冠心病病人血清lncRNA_XIST和miR-1197水平变化及其与冠状动脉CTA钙化积分的相关性

冠心病病人血清lncRNA XIST和miR-1197水平变化及其与冠状动脉CTA
钙化积分的相关性
康美丽,孙静,石丽媛
摘要目的:探讨冠心病病人血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)㊁微小RNA-1197(miR-1197)表达情况及其与冠状动脉CT血管造影(CTA)钙化积分(CACS)的相关性㊂方法:选择2019年4月 2021年12月在我院接受检测拟诊为冠心病的病人143例为观察对象,将75例冠心病病人作为冠心病组,68例非冠心病病人作为对照组,冠心病组冠状动脉单支病变17例㊁双支病变35例,多支病变23例,收集所有受试对象性别㊁年龄㊁血清炎性因子水平等临床资料,采用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测血清lncRNA XIST㊁miR-1197相对表达量,Pearson分析血清lncRNA XIST与miR-1197水平及lncRNA XIST㊁miR-1197水平与CACS评分㊁血清炎性因子的相关性㊂结果:冠心病组病人血清C-反应蛋白(CRP)㊁白细胞介素-6(IL-6)㊁肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及lncRNA XIST表达水平高于对照组(P<0.001),miR-1197表达水平低于对照组(P<0.001);与单支病变组比较,双支病变组㊁多支病变组病人血清lncRNA XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低(P<0.001);与双支病变组比较,多支病变组病人血清lncRNA XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低(P<0.001);相关性分析结果显示,冠心病病人血清lncRNA XIST水平与CACS评分㊁CRP㊁IL-6㊁TNF-α呈正相关(P<0.001),miR-1197水平与CACS评分㊁lncRNA XIST㊁CRP㊁IL-6㊁TNF-α呈负相关(P< 0.05)㊂结论:冠心病病人血浆lncRNA XIST水平升高,miR-1197水平降低,与冠状动脉CTA钙化积分相关,可作为评估病情严重程度的标志物㊂
关键词冠心病;长链非编码RNAX染色体失活特异转录本;微小RNA-1197;血浆;冠状动脉CTA钙化积分
d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.14.022
冠心病是由动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)引起血管管腔狭窄或阻塞导致的心肌缺血性疾病,主要表现为胸闷㊁胸痛㊁心肌梗死等,多发于老年人,其发生率与死亡率逐年增加,因此,准确㊁有效评估冠心病病人病情并及时治疗具有重要意义[1-2]㊂长链非编码RNA(lncRNA)可参与调控血管再生㊁血管内皮细胞功
能,在心血管疾病中发挥重要作用,长链非编码RNAX 染色体失活特异转录本(lncRNA X chromosome inactivation specific transc ript,XIST)属于lncRNA,可通过调控心肌细胞的增殖与凋亡促进心肌梗死[3]㊂韩虎魁等[4]研究显示,慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)病人血浆lncRNA XIST表达水平升高,与病人B型利钠肽(B type natriuretic peptide,BNP)水平及左心室射血分数有关,是CHF病人预后的独立影响因素㊂微小RNA-1197(miR-1197)在肿瘤中异常表达,参与肿瘤细胞的增殖㊁凋亡[5],通过生物信息学(starbase)分析显示,lncRNAXIST与miR-1197有靶
基金项目2021年廊坊市科学技术研究与发展计划基金项目(No. 2021013144)
作者单位河北中石油中心医院(河北廊坊065000),E-mail:kmly6325 @
引用信息康美丽,孙静,石丽媛.冠心病病人血清lncRNA XIST和miR-1197水平变化及其与冠状动脉CTA钙化积分的相关性[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(14):2652-2655.向结合位点,推测miR-1197可能与冠心病有关,冠状动脉CT血管造影(CTA)可明确诊断冠心病,钙化积分(coronary artery calcification scores,CACS)是评估冠状动脉粥样硬化的指标[6]㊂本研究检测冠心病病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197表达情况,探讨lncRNA XIST㊁miR-1197水平及其与冠状动脉CTA钙化积分的相关性㊂
1资料与方法
1.1一般资料
选择2019年4月 2021年12月在我院接受检测拟诊为冠心病的病人143例为观察对象,男83例,女60例,年龄45~78岁,确诊为冠心病的75病人例作为冠心病组,68例非冠心病病人作为对照组,其中冠心病组冠状动脉单支病变17例,双支病变35例,多支病变23例㊂纳入标准:所有病人均行CTA检查;冠心病均为首次发病,且经冠状动脉造影明确诊断,符合冠心病的诊断标准;病人临床资料完整㊂排除标准:合并瓣膜性心脏病㊁心律失常等心脏相关疾病史或治疗史;合并感染性疾病㊁肝肾功能不全等;合并恶性肿瘤㊁风湿免疫性疾病者㊂
1.2主要试剂与仪器
