醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究_夏循礼
杜仲叶中绿原酸提取工艺研究
杜仲叶中绿原酸提取工艺研究
本文以杜仲叶为原料，选取水提取和乙醇提取两种方法进行绿原酸提取工艺的研究，以期为杜仲叶中绿原酸的提取和应用提供一定的参考。
具体内容如下：
一、实验材料和设备
1.实验材料：杜仲叶、乙醇（95%）、绿原酸标准品（purity≥98%）、对羟基苯乙酮（Folin-Ciocalteu试剂）、硫酸、氢氧化钠。
2. 实验设备：电子天平、研钵、热水浴、离心机、紫外分光光度计、pH计等。
二、水提法提取绿原酸
1. 材料准备：将杜仲叶晒干粉碎成细粉末，称取10 g，加入300 ml滚水中，进行浸提，提取时间为2 h。
2. 绿原酸含量测定：将提取液离心去沉渣，取上清液用Folin-Ciocalteu试剂和NaOH溶液进行反应，再使用紫外分光光度计测定蓝色产物的吸收值。
最后，用绿原酸标准品作为对照，计算出提取液中绿原酸的含量。
四、结果与分析
1. 水提法提取绿原酸的含量为0.183 mg/g。
3. 乙醇提法的提取效果明显优于水提法，其可能的原因是乙醇能够更好的溶解绿原酸，加快其溶出速度。
此外，在提取过程中，温度和提取比也会对绿原酸的提取效果产生一定的影响。
五、结论
本文以杜仲叶为原料，比较了水提法和乙醇提法两种方法对其中绿原酸的提取效果。
结果表明，乙醇提法的提取效果要优于水提法，其提取效率逐渐升高的原因可能是乙醇的溶解力更强，加快了其所需的时间。
此外，实验结果还提示，在提取过程中的温度和比例也将对提取效果产生一定的影响，这需要具体情况具体分析。
总之，本研究为杜仲叶中绿原酸的提取和应用提供了一定的参考价值，为相关领域的研究提供了新的思路和方向。
茵陈蒿汤水提物和醇提物的成分及药效比较研究
茵陈蒿汤水提物和醇提物的成分及药效比较研究一、内容综述茵陈蒿汤是中医临床常用的方剂之一，具有清热解毒、利湿退黄的功效。
近年来随着对茵陈蒿汤研究的深入，发现其水提物和醇提物在药效方面存在一定的差异。
本文将对茵陈蒿汤水提物和醇提物的成分及药效进行比较研究，以期为临床应用提供参考。
首先从成分角度来看，茵陈蒿汤水提物和醇提物的主要成分均为挥发油类、黄酮类、生物碱类等。
其中挥发油类主要成分包括细辛醚、桉叶油素等；黄酮类主要成分包括芦丁、槲皮素等；生物碱类主要成分包括大黄素、大黄酸等。
这些成分在药理作用上具有清热解毒、利湿退黄、抗菌消炎等作用。
然而两者在成分组成上存在一定差异，如醇提物中的某些成分含量较高，而水提物中则较低。
其次从药效方面来看，茵陈蒿汤水提物和醇提物在抗炎、抗氧化、抗菌等方面具有相似的作用，但在其他方面存在一定差异。
例如醇提物在抗炎作用上较强，可能与其较强的抗氧化作用有关；而水提物在抗菌消炎方面表现较好，可能与其较强的抗病毒作用有关。
此外醇提物还具有一定的镇静、安神作用，而水提物则无此作用。
茵陈蒿汤水提物和醇提物在成分组成和药效方面存在一定差异，但两者在抗炎、抗氧化、抗菌等方面具有相似的作用。
因此在临床应用中可根据患者病情和需求选择合适的提取物进行治疗。
1. 研究背景和意义随着现代医学的不断发展，中药在治疗各种疾病方面发挥着越来越重要的作用。
茵陈蒿汤作为中医药学中的经典方剂，具有悠久的历史和丰富的药理作用。
近年来研究者们对茵陈蒿汤的成分进行了广泛深入的研究，发现其中蕴含着丰富的活性成分，具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化等多种药理作用。
然而目前对于茵陈蒿汤水提物和醇提物的成分及药效比较研究尚不充分，这限制了茵陈蒿汤在临床应用中的疗效发挥。
因此本研究旨在通过对茵陈蒿汤水提物和醇提物的成分及药效进行比较研究，揭示两者之间的差异，为进一步优化茵陈蒿汤的提取工艺和临床应用提供理论依据。
同时本研究也有助于丰富中药提取物研究领域的理论体系，为其他草药提取物的研究提供借鉴。
水提醇沉 醇提水沉
中药制备注射剂,我们采用的工艺缓慢加醇法,只需一次回收乙醇,即可达到目的。
用当归、丹参、野菊花、茵陈作原料,采用本工艺做成各种注射剂作纸层、薄层、紫外及化学方法比较,发现此工艺所做成的注射剂其有效成份的含量并不比传统工艺少,而杂质含量也并不比传统工艺多。
现报道如下:1 工艺生产流程在每次加乙醇放置后过滤,不回收乙醇,增高乙醇含量达75%,95%,仅末次沉淀后过滤回收乙醇,除尽乙醇,加注射用水至足量备用。
我们用此法与传统方法分别做了下面二种注射液,进行对比。
1.1 复方茵陈注射液茵陈100 g,黄柏50 g,栀子50 g,板兰根500 g,共制成1 000 ml,用传统方法(水煎,醇沉三次)与新工艺分别标记。
1.2 当归注射液当归250 g,共制1 000 ml,用传统法、新法分别标记。
2 方法和结果2.1 复方茵陈注射液传统方法相对标准曲线绘制取注射液加水稀释成含茵陈生药50,25,5 mg·ml-1,在581-G型,光电比色计上比色(50号滤光片),测定吸收度(A),测得值经回归方程处理。
绘制浓度与吸收度曲线见图1。
新法按上述方法测定,其吸收度(A值)和浓度均与相对标准曲线相符。
2.2 薄层层析样品:传统法注射液,新法注射液;吸附剂:硅胶G;展开剂:氯仿-丙酮-乙醇(10∶3∶1),紫外灯下显色观察,见图2。
2.3 当归注射液相对标准曲线的绘制取传统法注射液,加水稀释含当归生药250,125,62.5,31.25 mg·ml-1,在581-G型光电比色计上比色,测定吸收度,测得值经回归方程处理,绘制浓度-吸收度曲线图,见图3。
新法注射液按上述方法测定,其吸收值和浓度均与标准曲线上的浓度与吸收度相符。
薄层层析:吸附剂硅胶G,展开剂氯仿-甲醇-苯(2∶0.6∶2),显色剂,1%三氯化铁,1%铁氰化钾。
结果见图4。
图 1 复方茵陈注射液A值相对标准曲线图图 2 复方茵陈注射液两法层析图A.传统方法注射液B.新法注射液图 3 当归注射液A值相对标准曲线图?图 4 当归注射液两法层析图A.传统方法注射液B.新法注射液3 传统工艺与新工艺澄明度比较两种产品在0 ℃及25 ℃,放置3个月均无沉淀,4个月时有少量沉淀。
醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究_夏循礼
文章编号:1000-2375(2003)03-0267-04醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究夏循礼,陈 勇(湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062)摘 要:分别采用正交设计实验考察了提取溶剂浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量以及醇沉溶剂浓度等对醇提水沉法和水提醇沉法提取杜仲叶活性成分的影响,结果表明,无论是活性成分的含量,还是活性物质的得率,醇提水沉法都优于水提醇沉法.关键词:醇提水沉;水提醇沉;杜仲叶;活性物质中图分类号:R282.71 文献标识码:A收稿日期:2002-11-29基金项目:武汉市科技局2001年重大攻关项目(20016001008)作者简介:夏循礼(1969- ),男,硕士生杜仲传统以皮入药,皮剥树死.为保护杜仲植物资源,近年来对杜仲叶的化学成分及药理作用进行了较深入的研究.有文献报导[1]:杜仲叶与杜仲皮一样,含有几十种药用有效成分,如生物碱、桃叶珊瑚甙、黄酮类、内脂、维生素、微量元素、糖类、果胶、氨基酸等,杜仲叶和皮的水溶性或醇溶性提取物都含有咖啡酸、绿原酸、白桦酯酸等.现代药理研究表明杜仲叶具有如下生理功能:¹杜仲叶提取物能较好地促进机体中胶原蛋白的新陈代谢,增强细胞的活力,抗衰老作用强;º抗机体疲劳作用极为显著;»具有明显的体液和细胞免疫增强作用;¼具有较好的降血脂、减少中性脂肪形成的作用.杜仲叶资源丰富,无毒能食,但一直没有得到有效利用.目前也有许多关于杜仲叶活性成分提取分离研究的报告[2~6],但还存在一些问题:如只对单因素进行考察而不是对多因素进行综合考察,或者只采用平行设计实验而没有采用正交设计实验,或者只对某一种成分进行考察而没有对其它相关成分进行总体上考察等.本实验中对杜仲叶活性成分的提取工艺进行了正交设计,对比研究了醇提水沉法与水提醇沉法对杜仲叶活性成分提取的影响.1 实验材料与仪器杜仲叶(Folium ucommiae )采自湖北十堰市台子村杜仲林场,经湖北大学生命科学学院植物分类学教授王万贤鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥鲜叶.标准品绿原酸(chlorogenic acid)为中国药品生物制品检定所产品(批号:0753-9909),标准品京尼平甙酸(geniposidic acid)为日本和光纯药工业株式会社产品(批号:079-03431).检测用甲醇为色谱纯,水为超纯水.其它化学试剂均为AR 级.检测仪器为高效液相色谱仪Wa ters 515泵,Waters 996检测器.电子天平FA1004(上海天平仪器厂).2 实验结果及数据分析本实验采用醇提水沉法和水提醇沉法,运用正交试验设计,分别选取环烯醚萜类的京尼平甙酸(GA)和有机酸类的绿原酸(CHA)为指标,对影响杜仲叶活性成分提取的因素和相应水平如溶剂浓度(50%~70%)、提取次数(1~3)、提取时间(1~3h)、溶剂用量倍数(8~12)和沉醇浓度(50%~70%)进行系统的考察,研究了杜仲叶活性成分的提取情况.2.1 醇提水沉法 醇提水沉法各因素水平安排见表1,数据分析见表2.提取的一般工艺流程见图1:就京尼平甙酸的得率而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取第25卷第3期2003年9月湖北大学学报(自然科学版)Journal of Hubei Uni versity(Natural Science Edition)Vol.25 No.3Sep.,2003控温干燥干物质(含活性成分)水溶液过滤溶剂冷浸粗滤加适量水2h杜仲叶醇提醇提液浓缩转溶于水图1 醇提水沉法工艺流程表1 醇提水沉法因素水平安排水平溶剂浓度(A)提取次数(B)提取时间(C)溶剂用量(D)1A1B1C1D12A2B2C2D23A3B3C3D3表2 醇提水沉法正交设计实验数据分析ABCDGA 得率P %CHA 得率P %得率和P %1#11110.300.77 1.072#12220.340.86 1.203#13330.270.94 1.214#21230.250.660.915#22310.280.710.996#23120.370.89 1.267#31320.160.570.738#32130.360.83 1.199#33210.170.580.75K 10.920.72 1.030.75K 20.890.980.760.87京尼平甙酸(GA)得率分析K 30.690.800.720.88R 0.230.260.310.13K 1 2.57 2.00 2.49 2.06K 2 2.26 2.40 2.10 2.32绿原酸(C HA)得率分析K 3 1.98 2.42 2.23 2.43R 0.580.420.390.37K 1 3.49 2.72 3.52 2.81K 2 3.16 3.38 2.86 3.19京尼平甙酸和绿原酸得率和分析K 3 2.67 3.22 2.94 3.31R0.820.660.660.50B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸提取的最佳工艺应为A1B2C1D3,即溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.