2016生理生化实验课
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

2016年秋季学期微生物学实验报告1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段,掌握基本技能和基本原理。
2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序,掌握各检查实验操作。
3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。
4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。
5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。
6、树立牢固的无菌观念。
二、实验器材:1、培养基:营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂2、标本:脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物3、器材:1)培养基的制备:天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。
2)细菌的分离培养:碘酒棉球,酒精棉球、眼科镊子、接种环。
3)细菌的纯培养: 接种环。
4)细菌的形态学检查:生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。
5)细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素(青霉素、链霉素、庆大霉素)纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。
6)结果分析:尺子。
三、方法与步骤1、营养肉汤培养基的制备取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中,加入50ml蒸馏水,摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。
将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾,观察固体是否完全溶解,冷却后分装至试管内。
2、细菌的分离培养(平板划线分离法)甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板1)接种环烧灼灭菌,以免污染标本。
2)取标本3~5ul。
3)转动平板,当看到平板表面象镜面有反光的时候,保持这个角度,划线时就能看清划线痕迹,以便控制划线。
4)接种环与平板呈30~40度角,在平板表面上方,以曲线的形式,作大幅度来回连续划线,边划边退,线段要划得长而密集,每区划线不少于30条5)甲、乙烧掉接种环上多余的标本。
生化实验报告小鼠血糖(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖水平在生理和病理状态下的变化。
3. 学会使用血糖测定仪进行操作。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖,是人体重要的能量来源。
正常情况下,血糖水平维持在3.9-6.1 mmol/L之间。
血糖测定是通过测定血液中葡萄糖的浓度来评估血糖水平的方法。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定小鼠血糖。
葡萄糖氧化酶能够催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,而过氧化氢在过氧化物酶的作用下,将色原性物质氧化成有色产物,通过比色法测定吸光度,从而计算出血糖浓度。
三、实验材料1. 实验动物:昆明种小鼠(体重20-25g)。
2. 仪器:血糖测定仪、微量移液器、试管、离心机等。
3. 试剂:葡萄糖氧化酶法血糖测定试剂盒、肝素钠抗凝剂、生理盐水等。
四、实验步骤1. 实验动物分组:将小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。
2. 实验组:按照实验要求给予一定量的高糖或低糖饲料,对照组给予普通饲料。
3. 实验前准备:将血糖测定仪预热,校准仪器。
4. 抽取小鼠血液:用肝素钠抗凝剂处理小鼠耳缘静脉血,室温下静置10分钟,离心分离血清。
5. 血糖测定:将血清加入葡萄糖氧化酶法血糖测定试剂盒中,按照说明书操作,测定吸光度。
6. 数据处理:计算实验组和对照组血糖水平,进行统计学分析。
五、实验结果实验组小鼠血糖水平显著高于对照组(P<0.05),说明高糖饲料喂养能够引起血糖水平升高。
六、讨论1. 本实验通过葡萄糖氧化酶法测定了小鼠血糖水平,结果表明高糖饲料喂养能够引起血糖水平升高,与文献报道一致。
2. 血糖水平升高可能是由于高糖饲料导致胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗所致。
3. 本实验为后续研究血糖调节机制提供了实验依据。
七、结论1. 本实验成功建立了血糖测定方法,并应用于小鼠血糖水平的研究。
2. 高糖饲料喂养能够引起小鼠血糖水平升高,可能与胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗有关。
八、实验注意事项1. 实验操作过程中应保持无菌操作,避免污染。
生化反应鉴定实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解生化反应在微生物鉴定中的重要性。
2. 掌握常见生化反应的原理和方法。
3. 通过实验,对给定的微生物进行鉴定。
二、实验原理生化反应是指微生物在生长过程中,通过酶的催化作用,将营养物质转化为自身所需的物质,同时产生一些代谢产物。
这些代谢产物可以用来鉴定微生物的种类。
常见的生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
- 培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖)、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂等。
- 试剂:卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等。
- 仪器:酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等。
2. 仪器:- 酒精灯- 接种环- 超净工作台- 恒温培养箱- 高压灭菌锅- 试管- 移液枪- 滴管四、实验方法1. 菌种培养:将菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。
2. 糖发酵试验:- 将培养好的菌种接种于糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖),置于恒温培养箱中培养24小时。
- 观察培养基颜色变化,记录发酵结果。
3. 吲哚试验:- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入吲哚试剂,观察颜色变化,记录结果。
4. 甲基红试验:- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入甲基红试剂,观察颜色变化,记录结果。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验:- 大肠杆菌:发酵葡萄糖、乳糖,不发酵蔗糖。
- 金黄色葡萄球菌:不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 枯草芽孢杆菌:不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 变形杆菌:发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
2. 吲哚试验:- 大肠杆菌:吲哚试验阳性。
- 金黄色葡萄球菌:吲哚试验阴性。
- 枯草芽孢杆菌:吲哚试验阴性。
- 变形杆菌:吲哚试验阳性。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

考点三 (实验)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(5年6考)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测:脂肪+⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测:蛋白质+双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精,故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中,若用大豆作材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验,若需进一步设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理,2 min后试管内将呈现何种颜色?试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂,经加热若出现砖红色沉淀,则表明试管内含有葡萄糖,对吗?提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色,因未经水浴加热,只有将试管置于50~65 ℃温水中,经水浴加热后,方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”,不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案,请推测:(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质,其中“某试剂”是什么?A液、B液分别指什么?(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色?提示(1)蛋白质及多肽化合物;双缩脲试剂;A为0.1 g/mL NaOH溶液;B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷,15)下列实验中,加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆,用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖,用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀;黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,淀粉被消耗,加入碘液不会产生蓝色;玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核呈绿色;花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
人体功能学实验报告(3篇)
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第1篇一、实验目的本次实验旨在通过人体功能学实验,了解人体各器官系统的生理功能和代谢特点,掌握实验操作技能,分析实验结果,并能够将实验结果与理论知识相结合,加深对生理学知识的理解。
二、实验原理人体功能学实验主要研究人体各器官系统的生理功能和代谢特点。
通过观察、测量和分析实验数据,了解人体在不同生理状态下各器官系统的功能变化。
三、实验内容本次实验主要包括以下内容:1. 心脏功能实验:观察心脏的搏动、心率、血压等指标,了解心脏的泵血功能和调节机制。
2. 呼吸功能实验:观察肺的通气、换气功能,了解呼吸系统的调节机制。
3. 消化功能实验:观察消化道的蠕动、分泌功能,了解消化系统的调节机制。
4. 神经系统功能实验:观察神经反射、神经传导速度等指标,了解神经系统的调节机制。
5. 内分泌功能实验:观察激素水平、内分泌腺功能等指标,了解内分泌系统的调节机制。
四、实验方法1. 心脏功能实验:采用心电图、血压计等仪器观察心率、血压等指标。
2. 呼吸功能实验:采用肺功能仪、呼吸带等仪器观察肺通气、换气功能。
3. 消化功能实验:采用胃镜、肠镜等仪器观察消化道蠕动、分泌功能。
4. 神经系统功能实验:采用电生理仪器、神经传导速度仪等观察神经反射、神经传导速度等指标。
5. 内分泌功能实验:采用放射免疫法、化学发光法等检测激素水平、内分泌腺功能。
五、实验结果与分析1. 心脏功能实验:实验结果显示,受试者的心率、血压等指标在正常范围内,说明心脏功能良好。
2. 呼吸功能实验:实验结果显示,受试者的肺通气、换气功能正常,说明呼吸系统功能良好。
3. 消化功能实验:实验结果显示,受试者的消化道蠕动、分泌功能正常,说明消化系统功能良好。
4. 神经系统功能实验:实验结果显示,受试者的神经反射、神经传导速度等指标正常,说明神经系统功能良好。
5. 内分泌功能实验:实验结果显示,受试者的激素水平、内分泌腺功能正常,说明内分泌系统功能良好。
六、实验结论本次实验结果表明,受试者各器官系统的生理功能和代谢特点正常,符合生理学基本规律。
2016微生物生理4.3
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好氧呼吸第一阶段:EMP途径形成丙酮酸
TCA 循环
1.TCA循环 也称为柠檬酸(CAC)循环。从丙酮酸开始,先形 成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A进入TCA循环,最终被 彻底氧化成为CO2和H2O。 1mol丙酮酸经过TCA循环后形成了3mol的CO2: a.丙酮酸形成乙酰辅酶A时,产生1mol; b.草酰琥珀酸脱羧时产生1mol; c. 酮戊二酸 脱羧时形成1mol。
问题:为什么是产生 38molATP?
