地克珠利在鲫体内的药代动力学研究

合并乙腈层于 D" m氮气吹干加 ! N\流动相溶解 残留 物 后 加 #" N\正 己 烷 去 脂 流 动 相 层 过 "7GD N滤膜待 SW\&检测
!#I"标准曲线的制备
每箱放鲫 ?" 尾控制水温为!D p# m不间断充气
准确称取地克珠利标准品 #" NK置 #"" N\容
%%地克珠利 4(M21b0-(2 属于三嗪苯乙腈化合物是 由比利时 61)++*) 公司于 #@FA 年研制开发的一种高 效广谱抗球虫药# 因其高效广谱低毒性而在畜 牧业生产中广泛使用! 在水产养殖业中也用于防 治鲤科鱼类球虫黏孢子虫等孢子虫病? 由于这 类药物作用时间短在生产养殖中会被长期重复用 药不合理用药或未严格遵守休药期在动物体内产 生药物残留进而通过食物链传递危害消费者健康 #@@F 年 ,I=BYS= 食 品 添 加 剂 联 合 专 家 委 员 会 6V&,I 研究了地克珠利在兔体内的毒物代谢动力 学和 致 畸 性 实 验 发 现 地 克 珠 利 在 高 剂 量 # !F" NKBXKO7d74 时 具 有 致 畸 性 大 于 ?!" NKBXKO7d74时有胎儿毒性但无致畸性G 目 前地克珠利在家兔鸡组织中的残留和消除规律研 究报道较多D E#D 而在水产养殖上的应用研究较少 杨丽萍等## E#! 研究了地克珠利在家兔组织中的残留 及消除规律发现地克珠利在肾脏中残留量最高且 在肾脏中消除速度最快 张可煜等#D 研究了单次给 药后雏鸡体内地克珠利的血药浓度结果表明地克
对空白 血 浆 样 品 在 "7"D "7#" 和 "7D" NKB\ ? 个浓度水平空白肌肉在 "7"D"7#" 和 "7D" NKBXK ? 个浓度水平上进行精密度实验按 #7G 方法进行样 品前处理后每 ! 小时测定一次平行测定 D 次计算 日内变异系数 每天测定 # 次平行测定 D 次计算 日间变异系数
珠利在雏鸡体内吸收比较快消除缓慢 据报道国 内外已制定出畜禽组织中地克珠利的最高残留限量 J_\ 欧盟药品管理局 _*K0213(9) V& ;9!?$$ B @" 规定地克珠利在羊兔禽肌肉中的最高残留限量 为 D"" KBXK中国农业部公告 !?D 号也规定了地克珠 利在禽 肌 肉 中 的 最 高 残 留 限 量 为 D"" KBXK#A E#F !"#? 年 ? 月欧洲兽用药品管理委员会 &8JW 在 报道#@ 中指出由于没有用于检测有鳍鱼类肌肉中地 克珠利残留量的方法因而无法制定地克珠利在有鳍 鱼类肌肉组织中的最高残留限量 因此目前国内外 均未制定地克珠利在鱼体组织中的最高残留限量 且国内仅见刘永涛等!" 建立了地克珠利在鱼体组织 中残留量的超高效液相色谱检测方法 为此本实验 利用高效液相色谱法测定鲫体内的地克珠利浓度研 究其在鲫体内的药代动力学规律为鲫养殖过程中合 理使用该药提供理论依据并为地克珠利在其他水产 品中残留量的测定药代动力学研究及其在鱼体组 织中的最高残留限量的制定提供技术支持
!#Q"数据分析
将鲫血浆与肌肉样品中地克珠利药 E时曲线采 用 Wa529c*-#7" 药动学软件进行药物动力学模型拟 合及参数计算
心管中加入 D N\乙腈 l氯仿@ l#<B< 再分别加 入 &#F 粉 中 性 氧 化 铝 各 !"" NK 漩 涡 混 合 ? N() D """ -BN()离心 D N() 后取上清液于 D" m氮气吹
地克珠利在鲫体内的药代动力学研究
林丽聪# 樊海平#廖碧钗! 钟全福# 林煜#
#7福建省淡水水产研究所!7福建省水产技术推广总站福建 福州 ?D"""!
摘要在!D p# m水温条件下按照鲫体质量为 ?7" NKBXK的剂量混饲投喂地克珠利每天 # 次连用 D 4并于第 D 天投喂后 "7D##7D!?D$#"#!#D#F!G?AGF$!#!"!G"?A"GF"$!"# "F"# GG"! #A"! FF"? A"" ' 采 集鲫的血浆和肌肉样品用高效液相色谱法测定血浆和肌肉中的药物浓度研究了地克珠利在鲫体内的药代动力学 特征 结果表明鲫混饲投喂地克珠利后其血浆和肌肉中地克珠利经时过程均符合一级吸收二室开放模型其理论 方程分别为 9血浆 n@7F@*EA7$#"VE?"H?7AA*E@7"GVEG"E"7$G*EG7?$@"9肌肉 n#7"!A*EA7?$@VE!"H"7#""#*E#7D?VE!"E#7F!*ED7DAA" 鲫血浆和肌肉的达峰时间 FN1^ 分别为 ##7## 和 ##7"" '峰浓度 9N1^ 分别为 ?"7DF 和 #7#"F NKB\药时曲线下面积 Ii& 分别为 #A $F? 和 !"7"D NKB \' 消除半衰期 F#B! 分别为 F!$7AGD7G# ' 实验结果表明地克珠利在鲫 体内代谢缓慢 本研究为鲫的实际养殖过程中合理使用地克珠利提供理论依据同时也为地克珠利在其他水产品中 残留量的测定及药代动力学的研究提供技术支持 中国渔业质量与标准!"#$$# #A E!# 关键词地克珠利鲫药代动力学高效液相色谱 中图分类号5@G%%%文献标志码I%%%文章编号!"@D E#F??!"#$"# E""#A E"D
增氧 实验开始前一周停止投饵 饵料购自福州海 马饲料有限公司经检测无地克珠利残留 地克珠 利标准品 含量为 @@7@T 购自中国兽医药品监察 所地克珠利原料药 含量为 @F7"T 由重庆西南合 成药业提供乙腈为色谱纯其他试剂均为分析纯
!#$"实验设计及采样
#7!7#%饵料的制备 准确称取地克珠利原料药 #7" K加适量二甲亚
$#$"标准曲线及最低检测限
将 #7D 实验结果以峰面积 & 对质量浓度 5 作 标准曲线获得线性回归方程及相关系数 表 # 结 果表明鲫血浆在 "7"D UD7" NKB\线性范围内肌肉 在 "7"D UD7"" NKBXK线性范围内地克珠利线性关
系良好 以引起 ? 倍基线噪音的药物浓度为最低检 测限血浆中地克珠利的最低检测限为 #" KB\定 量限为 G" KB\肌肉中的最低检测限为 #" KBXK 定量限为 G" KBXK
!"#$ 年 # 月
中国渔业质量与标准
61)7!"#$
第 $ 卷%第 # 期
&'()*+*,(+'*-./012(3.1)4 531)41-4+
892:$%;9:#

<=>#"7?@A@ BC7(++)7!"@D E#F??7!"#$7"#7""?
