慢性阻塞性肺疾病患者尿白三烯E4的变化

慢性阻塞性肺疾病患者尿白三烯E4的变化
夏阳;白冲;徐永健
【摘要】目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者尿白三烯E4 (Ieukotriene E4 LTE4)的变化.方法采用竞争性酶联免疫吸附试验技术(ELISA)测定15位COPD患者急性加重期的尿LTE4水平,并与8位健康对照组者比较;同时对COPD患者的尿LTE4与其第一秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)、外周血中性粒细胞(pNC)及外周血嗜酸性粒细胞计数(pEC)进行相关性分析.结果 COPD患者急性加重期尿LTE4明显高于健康对照组( P <0.01).尿LTE4值和FEV1呈显著负相关( r =-0.607,P <0.01,n=23),和FEV1/FVC呈显著负相关( r =-0.697,P <0.01,n=23),和pNC无显著相关性( r =0.218,P >0.05),和pEC无显著相关性( r =-
0.032,P >0.05).结论 COPD患者急性加重期尿中LTE4增高.提示LTE4可能与COPD的发病机制有关.%Objective To evaluate the change of urinary leukotrience F4 (LTF4) in patients with chronic obstructive pulmonary disease.Methods 15 patients with COPD were tested the urine concentration of LTF4 by ELISA in acute exacerbation, and compared to 8 healthy controls.In addition, the correlation between the urine concentration of LTE4 and forced expiratory volume in one second and forced expiratory volume in one second/forced vital capacity, periperal neutrophils, periperal eosinophil count of patients were
investigated.Results Urinary LTE4 in exacerbations period was significantly higher than control group(857.85 ±393.05 vs 239.00 ±24.24 pg/ml, P ＜0.01 ).There was a significant negative relation between urinary LTE4 and forced expiratary volume in one second ( r = - 0.607,P ＜0.01 ,n =23).And a
significant negative relation between urinary LTE4 and forced expiratary volume in one second/forced vital capacity(r= -0.697,P ＜0.01 ,n
=23).There was no correlation between urinary LTE4 and periperal neutrophils count(r =0.218,P ＞0.05 ), and periperal eosinophil count ( r = - 0.365, P ＞ 0.05 ).Conclusion Urinary LTE4 in patients with COPD was significantly higher than control group, which suggested that LTE4 participated in the pathogenesy.
【期刊名称】《临床肺科杂志》
【年(卷),期】2011(016)007
【总页数】2页(P987-988)
【关键词】肺疾病,慢性阻塞性;尿白三烯E4
【作者】夏阳;白冲;徐永健
【作者单位】200433,上海,第二军医大学长海医院;200433,上海,第二军医大学长海医院;400030,湖北,武汉,华中科技大学同济医学院
【正文语种】中文
半胱氨酸白三烯(CysLTs)是一类重要的炎性介质，具有分布广泛，生物活性高的特点，参与了体内多种疾病的炎性过程。

在气道内其生理作用包括支气管收缩、血浆渗出、血管收缩、黏液分泌亢进和嗜酸性粒细胞聚集以及促进气道重塑，引起气道高反应性等［1］，在支气管哮喘的发病中有着重要的作用［2］。

而作为呼吸系统最为常见的疾病，COPD是以存在进行性发展的不完全可逆性气流受限为特点
的馒性气道炎性疾病。

且已有研究报道:支气管哮端和COPD可能存在着潜在的共同炎性过程［3，4］，由此可以推测 CysLTs可能也参与了COPD的发病过程。

目前关于CysLTS在COPD发病中作用的研究甚少见，本文通过测定COPD患者
急性加重期(AECOPD)和健康对照者尿白三烯E4(LTE4)水平，并对COPD患者尿LTE4、第一秒用力呼气容积(FEV1)，FEV1/用力肺活量〔FVC)、外周血中性粒细
胞(pNC)和外周血嗜酸性粒细胞(pEC)做相关性分析，旨在探讨CysLTs在COPD
发病中的作用。