1mol葡萄糖可在EMP途径形成2mol丙酮酸,则在TCA 循环中可形成: 2×15=30molATP; 由于葡萄糖的好氧呼吸包括两部分,TCA已知产生 30mol。那EMP途径呢,在发酵时净剩2mol,在发酵 过程中,可产生2mol的NADH2,则可换算成 2×3=6molATP , 因此, 1mol葡萄糖可产生: 30+2+6=38molATP.
甲基红(Methyl Red)试验
肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步 分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量 酸性产物,可使培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。
2.好氧呼吸 电子受体为O2,底物被彻底的完全氧化成CO2和H2O,并 有大量ATP产生。 在好氧呼吸过程中,电子并不是直接传递给O2,而是先 转移给NAD,成为NADH2,然后NADH2被氧化后,电子传 递给电子传递体系,最后由电子传递体系转给O2。 得到电子的O2与H结合形成H2O。
1.单纯扩散
生物化学与分子生物学-教学大纲(中西医)
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《生物化学与分子生物学》课程教学大纲(Biochemistry and Molecular Biology)一、课程基本信息课程编号:14232051课程性质:学科专业基础课适用专业:中西医学分:4学分总学时:72学时其中:讲授56学时,实验16学时先修课程:解剖学、组织胚胎、有机化学、医学生物学后续课程:生理学、病理生理学、药理学等临床专业课程授课学期:第2学期选用教材:生物化学与分子生物学[M].北京:科学出版社,2016生物化学实验指导 2016年( 自编教材)必读书目:[1] 周爱儒,生物化学(第八版)[M]. 北京:人民卫生出版社,2013年[2] 陈诗书,医学生物化学(第八版)[M].北京:科学出版社,2009[3] 药立波,医学分子生物学(第八版)[M]. 北京:人民卫生出版社,2014年二、课程教学目标:通过本课程的学习,使学生获得生物大分子的化学组成、结构及其功能等相关知识,在此基础上进一步掌握其代谢过程及其调节规律等生化及分子生物学的基本理论和基本技能,为学习其它后继基础医学和临床医学课程,在分子水平上探讨疾病发生机理,为中西医结合诊断疾病、制定预防和治疗措施等奠定基础。
作为一名医学院校的学生,只有具备扎实的以生物化学为立足点的医学基础知识,才能学好医学相关的专业技能和知识,才能更深入理解生理学、病理学等学科的内容。
总之,通过本门课程的学习,学生应能全面、系统地领会和掌握生物化学与分子生物学的基础理论、基本知识和基本技能,为学习其它基础医学课程和临床医学课程奠定基础。
三、理论教学课时安排、课程内容与基本要求教学内容与学时安排第一章绪论1、教学目的与基本要求(1)掌握:生物化学与分子生物学的概念。
(2)熟悉:生物化学与分子生物学研究的主要内容及其与医药学的关系。
(3)了解:生物化学与分子生物学的发展史。
2、教学内容(1学时)(1)生物化学与分子生物学发展简史(2)当代生物化学与分子生物学研究的主要内容:重点阐述当代生物化学的概念,生物化学与分子生物学研究的主要内容。
实验一人类性状的遗传分析

受精时各雌雄配子能以均等的机会相互自由结合;(4)受精以后不同基因型的合子发育的个体具有同样的或大致同样的寸活率;(5)杂种后代都处于相对一致的条件下,而且实验分析的群体比较大。
性状:是生物所具有的形态特征和生理生化特性。
三、材料与方法材料:人类(Homo sapiens)方法:(1)、以人类作为研究对象,选择8对相对性状进行研究。
(2)、在调查报告上注明性别、籍贯、民族、相对性状等,所选择的相对性状不得涉及个人隐私。
(3)、选择1000人作为研究对象,其中网络调查为300份,问卷调查为700份。
(4)、相对性状:①、有无耳垂②、单双眼皮③、有无酒窝④、舌头能否从两侧卷起⑤、油耳或干耳⑥、直发或卷发⑦、瞳孔的颜色⑧、食指长度(5)、将调查的结果进行分析。
七、作业1、性状是什么?质量性状与数量性状的差异是什么?答:(1)、性状(character)是指生物的形态结构,生理特征,行为习惯等具有的各种特征。
任何生物都有许许多多性状。
有的是形态特征(如豌豆种子的颜色,形状),有的是生理特征(如人的ABO血型,植物的抗病性,耐寒性),有的是行为方式(如狗的攻击性,服从性),等等。
在孟德尔以后的遗传学中把作为表型的显示的各种遗传性质称为性状。
在诸多性状中只着眼于一个性状,即单位性状进行遗传学分析已成一种遗传学研究中的常规手段。
(2)质量性状是指同一种性状的不同表现型之间不存在连续性的数量变化,而呈现质的中断性变化的那些性状。
它由少数起决定作用的遗传基因所支配,如鸡羽的芦花斑纹和非芦花斑纹、水稻的粳与糯、角的有无、毛色、血型、遗传缺陷和遗传疾病等都属于质量性状,这类性状在表面上都显示质的差别。
质量性状的差别可以比较容易地由分离定律和连锁定律来分析。
数量性状是另一类性状差异,这些性状的差异呈连续状态,界限不清楚,不易分类。
动植物的许多重要经济性状都是数量性状,如作物的产量、成熟期,奶牛的泌乳量,棉花的纤维长度、细度等等。
2016生理生化实验课资料

硕士研究生《昆虫生理生化实验技术》课程代码:3012100018开课单位:植物科技学院责任教师:牛长缨研究生:学号:实验一昆虫血淋巴中蛋白质的分离(聚丙烯酰胺凝胶电泳法)一、实验目的掌握凝胶电泳基本方法,并测定各种昆虫,以及同一种昆虫不同发育阶段的血淋巴的蛋白谱。
二、实验原理昆虫的各种组织,均含有多种蛋白质和各种酶类。
在血淋巴中经分离和纯化后已鉴定的蛋白质有:卵黄原蛋白,脂蛋白,贮存蛋白,滞育蛋白,抗菌蛋白,抗冷蛋白等。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离蛋白质和酶类,可以得到满意的蛋白谱和酶谱,通常能分离到20-30条带。
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂(过硫酸胺)与加速剂(四甲基乙二胺)的作用下,聚合交联而成,具有三维网状结构,能起分子筛的作用,因此常用它作为电泳支持物。
