《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计(可编辑修改word版)
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《DNA 的粗提取与鉴定》实验教学设计
1)、DNA 在NaCl 溶液中的溶解度,是随着NaCl 的浓度的变化而改变的。当NaCl 的物质的量浓度为0.14 mol/L 时,DNA 的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl 溶液中的DNA 析出。
2)、DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
鉴定DNA 的原理:
DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。
2、实验过程:师生共同学习
以鸡血为实验材料进行DNA 的粗提取
鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA 含量丰富,材料易得
②鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长
①柠檬酸钠作用及作用机理
防止血液凝固。
柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液就不会凝固
②注意事项
鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了减少DNA 的损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液
讨论:提取鸡血中的DNA 时,为什么除去血液中的上清液?
答:血液分为两部分,一部分是血浆,一部分是血细胞,离心后除去的上清液是血浆
3、过程(结合导学案边做边学)
①提取鸡血细胞的细胞核物质
②溶解细胞核内的DNA
【合作释疑一】
(1)为什么要加入蒸馏水?加入蒸馏水后细胞会有什么变化?
答:让细胞内浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破
(2)用玻璃棒搅拌有什么意义?
答:用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛,防止打碎DNA
(3)滤去的是什么物质?得到的是什么?
答:过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质;得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA