百合鳞片组织培养技术初探
百合的组织培养
百合的组织培养【摘要】将百合鳞片的不同部位接种于加油不同激素和不同浓度BA和NAA 的6种培养基上,一周后接种的百合鳞片开始变绿,2周后,鳞片的受伤部位出现绿色的愈伤组织,,再经2—3周培养,产生愈伤组织的部位逐渐形成小鳞茎,并开始有叶片长出。
其中2号培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L的分化率最高。
实验结果表明,鳞片的不同部位分化能力也有差异,其中下部分化效果最好;激素6-BA和NAA浓度的配比,与鳞片分化小鳞茎的速度、数量和质量有着重要的关系。
【关键词】百合;鳞茎;组织培养1.百合的简介百合是百合科百合属(LiliumL.)各个种、杂交种、园艺品种的总称。
它是著名的球根花卉,其地下部分为众多肥厚鳞片组成的鳞茎。
百合花花姿优美,花大色艳,历来深受世界各国人民的喜爱,为世界名贵切花之一,广泛用于盆栽、花坛、花境及专类园。
从考古文物中发现百合花用作观赏已有三千六百五十多年的历史。
此外,多种百合的鳞茎、茎、花、种子均可入药,百合的鳞茎及花营养丰富,可制作多种美味佳肴。
芳香的百合可提取芳香油制成香料。
全世界百合属植物约一百种,起源于我国的就有四十七种和十八个变种,占世界百合属植物的一半以上。
1.1实验目的和意义传统的花卉繁殖是靠播种、扦插、分株、压条、嫁接这些措施来实现的,然而在花卉业迅猛发展的今天,传统的育种技术已经无法满足生产需要,因而人们对花卉的繁殖技术提出了更高的要求。
在世界各国植物生理工作者的努力下,利用组织培养进行花卉繁殖的技术日趋成熟。
目前已有很多花卉可以利用组织培养为花卉提供种苗。
今天,我们所享用的花卉产品之所以能够如此之高的品质,与花卉组织培养的应用不无关联。
百合植物资源丰富,栽培历史悠久,花色多样,它不仅适用于庭院栽培,布置花境,也可盆栽观赏,并早已成为花卉研究领域的佼佼者。
百合虽然观赏性很高,但大多抗性很弱,尤其抗寒性。
一般在东北地区种植商品百合时,每年秋季必须起球,窖藏或者冷库存放,这大大增加了百合的生产成本,限制了东北地区花卉业的发展。
三类观赏百合组织培养技术的研究
的引种栽培、 优良品种快速繁殖 , 去毒复壮以及新
卉, 除供观赏外还 兼有药用、 滋补食用 等多种用 途。由于百合种类多 、 花型花色各异 , 因而杂交育 种的变异显著 , 新品种不断涌现 , 以其花大 、 并 色 艳、 型花色丰富而成为世界著名切花、 花 盆花 品 种。目 前观赏百合 主要 以亚洲百合 、 东方百合和 麝香百合为主。尤其是麝香百合和东方百合的观
维普资讯
青海农林科技
・ 试
验 研 究・
20 年第 1 06 期
三类观赏 百合组织培养技术的研 究
高 霞
( 青海省农林科学院, 青海 西宁 801) 1 6 0
摘 要: 本文对三类观赏百合鳞片组织培养。 结果表明: 亚洲百合组培前不需要依靠低温来打破休眠, 而东 方百合和麝香百合必需依靠低温来打破休眠。东方百合鳞片启动的最佳培养基是 M +B 03 A 05 最佳 S A . +N A 。
O 0 .mebs cl r  ̄ t a S+B 0 8+N A . o A i lys r m, , di’ l bs sie .5 " et ut em u w sM u ' n A. A 0 5 f s I t t Ila Bte et tk r a i a t n t I r l
 ̄l eme r a umr ,u w sMD +I] O n cU. 5+NAA .5. 【 o0
Ke r s F n y ly S ae T su utr ; o m n y ywo d : a c i ; cl ; i ec l e D r a c l s u
百合 (
L) . 为百合科 的多年生球根 花
be kd r n y d p n n lw tmp rtr e r su utr . u h r n n s i s ra ra oma c e e d o o e e aue b f e ts e c l e B tte O i tmy a d muk lv mu tbe k o i u e l d n n yd p n n l e e tr . h etc l r du wa o m e e e do o t w mp r ue 1 e b s ut eme im sMS+ RA 8+ N 0 5 frO e tⅢv 曲毗 a u o. AA . o r n i go t ad i’ h et t k utr ld啪 w s尬 +m rwh,n tsteb s r ec l ene i si u a . 5+N从 o.5 eb s utr e im 惝 0 0 . etc l e m du u +
百合的组织培养技术
百合的组织培养技术1植物名称百合(lilium brownii var. viridulum)2材料类别鳞茎、珠芽、叶片、花器官等3外植体消毒将洗净的外植体材料放于无菌瓶中,先用70%-75%的酒精消毒10-60s,用无菌水冲洗1次;再用饱和的漂白粉上清液消毒5min,用无菌水冲洗1次;再用0.125%的HgCI2消毒5-10min,用无菌水冲洗1次;再用饱和漂白粉的上清液消毒10-20min,用无菌水冲洗6-7次即可获得无菌的外植体材料。
4外植体培养条件(1)诱导培养基:MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;(2)增殖培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L;(3)生根培养基:1/2MS+NAA 0.1mg/L;以上所有培养基的pH均为5.8-6.0,培养温度为(24±2)℃,光照为800-1200lx,每天光照12h左右。
5外植体的生长与分化5.1诱导培养:鳞茎切块接种于诱导培养基上,大约20天后便可在切口处产生白色小鳞茎凸起,这时便可进行继代培养。
5.2增殖培养:将萌发的小鳞茎切成数块接种于增殖培养基上,约30天后即可抽出叶片形成幼苗。
5.3生根培养:将已经抽叶的幼苗转入生根培养基中大约10天便可看到有根开始长出。
