无偿献血者梅毒抗体筛查方法的比较

无偿献血者梅毒抗体筛查方法的比较【关键词】梅毒；酶联免疫吸附测定；凝集试验；快速血浆反应素试验
梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病，近年来梅毒的发病率有逐年上升的趋势。

根据卫生部每年发布的《27种法定报告传染病发病及死亡率》报告，梅毒的发病率由2003年的4.5/10万迅速增长到2006年的12.8/10万，对我国输血安全造成了越来越大的影响。

目前，梅毒血液检测的方法主要有：快速血浆反应素试验（RPR）、甲苯胺红快速反应素试验（TRUST）、酶联免疫试验（ELISA）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体微粒凝集试验（TPPA）、聚合酶链式反应试验（PCR）以及免疫层析法（GICA）等［1］。

国家明确规定献血员血液梅毒试验必须为阴性，因此，在献血员筛查中，选择灵敏度高、特异性好的梅毒检测方法，对于防止梅毒经过血液传染，保证临床用血安全上有着非常重要的意义。

在血站，常用RPR法、ELISA法和TPPA法进行献血员梅毒抗体检测。

因此，对这3种方法进行了比较，现报告如下。

1 材料与方法
1.1 标本
本血站2004年1月～2006年12月无偿献血者17 781例。

1.2 试剂RPR法
试剂由上海荣盛公司提供，TP-ELISA双抗原夹心法试剂由北京华大吉比爱生物技术有限公司提供，TPPA确证试剂由北京华大吉比爱物技术有限公司提供。

1.3 仪器
UranusAE100-1-4全自动酶免分析仪（深圳市爱康电子有限公司）、MK3酶标仪（芬兰雷勃）、TECAN型洗板机（天津国际贸易有限公司）。

1.4 方法
用RPR法和ELISA法同时对无偿献血者进行梅毒血清学检测，阳性样本进行复检，复检阳性样本用TPPA方法进行确认。

所有试验均严格按照相应的试剂盒说明书进行操作和判定结果。

统计学分析应用SPSS 12.0软件。

2 结果
2.1 RPR和ELISA结果见表1。

共检测标本17 781例，RPR法阳性172例，阳性率为0.98%;ELISA法阳性204例，阳性率为1.14%，2种检测方法比较差
异具有统计学意义（P<0.05）。

表1 无偿献血者梅毒抗体的RPR和ELISA检测比较（略）
2.2 TPPA复检对RPR阳性和（或）ELISA阳性共209份标本及室内质控定值血清1份进行TPPA复检。

结果见表2。

应用卡方检验比较RPR、ELIST和TPPA 3种方法的检测结果，RPR和ELISA法相比较P�0.01，表明两种方法差异有显著性；ELISA和TPPA法相比较P�0.05，表明两种方法差异无显著性。

表2 无偿献血者梅毒抗体筛查TPPA确认检测结果（略）注:RPR 与ELISA 检测结果比较:χ2 =16.11， P＜0. 0 1;TPPA与ELISA 检测结果比较，χ2 = 0.02 ， P＞0.05
3 讨论
梅毒筛查方法非常多，常用的初筛方法有RPR、TRUST以及ELISA3种。

从原理上说，RPR、TRUST是利用牛心磷脂检测非特异性的心磷脂抗体，而ELISA是利用基因重组抗原检测特异性的TP（苍白密螺旋体）抗体，TPPA是将裂解的梅毒螺旋体包被于明胶颗粒检测血清中的特异性TP抗体［2］。

RPR作为非特异性的检测方法，具有操作简便，检测速度快的特点，但是由于非特异性检测的缺陷，容易出现假阳性，而且在梅毒潜伏期、3期梅毒期均容易出现漏检，灵敏度和特异性存在着较大的局限，且手工操作及肉眼判断，受主观因素影响很大。

ELISA方法随着基因重组抗原发展，利用双抗原夹心法既可以检测特异性IgG，又可以检测特异性IgM，相比上世纪90年代产品在灵敏度和特异性上均得到了很大的提高，而且ELISA实验过程可以依靠于仪器进行自动化操作及判读，可减少手工操作的影响，而且利于结果的保存［3］。

但对于梅毒患者及治愈者，特异性的TP抗体会持续出现，甚至携带终生，ELISA阳性只能说明正在感染或者已经感染过，不能判断梅毒活动与否，作为临床梅毒诊断，不能作为疗效的检测方法［1］。

本实验中，RPR阳性且ELISA阳性的样本用TPPA确认均为阳性，RPR阳性但ELISA阴性的5份样本中，TPPA确认阳性的为1份，阴性4份；ELISA阳性但RPR阴性的37样本中，TPPA确认阳性的为30份，阴性7份，说明RPR的假阳性及假阴性情况均比ELISA高，作为无偿献血员的梅毒抗体筛查，RPR已经不太适用。

TPPA方法是目前公认的较好的梅毒抗体的确认方法，具有很高的灵敏度和特异性，但是试剂成本高，手工操作繁琐，而且需要依靠肉眼判断，受主观影响大，结果不利于保存和查阅［4］。

对于血站进行无偿献血员的筛查，ELISA方法已经非常普遍，而且随着ELISA的自动化程度的提高，已完全可以满足无偿献血员梅毒抗体筛查的需要。

因此，ELISA方法是目前最适合作为无偿献血员梅毒抗体筛查的检测方法。

参考文献
［1］王培华.输血技术学［M］.2版.北京:人民卫生出版社，2002:103-116.
［2］申静，元晋江.常用的梅毒抗体的检测方法［J］.中华中西医学杂志，2005（12）:72-73.
［3］孙业富.某些自身免疫性抗体对TP-ELISA试验干扰的观察［J］.江西医学检验， 2003（5）:371-372.
［4］邹黎.梅毒血清学试验几种检测方法比较［J］.实用医技杂志，2006（21）:3788.。