就绿原酸的得率而言,3#实验结果最好,因素水平组合为A1B3C3D3,即溶剂浓度为A1,提取B3次,每次提取C3小时,溶剂用量倍数为D3倍.而从统计分析的角度来看,绿原酸提取的最佳工艺应为A1B3C1D3,即溶剂浓度为A1,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.就京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍,可达到1.26%的水平.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸和绿原酸提取的最佳工艺应为A1B2C1D3,即在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.而溶剂用量D2和D3水平相差很小,从生产成本考虑,取D2水平,即D2倍溶剂用量.因此,醇提水沉法的最佳工艺条件为A1B2C1D2,即在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.2.2 水提醇沉法 水提醇沉法因素水平安排与表1同,A 因素为沉醇浓度,数据分析见表3.提取的一般工艺流程见图2.控温干躁水溶液水煎液浓缩水煎过滤干物质(含活性成分)加适量水转溶冷浸过夜加适量乙醇过滤杜仲叶醇沉滤液浓缩图2 水提醇沉法工艺流程就京尼平甙酸的得率而言,8#实验结果最好,因素水平组合为A3B2C1D3,即沉醇浓度为A3,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸提取的最佳工艺应为A3B2C1D2,即沉醇浓度为A3乙醇,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为268湖北大学学报(自然科学版)第25卷D2倍.就绿原酸的得率而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即沉醇浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍.而从统计分析的角度来看,绿原酸提取的最佳工艺应为A2B2C1D1,即溶剂浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍.表3 水提醇沉法正交设计实验数据分析AB C D GA 得率P %CHA 得率P %得率和P %1#11110.130.280.412#12220.140.260.403#13330.120.210.334#21230.130.260.395#22310.140.280.426#23120.160.300.467#31320.140.250.398#32130.160.290.459#33210.160.250.41K 10.390.400.460.43K 20.430.450.420.44京尼平甙酸(GA)得率分析K 30.460.440.410.42R 0.070.050.050.02K 10.750.790.870.81K 20.840.830.770.80绿原酸(C HA)得率分析K 30.780.760.740.77R 0.090.070.130.04K 1 1.15 1.19 1.33 1.24K 2 1.27 1.27 1.19 1.24京尼平甙酸和绿原酸得率和分析K 3 1.24 1.20 1.14 1.18R0.120.080.190.06就京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍时,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大,可达到0.46%的水平.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸和绿原酸提取的最佳工艺应为A2B2C1D1,即在溶剂浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.因此,水提醇沉法的最佳工艺条件为A2B2C1D1,即在沉醇浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.3 结论与讨论对醇提水沉法和水提醇沉法各指标成分分别进行比较,见表4.表4 醇提水沉法和水提醇沉法提取GA 和CHA 的比较GA 含量P %GA 得率P %C HA 含量P %CHA 得率P %得率和P %醇提水沉法 1.470.37 4.130.94 1.26水提醇沉法0.960.16 1.620.290.47相对比值65.3143.2439.2330.8537.30分析表4的实验数据可以认为:醇提水沉法优于水提醇沉法.醇提水沉法的最佳工艺为A1B2C1D2,即:在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.该研究可以作为工业上杜仲叶相关活性成分生产的参考.参考文献:[1]张康健,王 蓝,张凤云,等.杜仲叶与皮有效成分含量的比较研究[J].西北林学院学报,1996,11(2):4246.[2]马希汉,张康健,尉 芹,等.从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究[J].西北林学院学报,1996,11(2):58~60.[3]李稳宏,李多伟,张阿鹏,等.杜仲叶中有效成分提取工艺的研究[J].西北大学学报,1996,26(6):511~514.[4]钱 骅,赵伯涛,张卫明.杜仲叶有效成分提取工艺的研究[J].中国野生植物资源,1999,18(1):32~33.[5]汪洪武,汤敏燕,孙凌峰,等.杜仲叶中绿原酸类物质的提取研究[J].江西师范大学学报,1997,21(4):339~341.[6]马希汉,张康健,王 蓝,等.富含生理活性物质的杜仲叶提取物的研究[J].西北林学院学报,1997,12(3):86~89.269第3期夏循礼等:醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究270湖北大学学报(自然科学版)第25卷Comparative study on extracting of the active components of Folium eucommiaeby the methods of alcohol extracting-w ater precipitatingand water extracting-alcohol precipitatingXI A Xun-li,C HEN Yong(School of Life Science,Hubei University,Wuhan430062,China)Abstract:Orthogonal experimental layouts were used to study the effect on extracting of the active c omponents of Folium eucommiae by alcohol e xtracting-water precipitating and water extracting-alc ohol precipitating process-ing methods specially with different specifications:concentration of solvent,times of extracting,time of extracting and dosage of solvent.The alcohol extracting-water precipitating is better than the water extracting-alcohol precipitat-ing for the total gain rate as well as the content.Key words:alc ohol e xtracting-water precipita ting;water extracting-alcohol precipitating;Folium eucommi-ae;active components(责任编辑游俊)(上接第247页)[30]黄锦霞,陈家威,蒋济隆.聚合物生物碱相转移催化剂的合成及其对多类化学反应的催化性能[J].催化学报,1994,15(9):399~403.[31]张万轩,王卫仁,黄锦霞.载体化的苯硫酚、苯硒酚阴离子的制备及其反应[J].粒子交换与吸附,1998,14(1):36~40.[32]李明霞,张万轩,黄锦霞.聚合物试剂的合成及应用研究[J].湖北大学学报(自然科学版),1998,20(4):348~354.[33]Menger F M,Tsuuno T.Cross-linked polystyrene incorporating water-pools[J].J Am Chem Soc,1990,112:1263~1267.[34]Zhang Hong-tao,Ren Tian-bin,Yin Zhao-hui.Study on the polymerization kinetics and of P(UA)P MMA microe-mulsion[J].Ch-ina Journal of polymer Science,2001,19:45~50.Preparation and use in organic synthesization ofmicroemulsion polymerizationSUN Rong,HUANG Jin-xia(School of Chemis try and Material Science,Hubei University,Wuhan430062,China) Abstract:Polymerization of microemulsion is provided with exceed minuteness diameter of particle,high stabil-i ty,big surface area,easy to get functions and or so.It is used abroadly in biology,physic,food,chemical industry and others.Prepara tion,dynamics,polymeric mechanism,polymerizations of microemulsion are introduced.Key words:microemulsion polymerization;organic synthesization;dynamics;mechanism(责任编辑游俊)。
