常用荧光染料探针列表

流式细胞术中应用的荧光染料介绍

流式细胞术中应用的荧光染料介绍流式细胞术（Flow Cytometry）是一种用于分析和计数细胞的技术。

在流式细胞术中，荧光染料起着至关重要的作用，可以标记细胞的不同成分，使其能够通过流式细胞仪进行检测和分析。

荧光染料通过特定的荧光光谱来发出荧光信号，这些信号被流式细胞仪采集和分析，从而提供有关细胞类型、数量和功能的信息。

以下是几种常见的流式细胞术中应用的荧光染料的介绍。

1. FITC（Fluorescein Isothiocyanate）：FITC是最常用的荧光染料之一，通过与免疫球蛋白G（IgG）结合，可用于免疫细胞表面分子的检测。

FITC在波长为488 nm的激光下激发，发射的荧光信号在525 nm 左右。

它可以与其他荧光染料（如PE或APC）结合使用，以实现多参数流式细胞分析。

2. PE（Phycoerythrin）：PE是一种从红藻中提取的荧光染料，其发射的荧光信号在575 nm左右。

PE通常用于检测细胞表面的抗原或细胞内的蛋白质，如细胞因子。

PE也可以与其他染料结合使用，以实现多参数分析。

3. APC（Allophycocyanin）：APC是一种类似于PE的荧光染料，通过独特的发射波长（约于660 nm附近）和长的荧光寿命来区分。

APC适用于检测多种细胞表面分子和蛋白质，在深色的区域提供了可靠的信号。

5. PE-Cy7：PE-Cy7是PE染料与Cyanine 7（Cy7）结合形成的荧光染料。

它适用于多参数流式细胞术，利用其较长的荧光寿命和波长（激发于488 nm，发射于780 nm左右），可以与其他染料一起使用，以实现更多的细胞表面和内部分子的检测。

除了上述染料外，还有很多其他的荧光染料可以用于流式细胞术。

例如，Alexa Fluor系列、eFluor系列、Brilliant Violet系列等。

这些染料具有不同的光谱特性和荧光强度，可以根据实验需要选择合适的染料。

需要注意的是，在选择荧光染料时，需考虑染料的互相干扰问题和流式仪的激发和检测系统。

real-time PCR 常用仪器和探针

real-time PCR 常用仪器和探针1.SYBR Green I：一种DNA结合染料，能非特异性地与双链DNA结合，结合后发出荧光，价格便宜，但因无特异性，易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响，是定量结果不可靠。

可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增，引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有很大帮助。

2.Taqman探针：也称为水解寡核苷酸探针。

该探针在5’端标记报告荧光基团，在3’端标记淬灭荧光基团，在探针完整时报告荧光基团发出的荧光被淬灭荧光基团吸收，因此没有荧光产生。

在延伸阶段，由于DNA聚合酶具有5’－3’外切酶活性，5’端标记报告荧光基团被水解掉，远离淬灭荧光基团，于是产生荧光信号。

T aqman探针的优点是可以利用多种荧光同时进行多重分析，这是SYBR等DNA结合荧光基团所不具备的优点。

3.分子信标（molecular beacons）：为一发夹结构，环区与目的片段特异性互补，茎区的5’端和3’端分别标有荧光基团和淬灭基团。

自由状态的分子信标呈发夹结构，荧光基团和淬灭基团紧密接触，能量以热的形式消除，不产生荧光。

退火时，发夹结果打开，环区与目的片段特异性互补结合，荧光基团和淬灭基团分开，释放出荧光。

分子信标优于T aqman探针之处是可以检测单个核苷酸的突变，适合于SNP分析和等位基因突变分析。

缺点是设计比较困难，既要避免产生强的背景信号，又要避免茎部杂交过强，影响其与模板的退火，从而影响荧光的生成。

4.杂交探针：是一种新型的荧光探针，由两条探针组成，一条在5’端标记荧光（3’端被封闭，以防止退火后的延伸），一条在3’端标记荧光，其中一个为受体荧光基团，另一个为供体荧光基团，供体荧光基团的发射光谱覆盖受体荧光基团的激发光谱，自由状态时只能检测到供体荧光基团发出的荧光。