5.4炼苗及移栽:当幼苗的根生长到0.5cm长度左右时即可进行炼苗,在室温下炼苗2天,然后除去封口膜继续炼苗3-5天,然后将组培苗取出,用自来水洗净苗根部的培养基,移栽入基质或者田园土中,放入人工气候室中进行培养,每天进行浇水,约10-15天后即可移栽入大田中。
注:百合组培苗移栽以春秋季节成活率较高,冬夏季较差。
6意义百合是百合科百合属的一种多年生草本植物,不仅是世界著名的观赏花卉,而且具有食用、药用价值。
传统的百合繁殖方法具有繁殖系数小、多代繁殖种性易退化等缺点,对百合生产的数量和质量造成了一定的影响。
组培技术的应用能够克服以上缺点,并且提高的繁殖速度,是今后生产中一种有效的繁殖途径。
兰州百合的组织培养
试验步骤
1.培养基的设计(初代培养15个,继代培养6 个,生根培养6个) 2.培养基的配制 3.材料的消毒 4.接种 5.生长及观察
材料的消毒
鳞茎由外向内剥取鳞片,用清水冲洗干净, 于无菌操作台上进行消毒。方法如下,将鳞 片放入无菌烧杯中,用75%的酒精消毒30s, 无菌水冲洗2次,再用2%次氯酸钠溶液消毒 10min,用无菌水冲洗4-5次,最后用无菌滤 纸吸干水分。
试验意义
一、兰州百合的研究离不开组织培养(包括 百合的脱毒,快速繁殖,育种等); 二、兰州百合营养丰富,兰州对百合的生长 比较适宜,因此具有广泛的市场潜力。
试验方法及步骤
通过单因素的设计分别筛选出在各个阶段的 最佳培养基配方; 取材——材料消毒—制备培养基—— 接种——初代培养——继代培养——增殖— —生根——炼苗——移栽
结论
1、百合的鳞茎内部比外部鳞片分化能力强 2、通过反复试验得出2%的次氯酸钠的消毒 时间为10min 3、褐变用VC 200mg/l+pvp100mg/l
试验结果
初代培养培养基:MS+6-BA+NAA 继NAA
香水百合鳞片组织培养研究
香水百合鳞片组织培养研究孙慧刘易江应红古丽米拉·热合木土拉杨茹薇邢斌德(新疆农业科学院综合试验场,新疆乌鲁木齐830012)摘要为了提高香水百合繁殖系数和繁殖速度,生产出优质脱毒苗,满足工厂化生产,选用香水百合鳞茎的鳞片作为外植体,对外植体消毒时间、植物生长调节剂种类和浓度对鳞片诱导、增殖、生根及移栽基质的影响进行了研究。
结果表明:香水百合鳞片用75%乙醇消毒30s、0.1%升汞消毒12min效果较好;鳞片最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均每鳞片分化芽数达6.52个;鳞片最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数达5.70,鳞片最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,生根率达到100.00%,平均生根数5.6条,平均根长3.5cm,长势好。
移栽基质以采用蛭石∶草炭=4∶1和蛭石∶蚯蚓粪=4∶1较好,试管苗移栽成活率均最高,达到93.3%。
关键词香水百合;鳞片;组织培养中图分类号Q943.1文献标识码A文章编号1007-5739(2024)05-0072-04DOI:10.3969/j.issn.1007-5739.2024.05.019开放科学(资源服务)标识码(OSID):香水百合为百合科百合属多年生球根类花卉,属东方百合杂交种系。
花型硕大、花色繁多艳丽、花香淡雅清新,作为国内外著名观赏盆花和切花材料,受到人们的广泛喜爱。
同时,香水百合也是在新疆种植适应性强、观赏性高的百合品种之一,具有强大的市场发展潜力。
百合繁殖通常采用传统的分球、鳞片扦插等方法[1]。
但是,传统繁殖方法存在繁殖周期长、系数小、种球品质退化快等缺点,严重影响百合鳞茎和切花的产量和质量,大大制约百合的工厂化生产。
组织培养技术能够使百合快速繁殖、脱去病毒,还能够增加百合的繁殖系数以及保持其原有的品质[2]。
随着百合科植物组织培养技术的不断完善,许多百合的器官和组织都可作为外植体用于组织培养技术的研究,如鳞片、叶片、株芽、花丝等[3-5],其中以鳞片为外植体进行组织培养的研究最为广泛,具有繁殖系数高、易诱导等优点。
百合鳞片组织培养技术初探
20 0 9年第 2期( 总第2 1 ) 6期
栽培技术
百合鳞片组织培 养技术初 探
李 新 菊 和积 飞 周 学 花
( 永胜县 中药材技术推广站 , 云南 永胜 6 4 0 ) 7 20
【 要】 摘 百合是 百合科百合属 ( i m) Ll i 多年 生草本植物 , u 鳞茎宿存 , 其种类较 多, 色花型 各异 , 花 是人 们最喜爱的 花卉种 类之 一。百合常规繁 殖方 法是 分植 小鳞 茎, 其数量有 限 , 殖 系数 低 , 繁 其它方 法也存 在 各种 问题 , 不能满足 大 面积 生产 对种 苗的需求。而组织培养是较好的方 法。本 文用植 物组织培养方法对 百合 快繁进行初 步试验研 究, 试验选 用索邦 、 西北利亚 、 丽三 个品种 , 玛 剥其鳞 片作外值体进 行 多次试验 。结果表 明, 宜百合鳞 片组 织培养的 适 培 养基配方为 MS NA O. / + - A ig 1 MS NA + A 1 1 6 B l /和 mg n + AO.mg 1 6 B 5 / 两组 配方 ; 片不同部位 培养 1 / + - AO. mg 1 鳞 时, 底部 产生小鳞 茎的能力最强 , 中部 次之 , 上部 最弱 。通过本 次试验研 究, 步掌握 了百合 组培快繁技 术的第一 初 步, 为在本地进行百合快繁打好基础。 【 关键词】 百合 ; 鳞片 ; 织培 养 组 【 作者简介】 菊(9 5 , , 李新 17 -)女 助理农 艺师 , 云南省丽江市永胜县 中药材技 术推 广站 ; 和积飞 (96 , 助理 17 一) 男, 农 艺师 , 南省 丽江 市永胜县 中药材技 术推广站 ; 学花 (9 9 , , 云 周 1 7一) 女 助理农 艺师, 南省 丽江市永胜县 中药材技 云
百合的组织培养技术综述
百合的组织培养综述(辛文龙,200674010152)摘要对百合的分布和组织培养的进展状况及组织培养在百合育种中的应用作了综述。
特别罗列了百合组织培养中所选用的外植体类型和一些组培材料的最佳分化、生根培养基配方;阐述了组织培养中常见的一些问题;并介绍了百合组织培养在其育种中的应用。
关键词百合;组织培养;百合(Lilium.spp.)是百合科(Iiliaccae)百合属(Lilium)多年生草本植物。
