。
6. 孔洗涤和加入底物- 通过洗涤孔来去除未结合的检测抗体。
- 加入底物，它会与酶结合并产生可测定的信号。
7. 信号检测和结果记录- 使用酶标仪测量底物的反应产物生成的光信号。
- 将光信号与标准曲线进行比较，得出待测样品中目标物质的含量。
二. 控制样品的使用1. 阳性对照样品- 阳性对照样品是已知含有目标抗体或抗原的样品，用于验证实验的准确性和可靠性。
2. 阴性对照样品- 阴性对照样品是未含目标抗体或抗原的样品，用于确定实验的特异性。
3. 反应性对照样品- 反应性对照样品是含有不同浓度目标抗体或抗原的样品，用于绘制标准曲线并进行定量测定。
4. 标准曲线的制备- 使用已知浓度的标准样品制备标准曲线，该曲线用于将光信号转换为目标物质的定量结果。
5. 控制实验条件- 控制实验条件，包括温度、时间和洗涤次数等，以确保实验的可重复性和可比性。
三. 结果分析1. 原始数据处理- 使用酶标仪测量的吸光度值为原始数据，在计算吸光度值之前，需要进行空白校正和标准曲线外推。
elisa实验报告结果分析
elisa实验报告结果分析Elisa实验报告结果分析Elisa（酶联免疫吸附试验）是一种常用的实验技术，用于检测生物样本中的特定分子，如蛋白质、抗体、细胞因子等。
在这篇文章中，我们将对一份Elisa实验报告的结果进行分析和解读，以帮助读者更好地理解实验结果。
首先，让我们来看一下实验报告中的基本信息。
实验报告中应包含实验目的、方法、样本信息、实验结果以及数据分析等内容。
在本次实验中，我们的目的是检测血清中特定抗体的浓度。
实验使用了一种特定的抗体试剂盒，按照厂家提供的方法进行操作。
样本来源于一组健康人群，共有100个样本进行了检测。
接下来，我们来看一下实验结果。
实验报告中通常会给出每个样本的测量值，以及相应的阳性对照和阴性对照的测量值。
这些测量值通常以光密度（OD）的形式给出。
在本次实验中，阳性对照的光密度为0.8，阴性对照的光密度为0.1。
根据实验报告，我们可以看到，在100个样本中，有80个样本的光密度超过了阳性对照的光密度，而余下的20个样本的光密度低于阴性对照的光密度。
接下来，我们需要对实验结果进行数据分析。
首先，我们可以计算阳性率和阴性率。
阳性率是阳性样本数除以总样本数的比例，阴性率是阴性样本数除以总样本数的比例。
在本次实验中，阳性率为80%，阴性率为20%。
这意味着在这组健康人群中，大约80%的人体内存在着这种特定抗体。
另外，我们还可以计算阳性样本的平均光密度和标准差。
平均光密度是所有阳性样本的光密度之和除以阳性样本数，标准差是用来衡量数据分散程度的指标。
通过计算，我们可以得到阳性样本的平均光密度为1.2，标准差为0.3。
这表明阳性样本中的抗体浓度存在一定的变异性，标准差越大，说明样本间的差异越大。
此外，我们还可以进行一些统计学分析，如t检验或方差分析，来比较不同组别之间的差异。
比如，我们可以将样本分为不同的年龄组或性别组，然后比较它们之间的抗体浓度是否存在显著差异。
通过这些统计学方法，我们可以更全面地了解抗体浓度与各种因素之间的关系。
elisa实验报告
elisa实验报告Elisa实验报告。
实验目的，通过Elisa实验，检测血清中特定抗体的含量，从而了解免疫反应的情况。
实验原理，Elisa（酶联免疫吸附测定）是一种通过酶标记抗体与待测物相互作用，再用底物显色的方法进行检测的免疫学实验。
在实验中，待测物会与特定抗体结合，形成抗原-抗体复合物，然后通过酶标记的二抗结合复合物，最终通过底物显色来检测抗体的含量。
实验步骤：1. 吸附，将特定抗体吸附在微孔板上；2. 阻断，用蛋白质溶液阻断未结合的吸附位点；3. 反应，加入待测样品，待样品中的抗原与吸附的抗体结合；4. 洗涤，去除未结合的物质；5. 二抗结合，加入酶标记的二抗，与抗原-抗体复合物结合；6. 洗涤，去除未结合的二抗；7. 显色，加入底物，观察颜色变化；8. 停止反应，加入停止液，停止底物的反应。
实验结果分析，根据实验结果的光密度值，可以计算出样品中特定抗体的含量。
光密度值越高，抗体含量越高。
实验应用，Elisa实验可以应用于临床医学、生物学研究等领域，用于检测病毒、细菌感染，肿瘤标志物等。
实验注意事项：1. 实验操作要严格按照操作规程进行，避免交叉污染；2. 应使用高质量的试剂和耗材，避免实验结果的误差；3. 实验过程中要注意洗涤的次数和充分洗涤，以避免干扰物的影响；4. 应根据实验目的选择合适的Elisa试剂盒和标准曲线，以确保实验结果的准确性。
结论，Elisa实验是一种准确、灵敏的免疫学实验方法，可以用于检测血清中特定抗体的含量，对于疾病诊断和生物学研究具有重要意义。
通过本次实验，我们成功检测出样品中特定抗体的含量，为进一步的研究和临床应用提供了可靠的数据支持。
希望本实验结果能对相关领域的研究和实践提供有益的参考。
elisa实验报告
elisa实验报告Elisa实验报告。
实验目的，通过elisa实验，检测血清中特定蛋白的含量，为疾病的诊断和治疗提供依据。
实验原理，elisa是一种免疫学检测方法，通过抗原与抗体的特异性结合来检测特定蛋白的含量。
在实验中，首先将待检测的标本加入到包被有特定抗原的微孔板中，然后加入特异性的酶标记的抗体，再加入底物，最后通过酶反应产生的色素来测定蛋白的含量。
实验步骤：1. 准备工作，将所需试剂和标本取出，并标记清楚。
2. 包被抗原，将包被抗原加入到微孔板中，并在4℃下孵育一夜。
3. 洗板，将洗板缓冲液加入到微孔板中，用洗板机洗涤，重复3次。
4. 加样本，将待检测的标本加入到微孔板中，孵育一定时间后洗涤。
5. 加抗体，加入特异性的酶标记的抗体，孵育一定时间后洗涤。
6. 加底物，加入底物，孵育一定时间后停止反应。
7. 测定，用酶标仪测定吸光度，计算出蛋白的含量。
实验结果，根据实验数据，我们成功检测出待测蛋白的含量，得出了相应的浓度曲线和标准曲线。
通过比对标准曲线，我们可以准确地计算出待测样本中蛋白的含量。
实验分析，elisa实验是一种高灵敏度、高特异性的检测方法，能够快速、准确地检测出待测蛋白的含量。
通过该实验，我们可以为临床诊断提供重要的参考依据，也为疾病的治疗和预后评估提供了重要的实验数据。
实验总结，通过本次elisa实验，我们深入了解了该实验的原理和操作步骤，掌握了一种重要的蛋白检测方法。
在未来的实验中，我们将进一步应用elisa技术，开展更多的生物学研究和临床诊断工作。
结语，elisa实验作为一种重要的生物学实验方法，对于科研工作者和临床医生来说具有重要的意义。
通过不断地学习和实践，我们将能够更好地应用elisa技术，为人类健康事业做出更大的贡献。
Elisa实验报告
Elisa实验报告一、引言二、材料与方法1.样品制备：收集目标蛋白样品，将其加入适当的缓冲液中，并离心去除杂质。
2.准备试剂和工具：包括抗原涂板、试剂盒、显色底物、酶标仪等。
3. Elisa过程：a.将样品加入抗原涂板中，与涂板表面的抗体结合。
b.洗涤抗原涂板，除去未结合的物质。
c.加入检测抗体，与样品中的抗原结合。
d.再次洗涤抗原涂板，除去未结合的物质。
e.加入显色底物，使反应物质变色。
f.结束反应后，使用酶标仪测量样品的吸光度。
三、结果与讨论1.实验结果：根据测量的吸光度值，计算出目标蛋白质的浓度。
2.数据处理：使用相关软件或公式对实验结果进行数据处理和统计分析。
四、结论通过Elisa方法，成功检测并定量了目标蛋白质的含量。
实验结果表明该方法可用于快速、准确地检测目标蛋白质，具有较高的灵敏度和特异性。
然而，实验中可能存在的误差需要进一步探究和改进，以提高实验结果的准确性和可靠性。
五、实验改进建议1.优化样品准备过程，确保样品中的目标蛋白质不受污染或降解。
2.优化抗原涂板的选择和处理，以提高抗原与抗体的结合效率和稳定性。
3.准确定量样品的吸光度值，增加测量几组数据以降低实验误差。
4.定期校准酶标仪，确保测量结果的准确性和可重复性。
六、总结Elisa实验是一种常用于检测目标蛋白质含量的方法，通过酶作为报告信号，实现了定量性分析。
本实验通过Elisa方法成功检测到目标蛋白质，并完成了浓度的定量分析。
然而，实验中还存在一些潜在误差，需要进一步改进和优化实验方法。
我们相信通过不断的实验改进和优化，Elisa方法将在临床和科研应用中发挥更大的作用。
elisa实验报告结果分析
Elisa实验报告结果分析引言Elisa（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的生物化学分析方法，用于检测和测定生物样品中特定蛋白质的浓度。
在Elisa实验中，我们通过对样品中特定蛋白质与特异性抗体的结合反应进行定量分析。
本报告旨在对Elisa实验结果进行分析和解释。
实验设计在本次实验中，我们选取了X种样品进行Elisa实验，以检测其中特定蛋白质的浓度。
我们使用了Y抗体来与该蛋白质结合，并使用特定的底物进行检测。
实验过程中，我们设置了标准曲线和负对照以确保实验结果的准确性。
实验结果实验结果如下表所示：样品编号吸光度值样品1 0.35样品2 0.42样品3 0.18样品4 0.30样品5 0.50根据实验结果，我们可以看出各个样品的吸光度值不同，这代表了样品中特定蛋白质的浓度差异。