水提法和醇提法提取茶树老叶的茶多酚
水提法和醇提法提取茶树老叶的茶多酚作者：马春霓来源：《农村经济与科技》2017年第14期[摘要]采用纯化水和50%的乙醇对峨眉山茶树老叶中的茶多酚进行提取，并以提取物中儿茶素的含量为评价依据，考察两种溶剂提取茶多酚的优劣。
[关键词]茶多酚；儿茶素；茶树老叶[中图分类号]TS272 [文献标识码]A茶多酚作为茶叶中的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、降血脂、降血糖、抗蛀护齿、抑菌等药理作用。
茶树老叶由于口感不佳往往都被茶农弃之不用，但有很多研究发现茶树老叶中也含有较多的茶多酚。
本试验旨在比较两种成本较低的溶剂提取茶树老叶的茶多酚时提取率的情况。
1 主要仪器、试剂、供试材料1.1 主要仪器双光束紫外可见分光光度计、旋转蒸发仪、循环水式多用真空泵、电热恒温水浴锅。
1.2 试剂纯化水、50%乙醇、氯仿、乙酸乙酯、儿茶素对照液、香草醛、盐酸。
1.3 供试材料峨眉山当地茶农提供的茶树老叶。
2 试验方法2.1 茶叶的预处理采集的鲜叶→50℃下烘干→粉碎→过筛。
2.2 水提茶多酚分别称取两份过40目筛的茶树老叶粉末10.0g于250ml圆底烧瓶中，分别向其中加入100ml 80℃纯化水，用恒温水槽在60℃下提取45min 。
后用真空泵抽滤，滤渣再加100ml浸提液提起，共提取三次，后合并三次滤液，60℃下浓缩。
浓缩液用50ml氯仿脱咖啡因两次。
弃去氯仿层。
水层用等体积乙酸乙酯萃取三次，萃取完成后，将乙酸乙酯相在旋转蒸发仪中40℃下减压蒸馏，浓缩萃取物并回收乙酸乙酯。
得到的浓缩物于60℃下干燥，便得到茶多酚样品。
2.3 醇提茶多酚分别称取两份过40目筛的茶树老叶粉末10.0g于250ml圆底烧瓶中，分别向其中加入100ml 50%乙醇，用恒温水槽在60℃下提取45min 。
后用真空泵抽滤，滤渣再加100ml浸提液提起，共提取三次，后合并三次滤液，滤液用旋转蒸发仪在60℃下减压浓缩，并回收乙醇。
浓缩液用50ml氯仿脱咖啡因两次。
01 20种中草药醇提液与水提液清除自由基活性的比较
杜仲叶的有效成分及绿原酸提取工艺研究的开题报告
杜仲叶的有效成分及绿原酸提取工艺研究的开题报告一、研究背景杜仲叶是一种著名的中药材，具有滋补肝肾、强筋骨、补血补气等功效，广泛应用于中医药领域。
研究表明，杜仲叶中的有效成分主要是绿原酸，具有明显的药理活性，能够刺激免疫系统、降低血糖、调节血脂等。
因此，绿原酸的提取工艺研究对于杜仲叶的开发和利用具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在建立一种高效、经济、环保的杜仲叶绿原酸提取工艺，探究其在不同条件下的提取效果、特性及其稳定性。
三、研究内容（1）杜仲叶绿原酸的提取工艺探究通过单因素试验和正交试验，优选杜仲叶绿原酸的最佳提取工艺。
考虑的因素包括提取温度、提取时间、液料比、酸碱度、催化剂种类等。
（2）绿原酸的质量分析采用高效液相色谱仪对提取得到的绿原酸进行定性和定量分析，并研究其特性和稳定性。
（3）杜仲叶绿原酸的应用研究考虑到杜仲叶绿原酸的药理活性和应用前景，本研究还将对其在免疫调节、降血脂、降血糖等方面的应用进行初步的实验研究。
四、研究方法（1）杜仲叶绿原酸的提取方法可采用超声波辅助提取、微波辅助提取、离子液体提取等多种先进的技术。
（2）基于高效液相色谱仪的分析方法，对绿原酸进行定性和定量分析，研究其特性和稳定性。
（3）采用体外和体内实验方法，评价杜仲叶绿原酸的免疫调节、降血脂、降血糖等效应。
五、研究意义绿原酸是一种天然抗氧化剂，具有广泛的生物学活性，应用前景广泛。
本研究将为杜仲叶的开发和利用提供重要的理论基础和实践指导，同时对于推动传统中药材现代化发展，推动我国中草药产业的发展具有一定的推动作用。
地黄叶水提醇沉工艺研究
地黄叶水提醇沉工艺研究今天咱来聊聊这个地黄叶水提醇沉工艺研究。
您可能一开始听着觉着专业又生僻，不过别着急，听我慢慢给您说道说道。
咱先说为啥要研究这地黄叶水提醇沉工艺。
您瞧，地黄叶可是个宝，里面藏着好多对咱有用的东西。
但是要把这些好东西给弄出来，还得有一套靠谱的办法，这水提醇沉工艺就是其中很重要的一种，所以咱得好好琢磨琢磨，把这个工艺给研究明白了。
那这工艺具体是咋回事呢？简单来讲，就是先用水把地黄叶里的有效成分给提取出来，然后再用醇把这些提取出来的东西给沉淀下来，让咱能更好地收集和利用。
就像是从一大锅汤里把精华的部分给捞出来一样。
研究这个工艺，第一步得先确定用多少水、在啥温度下、泡多长时间来提取。
水多了、少了，温度高了、低了，时间长了、短了，都可能影响提取的效果。
咱得像个细心的厨师，一点一点地调整这些参数，找到那个最合适的配方。
比如说，咱先试试用一定量的水，在60 度的温度下，泡上两小时，看看能提出多少有效成分；然后再调整一下，水加一点，温度提高到70 度，时间变成三小时，再看看结果。
就这样不断地尝试，找到那个最佳的方案。
提取完了，就该醇沉这一步了。
这醇的种类、用量、加入的速度、沉淀的时间，也都有讲究。
咱得试试用乙醇好，还是甲醇好；是多加点醇效果好，还是少加一点就行；是一下子把醇倒进去好，还是慢慢滴进去好；沉淀一个小时够不够，还是得两个小时。
这都得咱一项一项地去试验、去摸索。
给您举个例子吧，有一次咱做实验，一开始按照常规的方法，用水提取的时候温度定在了50 度，结果提出来的有效成分特别少。
后来把温度提高到70 度，一下子效果就好了很多。
还有一次醇沉的时候，加醇的速度太快了，结果沉淀出来的东西不纯，又重新调整了速度，才得到了理想的结果。
研究这个地黄叶水提醇沉工艺，可不光是在实验室里鼓捣鼓捣就行。
还得考虑实际生产中的成本、效率、质量这些问题。
咱不能光为了提取出那些成分，就不管不顾地浪费好多水、好多醇，或者花上好长时间。
杜仲叶水提物和醇提物抑菌及其抗氧化活性研究
第３８卷第８期学报Ｎｏ ８Ｖｏｌ ３８２０２３年８月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＬｅｓｈａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｕｇ ꎬ２０２３ＤＯＩ:１０.１６０６９/ｊ.ｃｎｋｉ.５１－１６１０/ｇ４.２０２３.０８.００３杜仲叶水提物和醇提物抑菌及其抗氧化活性研究龚卫华１ꎬ王延云２ꎬ贺建武１җꎬ胡美忠３ꎬ蓝道英１[１.杜仲综合利用技术国家地方联合工程实验室(吉首大学)ꎬ湖南吉首４１６０００ꎻ２.乐山师范学院生命科学学院ꎬ四川乐山６１４０００ꎻ３.铜仁职业技术学院ꎬ贵州铜仁５５４３００]摘㊀要:为比较杜仲叶水提物和醇提物抗菌及抗氧化活性ꎬ分别采用去离子水和乙醇(５０％和７５％)溶液提取杜仲叶ꎬ得到三种提取物ꎬ采用Ａｌａｍａｒｂｌｕｅ实验法测定提取物的抑菌效果ꎬ通过ＤＰＰＨ自由基㊁超氧阴离子及总还原力来评价其抗氧化活性ꎮ结果表明:三种杜仲叶提取物对细菌均有一定抑制活性ꎬ特别是对金黄色葡萄球菌的抑制活性最强ꎬ其中杜仲叶水提物㊁５０％醇提物和７５％醇提物对金黄色葡萄球菌ＭＩＣ５０分别为７.２１㊁３.３２和４.１２ｍｇ/ｍＬꎻ但杜仲叶水提物对真菌黄曲霉无明显抑菌效果ꎬ杜仲醇提物抑菌效果强于杜仲水提物ꎮ三种杜仲提取物均具有较强的抗氧化活性ꎬ其中醇提物的清除ＤＰＰＨ㊁超氧阴离子能力及总还原力均高于水提物ꎮ总之ꎬ杜仲叶提取物均具有一定抗菌和抗氧化活性ꎬ具有作为食品防腐剂和抗氧化剂的潜力ꎮ关键词:杜仲叶ꎻ提取物ꎻ抑菌活性ꎻ抗氧化作用中图分类号:Ｓ９６５.３２５㊀㊀文献标志码:Ａ㊀㊀文章编号:１００９－８６６６(２０２３)０８－００１０－０５收稿日期:２０２２－０４－１２基金项目:国家自然科学基金项目 湘西地区野生食用植物资源利用的空间分异及形成机制 (４２００１２００)ꎻ湖南省科技成果转化及产业化计划 高新技术产业科技创新引领计划项目 杜仲深度研发及高值化利用关键技术集成与示范 (２０２０ＳＫ２０２８)ꎻ湖南省教育厅项目 白耙齿菌降解杜仲果壳木质纤维素的机制研究 (１９Ｂ４５５)ꎻ铜仁职院国家民委中兽药重点开放实验项目 杜仲提取物抑菌作用及在蛋鸡日粮中的应用研究 ( ２０２０ ００５)作者简介:龚卫华(１９８０ )ꎬ女ꎬ土家族ꎬ湖南永顺人ꎬ吉首大学副教授ꎬ博士ꎬ研究方向:植物资源高值化利用ꎮҗ通信作者:贺建武(１９８５ )ꎬ男ꎬ土家族ꎬ湖南溆浦人ꎬ副教授ꎬ博士ꎬ研究方向:可持续生态学和生物资源可持续利用ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｈｅｊｓｕ＠ｊｓｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ０㊀引言在食品工业中ꎬ为提高食品的品质ꎬ延长其货架期ꎬ需要添加一定量的食品添加剂ꎬ但化学添加剂存在一定的安全隐患ꎬ人们迫切需要使用天然㊁安全和高效的食品添加剂来满足这一需求ꎮ因此ꎬ从植物中提取活性成分是一种适当的方法ꎮ有研究表明ꎬ植物提取物具有杀菌㊁抗氧化㊁降三高和抗肿瘤等作用[１－４]ꎬ目前已广泛应用于化妆品㊁食品加工㊁饲料添加剂中[５－７]ꎮ杜仲(ＥｕｃｏｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯｌｉｖ.)ꎬ又名思仲㊁思仙㊁胶树等ꎬ单科单属ꎬ多年生落叶乔木ꎬ阔叶材ꎬ是我国特有的经济树种ꎮ传统以皮入药ꎬ但现代研究表明ꎬ杜仲叶与杜仲皮具有类似的化学成分及活性ꎬ富含环烯醚萜类㊁苯丙素类㊁总黄酮类㊁杜仲多糖㊁抗真菌蛋白㊁氨基酸等[８－１０]ꎬ具有抗氧化㊁降糖㊁抗衰老和抑菌等作用[１ꎬ１０－１１]ꎮ研究表明ꎬ杜仲叶具有抗氧化活性ꎬ不同提取方式的杜仲叶中ꎬ活性成分和抗氧化作用存在一定差异[１３]ꎮ杜仲叶醇提物主要聚焦在对其药用价值的研究[１１－１２]ꎬ对其抗菌抗氧化的深入研究还较少ꎮ因此ꎬ本研究以慈利县杜仲叶为原料ꎬ系统研究了不同杜仲叶水提物和醇提物的抑菌和抗氧化活性的效果ꎬ旨在为杜仲叶在食品添加剂方面的应用提供基础数据ꎮ２０２１年ꎬ国家把湖南省和河南省作为试点省份ꎬ将杜仲叶列为药食同源材料ꎮ这为杜仲叶在食品工业的发展开辟了新的通道ꎬ也为进一步综合开发利用杜仲叶提供了可能ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀材料与试剂实验以湖南省慈利县江垭林场采摘的杜仲叶为原料ꎻ大肠杆菌(Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ)㊁金黄色葡萄球菌(Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ)㊁沙门氏菌(Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ)和黄曲霉均由乐山师范学院微生物实验室提供ꎻ１ꎬ１－二苯基－２－三硝基苯肼(ＤＰＰＨ)㊁铁氰化钾㊁邻二氮菲㊁三氯化铁和阿尔玛蓝(ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ)等为分析纯ꎮ１.２㊀仪器与设备ＫＱ５２００超声波清洗器(昆山是超声仪器有限公司)ꎻＸＹ－３５０型高速多功能粉碎机(浙江省永康市松青五金厂)ꎻ培养箱(上海智诚分析仪器制造有限公司)ꎬＬＤ－９６Ａ多功能酶标仪(山东莱恩德智能科技有限公司)ꎻＢＫＱ－Ｂ５０ＩＩ高压蒸汽灭菌器(山东博科生物产业有限公司)ꎮ１.３㊀试验方法１.３.１㊀提取物的制备将新鲜的杜仲叶片用蒸馏水冲洗干净ꎬ烘干后粉碎待用ꎬ剪碎ꎬ装入１Ｌ的三角瓶中ꎬ分别加入水㊁７５％乙醇和５０％乙醇ꎬ室温下超声波提取３次ꎬ每次２ｈꎬ减压抽滤ꎬ将３次滤液合并后减压浓缩ꎬ冷冻干燥ꎬ即得３种不同杜仲叶提取物ꎬ置于４ħ条件下保存备用ꎮ１.３.２㊀抗菌活性评价杜仲叶提取物对致病菌金黄色葡萄球菌㊁沙氏杆菌㊁大肠杆菌和黄曲霉菌抗菌活性进行测试ꎬ参考Ｔａｎｇ等[１４]的Ａｌａｍａｒｂｌｕｅ实验法ꎬ以ＭＩＣ５０值表达抗菌活性ꎮ金黄色葡萄球菌㊁沙氏杆菌㊁大肠杆菌和黄曲霉菌接种在６ｍｌ的ＭＨＢ培养基中孵化２４ｈ(３７ħ)ꎮ将菌悬液在６００ｎｍ的吸光度的光学密度(ＯＤ)调整到０.１３~０.１５(采用ＭＨＢ调整)ꎬ表示其菌悬液浓度大约为１.５ˑ１０８ＣＦＵ/ｍｌꎮＭＩＣ５０的测定采用９６孔微滴板ꎬ每孔加入１００ｌＭＨＢꎬ然后将初始体积为２００ｌ的实验化合物加入到相应的孔中ꎬ然后依次稀释ꎬ从最高到最低达到理想的浓度ꎮ加入待测化合物后ꎬ每孔加入ｌ.５ｌ浓度为１.５ˑ１０８ＣＦＵ/ｍｌ的菌悬液ꎬ使终浓度为达到５ˑ１０６ＣＦＵ/ｍｌꎮ混合液在３７ħ孵育２０ｈ后ꎬ１０ｌＡｌａｍａｒｂｌｕｅ(ＡＢ)试剂被添加到微孔中并轻轻摇动ꎬ再孵化１ｈ(３７ħ)ꎬ摇匀后ꎬ在酶标仪中测定每孔在５７０和６００ｎｍ的吸光度ꎮ对照组为ＭＨＢ单独(空白)㊁稀释ＭＨＢ＋实验化合物和ＡＢ(阴性)㊁ＭＨＢ＋细菌细胞和ＡＢ(阳性)ꎮＭＩＣ５０是根据制造商的配方(每个实验孔５７０~６００ｎｍ的吸光度差除以阳性对照的差值)计算ＡＢ的减少百分比来确定的ꎮ试验进行了３个重复ꎮＡＢ测定的ＭＩＣ５０被定义为使ＡＢ降低５０％的实验化合物的最低浓度ꎬ并在添加ＡＢ后６０ｍｉｎ形成略带紫色的孔ꎮ１.３.３㊀ＤＰＰＨ自由基清除的测定参考张强等[１５]方法ꎬ略有改动ꎮ取０.０４ｍｇ/ｍｌ的ＤＰＰＨ－乙醇溶液１.５ｍｌꎬ加入适量提取液用９５％乙醇补足３ｍｌꎮ静置３０ｍｉｎꎬ在５１７ｎｍ处测定吸光度ꎮ清除率＝１－(Ａ１－Ａ２)[]/Ａ０ˑ１００ꎮ其中:Ａ１为加提取液后ＤＰＰＨ溶液的吸光度ꎬＡ２为提取液的吸光度ꎬＡ０为未加提取液时ＤＰＰＨ溶液的吸光度ꎮ１.３.４㊀清除超氧阴离子自由基(Ｏ２.－)的测定取适量样品溶液加入石英比色皿中ꎬ再加入Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液至２９５０Ｌꎬ再加５０Ｌ连苯三酚溶液ꎬ迅速混合(颠覆式)ꎬ开始计时ꎬ每隔３０秒读数一次(Ａ值ꎬ３２５ｎｍ)ꎬ至３００秒时为止ꎮΔＡ＝Ａ３２５ｎｍꎬ３００ｓ－Ａ３２５ｎｍꎬ３０ｓꎮ清除率＝ΔＡ０－ΔＡ样/ΔＡ０ˑ１００ꎮ式中:ΔＡ０为不加样品的对照值ꎬΔＡ样为加样品后的测定值ꎮ１.３.５总还原能力测定(铁氰化钾还原法)参考张强等[１５]方法ꎬ略有改动ꎮ２.５ｍＬ杜仲样品溶液加入２.５ｍＬ磷酸盐缓冲液和１ｍＬ铁氰化钾溶液ꎬ５０ħ水浴中放置２０ｍｉｎꎬ急速冷却ꎬ加２.５ｍＬＦｅＣｌ３溶液ꎬ混匀后在３５００ｒ/ｍｉｎ离心１０ｍｉｎꎮ取上清液２.５ｍＬꎬ加入２.５ｍＬ双馏水和０.５ｍＬＦｅＣｌ２溶液ꎬ混合均匀ꎬ静置１０ｍｉｎ后在波长７００ｎｍ下测吸光度Ａ值ꎮＡ越大ꎬ则样品的还原力越强ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀杜仲叶提取物抑菌活性由表１可以得出杜仲醇提物对细菌有很强的抑制作用ꎬ特别是对金黄色葡萄球菌的抑制效果最强ꎬ与胡居吾等[６]研究的结果一致ꎮ胡居吾等[６]研究发现杜仲绿原酸提取物抑菌效果强于平卧菊三七和金银花绿原酸提取物ꎬ这不仅与绿原酸有关ꎬ还可能与提取物中黄酮类物质的含量有关ꎮ杜仲醇提物不仅对细菌有抑制效果ꎬ对黄曲霉真菌也有一定的抑菌效果ꎬ而杜仲５０％乙醇提取物的抑菌效果更强ꎮ杜仲水提物对细菌有抑制作用ꎬ但对黄曲霉几乎没用抑制作用ꎮ这与季志平等[１]研究结果一致ꎮ石惠姝等[１６]研究表明ꎬ杜仲水提物可以通过促进益生菌的生长达到抑制致病菌的效果ꎬ调节肠道菌群平衡ꎮ整体而言ꎬ杜仲叶提取物中ꎬ乙醇提取物的抑菌效果要高于水提物ꎬ抑制细菌效果要强于真菌ꎬ特别是对金黄色葡萄球菌的抑制效果最强ꎮ这有利于杜仲叶提取物作为天然食品杀菌剂进一步开发利用ꎮ表１㊀杜仲提取物抑菌效果提取物ＭＩＣ５０(ｍｇ/ｍｌ)金黄色葡萄球菌沙门氏菌大肠杆菌黄曲霉杜仲水提物７.２１８.２３７.７９杜仲５０％醇提物３.３２３.６３３.５２９.８７杜仲７５％醇提物４.１２４.８１４.２６１０.９８２.２㊀杜仲叶提取物对ＤＰＰＨ 的清除活性采用清除自由基ＤＰＰＨ.来评价杜仲叶提取物的抗氧化活性ꎬ结果见图１所示ꎬ随着提取物浓度的升高ꎬ清除自由基的能力增强ꎮ当提取物浓度达到０.５ｍｇ/ｍＬ时ꎬ提取物的ＤＰＰＨ.自由基清除率都达到了８０％以上ꎬ说明杜仲叶提取物的抗氧化活性很高ꎬ与王凯等[１７]和向灿辉等[１８]研究结果一致ꎮ为了更好地比较各提取物之间抗氧化活性ꎬ计算其ＩＣ５０(半抑制量浓度)ꎬ结果见图１ꎮＩＣ５０越小ꎬ表示其抗氧化活性越强ꎬ杜仲叶５０％和７５％醇提物的ＩＣ５０值分别为０.１６１㊁０.１６２ｍｇ/ｍＬꎬ表示两者之间抗氧化活性相似ꎬ而水提物的ＩＣ５０值为０.２６２ｍｇ/ｍＬꎬ要高于醇提物的ＩＣ５０值ꎬ说明醇提物的抗氧化效果好于水提物ꎬ可能与其多酚的含量有关[１９－２０]ꎮ图１㊀杜仲叶提取物的ＤＰＰＨ清除活性２.３㊀杜仲叶提取物对超氧阴离子自由基(Ｏ２.－)清除活性超氧阴离子(Ｏ２.－)是活性氧的一种ꎬ是机体内寿命最长的自由基ꎬ如果体内Ｏ２.－堆积过量ꎬ会对机体造成危害ꎬ因此ꎬ本研究测定杜仲叶提取物对超氧阴离子的清除率具有重要意义[２１]ꎮ由图２所示ꎬ杜仲叶提取物都具有较高的超氧阴离子清除活性ꎬ随着提取物浓度升高ꎬ其抗氧化活性逐渐增强ꎬ当提取物浓度达到０.７ｍｇ/ｍＬ时ꎬ其Ｏ２.－清除率都达到８０％以上ꎬ乙醇提取物的清除效果更好ꎮ王凯等[１７]研究表明ꎬ不同品种㊁储存时间㊁加工方式等制备的杜仲叶乙醇提取物均具有较强的清除Ｏ２.－的活性ꎮ不同杜仲叶提取物的ＩＣ５０如图２所示ꎬ杜仲叶醇提物的ＩＣ５０较杜仲叶水提物ＩＣ５０要低ꎬ进一步说明杜仲叶醇提物清除超氧阴离子的效果更好ꎮ图２㊀杜仲叶提取物的超氧阴离子清除活性２.４㊀杜仲叶提取物总还原力测定总还原力测定是由抗氧化剂将Ｆｅ３＋络合物还原为Ｆｅ２＋络合物的能力来表示ꎮ本试验测定了３种杜仲叶提取物的总还原力ꎮ吸光度与还原力成正比ꎬ即吸光度越高还原能力越强ꎬ其结果见图３ꎮ随着杜仲叶提取物浓度升高ꎬ其还原能力逐渐增强ꎮ杜仲叶７５％醇提物的总还原力最强ꎬ其次为５０％醇提物ꎬ还原能力最弱的为杜仲叶水提物ꎮ与张强等[１５]研究相比ꎬ本试验的杜仲提取物的总还原能力要强于其测定的不同地区的杜仲水提物ꎬ这可能是因为产地不同ꎬ杜仲叶中具有还原力的化合物的含量不一样导致的ꎮ图３㊀杜仲叶提取物的总还原力３㊀结论试验采用了水和乙醇(７５％㊁５０％)作为溶剂提取杜仲叶中有效成分ꎬ考察了不同杜仲叶提取物的抗菌和抗氧化活性ꎮ结果显示:在抗菌方面ꎬ杜仲提取物对金黄色葡萄球菌㊁沙门氏菌和大肠杆菌均有一定的抑制作用ꎬ其中对金黄色葡萄球菌的抑制效果最强ꎮ在抑制黄曲霉菌方面ꎬ杜仲醇提物有一定的抑制效果ꎬ而杜仲水提物几乎没有ꎮ其中杜仲５０％醇提取物抑菌效果最强ꎬ其次是杜仲７５％醇提物ꎬ最弱的为杜仲水提物ꎮ在抗氧化方面ꎬ实验从ＤＰＰＨ㊁超氧阴离子及总还原力３个指标入手ꎬ来对比不同杜仲提取物抗氧化性的差异ꎮ总体来说ꎬ不同杜仲提取物均有一定的抗氧化活性ꎬ但杜仲醇提物的抗氧化活性强于杜仲水提物ꎬ这可能与提取物中多酚等活性成分的含量有关ꎮ通过对杜仲叶提取物抗菌和抗氧化的综合分析ꎬ为杜仲叶提取物进一步在食品添加剂方面的应用提供理论支持ꎮ参考文献:[１]㊀季志平ꎬ苏印泉.杜仲叶提取物的抑菌活性研究[Ｊ].林产化学与工业ꎬ２００８ꎬ２８(２):６３－６６.[２]㊀ＧＨＡＲＥＥＢＭＡꎬＨＡＢＩＢＭＲꎬＭＯＳＳＡＬＥＭＨＳꎬｅｔａｌ.Ｐｈｙｔｏ－ｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆＥｕｃａｌｙｐｔｕｓｃａｍａｌｄｕｌｅｎｓｉｓｌｅａｖｅｓｅｘ￣ｔｒａｃｔｓａｎｄｔｅｓｔｉｎｇｉｔｓａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ[Ｊ].Ｂｕｌｌｅ－ｔｉｎｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｒｅꎬ２０１８ꎬ４２(１６):１－９.[３]㊀何柳ꎬ王云鹏ꎬ谢卫红ꎬ等.艾叶水提物和酸提物的抗氧化及抗菌活性比较[Ｊ].现代食品科技ꎬ２０２１ꎬ３７(１０):２０５－２１３.[４]㊀ＨＡＪＤÚＺꎬＨＯＨＭＡＮＪꎬＦＯＲＧＯＰꎬｅｔａｌ.ＡｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡｒｔｅｍｉｓｉａａｓｉａｔｉｃａｅｘｔｒａｃｔａｎｄｉｔｓｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｎｈｕ￣ｍａｎｔｕｍｏｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔａＭｅｄｉｃａꎬ２０１４ꎬ８０(１８):１６９２－１６９７.