对样品的分离不仅取决于各组分所带电荷的多少,也与分子大小有关。
此外,凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应,即在电泳开始阶段,由于不连续pH和凝胶孔径梯度作用,将样品压缩成一条狭窄区带。
从而提高了分离效果。
三、实验材料和仪器供试昆虫:菜青虫试剂及配制:1.Acr:丙烯酰胺Bis:甲叉双丙烯酰胺TEMED:四甲基乙二胺AP:过硫酸胺Tris:三羟甲基氨基甲烷A:1mol/L HCl 48ml;Tris 36.3g;加水至100ml,pH 8.9;贮存于棕色瓶内,4℃保存。
B:Acr 30g;Bis 0.8g;加水至100ml,贮存于棕色瓶内,4℃保存。
C:10%AP 1gAP加9ml水,最好现用现配,贮存于棕色瓶内。
D:1mol/L HCl 48ml;Tris5.98g;加水至100ml,贮存于棕色瓶内,4℃保存.E:Tris6g;甘氨酸28.8g;加水至1000ml,pH8.3(电极缓冲液)2.1%溴酚蓝指示剂,苯硫脲3.染色液:考马斯亮蓝R250 1.25g; 水227ml; 冰乙酸46ml; 甲醇227ml; 共500ml,溶解后过滤。
高职护理专业《医用化学与生物化学实验》课程标准

陕西国际商贸学院医用化学与生物化学实验课程标准一、课程基本信息二、课程的性质与任务及设置目的(一)课程性质与任务《医用化学与生物化学实验》是护理学专业的实训与实验课程,与《医用化学与生物化学》课程二者紧密联系,是护理学专业实践教学的重要组成部分,是理论联系实际的重要环节和主要方式之一。
通过实验,验证和巩固课堂讲授的理论知识,提高动手能力,使学生掌握化学与生物化学实验的基本技能,为后续教学及学生毕业后步入工作岗位奠定技能基础。
掌握护理中常见量器的的使用,溶液的配制及稀释,了解蛋白质的分离纯化方法以及酶的性质,常用生化仪器设备的结构、性能及使用方法;培养学生的实验观察能力,实事求是的作风,以及独立总结实验资料的能力,为培养高素质护理人才打下良好的实践基础。
(二)前后续课程的安排本课程为基础课程,以学生高中时期所开设的化学、生物的理论和实验课程为学习背景,其后续课程为《药理学实验》、《病理学与病理生理学实验》、《基础护理技术》等。
三、课程目标(一)总体目标本课程以实践环节为主,根据课程的性质、任务、要求及学习的对象,将实验课分为演示性实验、验证性实验、综合性实验,学生经过多层次,多方式教学的全面训练后,应达到下列要求:(1)进一步巩固和加深医用化学与生物化学的基本知识,提高综合运用所学知识的能力;(2)能正确使用仪器设备,掌实验原理,熟练操作;(3)能独立撰写设计说明,准确分析实验结果。
四、教学内容、基本要求与学时分配(一)实验教学内容实验项目(一)仪器认领与溶液的稀释与配制(4学时):1.项目类别:必做2.项目性质:基础性3.项目主要目的要求:(1)熟悉实验室的规则要求,了解常见仪器的注意事项,落实责任制,掌握常用仪器的洗涤、干燥,试药的量取等方法。
(2)掌握一般溶液的配制方法和基本操作;(3)掌握吸管、容量瓶的使用方法;(4)熟悉质量分数和物质的量浓度的关系;(5)掌握由固体试剂或者浓溶液的稀释方法。
2016-2017学年第2学期16级课程表2.12
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星期三
3--4 5--6 ★健康评估 刘广琴
微生物/ 李妙丹
星期四
7--8 1--2 ★毛概 徐鹏 ★有机 张培宇 中医 郝存金 ★英语 尹昊 生化 魏德全 (4411) 生化 魏德全 (4411) 生化 魏德全 (4411) ★英语 张立彬 3--4 病理 牛雯铃 (3214) 中医 郝存金 ★有机 张培宇 5--6 ★英语 胡鲁平 体育 田桂玲 生化 魏德全 7--8 1--2 ★生理学杨 爱娟 (3312)
9
2016级护理 ★毛概孙玉 九班 美 (4517)
★健康评估 王新 /礼仪 /马敏 形体/金林 林/ ★健康评估 王叙超 体育 任军 ★药理学 蒋宝安 生化 贾祥捷 ★毛概 李勇 ★英语 胡鲁平
体育 马青 ★生理学 李安娜 ★生理学 徐芳 ★健康评估 王叙超 生化 李创光
★药理学 王岩 形体/金林 林/ 护士人文修 养/邵林/
医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系 医学技 术系杨光 ★生理学李 二班 云 晓波 (4618) 2016级护理 三班 (4615) ★英语 胡鲁平 ★健康评估 ★生理学李 曹成军 晓波 生化 杨其义 (z109)
微生物 李妙丹
星期五
3--4 体育 田桂玲 生化 魏德全
微生物 李妙丹
5--6 形体/礼仪 金林林/马 敏 ★英语 张立彬 ★天然药物 学高慧
微生物 李妙丹
7--8
医学技 19 术系 医学技 20 术系 医学技 21 术系 医学技 22 术系 医学技 23 术系 医学技 24 术系 医学技 25 术系 医学技 26 术系 医学技 27 术系
★健康评估 赵环 ★药理学 蒋宝安 病理 牛雯铃 (3214) 病理 牛雯铃 (3214) ★英语 胡鲁平
生理学实验课教案设计

2. 熟练掌握实验器材的使用方法和注意事项,避免误操作。
操作步骤与注意事项
3. 在实验过程中,密切观察实验动物 的生命体征变化,及时处理异常情况 。
VS
4. 准确记录实验数据,保证数据的真 实性和可靠性。
数据记录与分析
数据记录
在实验过程中,需要记录以下数据:实验动 物的呼吸频率、呼吸深度、潮气量、分钟通 气量等。同时,还需要记录给予不同刺激或 药物后呼吸运动的变化情况。
01
注意事项
03
2. 严格遵守实验室安全规范,确保实验过程的安全 性。
02
1. 确保实验动物处于合适的生理状态,避免 过度刺激或损伤。
04
3. 准确记录实验数据,避免主观因素对实验结果的 影响。
数据记录与分析
数据记录
详细记录每次电刺激下的肌肉收缩反应,包括收缩幅度、速度和持续时间等。同时记录实验动物的生理状态和刺 激参数。
对实验数据进行统计分析,比较不同处理组之间的差异。结 合理论知识,分析实验结果与预期是否一致,探讨可能的原 因和机制。通过图表等形式展示实验结果,使数据更加直观 易懂。