我国是百合植物的原产地,早在1400多年以前就有人工栽培,食用、观赏和药用百合的栽培利用历史十分悠久。
百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。
传统的白合繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。
但采用这些方法繁殖,繁殖系数较小,特别是经多代分殖以后,常造成种性退化,甚至病毒积累,影响百合的产量和质量。
利用组织培养技术,能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生育周期。
在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性,而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。
现将目前百合组织培养及育种方法做简单总结。
1百合的分布全世界百合约有90多个种,主要分布在北半球的温带和寒带地区,少数种类分布在热带高海拔地区,南半球没有野生种分布。
中国是百合种类分布最多的国家,也是世界百合起源的中心。
据调查,中国约有47个种18个变种,占世界百合总数的一半以上,其中有36个种15个变种为中国特有种;日本有15个种,其中9个种为日本特有种;韩国有11个种,其中3个为特有种;亚洲其他国家和欧洲共有约22个种;北美洲约有14个种。
2百合的组织培养外植体类型2.1外植体的选择2.1.1鳞片百合鳞片作为外植体具有容易获得、分化能力强、对培养基要求不严等优点是目前百合组织培养中普遍采用的外植体。
主要是通过调节生长素和细分裂素的比例来诱导其组织产生不定芽和再生植株。
百合组织培养及快繁技术
3 讨 论
利 用组 织培 养 脱毒 快繁 技术生 产百合 优质 种球 ,是 一种 有效 的途 径 。实 际上 百合 许多 部 分的 器 官和 组 织 都可 用组 织培养 方法诱 导成 苗 ,这 里仅 仅介 绍 的是 百合 鳞 片为 外植体
进行组织培养 。我们对百合脱毒的种球进行快速繁殖 ,在 4 个月左右时间时里 ,得到了几 千 个种 球 ,并 当年应 用 于生 产。通过 组织培 养 的方法 快速 繁殖 ,不仅 减 少 了病 毒重 新感 染 的 机 会 ,而 且 通过 鳞 片接 种培 养 ,进 一步 降低 了基 础 苗 中病 毒 的含量 .使快 繁得 到 的脱毒 优 质 种球 更 健 壮 .以提 高生 长后切花 的价 值 。 应用组织培养方法 , 快速繁殖优质百合种 球虽然是较好的途径 , 由于生产成本较高 . 但 目前 在实 际 应 用中 还有 一定 困难 . 低生 产成本 是把 这 一技术 应 用到生 产 中去的 首要 问题 。 降 因此 ,在实验中我们采用了许多方法 ,如当产生大量 种球时可用罐头瓶代替三角瓶 l少加 温 ;少加光 }用葡萄糖或 白糖代替蔗糖.可使碳源成本降低 7 倍 。将来 ,我们还会继续 ~8 研究以液体培养基取代琼脂固体培葬基是否也会节省经费。这些措施使百合鲜切花生产推 广应 用 成 为可 能 ,并 为今 后快 繁技术 的应用 积 累一 定的 一 开 — 竺 r —一 - f 一一 一 一—— —r I f l J
,
百合 ( i m.sp Ll i u p )为百台科植物 ,是世界上著名的观赏花卉 . 在国内外 园林 中广泛
应用 ,适 宜 盆裁 、鲜切 花和 庭 园绿化 .随 着百合 在 国内外鲜 切花市场 中的走 俏 ,百 合花生 产和 消 费逐年 增加 ,但 由于 观 赏百合 商品种 球 繁殖率低 ,病 毒侵染退 化 ,造成 种球 生产难 于满 足切 花生 产需 要 . 目前 主要 采用组 织培 养技术 进行百 合脱 毒和扩 繁 .促进 了百 合商 品 种球 的生 产 。近 几 年 .我 国百合切 花生 产 的种球 主要靠 进 口 ,价格 昂贵 .应用组 培 快繁技 术 ,可在 短期 内生产 大量 优 质种苗 ,以供生 产之需 。百合 的组织 培养 及快 繁技术 在 国 内极
[应用]兰州百合的植物组织培养
兰州百合的组织培养技术一、实验目的1、学习并掌握植物组织培养技术2、应用植物组织培养技术快速繁殖兰州百合3、通过以百合鳞片为外植体进行组培,掌握对试验材料的消毒、接种方法,初步掌握外植体愈伤组织诱导的方法。
二、实验原理植物组织培养再生植物的理论基础是细胞全能性,是指在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,具有发育成完整个体的潜力。
离体的植物组织在一定条件下,可发生“脱分化”,即已经分化了的植物细胞重新分裂生长,形成均一的无组织结构的细胞团,即愈伤组织。
这种愈伤组织在一定条件下,又能“再分化”出根和芽等器官。
在该过程中,植物生长调节物质起着决定作用,调控愈伤组织的芽或根的分化。
三、材料1、试剂:NH4NO3, KNO3, CaCl2·2H2O, MgSO4·7H2O, KH2PO4, KI, H2BO3,MnSO4·4H2O, ZnSO4·7H2O, Na2·MoO4·2H2O, CuSO4·5H2O, CoCl2·6H2O, Na2•EDTA•2H2O,FeSO4·7H2O,烟酸,甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇;琼脂,蔗糖,蒸馏水,NAA,6-BA,1mol/LHCl,1mol/LNaOH;升汞。
2、仪器: 冰箱,天平,酸度计或pH试纸,电炉,微波炉,高压灭菌锅,烘箱,超净工作台,光照培养箱等3、基本工具:三角锥瓶、容量瓶、吸量管、量筒、移液器、烧杯、培养皿、滤纸、牛皮纸、封瓶膜、玻璃棒、镊子、剪刀等。
4、生物材料:市售兰州百合。
四、方法(一)MS培养基的配制1.配制MS培养基母液的配制方法如下:(1)大量元素的配制(10×):按母液配制表1上的量依次称取KNO319g、NH4NO316.5g 、MgSO 4·7H 2O 3.7g 、KH 2PO 4 1.7g ,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,以防互相发生反应,最后用容量瓶定容至1L (如需求量不大可按比例减少),转入棕色试剂瓶中,贴上标签,置冰箱冷藏保存。