[５]㊀刘宏丁ꎬ刘亚敏ꎬ刘玉民ꎬ等.枫香叶正丁醇提取物抑菌效果及其抗氧化活性研究[Ｊ].食品工业科技ꎬ２０１５ꎬ３６(１２):８７－９４.[６]㊀胡居吾ꎬ韩晓丹ꎬ付建平ꎬ等.三种绿原酸提取物的抑菌和抗氧化效果比较[Ｊ].天然产物研究与开发ꎬ２０１７ꎬ２９(１１):１９２８－１９３３.[７]㊀王翔ꎬ胡凤杨ꎬ杨秋玲ꎬ等.杜仲叶的营养评价及体外抗氧化活性分析[Ｊ].食品工业科技ꎬ２０１９ꎬ４０(２１):２９０－２９９.[８]㊀崔国强.林业中药资源杜仲高效利用的生态工艺研究[Ｄ].哈尔滨:东北林业大学ꎬ２０１９.[９]㊀李佳.杜仲叶黄酮的提取方法及其生物活性研究进展[Ｊ].食品工业科技ꎬ２０１９ꎬ４０(０７):３４６－３５０.[１０]㊀ＳＨＡＮＦＲꎬＷＡＮＧＭＱꎬＢＡＩＹꎬｅｔａｌ.Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔｏｆｇｕｔｔａ－ｐｅｒｃｈａｆｒｏｍｅｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓｌｅａｖｅｓａｆｔｅｒｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｄｖａｎｃｅｄＭａｔｅｒｉａｌｓＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１１ꎬ２３６－２３８:２７２－２７７.[１１]㊀张红霞ꎬ杨丹丹ꎬ王凤ꎬ等.杜仲叶乙醇提取物的降糖作用机理[Ｊ].食品科学ꎬ２０１４(１７):１９７－２０３.[１２]㊀郑红星ꎬ鲁琪ꎬ徐小彤ꎬ等.杜仲叶乙醇提取物改善睡眠功能评价[Ｊ].食品科技ꎬ２０１５ꎬ４０(９):２０８－２１１.[１３]㊀屠万倩ꎬ张留记ꎬ夏曼玉ꎬ等.杜仲叶清除ＤＰＰＨ自由基动力学特性及抗氧化活性成分筛选[Ｊ].中国药学杂志ꎬ２０２２ꎬ５７(４):２６４－２６８.[１４]㊀ＴＡＮＧＸＸꎬ㊀ＸＵＣＭꎬ㊀ＹＡＧＩＺＹꎬｅｔａｌ.Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｆｉｌｅｓꎬａｎｄａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｇｒｅａｔｅｒｇａｌａｎｇａｌ[Ａｌｐｉｎｉａｇａｌａｎｇａ(Ｌｉｎｎ.)Ｓｗａｒｔｚ.]ｆｌｏｗｅｒｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１８ꎬ２５５:３００－３０８.[１５]㊀张强ꎬ苏印泉ꎬ李秀红.不同产地杜仲叶的水提取物体外抗氧化活性[Ｊ].食品科学ꎬ２０１１ꎬ３２(１５):１２６－１２９. 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[２１]㊀刘静.杜仲叶提取物的体外抗氧化作用[Ｊ].陕西教育学院学报ꎬ２００７ꎬ２３(２):６５－６７.ＡＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＥｆｆｅｃｔｓａｎｄＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＷａｔｅｒａｎｄＡｌｃｏｈｏｌＥｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＥｕｃｏｍｍｉａＵｌｍｏｉｄｅｓＬｅａｖｅｓＧＯＮＧＷｅｉｈｕａ１ꎬＷＡＮＧＹａｎｙｕｎ２ꎬＨＥＪｉａｎｗｕ１ꎬＨＵＭｅｉｚｈｏｎｇ３ꎬＬＡＮＤａｏｙｉｎｇ１(１.ＮａｔｉｏｎａｌａｎｄＬｏｃａｌＵｎｉｔｅｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＥｕｃｏｍｍｉａＵｌｍｏｉｄｅｓ(ＪｉｓｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ)ꎬＪｉｓｈｏｕＨｕｎａｎ４１６０００ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅꎬＬｅｓｈａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＬｅｓｈａｎＳｉｃｈｕａｎ６１４０００ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＴｏｎｇｒｅｎＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＣｏｌｌｅｇｅꎬＴｏｎｇｒｅｎＧｕｉｚｈｏｕ５５４３００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｗａｔｅｒａｎｄａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＥｕｃｏｍ￣ｍｉａＵｌｍｏｉｄｅｓ(ＥＵ)ｌｅａｖｅｓꎬｔｈｒｅｅｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｅｘｔｒａｃｔｉｎｇＥＵｌｅａｖｅｓｗｉｔｈｄｅｉｏｎｉｚｅｄｗａｔｅｒａｎｄｅｔｈａｎｏｌ(５０％ａｎｄ７５％)ｓｏｌｕｔｉｏｎｓꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＴｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＡｌａｍａｒＢｌｕｅａｓｓａｙꎬａｎｄｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌｓꎬｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅａｎｉｏｎａｎｄｔｏｔａｌｒｅｄｕｃｉｎｇｐｏｗｅｒ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｌｌｔｈｅｔｈｒｅｅｅｘｔｒａｃｔｓｈａｄｓｏｍｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｇａｉｎｓｔｂａｃｔｅｒｉａꎬｅｓｐｅｃｉａｌｌｙａｇａｉｎｓｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓꎬｗｉｔｈｔｈｅＭＩＣ５０ｏｆｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔꎬ５０％ａｌ￣ｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔａｎｄ７５％ａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔａｓ７.２１ｍｇ/ｍＬꎬ３.３２ｍｇ/ｍＬａｎｄ４.１２ｍｇ/ｍＬꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＨｏｗｅｖｅｒꎬｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＥＵｈａｄｎｏｏｂｖｉｏｕｓａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｏｎＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌａｖｕｓ(Ｆｕｎｇｕｓ)ꎬｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＥＵｗａｓｓｔｒｏｎｇｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＥＵ.ＴｈｅｔｈｒｅｅｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＥＵｓｈｏｗｅｄｓｔｒｏｎｇａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬａｎｄｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｏｆＤＰＰＨꎬｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅａｎｉｏｎａｎｄｔｏｔａｌｒｅｄｕｃｉｎｇｐｏｗｅｒｏｆａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔ.ＩｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎꎬＥＵｅｘｔｒａｃｔｓｈａｖｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬａｎｄｈａｖｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｔｏｂｅｕｓｅｄａｓｆｏｏｄｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＥｕｃｏｍｍｉａＵｌｍｏｉｄｅｓＬｅａｖｅｓꎻＥｘｔｒａｃｔｓꎻＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙꎻＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＥｆｆｅｃｔʌ责任编辑:王兴全ɔ。
三七醇提与水沉工艺研究的开题报告
三七醇提与水沉工艺研究的开题报告
一、选题背景和意义
三七是一种珍贵的中药材，是传统中医药的重要组成部分。
其中有
效成分三七醇具有多种药理作用，具有抗血栓、降血糖、抗疲劳等功能，被广泛应用于临床治疗和保健领域。
目前，三七醇的生产主要依靠化学
合成和传统提取工艺，存在一定的问题，例如成本高、产量低、原料消
耗大等。
因此，研究开发新的提取工艺对于提高三七醇的产量和质量具
有重要意义。
水沉法是一种简单易行、成本低廉、易于工业化推广的提取工艺。
在该工艺中，三七根材料与水混合后进行沉降，水层上清液中含有三七
醇等有效成分。
因此，通过对水沉提取方法的优化和研究，可以有效提
高三七醇的提取效率和纯度，从而实现三七醇的工业化生产。
二、研究内容和方法
本研究拟采用实验室小试和工业化生产试验相结合的方法，研究水
沉提取三七醇的工艺条件和优化方案。
1. 实验设计
将三七根材料按一定比例与水混合，混合物静置，观察其沉降情况
和分层情况。
在不同的温度、时间、比例等条件下进行实验，比较不同
条件下的提取效率和纯度，并选择最优条件。
2. 材料和仪器
材料：三七根材料、生化试剂、乙醇、纯水等。
仪器：电子天平、振荡器、离心机、紫外分光光度计等。
三、预期结果和意义
本研究拟通过对三七醇水沉提取工艺参数的优化和调整，实现三七醇的高效、低成本生产。
同时，本研究将为三七醇的工业化生产提供可靠的技术支持，促进三七醇的产业化发展，提高中国中药材的国际影响力和竞争力。
水体醇沉和醇提水沉
1、醇提水沉的原理应该和水提醇沉的原理是一样的，都是利用组分中杂质（即不需要的成分）在不同乙醇浓度下（水理解为乙醇浓度为0%）的溶解度不同而沉降，已达到去除杂质的目的。
加水的量应根据你需要的组分及杂质的性质决定。
应在最大程度保持有效成分的前提下，最大限度去除杂质。
2、醇提水沉将水沉后的液体静置过夜（建议低温，已达到加速沉降的作用），过滤，取上清液即可。
系指先以适宜浓度的乙醇提取药材成分，将提取液回收乙醇提水沉法：醇水法醇后，加适量水搅匀，静置冷藏一定时间，沉淀完全后滤除的方法。
药材用乙醇为溶剂提取，可避免淀粉、蛋白质、黏液质等成分的浸出，加水处理后可除去醇提液中树脂、脂溶性色素等杂质。
应用此方法要慎重，避免醇溶性有效成分因水溶性差而被一起沉淀除去。
即可提取出生物碱及其醇提水沉指将中药原料用一定浓度的乙醇用渗漉法、回流法提取盐、甙类、挥发油及有机酸类等，虽然多糖类、蛋白质、淀粉等无效成分不易溶出，但树脂、油脂、色素等杂质却仍可提出。
为此，醇提取液经回收乙醇后，再加水处理，并冷藏一定时间，可使杂质沉淀而除去。
40%-50%的乙醇可提取强心甙、鞣质、蒽醌及其甙、苦味质等。
60%-70%乙醇可提取甙类，更高浓度乙醇则可用于生物碱、挥发油、树脂和叶绿素的提取.水提醇沉和醇提水沉是两种纯化方法，是利用物质在不同溶剂中的溶解度差异的不同进行分离的，水体醇沉是在药材浓缩水提液中加入数倍量的高浓度的乙醇，以沉淀出去多糖、蛋白质等水溶性杂质；醇提水沉是在浓缩醇提液中加入数倍量的水稀释，放置以沉淀除去树脂、叶绿素等水不溶性杂质。
1、水。
为常用的浸出溶媒之一，水作为溶媒经济易得，极性大而溶解范围广，药材中的生物碱类、甙类，有机酸盐、鞣质、蛋白质、糖、树胶、色素、多糖类以及酶和少量挥发油都能被水浸出，为极性深媒。
四种不同杜仲叶渣中绿原酸含量的比较
四种不同杜仲叶渣中绿原酸含量的比较
刘巧;宗毅;相楚嫣;陈鸿平
【期刊名称】《中药与临床》
【年(卷),期】2022(13)4
【摘要】目的:本研究基于中国药典中对含有杜仲的中成药的处理方法以及绿原酸含量测定方法,测定四种不同杜仲叶渣中绿原酸的含量,为杜仲叶渣的合理利用提供理论依据。
方法:通过醇提取法、水提取法、醇水双提取法以及提取杜仲胶四种方法对杜仲叶干燥品进行预处理,并采用高效液相色谱法测定其中绿原酸含量。
结果:醇提取法后的杜仲叶药渣所含绿原酸的质量分数为0.04559%,水提取法后的杜仲叶药渣中绿原酸的质量分数为0.0159%,醇水双提处理之后的杜仲叶药渣所含绿原酸的质量分数为0.01439%,提取杜仲胶后的杜仲叶渣滓不含绿原酸。
结论:醇提、水提取之后的杜仲叶药渣中绿原酸含量较为丰富,可回收利用率高。
【总页数】3页(P4-6)
【作者】刘巧;宗毅;相楚嫣;陈鸿平
【作者单位】成都中医药大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R282
【相关文献】
1.不同月份杜仲叶中绿原酸含量的研究
2.不同采收时间及干燥方法对杜仲叶中绿原酸含量的影响
3.不同干燥方法及存放时间对杜仲叶中绿原酸含量的影响研究
4.杜
仲叶中绿原酸不同提取方法的比较5.不同影响因素下杜仲叶中绿原酸含量变化特征研究
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补肾益精方水提物和醇提物化学指标及药效的比较研究
补肾益精方水提物和醇提物化学指标及药效的比较研究史万忠;徐德生;沈培芝;石印玉【期刊名称】《中国中药杂志》【年(卷),期】2001(26)7【摘要】目的 :评价中药补肾益精方水提物和醇提物对化学成分指标含量以及对绝经后骨质疏松症大鼠模型骨矿密度的影响 ,考察化学成分指标与药效的相关性 ,探讨复方有效组分。
方法 :分别采用水提和醇提工艺制备补肾益精方的提取物 ,用HPLC法测定淫羊藿苷和柚皮苷含量 ,并观察两种提取物预防性给药对切除卵巢诱导的绝经后骨质疏松症大鼠模型的作用。
结果 :水提物和醇提物均具有抗骨质疏松作用 ,且水提物的作用略强于醇提物 ,而水提物中的淫羊藿苷和柚皮苷的含量低于醇提物 ,淫羊藿苷和柚皮苷的含量与复方抗骨质疏松作用非正性相关。
结论 :补肾益精方以水提为佳 ,复方中水溶性成分和醇溶性成分都具有抗骨质疏松的作用 ,复方的提取工艺筛选以药效为指标较妥。
【总页数】4页(P462-465)【关键词】补肾益精方;提取工艺;骨质疏松症;同矿密度;高效液相色谱法【作者】史万忠;徐德生;沈培芝;石印玉【作者单位】上海市中医药研究院骨伤科研究所;上海中医药大学附属曙光医院【正文语种】中文【中图分类】R283.6【相关文献】1.定志小丸水提物和醇提物对老龄小鼠学习记忆作用的比较研究 [J], 王永丽;贾庆忠;王永利2.补骨脂醇提物和水煎物抗疲劳药效比较研究 [J], 邹润;梁刘玲;张春凤;杨中林3.解毒宣透汤水提物和醇提物化学指标及药效的比较研究 [J], 王瑞;李玉娟;毕开顺4.愈骨疗伤方醇提物和水提物的药效学研究 [J], 陈海飞;鲍蕾蕾;孙艳;许志仁;范正平;卞俊5.益气活血药水提物与水提醇沉物对H9c2心肌细胞缺氧损伤的药效比较研究 [J], 李芳赫;郭书文;胡京红;王惠;黄小楼;谭晓波;蔡倩;张璐;林王欧;吴佳妮;张彬月;张宇沁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
水提醇沉法和醇提水沉法的区别
水提醇沉法和醇提水沉法
水提醇沉法(水醇法)系指在中药水提浓缩液中,加入乙醇使达不同含醇量,某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀,固液分离后使水提液得以精制的方法。
一般操作过程是:将中药水提液浓缩至1︰1~1︰2(ml︰g),药液放冷后,边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量,密闭冷藏24~48h,滤过,滤液回收乙醇,得到精制液。
操作时应注意以下问题:①药液应适当浓缩,以减少乙醇用量。
但应控制浓缩程度,若过浓,有效成分易包裹于沉淀中而造成损失。
②浓缩的药液冷却后方可加入乙醇,以免乙醇受热挥发损失。
③选择适宜的醇沉浓度。
一般药液中含醇量达50%~ 60%可除去淀粉等杂质,含醇量达75%以上大部分杂质均可沉淀除去。
④慢加快搅。
应快速搅动药液,缓缓加入乙醇,以避免局部醇浓度过高造成有效成分被包裹损失。
⑤密闭冷藏。
可防止乙醇挥发,促进析出沉淀的沉降,便于滤过操作。
⑥洗涤沉淀。
沉淀采用乙醇(浓度与药液中的乙醇浓度相同)洗涤可减少有效成分在沉淀中的包裹损失。
醇提水沉法(醇水法)系指先以适宜浓度的乙醇提取药材成分,将提取液回收乙醇后,加适量水搅匀,静置冷藏一定时间,沉淀完全后滤除的方法。
药材用乙醇为溶剂提取,可避免淀粉、蛋白质、黏液质等成分的浸出,加水处理后可除去醇提液中树脂、脂溶性色素等杂质。
应用此方法要慎重,避免醇溶性有效成分因水溶性差而被一起沉淀除去。
两种醇沉方式对杜仲水提液中氯原酸含量的影响
两种醇沉方式对杜仲水提液中氯原酸含量的影响
李稳宏;李多伟
【期刊名称】《陕西师大学报：自然科学版》
【年(卷),期】1997(025)001
【摘要】对一次醇沉及多次醇沉后杜仲水提液中氯原酸的含量做了对比分析。
结果表明，分次醇沉比一次醇沉所得的产品纯度高，当乙醇浓度最终为９０％时，一次醇沉的损失率为１８．９％，而分次醇沉的损失率仅为６．８％。
【总页数】3页(P64-66)
【作者】李稳宏;李多伟
【作者单位】西北大学化学工程系;西北大学化学工程系
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.宫环止血片工艺中水提液醇沉与不醇沉样品的药效实验研究 [J], 雷磊;尤昭玲;文乐兮;付灵梅;张烨
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3.纸层—紫外分光光度法测定杜仲中氯原酸的含量 [J], 孟芹;马克坚
4.杜仲叶水提醇沉工艺对氯原酸含量的影响 [J], 吴红;李稳宏;吴道澄;李晓晔
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20种中草药醇提液与水提液清除自由基活性的比较
20种中草药醇提液与水提液清除自由基活性的比较
赵骏;张毅;李钥
【期刊名称】《天津中医药》
【年(卷),期】2007(24)1
【摘要】[目的]测定20种中草药的清除自由基活性,从而筛选出具有较强清除自由基活性的中草药。
[方法]分别以乙醇和水作为提取剂,超声提取,采用1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)法测定各提取液清除自由基作用的强弱。
[结果]金银花、山楂、大黄、菊花的水提取液具有很强的清除自由基活性;金银花、黄芩、菊花、大黄、荷叶、麻黄的醇提液具有很强的清除自由基活性。
[结论]中草药醇提液与水提液有较强的清除自由基活性的能力。
【总页数】2页(P69-70)
【关键词】中草药;DPPH法;清除自由基
【作者】赵骏;张毅;李钥
【作者单位】天津中医药大学中药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.当归水提液和醇提液体外清除自由基的研究 [J], 邓红娟;郭延生;刁鹏飞;刘宝剑;魏彦明
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刘薇;龚盛昭
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水提与醇提对竹子中愈创木酚含量的影响
