大鼠心缺血再灌注实验设计

大鼠心缺血再灌注实验设计
题目：不同药物对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用
目的：观察抑制氧自由基生成药物（5-甲酰尿嘧啶）对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用。

观察钙离子拮抗剂（硝苯地平）对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用。

观察抗脂质过氧化制剂（维生素C或维生素E）对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用。

原理：多数情况下，缺血后再灌注可使组织器官功能得到恢复，损伤的结构得到修复，患者病情好转康复；但有时缺血后再灌注．不仅不能使组织、器官功能恢复，反而加重组织、器官的功能障碍和结构损伤。

这种在缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重，甚至发生不可逆性损伤的现象称为缺血再灌注损伤。

心缺血再灌注损伤是指心肌缺血后再灌注期间导致的心机细胞损害，其损害程度较心肌缺血本身严重，常表现为心肌细胞收缩功能减弱和心室顺应性改变，出现心律失常，心功能低下等现象。

心肌缺血再灌注损伤与氧自由基产生增多、钙超载、及白细胞的作用有关。

抑制氧自由基生成药（黄嘌呤氧化酶抑制剂——5-甲酰尿嘧啶）具有抑制氧自由基生
成的作用，减少氧自由基生成。

钙离子拮抗剂（硝苯地平）可以阻断钙的慢通道，使细胞外钙的内流减少，从而降低胞浆钙离子，可起到减少MIRI的作用。

抗脂质过氧化制剂（维生素C或维生素E）可以阻断脂质过氧化可1）抗白细胞粘附;（2）保护内皮功能;（3）抗血小板粘附、聚集及脱颗粒反应。

有研究证实外源性维生素E可增加心肌梗死后大鼠血浆、心脏的维生素E含量，改善心功能，并减少大鼠的再灌注心律失常。

实验对象：大鼠4只，120-200g，体格健康雌雄不限。

器材和药品：手术刀，动脉夹4个，棉线，剪子，镊子2把，玻
璃分针2个，注射器及针头2个，动脉插管器械，BL-420生物机能实验系统
药品：20%氨基甲酸乙酯0.5ml/g，5-甲酰尿嘧啶注射液，硝苯地平注射液，维生素C或维生素E注射液，肝素。

方法步骤：1、大鼠心再灌注损伤再灌注模型的制备
（1）取大鼠，称重，用20%氨基甲酸乙酯0.5ml/g腹腔注射麻醉，仰卧位固定。

（2）1%肝素0.2ml/100g从尾静脉注射。

（3）前胸，上腹部剪毛，沿肋缘下剪开腹前壁皮肤皮下筋膜，肌肉，纵向剪开胸前壁和横向剪开胸前壁暴露心脏。

（4）经主动脉插管
（5）找到左冠状动脉用动脉夹夹闭1分钟。

打开动脉夹，血液重新供应，用BL-420实验技能系统记录，观察心律心室内压等的改变。

2、药物治疗作用观察
再灌流15分钟后注入5-甲酰尿嘧啶注射液ml,观察心脏收缩改变。

重复步骤1，分别注入硝苯地平注射液，维生素C或维生素E注射液及生理盐水分别观察变化。

3,、记录波形
预期结果：实验组大鼠，均有不同程度的心肌细胞收缩功能增强，出现心律失常恢复，心功能恢复等现象。

对照大鼠择不会出现损伤缓解的状况。

可能出现的问题：1、药物作用的最佳时间不同，症状缓解的不明显。

2、实验小鼠较少可能会有抽样误差。