$"结果与分析
$#!"高效液相色谱图
干残余物加 # N\流动相溶解离心过 "7GD N滤
在本实验选定的色谱条
为 #D7# N() 左右且峰形尖锐对称 空白血浆和肌
#7G7!%肌肉样品
肉中均无地克珠利峰 见图 #
% #F
中国渔业质量与标准
!#J"回收率和精密度
#7A7# 回收率的测定 在空白样品中分别添加适量地克珠利标准溶液
配制成含地克珠利分别为 "7"D"7#" 和 "7D " NKB\ 的血浆样品和 "7"D"7#" 和 "7D" NKBXK肌肉样品 每个添加水平 D 个重复按 #7G 方法进行样品前处 理考察方法的回收率 #7A7!%精密度的测定
!#&"样品处理
#7G7#%血浆样品 血浆样品解冻后准确吸取 # N\置于 #D N\离
量瓶中加乙腈溶解并定容使用时根据实验要求用 流动相稀释至所需浓度的标准溶液 在 # N\空白血 浆中加入适量已知浓度的标准溶液使血浆中地克珠 利浓度分别为 "7"D"7#""7!""7D"#7""!7"" D7"" NKB\在 !7" K空白肌肉中加入适量已知浓度 的标准溶液 使肌肉中地克珠利含量分别为 "7"D "7#""7!""7D"#7""!7"""7D" NKBXK按 #7G 方 法处理并检测后得到血浆和肌肉样品的标准工作曲 线回归方程和相关系数
收稿日期!"#A E"A E#D接收日期!"#A E#" E#D 资助项目 现代农业产业技术体系建设专项资金 &I_5 EGA E?D 作者简介林丽聪#@F! E 女硕士高级工程师研究方向为水产品药物代谢动力学与质量安全 2()2(M9)KF!L#A?7M9N 通信作者樊海平研究员研究方向为水产养殖动物病害防治P1)'1(R()K#AL#A?7M9N
!"#$ 年

图 !"不同样品中地克珠利色谱图
I地克珠利标准品"7D NK \E# Q 在 空 白 血 浆 中 添 加 了 地 克 珠 利 "7D NK \E# & 空 白 血 浆 < 在 空 白 肌 肉 中 添 加 了 地 克 珠 利 "7D NKXKE# V空白肌肉,在空白肌肉中添加了地克珠利 定量限为 G" KXKE#
第# 期
% 林丽聪等地克珠利在鲫体内的药代动力学研究
#$

肌肉样品解冻匀浆准确称取 !7" K于 D" N\
!"材料与方法
离心管中加入 ! K无水硫酸钠和 G N\乙腈涡旋振
荡 D N()D """ -BN() 离心 ? N() 后吸取乙腈层到
!#!"实验材料
#D N\离心管中残渣再加 G N\乙腈重复提取 # 次
鲫9#-#,,0+,#+-#"+,?"" 尾平均体重为#D" p !" K由福建省淡水水产研究所榕桥中试基地提供 经抽样检测组织中无地克珠利残留 于 #" 个不锈 钢水族箱 每个箱体积为 ?"" \放水 !"" \ 中饲养
砜溶解加水对倍稀释至 #"" N\均匀喷至 #7" XK饵 料上D" m烘干饵料表面再喷一层花生油烘干 #7!7!%给药及样品采集
称取鱼体重按 ?7" NKBXK投饵量投喂每天投 喂 # 次连续投喂 D 4 并于第 D 天投喂后 "7D# #7D!?D$#"#!#D#F!G?AGF$!#!"!G" ?A"GF"$!"# "F"# GG"! #A"! FF"? A"" ' 采集 血浆和肌肉样品每个采样点采 #" 尾鱼D 个平行 血浆肌肉于 EF" m保存备用
!#%"色谱条件
高效液相色谱仪型号为 IK(2*)3#!""带有多波 长紫外检测器 色谱柱为 VM2(R+*h<QE&#F G7A q !D" NND N流动相为乙腈磷酸溶液# l#<B< 其中磷酸溶液由 ?7G N\磷酸加水稀释至 # \而成 流速为 #7" N\BN()柱温为 ?" m紫外检测波长为 !G" )N进样量为 D" \
K:6#!"D315<095610</57>:2;0RA1:;57>:77.1.=9/0<4;./
I ['*+31)41-4 9P4(M21b0-(2"7D NK\E# Q ['*O21)X R21+N1144*4 4(M21b0-(2"7D NK\E# & ['*O21)X R21+N1< ['*O21)X N0+M2* 144*4 4(M21b0-(2"7D NKXKE# V ['*O21)X N0+M2* , ['*O21)X N0+M2*144*4 4(M21b0-(2 ]01)3(P(M13(9) 2(N(3 G" KXKE# 7