一、对象选择
COPD组:2008年8月至2008年11月在武汉同济医院呼吸内科住院治疗的AECOPD患者15例，男12例，女3例，年龄〔72±6〕岁。

AECOPD的诊断符合我国2007年COPD诊治指南标准［5］，用支气管舒张剂后FEV1/FVC＜70%。

健康对照组:来武汉同济医院呼吸内科门诊体检的健康成人8名:男5名，女3名，年龄(68±4)岁。

无吸烟史，无家族史，无心肺疾患，留尿前4周内无上呼吸道感
染史及用药史。

各组在年龄分布和性别构成上无显著性差异(P＞0.05)。

二、实验方法
1 标本的采集 COPD组:用药前应用肺功能仪侧定肺功能，采外周静脉血
2 m l检
测pNC，pEC:取入院后第一次尿液5 ml，置－80℃冰箱保存，待测尿LTE4。

健
康对照组:常规体检后用肺功能仪测定肺功能，采外周静脉血2 m l检测pNC、pEC:取尿液5 m l，置－80℃冰箱保存，待测尿 LTE4。

2 检测方法采用竞争性ELISA法检测尿LTE4，试剂盒购于美国Cayman公司，
测定范围为5～1000 ng/L。

根据试剂说明书要求，为确定待测样本中尿LTE4值
在可测定范围内，随机取三份病情分级不同的病例尿标本进行预试验。

根据预实验结果，将所有病例尿标本分别稀释至1/4、1/8原浓度，健康对照者尿标本取原浓度进行正式试验，具体步骤严格按试剂盒说明书操作进行，将测出的吸光度数据用
Cayman提供的配套软件进行处理，计算出尿标本中LTE4值。

表1 COPD患者急性加重期与健康对照组尿LTE4及肺功能的比较±s)与对照组比较:△P＜0.01n 性别(男/女) 年龄(岁) FEV1/FVC(%) FEV1%Pre(%) 尿
LTE4(ng/L)COPD 组15 12/3 72 ±6 56．17±11．29△ 46．87 ±16．37△ 857．85±393．05△对照组8 5/3 68 ±4 85．08 ±9．15 118．75 ±20．85 239．00 ±24．24
3 统计学方法用SPSS12.0统计软件做统计学处理。

COPD组和健康对照组间均
数比较用独立样本t检验;用Spearman等级相关分析法探讨尿 LTE4、FEV1、FEV1/FVC、pNC、pEC的相关关系。

结果
一、AECOPD与健康对照组LTE4的比较
AECOPD尿LTE4值为(857.85±393.05)PG/ml，健康对照组尿LTE4为
〔239.00±24.24)PG/ml，两者之间有显著性差异(P ＜0.01)，见表1。

二、AECOPD与健康对照者外周血白细胞和外周血嗜酸性粒细胞比较
AECOPD pNC为(6.55±3.48)×109/L，pEC为(0.08±0.07)×109/L:健康对照组pNC为(3.92±0.83)×109/L，pEC为(0.13±0.08)×109/L;pNC组间比较有差异(P ＜0.05)，pEC组间比较无显著性差异(P＞0.05)。

三、FEV1、FEV1/FVC、pNC，pEC 和尿 LTE4相关性
在COPD组和健康对照组中尿LTE与FEV1呈显著负相关〔r= －0.607，P＜0.01，n=23〕;与 FEV1/FVC 呈负显著相关(r= －0.697，P＜0.01，n=23);与 pNC无显著相关性(r=0.218，P＞0.05)与pEC无显著相关(r= －0.365，P＞0.05)。

讨论
白三烯是花生四烯酸(AA)经5-脂氧合酶(5-LO)途径代谢的一系列产物，包括白三
烯A4(LTA4)、B4(LTB4)、C4(LTC4)、D4(LTD4)、E4(LTE4)，由于LTC4、LTD4、
LTE4 在 C-6位均含有半胱氨酸及硫酯肽键，故统称为半胱氨酸白三烯(CysLTs)［6］，CysLTs主要由噬酸粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞及嗜碱粒细胞产生。