结果分析通过观察上述表格中的吸光度值，我们可以得出以下结论：1.样品2的吸光度值最高，说明其含有的特定蛋白质浓度最高。
2.样品3的吸光度值最低，说明其含有的特定蛋白质浓度最低。
3.样品1、4和5的吸光度值介于样品2和3之间，说明它们的特定蛋白质浓度也介于最高和最低值之间。
结果验证为了验证实验结果的准确性，我们还进行了一些附加实验。
我们重复了对样品2和样品3的Elisa实验，并得到了如下结果：样品编号吸光度值（重复实验）样品2 0.40样品3 0.20通过比较重复实验的吸光度值与之前的结果，我们可以看出它们非常接近，这进一步证实了实验结果的准确性。
结果解释实验结果表明，样品中特定蛋白质的浓度存在显著差异。
吸光度值较高的样品含有较高浓度的特定蛋白质，而吸光度值较低的样品则含有较低浓度的特定蛋白质。
这些结果的解释可能与样品来源、生理状态和处理方法有关。
进一步的研究可以探究这些因素与特定蛋白质浓度之间的关系，以进一步了解其生物学意义。
结论通过Elisa实验，我们成功地测定了不同样品中特定蛋白质的浓度差异。
elisa实验报告
elisa实验报告Elisa实验报告引言Elisa（酶联免疫吸附测定）是一种常用的实验方法，用于检测和测量样本中特定蛋白质的存在和浓度。
本实验旨在通过Elisa方法检测血清中的特定抗体，以了解免疫系统的功能和疾病的发展。
实验步骤1. 样本准备：收集一定数量的血清样本，并将其离心以分离血浆。
血浆中含有丰富的抗体，用于检测特定蛋白质的存在。
2. 酶标板涂覆：将特定抗原溶液均匀涂覆在酶标板的孔中，并在低温下孵育一段时间，使抗原充分吸附在酶标板表面。
3. 样本加入：将待测血清样本加入到酶标板的孔中，使样本中的抗体与酶标板上的抗原结合。
4. 洗涤：使用缓冲液洗涤酶标板，去除未结合的物质。
5. 酶标记抗体加入：加入与待测抗体特异性结合的酶标记抗体，使其与待测抗体结合。
6. 洗涤：再次使用缓冲液洗涤酶标板，去除未结合的酶标记抗体。
7. 底物加入：加入底物溶液，使其与酶结合，产生可测量的光学信号。
8. 反应停止：加入反应停止剂，停止底物的反应，并阻止进一步的颜色发展。
9. 测量：使用酶标仪测量酶标板中的吸光度，得到与抗体浓度相关的信号。
结果与讨论通过Elisa实验，我们可以得到血清样本中特定抗体的存在与否以及浓度的信息。
根据实验结果，我们可以进一步了解免疫系统的功能和疾病的发展。
在本实验中，我们以某种疾病的抗体为例，对血清样本进行Elisa检测。
通过与正常血清样本的对比，我们可以判断该疾病是否存在，并根据抗体浓度的高低评估疾病的严重程度。
实验中，样本准备是非常关键的一步。
血清样本的收集和离心过程需要严格控制，以确保样本的纯净度和稳定性。
如果样本受到污染或不完全离心，可能会导致实验结果的误差。
酶标板涂覆和洗涤步骤也需要仔细操作。
涂覆抗原的过程需要均匀且适量，以确保抗原充分吸附在酶标板表面。
洗涤步骤的目的是去除未结合的物质，避免干扰实验结果。
在酶标记抗体加入的步骤中，选择特异性较好的酶标记抗体非常重要。
如果酶标记抗体与待测抗体结合不紧密或选择不当，可能会导致实验结果的误差。
elisa检测hbsab实验报告
elisa检测hbsab实验报告ELISA 检测 HBsAb 实验报告一、实验目的本实验旨在通过酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测血清中乙型肝炎表面抗体（HBsAb）的水平，以评估个体对乙型肝炎病毒（HBV）的免疫状态。
二、实验原理ELISA 是一种基于抗原抗体特异性结合反应的免疫测定技术。
在本实验中，将纯化的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包被在微孔板上，形成固相抗原。
待检血清中的 HBsAb 与固相抗原结合后，加入酶标记的抗人免疫球蛋白（通常为辣根过氧化物酶标记的抗人 IgG），形成抗原抗体酶标抗体复合物。
通过加入底物显色，根据显色的强度来定量测定血清中 HBsAb 的含量。
三、实验材料与设备1、试剂HBsAg 包被微孔板样品稀释液酶标记的抗人 IgG 试剂显色剂 A、B 液终止液阳性对照血清阴性对照血清洗涤液2、仪器设备酶标仪移液器恒温箱离心机四、实验步骤1、样本采集与处理采集受检者空腹静脉血 3-5ml，室温静置 30 分钟后，以 3000rpm 离心 10 分钟，分离血清。
将血清样本用样品稀释液按一定比例稀释。