水提与醇提对竹子中愈创木酚含量的影响陈秋香;蒋晓煌;李红【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2011(31)9【摘要】Objective To optimize the best extraction solvent of effective ingredients in bamboo. Method The fresh bamboo was cuted into small pieces, then shattered into thick powder, add water or 70% ethanol reflux extraction. The guaiacol content in extract was assaied by HPLC method. Chromatographic conditions: The mobile phase was 0.5% triethylamine and 0.5% H3PO4 solution-acetonitrile (78:22), stationary phase for using C18 column, flow velo city was 1.0 mL/min, column temperature was 20 ℃, detection wavelength was 220 nm. Result Alcohol formulation is slightly higher than the water extract method, but there is no obvious difference. Conclusion Water extract method can take the place of the formulation of alcohol.%目的优选竹子中有效成分愈创木酚的最佳提取溶媒.方法将新鲜竹子砍成小段,再粉碎成粗粉,加水或70%乙醇回流提取,提取液采用高效液相法测定愈创木酚含量.色谱条件为:流动相0.5%H3pO4的水溶液-乙腈(78:22)；固定相为C18柱；流速1.0 mL/min;柱温20℃；检测波长220 nm.结果醇提法愈创木酚含量略高于水提法,但无明显差异.结论水提法可以代替醇提法.【总页数】3页(P46-48)【作者】陈秋香;蒋晓煌;李红【作者单位】长沙市中医院,湖南长沙410100;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.正交试验法研究水提与醇提对大黄蒽醌提取率的影响 [J], 黄园;徐雄良;张志荣;邹静;陈力2.秦七风湿方水提液和醇提液对巨噬细胞功能的影响 [J], 周瑞;刘东;唐志书;宋忠兴;桂蓁蓉;葛秋萍;陈永琴3.杜仲对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响水提液与醇提液有区别吗? [J], 张艳红;谢焕松;夏树林;赵春;谭湘陵4.水提和醇提的石斛口服液对衰老药效学指标的影响 [J], 黄玲;郑纯5.丹参醇提与水提对脑痛宁颗粒主要药效的影响 [J], 刘春海;张水寒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
四种不同提取方法对雷公藤提取物中内酯类含量的影响
四种不同提取方法对雷公藤提取物中内酯类含量的影响
付志明;尹履伟;李佳;韩春超
【期刊名称】《山东中医药大学学报》
【年(卷),期】2014()4
【摘要】目的:研究4种不同提取方法对雷公藤提取物中雷公藤内酯类含量的影响。
方法:氯仿渗漉、氯仿回流、水提醇沉、醇提水沉4种提取方法提取雷公藤粗提物;将粗提物经柱层层析分离纯化,以所得雷公藤内酯类的含量为指标,考察4种提取方法的提取效率。
结果:4种提取方法的氯仿萃取物量及雷公藤内酯类粗品量由高到
低依次为氯仿回流法、氯仿渗漉法、醇提水沉法和水提醇沉法。
结论:氯仿回流法
和渗漉法对雷公藤内酯类提取率较高,但氯仿用量大,实验成本较高。
醇提水沉法和
水提醇沉法适宜工业大生产。
【总页数】2页(P398-399)
【关键词】雷公藤;提取方法;雷公藤内酯;含量
【作者】付志明;尹履伟;李佳;韩春超
【作者单位】山东中医药大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.HPLC法检测雷公藤超声提取物中雷公藤内酯醇的含量 [J], 段冶;魏晨;张学强
2.HPLC-ELSD法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素的含量 [J], 姜佳峰;朱丽华;张理
星
3.雷公藤提取物中的内酯类成分分析 [J], 张一萍;喻丽元
4.反相高效液相色谱法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素含量 [J], 李克;袁倚盛;戴晓莉
5.HPLC法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素及两种生物碱的含量 [J], 张聪聪;黄建明;俞媚华;侯爱君;朱国福
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文章编号:1000-2375(2003)03-0267-04醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究夏循礼,陈 勇(湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062)摘 要:分别采用正交设计实验考察了提取溶剂浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量以及醇沉溶剂浓度等对醇提水沉法和水提醇沉法提取杜仲叶活性成分的影响,结果表明,无论是活性成分的含量,还是活性物质的得率,醇提水沉法都优于水提醇沉法.关键词:醇提水沉;水提醇沉;杜仲叶;活性物质中图分类号:R282.71 文献标识码:A收稿日期:2002-11-29基金项目:武汉市科技局2001年重大攻关项目(20016001008)作者简介:夏循礼(1969- ),男,硕士生杜仲传统以皮入药,皮剥树死.为保护杜仲植物资源,近年来对杜仲叶的化学成分及药理作用进行了较深入的研究.有文献报导[1]:杜仲叶与杜仲皮一样,含有几十种药用有效成分,如生物碱、桃叶珊瑚甙、黄酮类、内脂、维生素、微量元素、糖类、果胶、氨基酸等,杜仲叶和皮的水溶性或醇溶性提取物都含有咖啡酸、绿原酸、白桦酯酸等.现代药理研究表明杜仲叶具有如下生理功能:¹杜仲叶提取物能较好地促进机体中胶原蛋白的新陈代谢,增强细胞的活力,抗衰老作用强;º抗机体疲劳作用极为显著;»具有明显的体液和细胞免疫增强作用;¼具有较好的降血脂、减少中性脂肪形成的作用.杜仲叶资源丰富,无毒能食,但一直没有得到有效利用.目前也有许多关于杜仲叶活性成分提取分离研究的报告[2~6],但还存在一些问题:如只对单因素进行考察而不是对多因素进行综合考察,或者只采用平行设计实验而没有采用正交设计实验,或者只对某一种成分进行考察而没有对其它相关成分进行总体上考察等.本实验中对杜仲叶活性成分的提取工艺进行了正交设计,对比研究了醇提水沉法与水提醇沉法对杜仲叶活性成分提取的影响.1 实验材料与仪器杜仲叶(Folium ucommiae )采自湖北十堰市台子村杜仲林场,经湖北大学生命科学学院植物分类学教授王万贤鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥鲜叶.标准品绿原酸(chlorogenic acid)为中国药品生物制品检定所产品(批号:0753-9909),标准品京尼平甙酸(geniposidic acid)为日本和光纯药工业株式会社产品(批号:079-03431).检测用甲醇为色谱纯,水为超纯水.其它化学试剂均为AR 级.检测仪器为高效液相色谱仪Wa ters 515泵,Waters 996检测器.电子天平FA1004(上海天平仪器厂).2 实验结果及数据分析本实验采用醇提水沉法和水提醇沉法,运用正交试验设计,分别选取环烯醚萜类的京尼平甙酸(GA)和有机酸类的绿原酸(CHA)为指标,对影响杜仲叶活性成分提取的因素和相应水平如溶剂浓度(50%~70%)、提取次数(1~3)、提取时间(1~3h)、溶剂用量倍数(8~12)和沉醇浓度(50%~70%)进行系统的考察,研究了杜仲叶活性成分的提取情况.2.1 醇提水沉法 醇提水沉法各因素水平安排见表1,数据分析见表2.提取的一般工艺流程见图1:就京尼平甙酸的得率而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取第25卷第3期2003年9月湖北大学学报(自然科学版)Journal of Hubei Uni versity(Natural Science Edition)Vol.25 No.3Sep.,2003控温干燥干物质(含活性成分)水溶液过滤溶剂冷浸粗滤加适量水2h杜仲叶醇提醇提液浓缩转溶于水图1 醇提水沉法工艺流程表1 醇提水沉法因素水平安排水平溶剂浓度(A)提取次数(B)提取时间(C)溶剂用量(D)1A1B1C1D12A2B2C2D23A3B3C3D3表2 醇提水沉法正交设计实验数据分析ABCDGA 得率P %CHA 得率P %得率和P %1#11110.300.77 1.072#12220.340.86 1.203#13330.270.94 1.214#21230.250.660.915#22310.280.710.996#23120.370.89 1.267#31320.160.570.738#32130.360.83 1.199#33210.170.580.75K 10.920.72 1.030.75K 20.890.980.760.87京尼平甙酸(GA)得率分析K 30.690.800.720.88R 0.230.260.310.13K 1 2.57 2.00 2.49 2.06K 2 2.26 2.40 2.10 2.32绿原酸(C HA)得率分析K 3 1.98 2.42 2.23 2.43R 0.580.420.390.37K 1 3.49 2.72 3.52 2.81K 2 3.16 3.38 2.86 3.19京尼平甙酸和绿原酸得率和分析K 3 2.67 3.22 2.94 3.31R0.820.660.660.50B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸提取的最佳工艺应为A1B2C1D3,即溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.就绿原酸的得率而言,3#实验结果最好,因素水平组合为A1B3C3D3,即溶剂浓度为A1,提取B3次,每次提取C3小时,溶剂用量倍数为D3倍.而从统计分析的角度来看,绿原酸提取的最佳工艺应为A1B3C1D3,即溶剂浓度为A1,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.就京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍,可达到1.26%的水平.