总胆红素重氮盐法作业指导书

总胆红素（重氮盐法）作业指导书
1：概述
血清中的[胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素。

2标本的收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。

血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。

样本在4摄氏度可稳定7天。

采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。

3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。

不建议采用血浆标本。

3：方法原理
本试剂采用表面活性剂作为增溶剂，样品中结合胆红素和经增溶的未结合胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处吸收值的增加与样品中胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度值的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。

4剂来源，配置及储存
试剂来源：迪瑞
试剂配置：。

试剂一和试剂二按100:1的比例。

即10ml 试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l
测光点0--41 测定模式：1点终点法正反应分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)
6计算方法
总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）
校正管吸光度
7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L
8参考范围成人1.7—21μmol/L
新生儿20—200μmol/L
9 失控控理
1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。

检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。

另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。

如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。

重测失控项目。

用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。

如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

5：胆红素重氮反应对温度敏感，测定时应以恒温。

6：反应形成的色素可稳定1小时。

7国际换算：μmol/L﹡0.585=mg/dl
11临床意义：临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻，当血清总胆红素有很大增高时，人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色，故称黄疸。

当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸，胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。

以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。

以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。

肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。

总胆红素增高，见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。

红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。

先天性胆红素代谢异常（Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征）、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。