六味地黄丸中丹皮酚含量的测定高锦红

2． 2 精密度试验 取对照品溶液，用紫外分光光度计在波长 274 nm 处连
续测定 6 次，其 结 果为 0． 662、0． 663、0． 661、0. 660、0． 661、 0. 662、0． 663，RSD = 0． 19% ，说明仪器精密度较好。 2． 3 样品测定 2． 3． 1 供试品溶液的制备 取六味地黄丸研成粉末，精确称 取粉末 约 1． 000 0 g，置 于 50 mL 锥 形 瓶 中，加 无 水 乙 醇 25 mL，在 60 ℃ 恒温水浴中加热 120 min，趁热过滤，冷却，置 于 25 mL 容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液备用。 2． 3． 2 丹皮酚含量测定 精确量取供试品溶液 0． 35 mL 六 味地黄丸样品溶液 3 份，分别置于 25 mL 容量瓶中，各加入无 水乙醇溶液至刻度，摇匀，以试剂为空白对照，于 274 nm 波长 处测定吸光度 3 次，取平均值。根据标准曲线计算 3 批样品 溶液中丹皮酚含量，结果见表 1，样品的吸光度在波段 200 ～ 400 nm 处的情况如图 3 所示。
温水浴锅，国华电器有限公司。试剂： 无水乙醇，分析纯； 丹皮 酚对照品，中国药品生物制品检定所，批号 110708 － 200505； 二次蒸馏水。试验分析样品为六味地黄丸（ 九芝堂浓缩丸） ， 购自老百姓大药房。 1． 2 方法 1． 2． 1 对照品溶液的制备 精确称取丹皮酚对照品约 0. 005 g，置于 50 mL 烧杯中，以无水乙醇溶解，转至 100 mL 容量瓶，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，得 50 μg / mL 丹皮酚 对照品溶液。 1． 2． 2 测定波长的选择 取对照品溶液，以无水乙醇试剂作 空白，在 200 ～ 500 nm 波长范围内进行紫外可见扫描。结果 表明，丹皮酚在 274 nm 处有最 大 吸 收 峰 （ 图 1 ） ，则 选 择 在 274 nm 处测定样品液中丹皮酚的含量。
［4］李长大，温 琰． 高效液相色谱法测定杞菊地黄丸中丹皮酚的含 量［J］． 中国现代药物应用，2011，5（ 6） ： 123 － 1定性试验 准确吸取六味地黄丸供试液 0． 35 mL，置于 25 mL 容量
瓶中，加入无水乙醇溶液至刻度，摇匀。置室温条件下保存， 每隔 2 h 测定 1 次，连续测定 6 次，测得其 RSD = 0． 21% （ n = 6） ，结果见表 2。说表明供试液吸光度在 10 h 内基本稳定。
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六味地黄丸中丹皮酚含量的测定
高锦红
（ 渭南师范学院化学与生命科学学院，陕西渭南 714000）
摘要： 采用紫外分光光度法测定六味地黄丸中丹皮酚含量。结果显示： 六味地黄丸中丹皮酚平均检出量分别为 5. 173 μg / mL，平均回收率分别为 101． 6% （ RSD = 1． 9% ） ，丹皮酚平均含量分别为 9． 221 μg / g。该测定方法简便、可 靠、准确，可用于该中成药的质量控制。
1 材料与方法
1． 1 材料 仪器： UV － 2000 紫外分光光度计，莱伯泰科有限公司；
电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司； HH － 2 数显恒
收稿日期： 2012 － 05 － 30 基金项目： 陕西省教育厅科研项目（ 编号： 12JK0832 ） ； 渭南师范学院
一般项目（ 编号： 12YKS028） 。 作者简介： 高锦红（ 1974—） ，女，硕士，副教授，研究方向为化学计量
表 3 加标回收试验
样品含量 （ μg / mL）
5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 5． 173 平均
对照品加入量 （ μg / mL）
2 2 2 3 3 3 4 4 4
注： RSD = 1． 9% 。
测定总量 （ μg / mL）
关键词： 六味地黄丸； 丹皮酚； 紫外分光光度法 中图分类号： R284 文献标志码： A 文章编号： 1002 － 1302（ 2013） 01 － 0293 － 02