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸和绿原酸提取的最佳工艺应为A1B2C1D3,即在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.而溶剂用量D2和D3水平相差很小,从生产成本考虑,取D2水平,即D2倍溶剂用量.因此,醇提水沉法的最佳工艺条件为A1B2C1D2,即在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.2.2 水提醇沉法 水提醇沉法因素水平安排与表1同,A 因素为沉醇浓度,数据分析见表3.提取的一般工艺流程见图2.控温干躁水溶液水煎液浓缩水煎过滤干物质(含活性成分)加适量水转溶冷浸过夜加适量乙醇过滤杜仲叶醇沉滤液浓缩图2 水提醇沉法工艺流程就京尼平甙酸的得率而言,8#实验结果最好,因素水平组合为A3B2C1D3,即沉醇浓度为A3,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸提取的最佳工艺应为A3B2C1D2,即沉醇浓度为A3乙醇,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为268湖北大学学报(自然科学版)第25卷D2倍.就绿原酸的得率而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即沉醇浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍.而从统计分析的角度来看,绿原酸提取的最佳工艺应为A2B2C1D1,即溶剂浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍.表3 水提醇沉法正交设计实验数据分析AB C D GA 得率P %CHA 得率P %得率和P %1#11110.130.280.412#12220.140.260.403#13330.120.210.334#21230.130.260.395#22310.140.280.426#23120.160.300.467#31320.140.250.398#32130.160.290.459#33210.160.250.41K 10.390.400.460.43K 20.430.450.420.44京尼平甙酸(GA)得率分析K 30.460.440.410.42R 0.070.050.050.02K 10.750.790.870.81K 20.840.830.770.80绿原酸(C HA)得率分析K 30.780.760.740.77R 0.090.070.130.04K 1 1.15 1.19 1.33 1.24K 2 1.27 1.27 1.19 1.24京尼平甙酸和绿原酸得率和分析K 3 1.24 1.20 1.14 1.18R0.120.080.190.06就京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度为A2,提取B3次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍时,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大,可达到0.46%的水平.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸和绿原酸提取的最佳工艺应为A2B2C1D1,即在溶剂浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.因此,水提醇沉法的最佳工艺条件为A2B2C1D1,即在沉醇浓度为A2,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D1倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.3 结论与讨论对醇提水沉法和水提醇沉法各指标成分分别进行比较,见表4.表4 醇提水沉法和水提醇沉法提取GA 和CHA 的比较GA 含量P %GA 得率P %C HA 含量P %CHA 得率P %得率和P %醇提水沉法 1.470.37 4.130.94 1.26水提醇沉法0.960.16 1.620.290.47相对比值65.3143.2439.2330.8537.30分析表4的实验数据可以认为:醇提水沉法优于水提醇沉法.醇提水沉法的最佳工艺为A1B2C1D2,即:在溶剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D2倍的条件下,京尼平甙酸和绿原酸的提取率之和最大.该研究可以作为工业上杜仲叶相关活性成分生产的参考.参考文献:[1]张康健,王 蓝,张凤云,等.杜仲叶与皮有效成分含量的比较研究[J].西北林学院学报,1996,11(2):4246.[2]马希汉,张康健,尉 芹,等.从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究[J].西北林学院学报,1996,11(2):58~60.[3]李稳宏,李多伟,张阿鹏,等.杜仲叶中有效成分提取工艺的研究[J].西北大学学报,1996,26(6):511~514.[4]钱 骅,赵伯涛,张卫明.杜仲叶有效成分提取工艺的研究[J].中国野生植物资源,1999,18(1):32~33.[5]汪洪武,汤敏燕,孙凌峰,等.杜仲叶中绿原酸类物质的提取研究[J].江西师范大学学报,1997,21(4):339~341.[6]马希汉,张康健,王 蓝,等.富含生理活性物质的杜仲叶提取物的研究[J].西北林学院学报,1997,12(3):86~89.269第3期夏循礼等:醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究270湖北大学学报(自然科学版)第25卷Comparative study on extracting of the active components of Folium eucommiaeby the methods of alcohol extracting-w ater precipitatingand water extracting-alcohol precipitatingXI A Xun-li,C HEN Yong(School of Life Science,Hubei University,Wuhan430062,China)Abstract:Orthogonal experimental layouts were used to study the effect on extracting of the active c omponents of Folium eucommiae by alcohol e xtracting-water precipitating and water extracting-alc ohol precipitating process-ing methods specially with different specifications:concentration of solvent,times of extracting,time of extracting and dosage of solvent.The alcohol extracting-water precipitating is better than the water extracting-alcohol precipitat-ing for the total gain rate as well as the content.Key words:alc ohol e xtracting-water precipita ting;water extracting-alcohol precipitating;Folium eucommi-ae;active components(责任编辑游俊)(上接第247页)[30]黄锦霞,陈家威,蒋济隆.聚合物生物碱相转移催化剂的合成及其对多类化学反应的催化性能[J].催化学报,1994,15(9):399~403.[31]张万轩,王卫仁,黄锦霞.载体化的苯硫酚、苯硒酚阴离子的制备及其反应[J].粒子交换与吸附,1998,14(1):36~40.[32]李明霞,张万轩,黄锦霞.聚合物试剂的合成及应用研究[J].湖北大学学报(自然科学版),1998,20(4):348~354.[33]Menger F M,Tsuuno T.Cross-linked polystyrene incorporating water-pools[J].J Am Chem Soc,1990,112:1263~1267.[34]Zhang Hong-tao,Ren Tian-bin,Yin Zhao-hui.Study on the polymerization kinetics and of P(UA)P MMA microe-mulsion[J].Ch-ina Journal of polymer Science,2001,19:45~50.Preparation and use in organic synthesization ofmicroemulsion polymerizationSUN Rong,HUANG Jin-xia(School of Chemis try and Material Science,Hubei University,Wuhan430062,China) Abstract:Polymerization of microemulsion is provided with exceed minuteness diameter of particle,high stabil-i ty,big surface area,easy to get functions and or so.It is used abroadly in biology,physic,food,chemical industry and others.Prepara tion,dynamics,polymeric mechanism,polymerizations of microemulsion are introduced.Key words:microemulsion polymerization;organic synthesization;dynamics;mechanism(责任编辑游俊)。