Trizol试剂(15596018)购自Invitrogen公司, miScript Reverse Transcription Kit(218061)㊁miScript SYBR Green PCR Kit(218075)购自德国Qiagen公司,ABI7500实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检
测仪购自美国ABI公司㊂
1.3研究方法
1.3.1血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平检测
采集所有观察对象入院后空腹静脉血5mL, 3000r/min,离心半径10cm,离心10min后采集血清,置于-80ħ冰箱保存待检㊂采用RT-qPCR检测血清lncRNA XIST㊁miR-1197相对表达量,Trizol 试剂提取血清总RNA,使用miScript Reverse Transcription Kit逆转录成cDNA后,按照试剂盒说明进行RT-qPCR扩增,lncRNA XIST正向引物序列:5'-GCATAACTCGGCTTAGGGCT-3',反向引物序列:5'-TCCTCTGCCTGACCTGCTAT-3';miR-1197正向引物序列:5'-GGACACATGGTCTACTTC-3',反向引物序列:5'-GAACA TGTCTGCGT A TCTC-3';分别以GAPDH㊁U6为内参,采用2-әәCt法计算lncRNA XIST㊁miR-1197相对表达量㊂
1.3.2CACS评分
对所有病人进行冠状动脉CTA检查,采用西门子SOMATOM Definition AS128层螺旋CT机进行扫描,选择最清晰图像血管显影行图像重建,根据Agatston 积分法[7],计算右冠状动脉㊁左主干㊁左前降支㊁左回旋支的钙化积分,并计算总CACS积分值㊂1.3.3其他资料收集
收集两组观察对象年龄㊁性别㊁高血压㊁糖尿病㊁吸烟史㊁高脂血症等临床资料及血清炎性因子C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)㊁肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)㊁白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平㊂
1.4统计学处理
采用SPSS25.0统计软件分析数据,符合正态分布的定量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,两组间比较行t检验,多组间比较使用单因素方差分析;定性资料用频数㊁百分比(%)表示,组间比较采用χ2检验, Pearson相关性分析血清lncRNA XIST与miR-1197水平及lncRNA XIST㊁miR-1197水平与CACS评分㊁血清炎性因子的相关性,以P<0.05为差异有统计学意义㊂
2结果
2.1两组临床资料及血清炎性因子水平比较
对照组与冠心病组在年龄㊁性别㊁吸烟史㊁高血压㊁糖尿病㊁高脂血症方面比较差异无统计学意义(P>0.05),冠心病组血清CRP㊁IL-6㊁TNF-α水平高于对照组(P<0.001)㊂详见表1㊂
表1两组临床资料与血清炎性因子水平比较
组别例数年龄(岁)
性别(例)
男女
吸烟史[例(%)]高血压[例(%)]糖尿病[例(%)]
对照组6861.21ʃ10.50412722(32.35)33(48.53)29(42.65)冠心病组7559.80ʃ10.70423327(36.00)43(57.33)40(53.33)统计值t=0.794χ2=0.270χ2=0.211χ2=1.110χ2=1.631 P0.4290.6030.6460.2920.202组别高脂血症[例(%)]CRP(mg/L)IL-6(ng/L)TNF-α(ng/L)对照组41(60.29) 6.54ʃ1.9171.90ʃ8.2465.42ʃ8.74冠心病组47(62.67)15.23ʃ3.6287.35ʃ11.70123.42ʃ15.36统计值χ2=0.085t=-17.685t=-9.043t=-27.373 P0.771<0.001<0.001<0.001
2.2两组血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平
冠心病组血清lncRNA XIST水平高于对照组(P<0.001),血清miR-1197表达水平低于对照组(P< 0.001)㊂详见表2㊂
表2两组血清lncRNA XIST㊁miR-1197
水平比较(xʃs)
组别例数lncRNA XIST miR-1197对照组68 1.03ʃ0.15 1.05ʃ0.16冠心病组75 2.47ʃ0.520.51ʃ0.10 t值-22.01424.439 P<0.001<0.0012.3不同冠状动脉病变程度病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平及CACS评分
单支病变组㊁双支病变组㊁多支病变组间血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平及CACS评分比较差异有统计学意义(P<0.05)㊂与单支病变组比较,双支病变组㊁多支病变组血清lncRNA XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低(P<0.05);与双支病变组比较,多支病变组血清lncRNA XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低(P<0.05)㊂详见表3㊂
表3不同冠状动脉病变程度冠心病病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平及CACS评分比较(xʃs)组别例数lncRNA XIST miR-1197CACS评分(分)单支病变组17 2.12ʃ0.380.79ʃ0.11180.25ʃ50.34双支病变组35 2.44ʃ0.45①0.51ʃ0.08①322.56ʃ76.55①多支病变组23 2.78ʃ0.47①②0.30ʃ0.06①②486.24ʃ105.31①②F值11.075172.29569.679