2、加样分别在微孔板的相应孔中加入稀释后的血清样本、阳性对照血清、阴性对照血清，每孔100μl。
3、温育将微孔板放入 37℃恒温箱中孵育 30 分钟。
4、洗涤取出微孔板，甩掉孔内液体，用洗涤液洗涤5 次，每次浸泡30 秒，然后甩干。
5、加酶标抗体每孔加入100μl 酶标记的抗人 IgG 试剂。
6、温育再次将微孔板放入 37℃恒温箱中孵育 30 分钟。
7、洗涤重复洗涤步骤。
8、显色每孔加入显色剂 A、B 液各50μl，轻轻振荡混匀，室温避光孵育15 分钟。
9、终止反应每孔加入50μl 终止液，终止显色反应。
10、测定吸光度使用酶标仪在 450nm 波长处测定各孔的吸光度（OD 值）。
五、结果判断1、阳性判断值（cutoff 值）的确定计算阴性对照孔的平均 OD 值（NC）和阳性对照孔的平均 OD 值（PC）。
免疫酶联免疫吸附实验报告
免疫酶联免疫吸附实验报告一、引言免疫酶联免疫吸附实验（ELISA），是一种常用于检测抗原或抗体的方法。
该实验利用酶的特异性反应来定量或定性测定目标物在样品中的存在量。
本实验旨在通过免疫酶联免疫吸附实验检测目标抗原的存在。
二、实验材料和方法 1. 实验材料 - ELISA板：含有特异性抗体的孔板 - 样品：待测的抗原溶液 - 阻断缓冲液：用于防止非特异性结合 - 洗涤缓冲液：用于洗涤ELISA板 - 特异性抗原抗体：用于与目标抗原结合 - 辣根过氧化物酶标记的二抗：与特异性抗原抗体结合 - 底物溶液：用于酶的反应产生可测量的产物2.实验方法•准备ELISA板：加入特异性抗体溶液并孵育，以使其在孔板上固定•添加阻断缓冲液：加入阻断缓冲液，以防止非特异性结合•加入样品：将待测样品加入孔板，并孵育使其与特异性抗体结合•洗涤：用洗涤缓冲液洗涤孔板，以去除未结合的物质•添加辣根过氧化物酶标记的二抗：加入与特异性抗原抗体结合的辣根过氧化物酶标记的二抗，使其与目标抗原结合•洗涤：用洗涤缓冲液洗涤孔板，以去除未结合的物质•加入底物溶液：加入底物溶液，并孵育使酶反应发生•反应停止：加入反应停止液，以停止酶反应•测量吸光度：使用ELISA阅读器测量吸光度，得到结果三、实验结果与讨论本实验使用ELISA方法成功检测到了目标抗原的存在。
在测量吸光度的过程中，我们发现样品中目标抗原与特异性抗体发生特异性结合，而其他非特异性的物质则被洗涤缓冲液去除。
根据实验结果，我们可以通过吸光度的数值判断样品中目标抗原的含量或存在与否。
通常情况下，吸光度数值越高，说明目标抗原的含量越高。
需要注意的是，在进行ELISA实验时，实验操作的准确性和仪器的稳定性对结果的准确性有重要影响。
因此，在实验过程中，我们应严格控制实验条件，并对仪器进行校准。
四、实验结论免疫酶联免疫吸附实验是一种有效的检测目标抗原的方法。
通过特异性抗体与待测样品中的目标抗原结合，再通过酶的特异性反应，我们可以通过测量吸光度来判断目标抗原的存在与否。
抗体的检测实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在学习抗体检测的基本原理和方法，掌握酶联免疫吸附试验（ELISA）技术，并通过实验验证抗体在特定抗原存在下的反应情况。
二、实验原理抗体检测是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）技术进行定量或定性分析。
在实验中，将抗原固定在固相载体上，加入待测样本，若样本中含有特异性抗体，则与固相抗原结合形成抗原抗体复合物。
随后加入酶标记的抗体，该抗体与抗原抗体复合物中的抗体结合，形成酶标记抗体-抗原抗体复合物。
最后加入底物，在酶的催化下产生颜色变化，根据颜色深浅可判断待测样本中抗体的含量。
三、实验材料1. 试剂：抗原、酶标记抗体、底物、洗涤液、终止液、缓冲液等。
2. 仪器：酶标仪、移液器、微量离心机、冰箱、培养箱等。
3. 样本：待测血清。
四、实验步骤1. 制备抗原包被板：将抗原稀释后，加入96孔板，每孔100μl，4℃过夜。
2. 洗板：用洗涤液清洗孔板，去除未结合的抗原。
3. 加待测血清：每孔加入100μl待测血清，37℃温育1小时。
4. 洗板：用洗涤液清洗孔板，去除未结合的血清。
5. 加酶标记抗体：每孔加入100μl酶标记抗体，37℃温育1小时。
6. 洗板：用洗涤液清洗孔板，去除未结合的酶标记抗体。
7. 加底物：每孔加入100μl底物，37℃温育15分钟。
8. 酶标仪检测：在酶标仪上检测各孔的吸光度（OD值）。
9. 绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。