05
实验项目三:消化系统实验
实验目的与原理
实验目的
通过消化系统实验,使学生了解消化系统的基本结构和功能,掌握消化酶的作用机制和消化过程,培 养学生的实验技能和科学思维能力。
数据分析
通过对实验数据的分析,可以了解呼吸系统 的生理功能和调节机制。例如,通过分析呼 吸频率和呼吸深度的变化,可以了解呼吸中 枢的兴奋性和抑制性调节;通过分析给予不 同刺激或药物后呼吸运动的变化情况,可以 了解不同因素对呼吸系统的影响及其作用机 制。
课程表2016上学期新北京中医药大学

2015-2016学年第二学期研究生课程表(基础、针推、临床)第1节至第4 节高级数据库技术36学时1-9周;1-4节西区机房4马星光药物经济学36学时10-18周;1-4节西29教朱文涛硕士英语(西区学术硕班)3个班54学时1-14周;1-4节分班请见续页“分班情况表”社会与发展心理研究36学时10-18周;1-4节西29教孔军辉、陈捷当代管理理论与前沿36学时1-9周;1-4节西29教谭巍、耿冬梅、李祺第5节至第8 节硕士英语(西区学术硕班)1个班54学时1-14周;5-8节分班请见续页“分班情况表”知识产权理论与方法54学时1-14周;5-8节西29教张韬药事法学理论与实务分析36学时1-9周;5-8节西29教刘新社公共关系与危机管理36学时10-18周;5-8节西29教刘新社高级统计学(二)54学时1-14周;5-8节西区机房2高莉敏、何静医学行为学36学时10-18周;5-8节西29教陈捷、图娅、王玉伟管理经济学36学时1-9周;5-8节西29教段利忠卫生改革与卫生经济政策36学时10-18周;5-8节西29教房耘耘、洪宝林、满晓玮、石学峰马克思主义与社会科学方法论18学时D班:1-9周;5-6节E班:1-9周;7-8节西36教王良滨中国特色科学社会主义理论与实践研究G班36学时1-9周;5-8节西36教万宗凤等项目管理54学时1-14周;5-8节西区机房4余学杰、戴力辉第9节至第12 节自然辩证法概论18学时D班:1-9周;9-10节E班:1-9周;11-12节F班:10-15周;9-12节西43教李虹流行病学研究方法36学时1-9周;9-12节西29教曾光卫生事业管理36学时10-18周;9-12节西29教武锋、胡凌娟卫生机构会计实务36学时1-9周;9-12节西29教程薇、吴欣、张丽丽卫生服务成本研究与应用36学时10-18周;9-12节西29教程薇中国特色科学社会主义理论与实践研究E班36学时1-9周;9-12节西36教万宗凤等医患法律问题专论36学时1-9周;9-12节西29教王梅红等医疗服务营销研究与应用(双语)36学时10-18周;9-12节西29教侯胜田中国特色科学社会主义理论与实践研究F班36学时1-9周;9-12节西43教李征等健康教育与健康促进36学时1-9周;9-12节西29教朱燕波医院质量与标准化管理36学时10-18周;9-12节西29教王志伟统计软件应用(选修)36学时10-18周;9-12节西区机房4刘仁权、陈建新第1节至第4 节科研思路与方法(西区A班)36学时1-9周;1-4节西43教丁霞、李彧、于世瀛、李亚东硕士英语(西区学术硕班)3个班54学时1-14周;1-4节分班请见续页“分班情况表”中医英语翻译36学时1-9周;1-4节西30教方廷钰、赵霞医学英语口译36学时10-18周;1-4节西30教李晶病历资料法律适用专题讲座18学时10-14周;1-4节西30教赵丹科研思路与方法(西区C班)36学时1-9周;1-4节西43教丁霞、李彧、于世瀛、李亚东医学术语研究36学时10-18周;1-4节西30教张春月第5节至第8 节硕士英语(西区学术硕班)1个班54学时1-14周;5-8节分班请见续页“分班情况表”医药卫生法律理论与实务36学时1-9周;5-8节西30教霍增辉科研思路与方法(西区B班)36学时10-18周;5-8节西36教赵宗江、李亚东、黄友良马克思主义与社会科学方法论18学时D班:1-9周;5-6节E班:1-9周;7-8节西36教王良滨中国特色科学社会主义理论与实践研究G班36学时1-9周;5-8节西36教万宗凤等医学统计学(西区C班)54学时1-14周;5-8节西51教刘仁权、陈建新第9节至第12 节医学统计学(西区A班)54学时1-14周;9-12节西51教刘仁权、陈建新自然辩证法概论18学时D班:1-9周;9-10节E班:1-9周;11-12节F班:10-15周;9-12节西43教李虹中国特色科学社会主义理论与实践研究E班36学时1-9周;9-12节西36教万宗凤等中国特色科学社会主义理论与实践研究F班36学时1-9周;9-12节西43教李征等统计软件应用(选修)36学时10-18周;9-12节西区机房4刘仁权、陈建新医学统计学(西区B班)54学时1-14周;9-12节西51教刘仁权、陈建新2015-2016学年第二学期研究生课程表(中药学院,含生物制药工程六年制)从第一教学周开始上课星期一星期二星期三星期四星期五星期六星期日第1节至第4 节中药制药学专论54学时1-14周;1-4节东11教倪健、杜守颖等计算机应用54学时1-14周;1-4节H班(Access):西区机房4;张未未I班(新内容):西区机房6;王苹生物药剂学36学时1-9周;1-4节东11教戴俊东、陆洋硕士英语(东区班)2个班54学时1-14周;1-4节分班请见续页“分班情况表”硕士英语(微生物班)54学时1-14周;1-4节东19教童兴红药物筛选思路与方法36学时15-19周;1-4节东16教王如峰、孙震晓、王春梅中药炮制学专论36学时1-9周;1-4节东11教李飞中成药学专论36学时10-18周;1-4节东11教杜守颖、吴清等微生物与生化药学专论54学时1-14周;1-4节东12教王春梅、孙震晓、史新元、王灵芝、白根本计算机应用54学时1-14周;1-4节J班(新内容):西区机房6;余学杰K班(Access):西区机房5;王苹L班(Access):西区机房1;马星光生物药物分析36学时1-9周;1-4节东11教张玉杰药品质量控制36学时10-18周;1-4节东11教马长华、孙毅坤分子细胞生物学专论54学时1-14周;1-4节东11教孙震晓第5节至第8 