P<0.001<0.001<0.001注:与单支病变组比较,①P<0.05;与双支病变组比较,②P<0.05㊂
2.4冠心病病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平与CACS评分的相关性
相关性分析显示,冠心病病人血清lncRNA XIST 水平与CACS评分呈正相关(r=0.518,P<0.05), miR-1197水平与CACS评分呈负相关(r=-0.692, P<0.05)㊂详见图1㊁图2㊂
图1冠心病病人血清lncRNA XIST水平
与CACS 评分的相关性
图2冠心病病人血清miR-1197水平
与CACS评分的相关性
2.5冠心病病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平与血清炎性因子的相关性
冠心病病人血清lncRNA XIST水平与CRP㊁IL-6㊁TNF-α水平呈正相关(P<0.001),miR-1197水平与lncRNA XIST㊁CRP㊁IL-6㊁TNF-α水平呈负相关(P< 0.001)㊂详见表4㊂
表4血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平
与血清炎性因子的相关性分析
指标
lncRNA XIST
r值P
miR-1197
r值P miR-1197-0.523<0.001
CRP0.347<0.001-0.383<0.001 IL-60.403<0.001-0.395<0.001 TNF-α0.413<0.001-0.451<0.001
3讨论
lncRNA在心血管疾病中发挥重要作用,研究显示,lncRNA与冠心病㊁高血压病㊁心脏发育及心脏衰竭等密切相关,lncRNA可参与调节心血管内皮细胞功能,促进AS的形成,与冠状动脉狭窄有关[8]㊂lncRNA XIST为LncRNA之一,位于人X染色体q13.2上,目前对lncRNA XIST的研究主要集中在肿瘤领域,如在肺癌㊁胰腺癌中异常表达[9]㊂研究显示,抑制lncRNA XIST表达可通过增加miR-30c-5p和降低PTEN表达抑制氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)的炎症反应和凋亡[10]㊂刘旭帮等[11]研究显示,lncRNA-XIST在冠心病病人血清表达水平升高,与心功能分级有关,是冠心病心脏事件发生的独立危险因素㊂miRNA可参与氧化应激㊁炎症反应㊁自噬等过程,与冠心病㊁动脉粥样硬化㊁心力衰竭等心血管疾病发生有关[12-13]㊂miR-1197均属于miRNAs,在肿瘤领域研究较多,调控肿瘤细胞增殖㊁迁移与凋亡等[14]㊂最新研究显示,miR-1197可靶向调控COX10表达参与动脉粥样硬化的形成[15]㊂本研究结果显示,冠心病组病人血清lncRNA XIST水平高于对照组,miR-1197表达水平低于对照组,提示lncRNA XIST㊁miR-1197水平变化可能与冠心病发生有关㊂本研究还发现,与单支病变组比较,双支病变组㊁多支病变组病人血清lncRNA XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低;与双支病变组比较,多支病变组血清lncRNA
XIST水平㊁CACS评分升高,miR-1197水平降低,提示冠心病病人血清lncRNA XIST㊁miR-1197水平变化可能与冠状动脉病变程度有关㊂
动脉粥样硬化的形成与血管内皮细胞㊁平滑肌细胞的增殖/凋亡不平衡有关,研究显示,lncRNA XIST 通过作为miR-599的ceRNA增加TLR4的表达,促进血管平滑肌细胞增殖[16]㊂本研究通过相关性分析显示,冠心病病人血清lncRNA XIST与miR-1197水平呈负相关,lncRNA XIST㊁miR-1197有靶向结合位点,提示lncRNA XIST可能靶向负调控miR-1197表达参与冠心病的进展[16]㊂由此可以推测,lncRNA XIST可能通过调节miR-1197表达参与血管平滑肌细胞的增殖,促进动脉粥样硬化的形成,进而发展为冠心病㊂炎症反应是冠心病发生的机制之一,全身炎症反应与血管局部炎症程度与冠状动脉损伤程度有关, CRP是一种急性时相反应蛋白,可直接参与动脉粥样硬化的形成,IL-6水平升高可加重管腔狭窄,与冠状动脉斑块程度有关,TNF-α可激活中性粒细胞使之聚集并阻塞缺血区微血管,引起心肌细胞损伤[17-18]㊂本研究显示,冠心病组血清CRP㊁IL-6㊁TNF-α水平高于对照组,提示病人存在冠状动脉损伤㊂相关性分析显示, lncRNA XIST与CRP㊁IL-6㊁TNF-α呈正相关,miR-1197水平与CRP㊁IL-6㊁TNF-α呈负相关,提示lncRNA XIST㊁miR-1197可反映冠心病病人炎症反应程度㊂CACS 水平可宏观反映冠心病狭窄血管累及支数,与动脉粥样硬化及病变严重程度有关,冠心病病人CACS评分升高[19]㊂本研究显示,冠心病病人CACS评分高于对照组,且血清lncRNA XIST水平与CACS评分呈正相关,miR-1197水平与CACS评分呈负相关,提示lncRNA XIST水平越高㊁miR-1197水平越低,冠状动脉病变程度越严重,检测lncRNA XIST㊁miR-1197水平对判定冠状动病变严重程度具有参考价值㊂综上所述,冠心病病人血浆lncRNA XIST水平升高,miR-1197水平降低,与冠状动脉CTA钙化积分相关,可作为评估病情严重程度的标志物㊂
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(收稿日期:2022-02-16)
(本文编辑王雅洁)。