细胞污染原因和处理

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细胞污染原因和处理
养成良好的无菌操作的习惯拿70%酒精擦手,擦超净台,擦培养瓶,擦培养基瓶,各种瓶子的口多拿火焰烧灼。

就不再会发生细菌污染。

决定要进行细胞培养,首先一定要有强烈的无菌意识!操作中要求自己遵守严格的操
作规程,不要怕麻烦,越细心越好,越“罗嗦”越好!
我辨认出在抽取须要非政府时,往往头会距离非政府很将近,所以拎口罩很关键!还
要换无菌衣(紫外Ramanathapuram的白大褂)
另外,每次开始实验前,先用紫外照无菌台和实验室20分,用酒精擦手,台面,不
消毒的器械(如移液枪,冰块等);实验中,如允许,尽量多过火,开起或盖盖都靠近火
焰或在无菌台深处进行;使用无菌台后,再用酒精擦全台面,紫外照20分!
除了,努力做到绝对无菌,那不可能将!但我们可以努力做到最大限度的增加含菌量!采用回去的东西尽快抽走无菌台!另外无菌台上的器械,试剂放置,也尽量遵从一定的顺序!依污染可能将程度依次向外挂。

1.滴管不要接触瓶口,吸取废液及加入新鲜培养基时都要注意不要滴在瓶口上等等。

2.凡是碰触瓶口后都必须用酒精灯烧烧。

3.初学者一般可以用培养瓶养细胞,个人认为瓶污染的机率要比皿小。

4.特别注意酿制全然培养基时不要出现污染,在采用前一定必须搞无菌培育,因为通
常应用领域污染后的培养基培育细胞后,很快就可以出现特别轻微的污染。

2.1.注意喷酒精装置的应用:制作很简单,用过的化妆品,理发店理发前往头发上喷
水的瓶子及其他一些有喷水功能的瓶子,经过处理装上百分之75的酒精就可以了(我不
知道有没有实验专用喷洒酒精的瓶子,如果有那就更好了)。

我用的是师姐留下来的一种
护肤品的瓶子。

常常往超净台台面,手上喷洒酒精,效果很好。

2。

我步入细胞培养室就穿上pe手套(一次性塑料薄膜手套),当在无尘室台操作方
式时穿上一次性橡胶手套。

3。

培养箱内水盘里的水,用灭菌的超净水,每周更换一次(至少也要两周换一次)。

换水前要用百分之75酒精消毒。

水浴箱也要定期消毒(用百分之75酒精)换双蒸水。

4。

从培育箱内挑东西前手一定必须擦酒精,动作必须慢,可以先看淡了,林宏吉的
东西在那里,然后慢挑。

显微镜下观赏细胞时间也不要过久,否则可以对细胞存有有利影响。

5。

很多人喜欢常规用抗生素,其实除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。

当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。

血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。

在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。

6。

液体培养基储藏于4℃冰箱,实验展开前放到37℃水槽中风寒。

风寒前后特别注意酒精消毒。

7。

用离心法从动物身上取细胞时,其离心速率不要超过1000转/分钟(很多文献上都大于这个数值,但记住不要超过1000),时间一般不超过10分钟,否则会造成细胞死亡。

8。

抽出冷冻管后,通常就是放进37°c水槽中快速鞭叶。

我按着师姐的经验都就是放进38°c的水中,上面一些战友提及了39和40°c,不晓得效果如何,期望多多交流,期望其他战友如果也存有不同于37°c的,恳请多多回帖,互相交流。

在水中晃动冷冻管的时候水不要浸瓶盖。

9。

在超净台内,瓶盖口应该朝下放。

我们知道,用酒精灯的火烧一下,不是为了杀菌,主要是形成向上的气流,防止空气中的细菌落下,如果这样的话,那么瓶盖口向上就不对了,所以瓶盖口应该向下放,但应该注意超净台的酒精消毒。

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