实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41

实验十四血清白蛋白测定（溴甲酚绿法）
一、实验目的与要求
1 了解血清白蛋白（albumin）在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。

2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。

二、实验原理
在具有表面活性剂的酸性环境中，血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合，形成绿色。

最高吸收峰628nm，颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。

三、实验仪器与试剂
1 仪器
（1） AT648半自动生化分析仪1台；
（2）四孔恒温水浴锅1个；
（3）振动摇床1台。

2 分组与仪器2人一组，每组仪器包括：
（1）试管架1个；
（2） 2ml试管10个；
（3）可调微量加样器1个；
（4） 1ml移液管1个；
（5）吸耳球1个；
（6）搪瓷盘1个；
（7）微量加样滴头；
（8）吸水纸。

3 本试剂盒内含2种试剂：
（1）溴甲酚绿试剂100ml×3瓶；
（2）白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。

四、实验步骤
1 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表141系列反应管中所加溶液的量
空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.00
2 以上各管充分混匀,室温放置10min。

3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。

五、实验结果与分析
A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度（g/L）＝血清白蛋白（g/L）线性范围：在0~60g/L范围内线性良好。

六、实验报告
参照《营养学》、《生物化学》原理分析。

七、注意事项
1 试剂为空白对照；
2 每组样品做2～3个平行实验；
3 正常参考范围： 55～75g/L。