节中国特色科学社会主义理论与实践研究H班36学时1-9周;5-8节东9教裴蕾硕士英语(东区班)1个班54学时1-14周;5-8节分班请见续页“分班情况表”药物筛选思路与方法36学时15-19周;5-8节东16教王如峰、孙震晓、王春梅中医学选读36学时;1-9周;5-8节东11教张冰、郑虎占本草文献学18学时;10-14周;5-8节东11教张冰、郑虎占药性导论18学时;15-19周;5-8节东11教张冰、郑虎占分子生药学36学时;1-9周;5-8节东12教刘春生中药生物技术应用36学时;1-9周;5-8节东13教王春梅、王如峰生物信息学36学时;1-9周;5-8节东11教王耘药用植物学专论36学时;10-18周;5-8节东11教刘春生中药药物警戒与安全用药评价36学时;1-9周;5-8节东12教张冰、吴嘉瑞中药信息学36学时;10-18周;5-8节东12教乔延江、张燕玲、王耘中药显微鉴定36学时;1-9周;5-8节东17教杨瑶珺植物化学分类36学时1-9周;5-8节东11教石晋丽中国特色科学社会主义理论与实践研究I班36学时1-9周;5-8节东9教裴蕾马克思主义与社会科学方法论18学时F班:10-18周;5-6节G班:10-18周;7-8节东11教王良滨蛋白质工程54学时1-14周;5-8节东12教王春梅实验室科研安全与管理18学时15-19周;5-8节东9教孙毅坤、马群中药炮制药理学36学时10-18周;5-8节东11教杜红实验室分析仪器实训36学时10-18周;5-8节分析测试中心实验室黄建梅、詹雪艳、林宏英第9节至第12 节中药资源学专论36学时1-9周;9-12节东11教王文全药理学进展36学时1-9周;9-12节东11教孙建宁、潘思源、唐民科、孙文燕、方芳临床中药学专论54学时1-14周;9-12节东12教张冰、郑虎占自然辩证法概论18学时G班:1-9周;9-10节H班:1-9周;11-12节东11教李虹中药成分分析36学时1-9周;9-12节东11教黄建梅、高晓燕、孙毅坤生物制药专题36学时1-9周;9-12节东12教王春梅、刘颖中药药理学专论54学时1-14周;9-12节东11教孙建宁、张硕峰、王晶、方芳、畅洪昇中药药效毒理研究思路与方法18学时15-19周;9-12节东11教孙建宁、张硕峰统计软件应用(选修)36学时10-18周;9-12节西区机房4刘仁权、陈建新生物医用高分子材料36学时10-18周;9-12节东11教史新元微生物与生化药学“4+2”学制班本学期开设必修课程如下:1.《中国特色科学社会主义理论与实践研究》H班;2.《自然辩证法概论》H班;3.《硕士英语-微生物班》;4.《计算机应用》I班(新内容);5.《微生物与生化药学专论》;6.《中药生物技术应用》;7. 《高级分子生物学实验》(西校区,具体授课安排另行通知);8.《名师大讲堂系列讲座》。
NaCl胁迫下玉米幼苗几项生理指标的变化

学年论文题目:NaCl胁迫对玉米幼苗几项生理指标的影响学院生命科学学院专业生物科学学号2013441263姓名皮祖飞指导教师张锋2016年6月30日NaCl胁迫下玉米幼苗几项生理指标的变化摘要:本实验采用不同浓度的NaCl溶液对正在生长的玉米苗进行处理,研究了不同浓度NaCl 胁迫处理下玉米幼苗可溶性糖含量、可溶性蛋白、叶绿素含量、游离脯氨酸含量植物生物量的变化规律。
结果发现,随着NaCl 处理浓度的增加,玉米幼苗中的可溶性糖含量、叶绿素含量减少,脯氨酸含量呈上升趋势;可溶性蛋白含量则随着盐浓度的升高逐渐增加后又慢慢降低。
而生物量、根鲜重与苗鲜重又有着不同的变化,随着NaCl 处理浓度的增加,根鲜重表现出先减小后增加,而苗鲜重则逐渐减小,根冠比则在NaCl 浓度为完全与浓度为0.1的无明显变化,0.2处理的根冠比比前两个处理的根冠比高。
因此可溶性糖含量、脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、叶绿素含量及生物量可以作为鉴定玉米耐盐性的生理指标。
关键词:NaCl胁迫;玉米幼苗;可溶性蛋白;可溶性糖;叶绿素前言:盐胁迫作为影响植物生长发育和制约农业生产的一个重要环境因素,长期以来,受到科学家们的广泛关注。
土壤盐分过多对植物造成的危害称为盐害,全球约20%的耕地和近半数的灌溉土地在不同程度上都受到的盐害威胁。
NaCl为易溶解的盐类,对植物的伤害尤为严重,而世界上所有的粮食作物都是不抗盐的。
由于近年来人们的不合理或用含盐量较高的劣质水灌溉,使得部分土壤中的盐分不断积累,土壤含盐量不断提高,从而产生盐害影响了玉米产量的提高和品质的改善,严重阻碍了农业生产的发展[1.2]。
而玉米作为我国重要的粮食作物,对其抗盐性进行研究,探讨其抗盐机理,培育出耐盐的玉米品种,合理的开发利用盐渍性土壤,对缓解人口日益增长,而耕地不断减少的现状必有重大意义。
本研究以玉米幼苗为试材,通过比较在不同浓度盐胁迫下幼苗叶片内可溶性糖含量、可溶性蛋白和叶绿素含量、游离脯氨酸含量和植物生物量的含量等,从多方面探讨盐胁迫对玉米幼苗的影响。
细胞后含物的实验报告(3篇)
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第1篇一、实验目的1. 了解细胞后含物的概念、种类及作用。
2. 观察细胞后含物的形态、分布和功能。
3. 掌握观察细胞后含物的实验方法。
二、实验原理细胞后含物是指在细胞质中除细胞器以外的各种物质的总称,包括蛋白质、核酸、脂类、糖类等。
细胞后含物是细胞生命活动的重要物质基础,具有多种生物学功能。
三、实验材料1. 实验动物:小白鼠2. 实验器材:显微镜、切片机、染色剂、载玻片、盖玻片等3. 实验试剂:HE染色剂、苏木精染色剂、番红染色剂等四、实验步骤1. 取小白鼠心脏,进行组织切片。
2. 将切片进行HE染色,观察细胞核、细胞质等结构。
3. 对切片进行苏木精-伊红(H&E)染色,观察细胞后含物。
4. 对切片进行番红染色,观察细胞后含物。
5. 在显微镜下观察细胞后含物的形态、分布和功能。
五、实验结果1. 细胞核:呈圆形或椭圆形,染色深,位于细胞中央。
2. 细胞质:呈淡红色,内含有各种细胞器。
3. 细胞后含物:呈红色,主要分布在细胞质中,形态多样,包括颗粒状、网状、膜状等。
六、实验分析与讨论1. 细胞后含物在细胞生命活动中具有重要作用,如储存能量、调节细胞代谢等。
2. 不同类型的细胞后含物在形态、分布和功能上存在差异,反映了细胞生物学功能的多样性。
3. 通过观察细胞后含物,可以了解细胞的生物学功能和代谢途径。
