长白山杜鹃花基因组DNA提取及RAPD体系的建立

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【总页数】4页(P254-257)
【作 者】庄得凤;曹后男;周兰;徐颖;何伟;黄岳
【作者单位】延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400;延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400;延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400;延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400;延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400;延边大学农学院园艺系,吉林,龙井,133400
【正文语种】中 文
【中图分类】S685.21;Q78;Q503
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长白山杜鹃花基因组DNA提取及RAPD体系的建立
庄得凤;曹后男;周兰;徐颖;何伟;黄岳
【期刊名称】《湖北农业科学》
【年(卷),期】2008(47)3
【摘 要】采用改良的CTAB法提取杜鹃花的基因组DNA,所得的DNA纯度高、质量好,可用于RAPD分析.筛选出的杜鹃花RAPD反应的最佳体系为25μL反应体系中包括模板DNA20~200ng.引物10pmol,dNTPs100μmol·L-1,TaqDNA聚合酶0.5U,Mg2+2.5 mmol·L-1,10xbuffer缓冲液2.5 mmol·-1,其余部分用无茵超纯水补充.PCR扩增程序为94℃预变性5 min;94℃变性1 min,37℃退火1min,72℃延伸2min,40次循环;72℃最终延伸7min.应用优化后的反应体系PCR扩增获得的RAPD指纹图谱带型清晰,重复性好,为长白山杜鹃花品种鉴定、分类的研究提供了一定基础.
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