百合的组织培养技术综述
百合的组织培养综述(辛文龙,200674010152)摘要对百合的分布和组织培养的进展状况及组织培养在百合育种中的应用作了综述。
特别罗列了百合组织培养中所选用的外植体类型和一些组培材料的最佳分化、生根培养基配方;阐述了组织培养中常见的一些问题;并介绍了百合组织培养在其育种中的应用。
关键词百合;组织培养;百合(Lilium.spp.)是百合科(Iiliaccae)百合属(Lilium)多年生草本植物。
我国是百合植物的原产地,早在1400多年以前就有人工栽培,食用、观赏和药用百合的栽培利用历史十分悠久。
百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。
传统的白合繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。
但采用这些方法繁殖,繁殖系数较小,特别是经多代分殖以后,常造成种性退化,甚至病毒积累,影响百合的产量和质量。
利用组织培养技术,能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生育周期。
在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性,而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。
现将目前百合组织培养及育种方法做简单总结。
1百合的分布全世界百合约有90多个种,主要分布在北半球的温带和寒带地区,少数种类分布在热带高海拔地区,南半球没有野生种分布。
中国是百合种类分布最多的国家,也是世界百合起源的中心。
据调查,中国约有47个种18个变种,占世界百合总数的一半以上,其中有36个种15个变种为中国特有种;日本有15个种,其中9个种为日本特有种;韩国有11个种,其中3个为特有种;亚洲其他国家和欧洲共有约22个种;北美洲约有14个种。
2百合的组织培养外植体类型2.1外植体的选择2.1.1鳞片百合鳞片作为外植体具有容易获得、分化能力强、对培养基要求不严等优点是目前百合组织培养中普遍采用的外植体。
主要是通过调节生长素和细分裂素的比例来诱导其组织产生不定芽和再生植株。
大百合鳞片组织培养细胞分化及生理机制研究
图25愈伤组织诱导阶段POD酶谱Fig.25PODelectrophoresisspecfo'umofcallusinduction5.5.1.2酯酶(EST)同工酶分析图26为大百合愈伤组织诱导阶段的酯酶电泳酶谱图。
由图27看出,在诱导阶段出现了6条酶带,有两个带集中区,ESTl、EST2和EST3处为第一个带集中区,EST5和EST6是第二个带集中区。
酶谱的变化主要有:随着培养时间的延长,酶带有所增加,酶总活性增强,l、2条带是共有的带,到15d时,增加了两条带,且酶带颜色也加深,一个月时又增加了一条弱带。
转接到新的培养基后,EST3、EST4带消失,各带活性增强,60d后,又出现了一条新带,但各带活性减弱。
图26愈伤组织诱导阶段EST酶谱Fig26ESTelectrophoresisspectrumofcallusinduction5.5.2分化培养阶段同工酶酶谱变化5.5.2.1过氧化物酶(POD)同工酶分析大百合愈伤组织在附加不同NAA浓度培养基中培养后,酶带宽且颜色深,酶活性显著高于诱导阶段,在分化培养前14d,PODI带消失,21d时出现且活性强,之后酶活减弱,在POD酶带集中区POD2和POD3酶活性基本保持不变,POD4带活性和条带发生较大变化:7d时低浓度NAA中愈伤组织活性弱,条带窄,POD5弱带出现,高浓度NAA中带宽,活性强,到14d时,窄带变宽,0.5mg/LNAA处理培养的愈伤组织中POD4带分化出两条带来,其余NAA浓度下的活性都增表现增强,POD5带出出现,21d时POD4酶带颜色变浅,酶活性降低,35d时酶活性又增强。
图27不同NAA浓度中愈伤组织过氧化物酶(POD)同工酶酶谱Fig.27PODelectrophoresisspectrumofcalluswithdifferentNAAconcentrations图28表明了在不同6.BA中培养的愈伤组织POD酶带变化规律,从上图明显看出6.BA处理中的愈伤组织POD带窄,颜色浅于NAA处理。
百合组织培养及快繁技术研究
宁夏农林科技,Ningxia Journal of Agri,and Fores.Sci.&Tech.2020,61(09):13-1513百合组织培养及快繁技术研究马少梅宁夏农垦集团有限公司,宁夏银川750011摘要:以百合鳞片为试验材料,探讨不同激素水平对百合不定芽诱导、分化以及生根情况的影响。
结果表明:百合鳞片用75%酒精浸泡30s,再用0.1%的升汞处理10min后污染率最低、成活率最高;筛选出最佳诱导培养基为MS+6—BA1.0 mg/L+NAA0.2mg/L、最佳分化培养基为MS+6—BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L o关键词:百合;组织培养;快繁技术中图分类号:S682.29文献标识码:A文章编号:1002-204X(2020)09-0013-03doi:10.3969/j.issn.1002—204x.2020.09.005Lily Tissue Culture and Its Rapid PropagationMa Shaomei(Ningxia Agricultural Reclamation Group Co.,Ltd.,Yinchuan,Ningxia750011)Abstract Taking lily scales as experimental materials,this paper discussed the effect of different hormonal readiness on lily adventitious bud induction,differentiation and rooting.The results indicated that lily scales had the lowest pollution rate and highest survival rate with the immersion of75%alcohol for30s and the treatment of mercuric chloride(0」%)for8min.The selected optimum induction was MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.2mg/L,the optimal differential medium was MS+6-BA0.5mg/L+ NAA0」mg/L,and the best rooting medium was1/2MS+IBA0.5mg/L.Key words Lily;Tissue culture;Rapid propagation百合为百合科百合属球根花卉,原产我国,喜温暖湿润和阳光充足环境。
