DNA重组技术的基本工具(填空版)

1.1 DNA 重组技术的基本工具

一、基因工程的概念(阅读P 1) 1．对概念的理解

2. 2－3

二、 4－51．来源：主要来自于 。 2．特点

(1)识别双链DNA 分子的某种 序列。

(2)使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 3．作用结果

(1) 末端：在所识别序列的中心轴线两侧将DNA 的两条链分别切开时形成的末端。 (2) 末端：在所识别序列的中心轴线处切开时形成的末端。 三、 DNA 连接酶——“分子缝合针”(阅读P 5－6) 1．种类

（1） 连接酶⎩

⎪⎨⎪⎧

来源：大肠杆菌

作用：只连接互补的黏性末端

（2） 连接酶⎩⎪⎨⎪

⎧

来源：T 4噬菌体作用：对于两种末端都能连接

但对平末端的连接效率较低

2．作用：将切开的DNA 片段“缝合”，恢复被限制酶切开的 ，拼接成新的DNA 分子。

四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(阅读P6)

1．种类：、的衍生物、等。

2．常用载体——质粒

(1)质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有能力的很小的分子。

(2)质粒DNA分子上有一个至多个位点，供插入其中。

(3)质粒DNA分子上有特殊的，供重组DNA的。

(4)在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上经

过的。

判断正误：

(1)限制性核酸内切酶只能用于切割目的基因。()

(2)DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。()

(3)E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。()

(4)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体。()

(5)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中。()

(6)变异一般是不定向的，但基因工程使生物产生新的性状变异却是定向的，是按照人们的实际需要进行的有目的的改造。()

(7)不同生物的DNA能够重组是由于基本单位和空间结构相同。()

五、基因工程的理论基础

1．不同生物DNA分子得以重新拼接的基础

(1)

(2)

(3)

2．外源基因在受体内表达的理论基础

(1) 。

(2) 。

(3) 。

六、基因工程的工具酶

DNA连接酶与DNA聚合酶的比较

结果

用途

1．限制酶与DNA连接酶的化学本质和基本组成单位分别是什么？

答案化学本质均是；基本组成单位均是。

2．氢键的断裂与重新形成与限制酶和DNA连接酶是否有关？

答案。

3．限制性核酸内切酶的作用特点体现了酶的哪种特性？

答案性。

4．不同限制酶切割形成的黏性末端能发生黏合吗？借助于什么方式来完成黏合？

答案。

5．在下图中标出限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和DNA解旋酶的作用部位。

七、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

1．基因工程的载体和主动运输的载体有哪些区别？

答案(1)主动运输中载体的化学本质是，其作用是运输离子、氨基酸等物质进出细胞。

(2)基因工程中的载体的化学本质是，其作用是携带目的基因进入受体细胞。

2. 霍乱弧菌中也含有质粒，能否用来作为载体？

答案。

3．质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。某细菌质粒上有标记基因如右图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转入成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，如图所示是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是()

细菌在含氨苄青霉素的培养基上的

生长状况

细菌在含四环素的培养基上的生

长状况

①能生长能生长

②能生长不能生长

③不能生长能生长

A

B．①是a和b；②是a；③是b

C．①是a和b；②是b；③是a