CysLTs产生后被迅速从循环中代谢清除掉，经氧化后代谢产物经胆汁和尿液清除，LTE4是尿中的一种重要的代谢产物，尿LTE4以占体内CysLTs含量的4% ～7%
的比例相对恒定排泄［7］。

因此尿LTE4可以作为评价体内CysLTs水平的一种
指标。

目前已有大量研究，CysLTs参与了支气管哮喘的气道炎症反应［2］，且CysLTs
在COPD中的作用正渐被重视，Shindo K等报道:AECOPD患者血清中LTE4的
值增高，缓解期下降，两者有显著性差异［8］，俞小卫等［9］发现COPD急性发作期以及缓解期血清中CysLTs皆有明显升高。

Cazaola M等报道:Cys-LTs受
体拮抗剂孟鲁司特可显著改善COPD。

患者的肺功能［10］。

本研究通过检测尿中LTE4的值来反映体内CysLTs的水平，结果显示AECOPD
尿LTE4值显著高于健康对照者，在COPD组和健康对照组中，尿LTE4与FEV1
及 FEV1/FVC均呈显著负相关。

表明AECOPD内CysLTs的水平增高，提示CysLTs可能与COPD发病机制有关。

本试验结果还显示COPD患者尿LTE4与pNC和pEC均无相关性，可以认为不是所有出现在外周血的中性粒细胞和嗜酸性粒细胞都被活化，都能导致炎症，如果检测活化率可能反映气道炎症。

由于尿液LTE4的ELISA检测法简便快捷，敏感性高，且取材方便，无创伤性，故对了解COPD患者体内CysLTs的水平有一定意义。

参考文献
［1］ Lewis RA，Austen KF，Spberman RJ.Leukotriences and other product of the 5-lipoxygenase pathway．Biochemistry and relation to pathobiology in human disease［J］．N Engl JMed，1990，323:645．［2］ Samitas K，Chorianopoulos D，Vittorakis S．Exhaled cysteinyl－
leukotrienes and 8－isoprostane in patientswith asthma and their relation to clinical severity［J］．Respir Med，2009，103(5):750 －756．
［3］ Kostikas K，Gaga M，Papatheodorou G．Leukotriene B4 in exhaled breath condensate and sputum supernatant in patients with COPD and asthma［J］．Chest，2005，127(5):1553．
［4］ Bleecker ER，Similarlities and differences in asthma:the Dutch hypothesis［J］．Chest，2004，126(suppl):93S．
［5］中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组．慢性阻塞性肺疾病诊治指南［J］．中华结核和呼吸杂志，2007，30(1):8－17．
［6］ Mita H，Turikisawa N，Yamada T，Taniguchi M．Quantification of leukotriene B4 glucuronide in human urine［J］．Prostaglandins Other Lipid Mediators，2007，83(1):42 －49．
［7］ Smith CM，Hawksworth RJ，Thien FC．Urinary leukotriene E4 in bronchial asthma［J］．Eur Respir J，1992，5(6):693 －699．
［8］ Shindo K，Hiral Y，Fukumura M．Plasma levels of leukotriene E4 during clinical course of chronic obstructive pulmonary disease ［J］．ProstaglandinsLeukot Essent Fatty Acids，1997，56(3):213．［9］俞小卫，韦国桢，林亚媛．慢性阻塞性肺疾病患者血清白三烯和α1抗胰蛋白酶的变化［J］．南京医科大学学报，2004，24(2);182．
［10］ Cazzola M，Centanni S，Boveri B．Comparison of the bronchodilating effect of salmeterol and zafrlukast in combination with that of their use as single treatment in asthma and chronic obstructive pulmonary disease［J］．Respiration，2001，68:452．。