东方百合组织培养和快速繁殖的研究
东方百合组织培养和快速繁殖的研究本试验选用东方百合系列的西伯利亚(Siberia)、索邦(Sorbonne)、元帅(Acapulco)、提伯(Diber)的鳞片,西伯利亚、马可波罗(Marco Polo)、元帅、卡莎布兰卡(Casa Blaca’)、黄时代的花器官作为外植体进行组织培养,分别在无性系的建立、继代增殖培养、生根结鳞茎、移栽技术四个阶段进行了研究,得出以下结果:1.无性系的建立不同品种间鳞片分化从易到难的排序为:西伯利亚,提伯,元帅,索邦;同一鳞片,基部最容易分化,其次是中部,顶部较难分化。
在所试验的培养基中,较适合西伯利亚、提伯鳞片分化的培养基为:MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,元帅、索邦的为:MS+BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L。
不同品种间花器官分化从易到难的排序为西伯利亚,马可波罗,元帅,黄时代,卡萨布兰卡;同一品种不同部位分化从易到难的排序为花托,子房,花冠,花丝,花柱。
在所试验的培养基中:西伯利亚的花托、子房、花柱,马可波罗、黄时代花托、子房、的为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,西伯利亚、马可波罗、黄时代的花冠、花丝,元帅、卡莎布兰卡的花托、子房、花冠、花丝的为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
无菌苗叶片诱导试验表明较适合诱导部位为叶片基部,较适合叶片基部分化的培养基为MS+BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
2.继代增殖培养西伯利亚和提伯鳞片不定芽增殖较好培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,元帅、索邦的为MS+BA0.4mg/L+NAA0.05mg/L;西伯利亚、马可波罗花器官不定芽的增殖较好培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,黄时代、元帅、卡莎布兰卡的为MS+BA0.3mg /L+NAA0.02mg/L。
3.生根结鳞茎与百合组培苗生根结鳞茎有关的影响因素有植物生长物质的种类和浓度、糖浓度等;NAA有利于生根,其较适合的浓度为0.5mg/L;糖对结鳞茎作用较明显,较适合浓度为60g/L;在NAA与糖组合试验中,较适合西伯利亚和马可波罗组培苗生根结鳞茎培养基为1/2MS+糖60g/L+NAA0.5mg/L,黄时代、元帅、索邦、卡莎布兰卡的为1/2MS+糖70g/L+NAA0.3mg/L。
百合的组织培养技术研究
3收稿日期 :2008206225
李 劼 : 百合的组织培养技术研究
·85 ·
种培养基 ,可选用改良 MS + BA0. 8 mg/ l + NAA 殖的诱导培养基 ,以培养大量具有分化能力的不 0. 3 mg/ l + KT0. 2 mg/ l 培养基作为百合快速繁 定芽 , 其诱导率为 74. 3 %。
培养时间 ( d)
15 20 25 30 35 40 45 50
增殖倍数 (倍)
2. 1 2. 5 2. 8 3. 2 3. 5 3. 7 3. 8 3. 8
生长状况
小鳞茎状突起 小鳞茎状突起
小鳞茎芽 小鳞茎芽 丛状小鳞茎芽 丛状小鳞茎芽 、叶大 叶变黄 叶变黄且芽基部有点黑
培养基颜色
洁白 洁白 洁白 洁白 洁白 洁白 浅黄 较黄
盘 ,以及其当年种植的未开花的茎段 、花器官 ,在 生理活性 ,造成诱导率较低 。从表 2 也可看出 ,茎
改良 MS + BA0. 1 - 1mg/ l + NAA0. 3 mg/ l 的培 段 、花器官 、鳞茎盘诱导分化的芽数较多 ,而且其
养基上分别诱导 ,1 个月后观察其平均外殖体诱 分化能力较强 。因此 ,在百合快速繁殖中 ,除百合
2. 2 生根培养及移栽 2. 2. 1 生根培养 继代培养所分化的小鳞茎 , 接种在 MS + NAA0. 5 mg/ L 或 IBA0. 5 mg/ L 的 培养基中 , 约 20 d 就可生根 , 35 d 后根生长完 全 ,生根率达 98 %。据袁芳亭[9] 研究麝香百合时 发现 ,在生根培养基中再添加 10. 0 mg/ l 的多效 唑有促进生根和壮苗的作用 ;同时他们认为当试 管苗根长 1 cm 时移栽至珍珠岩基质中易成活 。 罗凤霞等[2] 认为 ,以不附加任何激素的 MS 培养 基为新铁炮百合的最佳生根培养基 ,移栽基质以 细河沙 ∶草炭 (2 ∶1) 为最好 。 2. 2. 2 有菌条件下移栽生根 为了减少组培苗
百合组织培养实验报告
百合组织培养实验报告一、实验原理植物细胞全能性理论是植物组织培养的核心理论。
立体细胞具有生命的特征属性,在全能性的基础上,提供合适的营养和环境条件,立体细胞经历脱分化(dedifferentiation)和再分化(redifferentiation)过程,可形成再生植物。