七、实验结论通过本次实验,我们成功地观察到了细胞后含物的形态、分布和功能,进一步了解了细胞生物学的基本知识。
八、注意事项1. 实验过程中要注意切片的质量,确保切片均匀、透明。
2. 染色过程中要注意控制染色时间,避免染色过深或过浅。
3. 观察过程中要注意显微镜的调节,确保观察清晰。
九、实验拓展1. 研究不同细胞类型后含物的差异及生物学意义。
2. 探讨细胞后含物在疾病发生发展中的作用。
3. 利用细胞后含物进行细胞生物学研究,如基因表达调控、信号传导等。
第2篇一、实验目的1. 了解细胞后含物的概念和种类。
肠杆菌生化实验报告
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肠杆菌生化实验报告引言肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的革兰氏阴性菌,广泛存在于自然环境中,并且常被用作实验室常规菌株之一。
肠杆菌不仅对科学研究有重要意义,还在医学和工业领域发挥着重要作用。
为了更好地理解肠杆菌的生理特性和代谢能力,本实验通过一系列生化实验测试肠杆菌的酶活性和代谢特点。
实验目的1. 测试肠杆菌的葡萄糖发酵能力;2. 测试肠杆菌的甲烷发酵能力;3. 测试肠杆菌的氧化酶活性。
实验步骤1. 葡萄糖发酵能力实验1. 取一株经过培养纯化的肠杆菌菌落,接种到含有菌落接种环的葡萄糖发酵液中;2. 培养液于37摄氏度恒温培养箱中培养24小时;3. 观察培养液的颜色变化和气泡产生情况,判断是否发生了葡萄糖发酵。
2. 甲烷发酵能力实验1. 取一株经过培养纯化的肠杆菌菌落,接种到含有菌落接种环的甲烷发酵液中;2. 培养液于37摄氏度恒温培养箱中培养48小时;3. 观察培养液的颜色变化和气泡产生情况,判断是否发生了甲烷发酵。
3. 氧化酶活性实验1. 取一株经过培养纯化的肠杆菌菌落,接种到含有菌落接种环的氧化酶测试培2. 培养液于37摄氏度恒温培养箱中培养12小时;3. 将TMB(3,3′,5,5′-四甲基苯基二氨基苯硫酸盐)滴加到培养液中,并观察液体颜色变化;4. 使用酶标仪测定A450值,判断氧化酶的活性。
实验结果与分析1. 葡萄糖发酵能力实验经过24小时的培养后,观察到培养液由无色变为黄色,产生了大量气泡,表明肠杆菌具有葡萄糖发酵能力。
2. 甲烷发酵能力实验经过48小时的培养后,观察到培养液由无色变为蓝绿色,产生了少量气泡,表明肠杆菌具有一定的甲烷发酵能力。
3. 氧化酶活性实验经过12小时的培养后,滴加TMB后,观察到培养液由无色变为蓝色,A450值显著升高,表明肠杆菌具有氧化酶活性。
结论通过本实验的测试,可以得出以下结论:1. 肠杆菌具有较强的葡萄糖发酵能力;2. 肠杆菌具有一定的甲烷发酵能力;3. 肠杆菌具有较高的氧化酶活性。
植物生长变量实验报告(3篇)
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第1篇一、实验背景植物生长是自然界中一个复杂而神奇的过程,涉及多种环境因素和内部生理生化反应。
为了探究这些因素对植物生长的影响,我们设计了一系列变量实验。
本实验旨在观察不同变量对植物生长的影响,包括光照、水分、温度、营养盐等。
二、实验目的1. 观察不同光照强度对植物生长的影响。
2. 研究水分供应对植物生长的影响。
3. 探究不同温度条件对植物生长的影响。
4. 分析营养盐浓度对植物生长的影响。
三、实验材料1. 植物材料:水稻种子、小麦种子、大豆种子。
2. 实验容器:塑料培养箱、塑料花盆。
3. 实验试剂:不同浓度的营养盐溶液、不同光照强度的光源、温度控制器。
4. 实验工具:电子秤、量筒、温度计、光照计、土壤pH计。
四、实验方法1. 光照实验:将三种植物分别种植在塑料培养箱中,设置不同的光照强度(全光照、半光照、无光照),控制其他条件一致,观察植物生长情况。
2. 水分实验:将三种植物分别种植在塑料花盆中,设置不同的水分供应(充足水分、适量水分、干旱),控制其他条件一致,观察植物生长情况。
3. 温度实验:将三种植物分别种植在塑料培养箱中,设置不同的温度条件(低温、适宜温度、高温),控制其他条件一致,观察植物生长情况。
4. 营养盐实验:将三种植物分别种植在塑料花盆中,使用不同浓度的营养盐溶液浇灌,设置低浓度、中浓度、高浓度三个处理,控制其他条件一致,观察植物生长情况。
五、实验步骤1. 种子处理:将种子浸泡在水中,使其充分吸水膨胀。
2. 种植:将浸泡好的种子分别种植在实验容器中,确保每盆种子数量相同。
3. 变量设置:根据实验目的,设置不同的实验变量,如光照强度、水分供应、温度、营养盐浓度等。
4. 环境控制:控制实验环境,如温度、湿度、光照等,确保实验条件的一致性。
5. 观察记录:定期观察植物的生长情况,包括株高、叶片颜色、叶片数量、根系长度等指标。
6. 数据收集:记录观察结果,并进行统计分析。
六、实验结果与分析1. 光照实验:在全光照条件下,植物生长速度最快,叶片颜色鲜绿;在半光照条件下,植物生长速度次之;在无光照条件下,植物生长缓慢,叶片发黄。
理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用某中医药大学14级临床医学本部三班X伊娜【摘要】目的:研究乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl、低温台氏液、缺氧对离体家兔肠肌的作用及机制。
方法:向浸有离体家兔肠肌的38℃台氏液中依次滴加乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl各2滴,将38℃台氏液迅速换成25℃的台氏液,停止供氧及恢复供氧,用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。
结果:滴加乙酰胆碱、NaOH后,肠肌收缩X力和频率都增大;滴加肾上腺素、HCl和将 38℃的台氏液迅速换成25℃台氏液后,肠肌收缩X力与频率都降低;停止供氧后,肠肌收缩早期X力及频率增强,晚期减弱。
通气后频率先降低又逐渐恢复正常。
结论:一定浓度乙酰胆碱、NaOH可促进肠肌的运动;一定浓度的肾上腺素、HCl以及低温会抑制肠肌的运动;短时间的缺氧能使肠肌收缩一开始增强,随后减弱。