10. 计算待测样本中抗体含量：根据待测样本的OD值，在标准曲线上查找对应的抗体浓度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样本抗体含量计算：根据待测样本的OD值，在标准曲线上查找对应的抗体浓度。
六、实验讨论1. 实验过程中，洗板操作要轻柔，避免气泡产生，以免影响实验结果。
2. 在加待测血清和酶标记抗体时，应避免交叉污染。
免疫学实验报告
免疫学实验报告免疫学是研究免疫系统功能和疾病的科学。
在医学、生物学等领域都具有重要的应用价值。
免疫学实验是免疫学教学和研究的基础。
在这篇实验报告中，将介绍几种常见的免疫学实验。
ELISA实验ELISA（酶联免疫吸附实验）是一种检测抗原或抗体的方法。
它利用酶偶联物将抗原或抗体与微孔板上的特定抗体相结合，然后通过荧光或颜色反应检测物质的数量。
这种实验被广泛应用于诊断和治疗疾病，例如艾滋病、乙肝和结核病等。
实验步骤：1. 预处理和制备样品2. 用微孔板包被抗体，洗涤板子3. 加入样品4. 加入检测抗体5. 再加入酶偶联物6. 加入底物（颜色或荧光染料）7. 洗涤平板8. 读取光密度（或荧光）测量检测物质的数量流式细胞术流式细胞术是一种检测和分离单个细胞的技术。
它通过标记细胞表面的抗原，然后使用激光逐个检测单个标记的细胞。
这个技术可以分离出一种特定的细胞类型、计量特定的细胞数量、定量分析生物标志物和研究细胞亚群之间的关系等。
实验步骤：1. 收集细胞样本并处理成单个单元。
2. 加入荧光素标记，使单元表面上的特定抗原能够被识别。
3. 加入流动介质，并通过细胞传递。
4. 流式细胞术仪器通过激光逐个检测每个单元，并用荧光探测器测量荧光信号。
5. 得到具有荧光标记的单元数量和荧光强度，可以用于特定标记的细胞分析和定量分析。
西伯利亚血清学实验西伯利亚血清学实验是一种检测抗中毒素效价的技术。
它根据抗中毒素与毒素之间的反应来测量中毒素的浓度。
这种实验被广泛应用于检测狂犬病、肉毒病、天花病等。
实验步骤：1. 洗涤载玻片，准备供试血清和供比较血清。
2. 将血清稀释，将其缩小。
3. 将血清和毒素混合，观察混合物效果。
4. 根据混合物效果，测量抗体对毒素的浓度。
总结免疫学实验的应用远远不止于此，但以上三种实验是比较典型的。
ELISA能检测到各种抗原和抗体，是临床检验和学术研究的常用方法之一。
流式细胞术因其高精度、快速和敏感性而广泛应用于细胞学研究和诊断学。
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Experiment: ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)Date: 2016.10.17Objectives(1)Learn ELISA principle(2)Master ELISA technology, quantitatively determine antibody and antigen.Experimental principleThe principle of ELISA is to make antigen or antibody combine to the surface of some solid phase carrier and maintain its immunocompetence, and then make the antibody or antigen to connect with some enzyme to become enzyme labeled antigen or antibody in which the immunocompetence of both antigen or antibody and enzyme is kept. In the determination, make the specimen to be tested and enzyme linked antigen react with the antigen or antibody on the surface of solid phase carrier following difference procedures. Through washing, antigen-antibody complex formed on solid phase carrier and other materials are