二、实验用品实验材料:百合种球实验仪器:高压消毒锅、超净工作台、镊子、剪刀、手术刀柄、手术刀片、酒精灯、定时器、人工气候箱、分析天平、酸度计、电炉、蒸馏水机、培养皿、烧杯、量筒、移液管、吸球、药匙、玻璃棒、锥形瓶、称量纸、滤纸、枪、枪头、试剂瓶、打火机、塑料膜、绳子实验试剂:琼脂、蔗糖、75%,95%乙醇、α-萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、0.1%升汞、盐酸、大量元素(磷酸二氢钾、硝酸钾、硝酸铵、七水硫酸镁、二水合氯化钙)、微量元素(四水合硫酸猛、七水合硫酸锌、五水合硫酸铜、二水合钼酸钠、碘化钾、六水合氯化钴、硼酸)、铁盐(乙二胺四乙酸二钠、七水合硫酸亚铁)、有机物(甘氨酸、盐酸吡哆辛、盐酸硫胺素、烟酸、肌醇)三、实验操作步骤1、用分析天平去8.8g琼脂,30g蔗糖,放入烧杯中,加蒸馏水至900ml,把烧杯放在电炉上煮琼脂,并用玻璃棒搅拌,时间为50-60分钟。
2、将煮好的琼脂加蒸馏水至900ml,按顺序用移液管加50ml大量元素,5ml微量元素,10ml铁盐,10ml有机物,再用枪加1ml6-BA,0.5mlNAA,并用玻璃棒搅拌。
调ph至5.6-6.0之间。
3、将配好的培养基倒入锥形瓶中(50-60ml),用绳子将塑料膜绑好。
准备蒸馏水,并将培养皿、手术刀柄、镊子用报纸包好,同培养基一起放入高压灭菌锅灭菌,温度为121℃,时间为23min。
4、灭完菌后将培养基放至室内,冷却。
准备好洗净的百合种球,75%的酒精,0.1% 升汞(注:升汞有剧毒,注意操作),定时器,手术刀片,烧杯等,准备进行无菌操作。
5、开启紫外灯30min,关闭10min后进入,用酒精擦拭无菌操作台,在手上喷洒酒精,将酒精灯点燃放入无菌操作台中,把酒精倒满烧杯,将镊子与手术刀放入烧杯中。
百合鳞片无土育苗技术要点
百合鳞片无土育苗技术要点种百合收入大,但投资也大。
在平陆县百合作为政府牵头的产业,经过多年的生产发展,现已有一定的规模,但需求远远大于供求,发展前景广阔。
很多农民想种,但育苗的投入很大,每亩200公斤的种苗就需要将近2万元的投入,所以一般人想种种不起。
为此,笔者与农户联合进行了多年的无土育苗实验,每亩只需要种15-20公斤,可采鳞片3万片,育苗3万株左右。
减少投资90%左右,从育苗到收获2年,全生育期节省1年时间,极大减少种植户的投入。
现将总结出的“百合鳞片无土育苗技术”介绍给大家,供农民朋友在生产实践中参考使用。
一、备材1.场地选择平陆农村还有很多的窑洞,冬暖夏凉,冬季窑洞中的自然温度恒定在10℃-15℃,平陆百合的无土育苗温度适宜范围是15℃-25℃,这就要求在窑洞中增加升温设备,取暖直接用煤又增加一氧化碳中毒可能,这就要求窑洞中加入“土暖”。
保持11月到翌年2月窑洞温度15℃-25℃。
2.温度平陆百合由于原生是由野生百合培育优选而来的,自然适应能力很强,平陆大部分的气候都适宜种植要求,15℃-25℃最有利于鳞片生根和鳞茎的膨大,温度低于10℃不利于根系发育。
鳞片无土育苗必须进过5℃-10℃的低温贮藏4-6周,进一步提高温度、破除休眠进入根系缓慢生长期。
实验数据10℃-15℃,11月到翌年2月根系还是生长得不错,但鳞茎基本不膨大,15℃-25℃4个月根系发达,与有土育苗1年龄根系生长程度相同,鳞茎膨大一般在1-2厘米直径,3月份直接大田栽植即可。
温度高过27℃生长明显放缓,30℃以上就进入半休眠休眠状态,生长严重抑制。
3.水分空气湿度保持在75%左右最为适宜,这就要求每天喷水2-3次左右,水的温度要求在30℃-36℃,就是人体体表的温度。
撒匀就行,一亩无土育苗3万多片,每天的用水量大约在20公斤左右。
4.空气每天保持窑洞或房间通风换气,保持氧气的含量,否则无土育苗容易烂根,鳞片腐烂,即使不烂也生长不理想,达不到要求。
兰州百合鳞片繁殖及小鳞茎形成过程的研究
兰州百合鳞片繁殖及小鳞茎形成过程的研究百合〔Lilium spp〕是单子叶植物亚纲百合科〔Liliaceae〕百合属〔Lilium〕的所有种类的总称。
随着市场经济的开展,兰州百合供不应求,种球的需求量也大幅上升。
百合的快繁主要有小鳞茎分株繁殖、鳞片扦插及组织培养。
兰州百合〔Lilium davidii var.Unicolor〔hoog〕cotton〕属于川百合变种,是我国食用百合最正确品种,个头大,色泽白,肉质厚,味甜香;配药可润肺止咳,宁心安神;花色火红,十分艳丽,可供欣赏。
本研究以兰州百合进行单鳞片扦插繁殖,了解了内、中、外三层鳞片的分化能力及最正确扦插基质,并显微观察了扦插鳞片上小鳞茎的形态发生过程,结果说明小鳞茎的形态发生过程属于器官发生。
供试材料是由兰州西果园乡购得。
2001年4月28 日,将百合鳞片按内、中、外三层分组,消毒,冲洗后凉干外表水分,分组扦插在16种基质中,在室温〔20-25 C〕下培养。
培养45天时统计了各种基质中的成苗情况,结果说明,在16种基质中,每一种基质都证明了兰州百合内、中、外三层鳞片在同一基质中的分化能力不同,每一种基质中中层鳞片成苗率最高,内层次之,外层最差。
在16种基质中,G基质〔珍珠岩+蛭石粉1:1〕中扦插鳞片的成苗率最高,内、中层鳞片的成苗率分别为230.4 %和236.8 %, H基质〔珍珠岩+泥炭1:1〕中内、中层鳞片的成苗率为184.2 %和226.1 %,仅次于G基质,但H基质中小鳞茎生根情况较G基质好。
为了进一步提高鳞片的分化能力,在实验组H基质中,扦插前将鳞片分别蘸不同浓度〔0.05g/L、0.08g/L、0.1g/L、0.12g/L、0.15g/L、0.2g /L〕的NAA实验结果证明,NAA浓度为0.15g /L时,扦插鳞片分化情况最佳,并且也是促进小鳞茎生根的最正确浓度鳞片上分化的小鳞茎的分布具有极性,即在扦插鳞片近轴面切口边缘呈一行整齐排列。
百合鳞片离体培养的研究
百合鳞片离体培养的研究
李敏;王俊
【期刊名称】《北方园艺》
【年(卷),期】2008(000)002
【摘要】以'布鲁拉诺'、'提伯'和'索蚌'3个百合品种的鳞片为外植体,比较了不同的消毒方法、不同品种、不同取材部位及接种方法对百合鳞片离体培养的影响.结果表明,最佳的消毒方法是0.1%升汞消毒8 min,污染率较低,成活率最高,可达90.9%,且采用小鳞茎整体消毒可以有效降低污染率.不同百合品种分化小鳞茎的能力有较大差异,分化能力依次为'布鲁拉诺'>'索蚌'>'提伯'.百合鳞片不同部位分化小鳞茎的能力从大到小依次为下部、中部、上部.近轴面向上接种的鳞片分化能力强于远轴面向上,小鳞茎再生率最高,可达100%.