【关键词】理化因素;小肠平滑肌;家兔;电活动1实验材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物家兔(雌雄不限)。
1.1.2实验材料和器械微机化生物信号采集处理系统(RM6240系统),麦氏浴槽,X力换能器,铁支架,双凹夹,恒温水浴箱,气泵,温度计,烧杯,螺旋夹,棉线,L型固定钩,剪刀,眼科镊,注射器,持针器,手术圆针,手术盘,搪瓷碗等;台氏液,乙酰胆碱(10-4mol/L),肾上腺素(10-4mol/L),氢氧化钠,盐酸,阿托品等。
1.2实验方法1.2.1实验装置准备和仪器参数设置安装麦氏浴槽,在麦氏浴槽中加固定量(10-15mL)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度温度在38℃。
通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气体一个个逸出为止。
换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统,仪器参数设置:RM6240,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。
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硕士研究生《昆虫生理生化实验技术》课程代码:3012100018开课单位:植物科技学院责任教师:牛长缨研究生:学号:实验一昆虫血淋巴中蛋白质的分离(聚丙烯酰胺凝胶电泳法)一、实验目的掌握凝胶电泳基本方法,并测定各种昆虫,以及同一种昆虫不同发育阶段的血淋巴的蛋白谱。
二、实验原理昆虫的各种组织,均含有多种蛋白质和各种酶类。
在血淋巴中经分离和纯化后已鉴定的蛋白质有:卵黄原蛋白,脂蛋白,贮存蛋白,滞育蛋白,抗菌蛋白,抗冷蛋白等。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离蛋白质和酶类,可以得到满意的蛋白谱和酶谱,通常能分离到20-30条带。
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂(过硫酸胺)与加速剂(四甲基乙二胺)的作用下,聚合交联而成,具有三维网状结构,能起分子筛的作用,因此常用它作为电泳支持物。
对样品的分离不仅取决于各组分所带电荷的多少,也与分子大小有关。
此外,凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应,即在电泳开始阶段,由于不连续pH和凝胶孔径梯度作用,将样品压缩成一条狭窄区带。
从而提高了分离效果。
三、实验材料和仪器供试昆虫:菜青虫试剂及配制:1.Acr:丙烯酰胺Bis:甲叉双丙烯酰胺TEMED:四甲基乙二胺AP:过硫酸胺Tris:三羟甲基氨基甲烷A:1mol/L HCl 48ml;Tris 36.3g;加水至100ml,pH 8.9;贮存于棕色瓶内,4℃保存。
B:Acr 30g;Bis 0.8g;加水至100ml,贮存于棕色瓶内,4℃保存。
C:10%AP 1gAP加9ml水,最好现用现配,贮存于棕色瓶内。
D:1mol/L HCl 48ml;Tris5.98g;加水至100ml,贮存于棕色瓶内,4℃保存.E:Tris6g;甘氨酸28.8g;加水至1000ml,pH8.3(电极缓冲液)2.1%溴酚蓝指示剂,苯硫脲3.染色液:考马斯亮蓝R250 1.25g; 水227ml; 冰乙酸46ml; 甲醇227ml; 共500ml,溶解后过滤。
4.脱色液:水875ml; 甲醇50ml; 冰乙酸75ml.5.分离胶及浓缩胶的配制:分离胶高pH 不连续系统配制体积比(ml)A1mol/L HClTris加水至100ml48ml36.3gpH 8.92.5BAcrBis加水至100ml30g0.8g5TEMED (直接用原液) 0.01加水12.3910%AP (最后加入) 0.1浓缩胶配制体积比(ml)D 1mol/L HClTris48ml5.98g1.25加水至100ml pH 6.7BAcrBis加水至100ml30g0.8g1TEMED 0.005 水7.64 10%AP 0.10仪器及用具:高压电泳仪与垂直平板电泳槽、冰箱、组织匀浆器、离心机、吸水纸、移液器、注射器及长针头、大培养皿及大玻璃烧杯四、实验方法及内容(一)样品制备血淋巴的采集:用解剖针轻轻刺破菜青虫尾部或头部表皮,用力挤压虫体收集血淋巴,滴入小试管或离心管中,用力适当防止将虫体内脏一起挤入(血淋巴中可加入微量的苯硫脲以防止血淋巴变黑)。
(二)电泳胶的制备1.凝胶框的安装:将两块制胶玻璃插入橡胶框内成为凝胶框,插入电泳槽中,拧紧电泳槽两侧的固定螺丝,使橡胶框垂直安装在电泳槽内不致漏水。
2.分离胶的制备:如上述,混匀后速将此胶加到凝胶框内,上面加正丁醇,晾干,约30分钟。
3.待分离胶凝固后,倾倒出正丁醇,用蒸馏水多次冲洗胶面,最后用吸水纸吸干胶面水分。
4.配浓缩胶,倒入分离胶上面,马上插入梳子,梳子下不能有气泡,用微量移液器向凹陷的梳子孔加入浓缩胶补平。
约10分钟后,浓缩胶干燥。
(三)加样1.待浓缩胶干燥后,取出梳子,留下梳子孔准备点样。
2.样品与40%蔗糖(1:1)混匀,一般各取50µl。
3.点样后,每个样上加溴酚蓝指示剂,然后倒入电极缓冲液,至样品以下,用吸管吸缓冲液覆盖于样品之上,然后再倒满。
(四)电泳1.打开电泳仪,在浓缩胶150v, 跑到分离胶后200v, 大约跑3-4小时,至底部为止,关上电泳仪。
2.倒出电极缓冲液,取出玻璃板,分开,浓缩胶不要,将分离胶倒入培养皿中,倒入染色剂染色(60℃30分钟)3.用脱色液脱色,至胶变白色为止。
(五)分析各蛋白谱带迁移率(Rf)的计算:迁移率Rf:谱带迁移距离(cm)/溴酚蓝迁移距离(cm)谱带迁移距离是指从分离胶起点至谱带中心的距离(cm)五、实验结果及分析实验二SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定牛血红蛋白分子量一、实验目的掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,并用以测定未知蛋白子分子量大小,分离不同大小的蛋白质。