separated. Finally, adding substrate into enzyme reaction, the substrate will be catalyzed and become colored product. The amount of product has direct relation with the amount of enzyme on the solid phase carrier, in other words, the amount of the material to be tested in the specimen. Quantitative analysis can be conducted based on the shade of color reaction. This determination has a very high sensitivity.ELISA can be divided into mainly four types: the direct method, indirect method, double antibody sandwich method and competitive inhibition method. Also, different kinds of enzyme and substrate can be used in ELISA.Double antibody method is a kind of ELISA to determine antigen in the specimen. In this method, antibody is coated on the surface of solid phase carrier. Antigen in the sample binds with antibody on the solid phase, while other materials are washed away. Then add enzyme linked antibody to bind the antigen which are bound on the solid phase. After washing, superfluous antibody is washed away. The substrate is then added to produce color and the quantitative tests are conducted.In our experiment, we adopted double antibody sandwich method to determine mouse tumor necr osis factor alpha (TNF α) with anti-mouse TNF α. The enzyme and substrate we used are Avidin-HRP and TMB respectively.Reagents and equipment(1)Equipments40-well reaction plate coated with anti-mouse TNF α; liquid transfer gun (1ml, 200μl); thermotank (37℃).(2) ReagentsWashing liquid (PBST); sealing fluid; antigen (1000pg/ml); anti-mouse TNF α; TMB;Avidin-HRP; 1M H2SO4.Method of operation(1) Empty out the solution in the plate and clean the plate with washing liquid for three times. Top up each hole and flap on absorbent paper to clean away the remaining liquid in each hole. Add 200μl sealing fluid in each hole and put the plate in 37℃ for 30mins.