六味地黄丸别称六味丸、地黄丸，系由熟地黄、山茱萸、泽 泻、山药、茯苓、牡丹等六味中药组成的。它可调节机体免疫 功能，增强全身及肾脏局部的防御功能，增强细胞免疫功能， 促进免疫球蛋白的合成，同时又能抑制抗体的生成，抑制过敏 反应，具有增强 免 疫、抗 衰 老、抗 疲 劳、抗 低 温、耐 缺 氧、降 血 脂、降血压、降血糖、改善肾功能、促进新陈代谢及较强的强壮 作用［1］。其中，牡丹皮药材中主要有丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮 酚原苷、丹皮酚新苷等有效成分。丹皮酚具有镇静、催眠、解 热、镇痛、抗炎、抗菌等药理作用，是牡丹皮药材主要活性成分 之一［2］。目前，大都采用高效液相色谱法 （ HPLC） 来测定中 成药中丹皮酚的含量［3 － 4］，未见紫外分光光度法 （ UV） 的报 道。紫外分光光度法是测定药物含量最常见的方法，此方法 迅速简便，灵敏度高、重现性好，而 HPLC 法仪器造价高，对操 作人员要求高、费时长，故本研究用 UV 法测定六味地黄丸中 的丹皮酚含量。
取已知含量的样品 3 份，分别置 25 mL 量瓶中，加入丹皮 酚对照品适量，按供试品溶液的制备方法处理，再按“2． 3． 2” 节 的 方 法 测 定 含 量，计 算 回 收 率，回 收 率 的 平 均 值 为 101. 6% ，RSD = 1． 9% （ 表 3） 。说明方法的回收率较好，达到 了 基 本 要 求，该 方 法 可 以 用 于 六 味 地 黄 丸 中 丹 皮 酚 含 量 的 检测。
它可调节机体免疫功能增强全身及肾脏局部的防御功能增强细胞免疫功能促进免疫球蛋白的合成同时又能抑制抗体的生成抑制过敏反应具有增强免疫抗衰老抗疲劳抗低温耐缺氧降血脂降血压降血糖改善肾功能促进新陈代谢及较强的强壮作用?
江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 1 期
高锦红． 六味地黄丸中丹皮酚含量的测定［J］． 江苏农业科学，2013，41（ 1） ： 293 － 294．
7． 228 7． 231 7． 215 8． 181 8． 175 8． 167 9． 301 9． 266 9． 204
回收率 （ %）
102． 8 102． 9 102． 1 100． 3 100． 1 99． 8 103． 2 102． 3 100． 8 101． 6
3 结论
采用紫外分光光度法，以丹皮酚为对照品，测定六味地黄 丸中丹皮酚的含量，检测波长为 274 nm。溶液在检测浓度范 围内线性良好，平均回收率为 101． 6% ，RSD 值为 1． 9% ，回收 率符合要求，供试样品和对照品溶液配制在 10 h 内基本稳 定，测定结果稳定可靠，故该方法可作为六味地黄丸类中成药 的质量评价方法之一。
［1］周坤福，王明艳，赵凤明，等． 六味地黄丸延缓衰老作用机理的实 验研究［J］． 江苏中医，1999，20（ 1） ： 44 － 45．
［2］孙言才，沈玉先，孙国平． 丹皮酚的主要药理活性研究进展［J］． 中成药，2004，26（ 7） ： 579 － 582．
［3］王苑桃，彭 艳． HPLC 法测定六味地黄胶囊中丹皮酚的含量 ［J］． 陕西中医，2006，27（ 11） ： 1427 － 1428．
学和药物分析。E － mail： gjh97@ 163． com。
2 结果与分析
2． 1 线性关系考察 分别精确吸取对照品溶液 0． 5、1． 0、1． 5、2． 0、2． 5、3． 0、
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江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 1 期
3． 5、4． 0 mL，置 25 mL 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇 匀。用无水乙醇为空白，在 274 nm 波长处测定吸光度，以吸 光度为纵坐标、丹皮酚浓度为横坐标绘制标准曲线。经分析 后，得回归方程为 y = 0． 085 8x － 0． 022 2，r2 = 0． 999 9，线性范 围 1 ～ 8 μg / mL（ 图 2） 。
表 1 丹皮酚含量测定结果
吸光度 0． 421 0． 42 0． 424 平均
检出量（ μg / mL） 5． 166 5． 154 5． 200 5． 173
注： 丹皮酚含量为 9． 238 mg / g。
表 2 稳定性试验
时间（ h） 0 2 4 6 8 10
平均值
注： RSD = 0． 21% 。
吸光度 0． 421 0． 421 0． 422 0． 423 0． 423 0． 422 0． 422
2． 5 精密度试验 取供试品溶液 0． 35 mL 于 25 mL 容量瓶中，用无水乙醇
溶液至刻度，用紫外分光光度计在波长 274 nm 处连续测定 6 次吸光度，RSD = 0． 37% ，说明仪器精密度较好。 2． 6 加样回收试验