退火时两条探针与目的基因特异性结合，形成首尾连接，两个荧光基团互相靠近，供体基团发出的能量激发受体基团发出荧光，检测时只检测受体基团发出的荧光。

流式常用荧光染料概要

如何选择流式细胞仪测定常用的荧光染料
流式细胞仪测定常用的荧光染料有很多种,我们如何来选择流式细胞仪测定的常用荧光染料呢？
首先要考虑，他们分子结构不同,激发光谱和发射光谱也不同,选择荧光染料时，必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长做为重点考虑。

发射光波长，如：氩离子气体激光管,它的发射光波488nm；
氦氖离子气体激光管发射光波长633nm；
488nm激光光源常用的荧光染料有FITC（异硫氰酸荧光素）；
PE（藻红蛋白）
PI（碘化丙啶）
CY5（化青素）
preCP(叶绿素蛋白)
ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。

激发光和发射光波长，如下：
流式细胞仪中常用的荧光染料光学特征以及需要的激光器
流式•细胞仪交流论坛：/forum-181-1.ht ml
荧光染料谱。

荧光检测方法

荧光检测方法荧光检测是一种常用的分析方法，通过检测样品发出的荧光信号来获取样品的信息。

荧光检测方法广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。

本文将介绍荧光检测的原理、常用的荧光探针和荧光检测技术。

一、荧光检测原理。

荧光检测原理是基于样品在受激光照射后发出荧光信号的特性。

当样品受到特定波长的激发光照射后，样品中的荧光探针会吸收光能并发生激发态跃迁，随后再释放出荧光光子。

荧光光子的强度和波长可以提供样品的信息，如浓度、纯度、活性等。

荧光检测原理简单、灵敏度高，因此被广泛应用于科学研究和工业生产中。

二、常用的荧光探针。

1. 荧光染料。

荧光染料是最常用的荧光探针之一，它可以与样品中的特定分子结合并发出荧光信号。

荧光染料具有多种颜色和波长的荧光光子，适用于不同样品的检测需求。

常见的荧光染料有荧光素、罗丹明、FITC等。

2. 荧光蛋白。

荧光蛋白是一类来源于生物体的荧光探针，它可以在特定条件下发出荧光信号。

荧光蛋白具有天然的荧光特性，被广泛用于细胞标记、蛋白质定位、蛋白质相互作用等研究领域。

3. 量子点。

量子点是一种新型的荧光探针，具有窄的荧光发射峰和宽的激发光谱，可以同时发出多种颜色的荧光信号。

量子点具有优异的光学性能和化学稳定性，适用于多种样品的荧光检测。

三、常用的荧光检测技术。

1. 荧光光谱法。

荧光光谱法是最常用的荧光检测技术之一，通过记录样品在不同激发波长下的荧光发射光谱，可以获取样品的荧光特性和信息。

荧光光谱法具有高灵敏度、高选择性和高分辨率的优点，被广泛应用于生物医学、环境监测等领域。

2. 荧光显微镜。

荧光显微镜是一种利用荧光探针标记样品后进行观察和分析的技术。

荧光显微镜可以实现对生物细胞、组织的高分辨率成像，被广泛用于生物医学研究和临床诊断。

3. 荧光免疫分析法。

荧光免疫分析法是一种利用荧光标记的抗体或抗原对特定分子进行检测的技术。

荧光免疫分析法具有高灵敏度、高特异性和高通量的优点，被广泛应用于临床诊断和生物医学研究中。

DiI (细胞膜红色荧光探针)说明书

DiI (细胞膜红色荧光探针)产品编号产品名称包装 C1036DiI (细胞膜红色荧光探针)10mg产品简介：DiI 即DiIC 18(3)，全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate ，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现橙红色荧光。

DiI 是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。

DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。

DiI 被激发后可以发出橙红色的荧光，DiI 和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。

其中，最大激发波长为549nm ，最大发射波长为565nm 。

DiI 的分子式为C 59H 97ClN 2O 4，分子量为933.88，CAS number 为41085-99-8。

DiI 可以溶解于无水乙醇、DMSO 和DMF ，其中在DMSO 中的溶解度大于10mg/ml 。

发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。

DiI 被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。

DiI 通常不会影响细胞的生存力(viability)。

被DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周，在体内可以长达一年。

DiI 在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day ，在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day 。

DiI 除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

用于细胞膜荧光标记时，DiI 的常用浓度为1-25µM ，最常用的浓度为5-10µM 。

免疫分析中常用的荧光染料与标记染色

（⼀）免疫荧光标记最常⽤的荧光染料
最常⽤的染料有FITC和藻红蛋⽩类（PE）及罗丹明等。

FITC（异硫氰酸荧光素）：绿⾊530nm
PE（藻红蛋⽩）：橙黄⾊575nm
PerCP（多甲藻黄素叶绿素蛋⽩）：深红⾊675nm
PI（碘化丙啶）：橙红⾊620nm
488nm波长的氩离⼦激光激发
APC（别藻青蛋⽩）：红⾊660nm
630nm波长的氦氖激光或红⾊⼆极管激光激发
（⼆）免疫荧光标记
常⽤的标记染⾊为直接免疫荧光染⾊和间接免疫荧光染⾊。

在进⾏双参数或多参数分析时，常常需要进⾏荧光抗体的组合标记，⽬前已经有双⾊、三⾊以及四⾊标记。

（三）细胞⾃发荧光
⾃发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会⼲扰对特异荧光信号的分辨和测量。

在免疫细胞化学等测量中，对于结合⽔平不⾼的荧光抗体来说，如何提⾼信噪⽐是个关键。

⼀般说来，细胞成分中能够产⽣⾃发荧光的分⼦（例如核黄素、细胞⾊素等）的含量越⾼，⾃发荧光越强；培养细胞中死细胞／活细胞⽐例越⾼，⾃发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的⽐例越⾼，⾃发荧光越强。

荧光探针的研究及应用

荧光探针的研究及应用随着科技的不断发展，荧光探针逐渐成为生命科学研究领域中不可缺少的重要工具。

荧光探针是一种能够发射出荧光信号的分子，在分子生物学、生物医学和化学生物学等领域中有着广泛的应用。

它们可以被用来研究细胞内的分子相互作用、识别生物分子、分析细胞功能，并可以在体内用作活体成像和药物筛选的工具。

本文将简要介绍荧光探针的基本原理、常见的荧光探针类型和其在生物学研究中的应用。

一、荧光探针的基本原理荧光探针的基本原理是荧光共振能量转移（FRET），其通过将荧光分子与生物分子（生物样品）耦合，使两者之间发生相互作用，从而产生能量转移。

FRET 能量转移是从能量接受者的激发态到另一个分子的荧光染料的发射态的一种非辐射性能量转移。

在FRET中，激发荧光染料的光子会被共振耦合到另一个染料的激发态，从而使其发出荧光光子。

这样，在激发荧光染料的时候，可以用荧光染料的荧光光子来检测另一个染料的存在和位置。

荧光探针对于荧光光子的发射特征和其它的生化参数是很敏感的，所以它们可以被用来探测各种细胞和分子。

二、常见的荧光探针类型1. 荧光染料：荧光染料是最常见的荧光探针类型之一，它们有着广泛的应用，可以被用来标记蛋白质、核酸等生物分子。

常见的荧光染料包括荧光素、草铵膦、偶氮染料等。

2. 荧光蛋白：荧光蛋白是一种具有自发荧光性质的蛋白质，其最早源自于水母Aequorea victoria。

荧光蛋白可以用来跟踪胞内或胞外的重要过程，如蛋白质、核酸合成、信号传递等。

3. 量子点：量子点是一种半导体纳米粒子，具有窄的发射光谱、强的光稳定性和较大的荧光量子产率。

这些特点使得量子点成为新一代高亮度及高灵敏度的荧光探针。

三、荧光探针在生物学研究中的应用荧光探针广泛地应用于细胞内信息传递、化学生物学、生物传感、药物筛选和临床诊断等方面。

以下为举几个常见的案例：1. 细胞内信息传递：荧光探针可被用于研究细胞内信号转导、磷酸化和蛋白质相互作用等过程。

常见荧光染料及用途

常见荧光染料及用途《常见荧光染料及用途》荧光染料是一种能够吸收可见光或紫外光，并在吸收能量的激发下发射可见光的化学物质。

它们的应用非常广泛，涵盖了许多领域，例如生物医学、材料科学、环境监测等。

以下介绍几种常见的荧光染料及其主要用途。

1. 墨水蓝(BR)：墨水蓝是一种具有强烈蓝色荧光的染料，常用于生物实验中的DNA染色。

它与DNA结合后能发出强烈的荧光信号，从而在实验中方便地观察和分析DNA的存在和定位。

2. 罗丹明B(RhB)：罗丹明B是一种红色荧光染料，广泛用于组织切片和细胞染色。

它能够与细胞核和胞浆中的核酸结合，以显示细胞和组织的结构，帮助科研人员研究细胞分裂和组织结构变化。

3. 草酸罗丹明G(OG)：草酸罗丹明G是一种绿色荧光染料，主要应用于蛋白质和核酸的定量分析。

在分光光度计中配合荧光检测器使用，可以精确测定溶液中蛋白质和核酸的浓度。

4. 罗丹明110(Rh110)：罗丹明110是一种黄绿色荧光染料，常用于细胞活性检测。

通过与细胞内的酶或细胞膜结合，罗丹明110可以用来评估细胞的活力和存活情况，特别适用于细胞毒性测试和细胞增殖研究。

5. 荧光素(FITC)：荧光素是一种与生物相容性极高的荧光染料，常用于免疫染色和分子生物学实验。

它能与抗体特异性结合，在免疫组化和流式细胞术中用于检测蛋白质的表达以及细胞表面标记。

以上只是常见的荧光染料中的几种，它们的应用还远不止于此。

随着科学技术的不断进步，新型的荧光染料不断问世，为各个领域的研究提供了更多更有力的工具。

通过荧光染料的运用，科学家们能够更好地理解和研究生物、物质和环境，进一步推动科学的发展。

常见细胞核荧光染料

细胞核常用荧光染料有：吖啶橙（Acridine Orange，AO）、溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）和碘化丙啶（Propidium Iodide，PI），DAPI、Hoechst染料、EthD III、7-AAD、RedDot1、2 等等。

透膜的染料如下：AO：具有膜通透性，能透过细胞膜，将核DNA和RNA分别染成绿色和红色，因此使细胞核呈绿色或黄绿色荧光。

EB：一种高度灵敏的荧光染色剂，在标准302nm处激发出橙红色信号。

DAPI：蓝色一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，其与DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，而与单链DNA结合无荧光的增强。

DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高于EB和PI，荧光强度比Hoechst低，但光稳定性高于Hoechst。

Hoechst染料：蓝色一类在显微观察中标记DNA的荧光染料，最常见的两种是Hoechst33342和Hoechst33258。

这两种染料都在紫外350nm处被激发，在461nm处最大发射光附近发射青/蓝色荧光。

与DAPI相比，Hoechst33342加有乙基，具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，并且细胞毒性更小。

RedDot 1染料：红色，超强的细胞核选择性，其光谱相似于Draq?5 和Draq?7。

RedDot?染料可被几种常见的激光激发并可在远红外区激发荧光。

RedDot? 的红色近红外荧光有效的与其他常用荧光探针区分开来。

不透膜的染料，如下：PI：不同通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。

PI作为红色荧光复染剂首选，PI经常与Calcein-AM或者FDA等荧光探针合用，区分死/活细胞。

EthD III、7-AAD、RedDot 2：不能透过细胞膜，但能将坏死细胞区分开来；更适合凋亡坏死实验的检测；细胞核荧光染料（PI DAPI Hoechst33342）细胞核荧光染料PI碘化丙啶（简称PI）是一种常用的细胞核荧光染色剂。