(2) Wash the plate for 3 times. Add reagents in 8 holes according to the table: (number refer to the co ncentration of antigen added, each hole is added 100μl liquid)1 2 3 4 5 6 7 831.25(this hole is antibody-free) Washingliquid31.25 62.5 125 250 500 1000Put the plate in 37℃ for 45mins.(3) Wash the plate for 3 times, add 100μl antibody in each hole, put the plate in 37℃ for 30mins.(4) Wash the plate for 3 times, add 100μl enzyme in each hole, put the plate in 37℃ for 20mins.(5) Wash the plate for 5 times, add 100μl substrate in each hole, put the plate in 37℃ for 5mins. Observe the coloration and take a picture.(6) Add 50μl 1M H2SO4 in each hole, observe the color change and take a picture.Notes:(1)All reagents shall be kept in dark place at 2-8℃.(2)Liquid feeding shall be limited at the bottom of holes instead of wall, without spillage.(3)When cleaning the plate manually, do not spill out the liquid in the holes in case that theadjacent holes pollute each other to cause false positive.(4)The results are only valid within 30mins after the termination of test.(5)Experiment wastes shall be treated as infectious samples.Discussion(1)From the result, we can see the gradient shade of coloration, which means the shade of coloration is in proportion to the concentrate of antigen. The exact shade of coloration can be detected by spectrophotometer, and be compared with the standard curve to get the concentrate value.(2)Every time when cleaning the plate, the washing liquid must be completely removed.Questions(1)Analyze the effect of impure enzyme labeled antibody to the testing result of antigen. (Double Antibody Sandwich Method)If the impurity can not be bond with antigen, it has no affect to the result; if the impurity can be bond with antigen, it will cause the result lower than the real concentrate.(2)Compare the most suitable testing objects of IFA and ELISA.IFA is used in vivo to locate a certain antigen; while ELISA is used in vitro condition to determine the presence and concentrate of a certain antigen or antibody.。