【总页数】3页(P212-214)
【作者】李敏;王俊
【作者单位】大连花卉苗木绿化工程总公司,辽宁,大连,116033;大连花卉苗木绿化工程总公司,辽宁,大连,116033
【正文语种】中文
【中图分类】S682.203.6
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处 理
接种瓶数
污染及 残废瓶数
产生小鳞 茎瓶数
产生小鳞 茎个数
A B CABCA B C AB C
每瓶平均产 生小鳞茎数 ABC
平 均
a 10 10 10 5 6 7 2 2 1 11 12 6 5.5 6 6 5.8
b 10 10 10 4 4 4 3 1 3 15 7 12 5 7 4 5.3
c 10 10 10 6 5 5 2 3 2 6 12 9 3 4 4.5 3.8
���������
治观察区用药 5.3 次,其中只在 5 月中下旬红蜘蛛高峰 期全面施药一次,其余均采用挑治,对照区全年用药 11.6 次,减少 6.3 次,取得了较好的效果。
2 效益评价
根据枧塘乡珠塘园、飞机坪园、龙水镇杜里园三个 防治观察区试验结果统计,见表 2。表 2 说明,防治观察 区比对照区年减少用药 6.3 次,每 hm2节支 623 元,产量 增加 2819kg。由于防治观察区红蜘蛛发生量较少,施 药次数相对少,果品质量较好,商品价值每千克价格比 对照区高 0.3 元,增加产值 11942 元,经济效益显著。
培养的,因而污染率很高。虽然小鳞茎产生率是在受
污染一定影响的情况下得出的,但仍然可以看出差异
比较明显。
3 小结与讨论
3.1 百合鳞片组织培养试验的成功及不同部位鳞
片切块培养的选择,使百合组培快繁技术在本地取得
一定突破,为引进优良品种在当地产业化发展提供了
种苗繁育供应的前提养获得成功,并选出
较适宜增殖培养的培养基配方为 MS+NAAO.1+6-BA1
和 MS + NAA0.1 + 6-BA0.5,激 素 比 例 高 BA 低 于 NAA。
在培养时为提高外植体利用效率,将鳞片切块用上、
中、下不同部位培养,试验表明,鳞片底部产生小鳞茎
的能力(即再生能力)最强,中部次之,上部最弱。建议
2 试验结果与分析
2.1 培养基选择试验结果与分析 从表 1 可以看出:a、b 优于 c、d。处理 a、b 每块外植 体产生小鳞茎数分别是 5.8 个、5.3 个,而 c、d 分别是 3.8 个和 3.3 个。配方 a、b 产生的小鳞茎数多,增殖快。而 c、d 也能产生小鳞茎,但数量较少,且培养一段时间后, 会一次性分化成苗,因而不利于增殖。结果表明,百合
8 11 1 0 3 0
3
5
中 20 20 13 10 1 2 4 9
4.3
18
下 20 20 11 12 6 5 45 38
7.6
65
注:小鳞茎产生率=
产生小鳞茎瓶数 ×100% 接种瓶数-污染瓶数
从表 2 可以看出,百合鳞片培养时,其上部产生小
鳞茎的能力最弱,鳞片下部产生小鳞茎的能力最强,中
部介于二者之间。由于试验采用的鳞片是作为外植体
���������
鳞 片 组 织 培 养 采 用 MS + NAAO.1 + 6-BAl 和 MS +
NAAO.1 + 6-BAO.5 较 适 合 培 养 小 鳞 茎 增 殖 。 而 配 方
MS+NAA1+6-BAO.1 和 MS+NAA0.5+6-BA0.1 不适宜鳞
片培养小鳞茎增殖。
表 1 百合鳞片组培试验结果分析表
在以后的培养中,尽量选用鳞片中下部。 3.2 本次试验研究范围窄、不全面,要获得百合组
培快繁的整套技术方案,要做的试验还很多。比如百 合组培外植体的选用除鳞片外,还有没有更好的材料, 如叶片、根、茎、花梗、花器官。就鳞片而言,内外层其 培养再生能力有没有差异。资料表明,绝大多数植物 从培养的器官再生出新的不同种类的器官比较容易 些,这种现象被称为“条件比”效应,即从培养条件下的 植物上取得的外植体已具有被促进了的形态发生能 力。百合组培也可用培养再生的器官作外植体培养, 如培养再生的叶片、鳞茎、根等,有再生能力强、污染少 等优点,值得探索研究。
d 10 10 10 7 5 4 1 2 3 4 4 12 4 2 4 3.3
2.2 鳞片不同部位切块组培试验结果分析
表 2 百合鳞片不同部位组培试验结果分析表
切块 部位
接种 瓶数 AB
上 20 20
污染 瓶数
产生小鳞 茎瓶数
产生小鳞 茎个数
平均每块外 植体产生小
小鳞茎 产生率
A B A B A B 鳞茎个数 (%)
(上接第 40 页) 1.3 化学防治措施。根据红蜘蛛、捕食螨消长情
况,准确掌握防治适期,改普治为挑治能提高防治效 果,具体措施是:当红蜘蛛叶虫数(包括卵、若、成螨)达 5 头以上捕食螨叶虫数又在 0.1 头以下时,确定施药,并 根据虫口的不同分布和密度,采用挑治和普治。在防 治方法上,选用对天敌杀伤力较小的高效低毒农药,如 克螨特 2000 倍,或用三氯杀螨醇 800 倍,或用水胺硫磷 1000 倍。在防治策略上视病虫的不同分布和密度,确 定挑治或普治,抓住红蜘蛛两个高峰期实行普治,即 5 月中下旬和 8 月中下旬,其余各代则采用挑治。全年防
通过本次试验研究,在本地进行百合组培快繁已 取得初步成功,以后不断改进完善其技术,结合当地优 越的自然条件,在本地建立百合优良品种快繁基地是 可能的。
[参考文献]
[1]周厚江,江如蓝,王凤兰等.百合[M].广州:广东科技出版 社,2004.