荧光探针分类

荧光探针分类1荧光探针的定义荧光探针是一种能够发出荧光信号的分子或化合物。

它们被广泛用于生物医学、化学、物理学等领域中的实验研究。

荧光探针通过与其他分子相互作用，从而引发荧光响应，使得这些分子的存在和变化可以被检测和监测。

2荧光探针的分类荧光探针根据其化学性质和功能，可以分为以下几类。

2.1光量子收集探针光量子收集探针是一种荧光探针，其光学性质可用于收集和扩散光。

这类探针包括光学增强剂和荧光增强剂，它们能够增强荧光强度，提高荧光信号的检测灵敏度。

常见的光量子收集探针有荧光素、苯酚、二甲苯、甲基化苯、萤石等。

这些化合物具有不同的荧光功效，可以应用于不同的生物医学、化学、物理学等领域中的实验研究。

2.2活细胞荧光探针活细胞荧光探针是一种荧光探针，它们在荧光显微镜下被用来研究和监测细胞活动和功能变化，其中包括染色体、酶活性、代谢过程、细胞膜、细胞器等方面。

常见的活细胞荧光探针有DAPI、莱科黄、荧光素、卡拉曼汀、吧索染色剂、酯化剂等。

它们具有不同的荧光色彩，可以应用于不同的细胞结构、功能研究。

2.3分子探针分子探针是一种荧光探针，它们通过对特定分子的特异性识别和结合，从而发出荧光响应。

这些分子可包括传感器、化学监测设备、分子驱动器等。

常见的分子探针有脱氧腺苷分子探针、萘酰亚胺分子探针、三苯基甲溴酸染色剂、芴酰亚胺染色剂、荧光素等。

2.4磁性-荧光复合探针磁性-荧光复合探针是一种荧光探针，它结合了磁性和荧光性质，在磁场下能够发出非常强的荧光信号，可用于核酸、蛋白质、生物样本和细胞的检测和研究。

常见的磁性-荧光复合探针有铁氧化物纳米颗粒和含荧光标记的核酸分子达成的组合，还有磁性-荧光纳米粒子、磁性-荧光量子点等。

3荧光探针在研究领域中的应用荧光探针在研究领域中被广泛应用，包括但不限于以下几个方面。

3.1生物医学研究荧光探针可以被用于研究生物系统中如分子生物学、细胞生物学、病毒学、医学等方面的生物活动，如药物筛选、细胞膜电位检测、酶活性和代谢监测、肿瘤检测和细胞形态学研究等。

荧光定量PCR中探针的荧光修饰基团

荧光定量PCR中探针的荧光修饰基团1. 荧光定量PCR两种方法荧光定量PCR技术是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量，是一种测定特异的PCR片段含量的方式。

如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA 的含量等。

为了达到高效反应，应将实时PCR应用的引物设计为能生成短的扩增子。

常用的方法有SYBR Green的荧光染料法和TaqMan探针法，两种方法的特点及应用如下表：名称SYBR Green染料法TaqMan探针法引物一对特异性的引物一对特异性的引物和一条探针原理SYBR Green一种DNA结合染料，能非特异地掺入到DNA双链的小沟当中去，在游离状态下，它不发出荧光，但一旦结合到双链DNA中以后，便可以发出荧光。

探针的5’端有一荧光报告基团，3’端有一荧光淬灭基团，当两个基团相互先靠近的时候，由于发生能量传递作用，报告基团不能发出荧光，但随着扩增反应的进行，5’端的报告基团随着探针的水解而脱落下来，不再与淬灭发生能量传递作用，从而能发出荧光，被信号探测器所捕获。

特点从实验成本来讲，SYBR Green是最好的，普通PCR加上一点SYBR Green荧光染料即可，其信号强度也很好，还可以进行融解曲线分析等，但缺点是只能在一个反应管内进行一种PCR反应的检测，出现非特异扩增会影响到定量结果的可靠性与重复性。

由于增加了探针的特异性，因此其扩增曲线反映的就是特异性产物的扩增曲线，不含有非特异性扩增的成分，其敏感性要比SYBR Green高出10倍。

其缺点在于探针成本较高，有时设计的探针并不合适，有造成损失的可能性。

并且要进行较多的实验条件的优化。

扩增长度SYBR Green法不超过500 bp，一般选择250-400bp，过大会影响到PCR扩增的效率，过小则很难通过融解曲线与引物二聚体分开。

TaqMan法的扩增片段都很小，几十或是100多，一般不超过300，通常为80－150bp。

荧光探针在活细胞成像中的应用研究

荧光探针在活细胞成像中的应用研究荧光探针是一种用于活体细胞成像的重要工具，其广泛应用于生物医学研究、药物开发和临床诊断等领域。

本文将探究荧光探针在活细胞成像中的应用研究，包括荧光探针的基本原理、常用的荧光探针分类和其在活细胞中的应用。

一、荧光探针的基本原理荧光探针是一种通过吸收外部光源而发射特定波长的光的物质。

其基本原理是分子在受到激发光源的刺激后，发生能级跃迁，从高能级跃迁到低能级释放出荧光。

荧光探针可以通过与特定的分子靶点相互作用来实现对其进行选择性标记和成像。

二、常用的荧光探针分类及其特点1. 核酸染料类荧光探针核酸染料类荧光探针是一类能够选择性地与DNA或RNA结合并发出荧光的染料分子。

常见的核酸染料类荧光探针包括乙啶溴化物（EtBr）、SYBR Green、DAPI等。

这些荧光探针可以用于核酸分子的定量、定位和检测等应用。

2.pH敏感型荧光探针pH敏感型荧光探针是一类能够根据环境酸碱度变化而改变荧光颜色或强度的探针。

常用的pH敏感型荧光探针有荧光素黄（FLYO）、羟基萘醌（HNQ）等。

这些荧光探针可以用于检测细胞内pH值的变化，从而研究细胞内的酸碱平衡及其与疾病的关系。

3. 钙离子指示剂钙离子是细胞内重要的信号分子，荧光探针可以通过与钙离子结合而发出荧光信号，实现对钙离子浓度和变化的检测。

常用的钙离子指示剂有Rhod-2、Fluo-4等。

这些荧光探针可以用于研究细胞内钙离子信号传导的机制及其与细胞功能之间的关系。

4. 蛋白质标记剂蛋白质标记剂是一类能够与特定蛋白质结合并发出荧光的探针。

常见的蛋白质标记剂有荧光素（Fluorescein）和鲜艳染料（Cyanine）。

这些荧光探针可以用于标记蛋白质在细胞内的分布和转运，从而研究蛋白质功能和相互作用。

三、荧光探针在活细胞成像中的应用荧光探针在活细胞成像中有着广泛的应用。

通过合理选择和设计荧光探针，可以实现对细胞生理、信号传导、代谢活动等过程的实时监测和定量分析。

常用抗体标记荧光染料的选择

1、蓝色（350-450nm处激发）CF 350、Alexa Fluor 350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发。

CF350是类似于Alexa Fluor 350和传统荧光染料AMCA的蓝色荧光染料，CF350的荧光强度高于Alexa Fluor350、AMCA，吸附在蛋白上的荧光超过50%，水溶性更好，耐光性非常优秀亮，更容易与现有的绿色荧光基团区分。

CF 405S/ CF 405 M、Alexa Fluor 405 ----近乎完美的匹配蓝色二极管激光器。

CF 405S/ CF 405 M、Alexa Fluor 405与近来使用的荧光显微镜和流式细胞仪405nm;谱线的蓝色二极管激光器完美的匹配。

在流式细胞仪上的分析结果显示CF 405S/ CF 405 M荧光信号强度高于Alexa Fluor 405染料1.7倍。

2、绿色（488nm处激发）CF 488A、Alexa Fluor 488、FITC、FAM、DyLight 488、Cy2等----针对488nm 氩离子激光器的绿色荧光染料。

以上染料其标记的抗体蛋白适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪，流式细胞仪的FL1通道检测，或者可用于荧光显微镜技术。

CF 488A最低限度的带电量降低了与抗体耦联物的非特异性结合，在红色通道溢出少于Alexa Fluor 488，耐光性好、水溶性好和pH 不敏感，良好的稳定性和活性染料的标记率。

Alexa Fluor 488在较宽的PH值范围内保持稳定（PH4~10）；FITC激发波长488nm，最大发射波长525nm，缺点：荧光强度易受PH值影响，PH值降低时其荧光强度减弱。

3、橙红色（543-555nm处激发）CF 543、Alexa Fluor 546、ATTO550, Cy 3, DyLight 549, Rhodamine (TRITC) 匹配543nm的橙色荧光染料；CF ™543 荧光条带明亮，耐光，水溶性好，确保了CF 543染料与抗体的耦联物保持优异的水溶性，为该波段最亮的橙色荧光染料。