[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国 林业出版社,1991.
1.5.2 鳞片不同部位组培试验 通过试验,观察鳞片上、中、下三部分生长情况。 培养基配方选用培养选择试验得出的两组配方:MS+ NAAO.1+6-BA1 和 MS+NAAO.11+6-BAO.5,处理代号 仍分别用 a、b 表示,将消毒处理好的百合鳞片按上、中、 下三部分切块,分别接种于 a、b 培养基上,试验品种为 索邦、玛丽,代号 A、B,每个品种每个部位接种外植体 20 瓶,每瓶 1 块外植体,共 120 瓶。培养期间观察各品 种不同部位鳞片切块生长情况并记录。
3.4 百合原产高纬度地区,耐寒性强,耐热性差,喜 冷凉气候,生长适温;白天 20-25℃,夜间 10-15℃以下、 28℃以上生长受抑制,品质下降。永胜县是一个山区 县,高海拔山区很多,大多海拔在 2100m 以上,年均温 11.5℃左右,白天最高温在 25℃以下,夏季凉爽,特别适 合百合生长发育。
通过试验,找出一种或几种适合于百合鳞片组织 培养的培养基配方。此实验选用 4 种不同激素配方,激 素单位 mg/1(单位下同),分别是:MS+NAAO.1+6-BA1, 处理代号 a;MS+NAAO.11+6-BAO.5,处理代号 b;MS+ NAA1+6-BAO.1,处理代号 c;MS+NAA0.5+6-BAO.1,处 理代号 d。三个品种索邦、玛丽、西北利亚分别用 A、B、 C 表示。每一品种每一处理接种外植体 10 瓶,每瓶 1 块 外植体。通过观察记录外植体生长情况。
[关键词]百合;鳞片;组织培养 [作者简介]李新菊(1975-),女,助理农艺师,云南省丽江市永胜县中药材技术推广站;和积飞(1976-),男,助理 农艺师,云南省丽江市永胜县中药材技术推广站;周学花(1979-),女,助理农艺师,云南省丽江市永胜县中药材技 术推广站。
1 试验方法
1.1 试验材料 选用百合鳞茎进行试验,品种有索邦、西北利亚、 玛丽 3 个品种。鳞茎分不同品种进行沙藏或土栽。 1.2 外植体及消毒 选用百合鳞片作为外植体。将百合鳞茎从沙中或 土中取出,在自来水上将泥沙等冲洗干净,剥下鳞片再 次清洗后,用无菌水冲洗 2 次,装入无菌瓶,按组织培养 操作规程,进入无菌操作室的超净工作台进行药物消 毒处理。先用 75%酒精浸摇 30 秒,无菌水冲洗 3 次,然 后用 5‰高锰酸钾消毒 8 分钟,无菌水漂洗 8 次,将其按 不同部位切块待用。 1.3 培养基 用琼脂固体培养基,基本配方为 MS+30g/1 蔗糖,激 素选用据实验不同而异,pH 值 5.8-6.2。 1.4 接种与培养条件 将消毒处理好的百合鳞片切块按组织培养操作规 程,接种于相应的琼脂固体培养基上,然后将其分类摆 放于培养室的培养架上,作好标记,每天观察一次,检 查污染情况,如有污染作记录后立即拣出培养室,作报 废处理,每 10 天观察其生长情况并作记录。培养室温 度 20-25℃,光照 800-1200lx,每天 12 小时光照。 1.5 处理及方法 1.5.1 培养基选择试验
3.3 百合组培外植体的药物消毒,目前使用比较广 泛的是氯化汞。虽然其灭菌效果很好,但很难清除,容 易在植物材料上残留,对培养材料造成毒害,且对环境 危害大。在本次试验中,采用高锰酸钾灭菌消毒,其灭 菌效果好且易清除,对植物及环境危害也不大。以后 还可以试验使用更好的灭菌剂,如次氯酸钠、漂白粉饱 和溶液等。
农家之友
2009 年第 2 期(总第 261 期)
栽培技术
百合鳞片组织培养技术初探
李新菊 和积飞 周学花 (永胜县中药材技术推广站,云南 永胜 674200)
[摘要]百合是百合科百合属(Lilium)多年生草本植物,鳞茎宿存,其种类较多,花色花型各异,是人们最喜爱的 花卉种类之一。百合常规繁殖方法是分植小鳞茎,其数量有限,繁殖系数低,其它方法也存在各种问题,不能满足 大面积生产对种苗的需求。而组织培养是较好的方法。本文用植物组织培养方法对百合快繁进行初步试验研究, 试验选用索邦、西北利亚、玛丽三个品种,剥其鳞片作外值体进行多次试验。结果表明,适宜百合鳞片组织培养的 培养基配方为 MS+NAAO.1mg/1+6-BA1mg/1 和 MS+NAAO.1mg/1+6-BAO.5mg/1 两组配方;鳞片不同部位培养 时,底部产生小鳞茎的能力最强,中部次之,上部最弱。通过本次试验研究,初步掌握了百合组培快繁技术的第一 步,为在本地进行百合快繁打好基础。