常用荧光染料探针列表

这是来自于Salk的一个比较全的荧光染料列表，这些荧光染料可广泛用于流式细胞术以及荧光显微镜技术，汇集了各种荧光染料的特性，方便大家查找。

可根据实际所用的检测平台、染料的最大激发光波长和最大发射光波长来选择合适的荧光染料用于实验。

请注意这上面所显示的颜色可能会由于所用浏览器不同而有所不同，他们只是一个与实际颜色的近似值。

Ex: Peak excitation wavelength (nm)
Em: Peak emission wavelength (nm)
QY: Quantum yield
BR: Brightness; Extinction coefficient * Quantum yield / 1000 PS: Photostability; time to 50% brightness (sec)
光色波长λ(nm)代表波长
红（Red）780～630700
橙（Orange）630～600620
黄（Yellow）600～570580 绿（Green）570～500550 青（Cyan）500～470500 蓝（Blue）470～420470 紫（Violet）420～380420。

常用荧光染料及应用领域

617nm 461nm 500-550nm 570-620nm 509nm/540nm —— —— —— —— ——
2
3
蛋白质、酶、 RITC（四甲基异硫氰基罗丹明）抗体的检测绿色荧光蛋白（GFP） 6-羧基荧光乙酰乙酸（CFDA）， FITC JC-1、Rhodamine123、SPMI NBD ceramide、BODIPY ceramide 细胞结构检测 Dil DAMP、neutral red
常用荧光染料及应用领域
序号应用领域燃料名称吖啶橙（AO） 1 DNA和 RNA检测激发波长 492nm 发射波长 530/640nm
碘化丙啶（PI） Hoechst/DAPI FITC（异硫氰酸荧光素）
536nm 325nm 488nm 561nm 395nm/479nm —— —— —— —— ——
料及应用领域
特性用激光共聚焦显微镜双通道观察可见；活细胞的胞核呈黄绿色荧光，胞质呈绿色荧光；死细胞呈红色荧光 PI不能进入完整的细胞膜，常用于检测膜损伤、细胞凋亡、细胞核定位、核酸定量等。对细胞毒性小，特异性强。不与DNA特异性结合能够结合细胞内总蛋白质，是检测蛋白质最常用的荧光探针，它还能广泛地结合各种特异性的配体。光照下易淬灭。常用的共价标记探针，稳定性高跟踪活组织或细胞内基因表达及蛋白质定位的标记物 FRAP技术线粒

生物荧光探针

生物荧光探针生物荧光探针是一种在生物学研究和生命科学应用中常用的工具。

它可以通过发射和接收荧光信号来监测和观察生物体内的特定分子、细胞或组织。

生物荧光探针的设计和应用广泛，对于疾病诊断、药物研发以及生物过程的理解具有重要意义。

一、生物荧光探针的原理生物荧光探针的原理基于化学荧光及生物分子的相互作用。

它通常由一个荧光团和一个具有特定亲和力的信号基团组成。

荧光团可以是天然的生物染料，如荧光素、罗丹明B等，也可以是人工合成的荧光分子。

信号基团则根据需要选择，可与靶分子特异性结合，以实现对靶分子的特定识别或监测。

二、生物荧光探针的分类根据应用领域和适用范围的不同，生物荧光探针可以分为多种类型。

常见的分类主要有以下几种：1.荧光染料类探针：荧光染料类探针是指直接采用荧光染料作为荧光团设计的探针。

这种探针广泛用于细胞和分子生物学研究中，可以标记蛋白质、核酸等生物分子，并通过荧光显微镜等技术进行观察和分析。

2.荧光蛋白类探针：荧光蛋白类探针是利用天然或经过改造的荧光蛋白作为荧光团的探针。

荧光蛋白具有发达的光学性质，能够在活细胞中实时观察和追踪特定蛋白质或细胞的动态过程。

3.量子点类探针：量子点是一种纳米级半导体颗粒，具有独特的光学特性和调控性能。

量子点类探针可以通过改变其表面配体而实现与靶分子的特异性结合，具有较高的荧光产量和较长的荧光寿命，适用于生物荧光成像和检测。

三、生物荧光探针的应用生物荧光探针在生命科学研究和医学应用中具有广泛的应用价值。

以下列举几个常见的应用领域：1.细胞成像：生物荧光探针可以标记特定蛋白质、细胞器或细胞结构，通过荧光显微镜等技术实时观察和追踪细胞的形态和功能变化。

2.分子探测：生物荧光探针可以特异性地结合目标分子，用于检测生物体内的特定代谢产物、信号分子等，从而实现对生物过程的深入研究。

3.药物筛选和评估：生物荧光探针可用于药物靶点的筛选与评估，帮助研究人员了解药物的作用机制和效果。

荧光标记的染料法和探针法

荧光标记的染料法和探针法荧光标记的染料法和探针法，听起来是不是有点晦涩难懂？但其实说白了，这就是两种非常有趣、非常有用的实验方法，专门用来“追踪”和“观察”细胞或者分子里面的神奇世界。

要是用大家能听懂的语言解释，就是这些方法让我们能看到一些平时眼睛看不见的小东西——细胞里发生了什么，某个特定的分子在不在，甚至它们是不是还在忙着做着一些复杂的反应。

就好像你能用一个特殊的眼镜，看清楚别人眼中看不到的东西一样。

首先说到“荧光标记的染料法”，它其实就是利用一些能发光的染料来做标记，这些染料特别神奇，吸收光之后，自己会发出不同颜色的光。

你可以想象这些染料就像是一只会发光的小螃蟹，它们一碰到特定的东西，就会发出五光十色的亮光，瞬间把目标引入了你的视野。

这些染料就像是“指路明灯”，你可以用它们标记细胞的特定区域，或者是细胞里特定的分子，然后利用显微镜什么的观察到它们的样子。

比如说，我们研究一种新的药物效果，怎么知道药物是不是成功作用到细胞了？就可以把药物和一些荧光染料结合在一起，看看药物是不是在细胞里亮了起来。

这样一来，研究人员就能通过“光芒”看到药物的“到达现场”，不再是靠猜和推测了。

荧光染料法有个最大好处，那就是它能让你看得非常清楚，而且时间上也挺灵活，你可以随时观察标记的分子，看看它们是如何随着时间的推移发生变化。

你还能标记不同的东西，用不同颜色的荧光染料，看看它们是怎么“同场竞技”的。

这就像是你在看一场盛大的舞会，荧光染料们就像是舞池里的小明星，每一个都穿着不同颜色的闪亮衣服，光芒四射，想不注意都难。

不过呢，染料法虽然好，但是也有一些“小毛病”。

染料并不是永远稳定的，它们可能会因为实验条件变化，发出的光不稳定，甚至可能“耗尽电力”——就是说发光时间变短或者干脆不发光了。

那时候你可能就需要换一个新染料，或者调整实验条件，调皮的小染料可不好对付呢。

接着说说“探针法”，这个听起来是不是也有点像是间谍电影里的那种秘密武器？其实说白了，探针法就是用一些非常特殊的分子，去“探测”细胞或者分子里的某些东西。

钾离子响应荧光探针

钾离子响应荧光探针
钾离子响应荧光探针是一类用于检测和测量钾离子浓度的荧光化学传感器。

这些探针通过与钾离子结合后发生荧光信号变化的原理来工作，可以用于细胞内或细胞外的钾离子检测。

以下是一些常见的钾离子响应荧光探针：
1. 比率钾传感器-1（RPS-1）：这是一种双荧光探针，设计用于细胞内的钾比例计量。

它包含一个钾敏感染料PS525和一个钾不敏感的内标荧光团香豆素343。

RPS-1能够通过基于强度的开启响应来匹配静息细胞内高水平的K+池。

2. PBFI AM：这是一种细胞渗透性的钾敏感荧光探针，用于测量细胞和细胞内区室中的钾变化。

PBFI AM在进入细胞后被酯酶水解生成PBFI，其对钾的亲和力是钠依赖性的。

PBFI AM 具有特定的吸收和发射波长，使其适用于荧光检测。

3. IPG系列探针：由ION Biosciences开发，这些探针是传统K⁺荧光探针如PBFI的替代品。

IPG 系列探针与常见的滤光片兼容，并且提供多种亲和力选项，适用于不同的应用需求，如检测胞外或胞内K⁺的动态变化。

总的来说，这些探针的设计和应用为生物学和医学研究提供了强大的工具，尤其是在研究细胞生理学和钾离子通道功能方面。

通过使用这些探针，科学家可以更准确地监测和分析钾离子在细胞活动中的作用，从而推动相关疾病治疗和药物开发的进步。