二、实验原理一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基(肽链)分子量。
非变性胶同蛋白质分子结构,分子电荷有关。
而变性胶因为有SDS参与,所以同分子结构电荷等等都无关。
氨基酸有电泳性质,不过在普通Page胶里面电荷远少于SDS,忽略不计,所以可以用以分离不同大小的蛋白质。
三、实验材料及仪器同实验一四、实验方法及内容方法同实验一,不同的是制备分离胶、浓缩胶和电极缓冲液的时候都要加入10%的SDS。
制样:样品要与上样缓冲液混匀,注意蛋白Marker和样品都要沸水煮3-5min。
五、实验结果及分析实验三昆虫基因组DNA的提取及检测一、实验目的1.学习并掌握昆虫基因组DNA提取的一般方法;2.掌握基因组DNA检测的一般方法;3.比较不同样品对基因组DNA提取质量的影响。
二、实验原理CTAB法原理:CTAB是一种非离子去污剂,CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7mM)浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1-0.5mM NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。
经离心弃上清后,CTAB-核酸复合物再用70-75%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。
琼脂糖凝胶电泳检测原理:在pH值为8.0-8.3时,核酸分子带负电,在电泳时由负极向正极移动。
采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作用下,使分子大小和构像不同的核酸分子泳动率出现较大的差异,从而达到分离核酸片段检测其大小的目的。
核酸分子中嵌入荧光染料(如EB)后,在紫外灯下可观察到核酸片段所在的位置。
三、实验材料及仪器供试昆虫:蜚蠊、家蝇、橘小实蝇试剂:2×CTAB溶液:0.05M CTAB (国产)0.1 M Tris·Cl (pH 8.3)0.02 M EDTA1.4M NaClAdd ddH2O to 1000 ml氯仿/异戊醇(24:1),实验前配好,放入通风橱中。
异丙醇,分装在棕色瓶中,-20℃保存。
70%乙醇TE溶液:1mM EDTA,10mM Tris.HCl pH8.0进口琼脂糖电泳缓冲液10×TAE:NaAc4.1g+EDTA1.85g(pH8.0)混合定容于250mlEB 0.5ug/mlDNA Marker:DL2000仪器:冰盒,研钵,1.5ml的离心管,移液器,枪头(蓝黄白三种),一次性手套,玻棒,烧杯,容量瓶,锥形瓶,灭菌瓶四、实验方法及内容1.取试验昆虫于研钵中研碎;2.取约0.4g左右细粉1.5ml离心管,加入1ml 2×CTAB提取液,加入大约2ul的β-巯基乙醇混匀;3.65ºC水浴中放置1h,每隔10分钟上下颠倒混合数次(DNase变性,促进内溶物释放);4.11000rpm离心15分钟;5.吸取600ul上清于新的1.5ml离心管,加入等体积苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1),上下颠倒数次;6.11000rpm离心15分钟;7.取上清,重复5-6步1-2次;8.加入等体积异丙醇-20ºC沉淀半小时;9.弃去上清。
用70%乙醇浸洗沉淀,除去离子及CTAB残余,自然干燥30分钟以上;10.加入50ul TE(含20ug/ml RNaseA),放于4ºC冰箱保存备用;11.0.8-1%琼脂糖凝胶电泳检测:(1)将挡板及制胶板洗净,水平放置在工作台上;(2)称取0.24 g琼脂糖于30 ml 1×TAE中,在微波炉中使琼脂糖颗粒完全溶解,冷却至温热时倒胶;(3)调整好梳子的高度,趁热插入凝胶中;(4)凝胶凝固后,小心拔去梳子,取下挡板;(5)将电泳样品(约5ul)依次点入加样孔中,选一个适当的位置点DNA Marker;(6)将制胶板放入电泳槽中,加入电泳液,打开电泳仪,使核酸样品向正极泳动(注意点样孔在电泳槽的负极一端);电压80v,30min。
(7)电泳完成后切断电源,取出凝胶,放入0.5 µg/ml的溴化乙锭(EB)中浸泡10-15 min,在紫外透射仪上观察电泳结果并照相记录。
五、本实验注意事项1.研钵预冻,粉末转管前至加CTAB前不要融化2.24:1的苯酚氯仿抽提时动作应轻柔,氯仿的操作要在通风柜中进行3.所用试剂必需灭菌,带手套4.EB为诱变剂,可引起插入突变,并有中度毒性,操作时要注意防护。
一般配成1000×储液(0.5mg/ml),工作浓度为0.5ug/ml。
六、实验结果及分析实验四昆虫肌动蛋白(Actin)基因片段的PCR检测一、实验目的:学习并掌握PCR扩增目的基因片断的一般原理和方法,熟练操作琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物的方法。
二、实验原理:PCR(多聚酶链式反应〕是一种体外扩增特异DNA片段的技术,是分子克隆技术中最常用的技术之一,是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。
PCR技术的特异性取决于引物和模板结合的特异性。
反应分为变性(denaturation,)退火(annealing)、延伸(extension)三步,经过一定的循环,介于两个引物之间的特异DNA片段得到大量扩增。
三、实验试剂及作用➢Mg2+:Mg2+能影响反应的特异性和扩增片段的产率。
一般反应体系中1.5-2.5 mmol/L ➢反应缓冲液:使Taq DNA聚合酶的作用环境维持偏碱性。
➢dNTP:在PCR反应体系中其浓度一般为20-200mmol/L,浓度过高、过低都不利。
➢Taq DNA聚合酶:在70-75︒C具最高活性。
具有5’-3’的聚合酶活性和5’-3’的外切酶活性,无校正功能。
是镁依赖性酶。
引物序列Actin基因片段引物:F: 5′- AGGCTAACCGTGAGAAGAR:5′-GGTGGTGGTGAAAGAGTAA由上海生工有限公司合成➢模板DNA:前次所提质量较好的基因组DNA➢ 1.4-1.5%琼脂糖➢EB➢电泳buffer的配制四、操作步骤1. 20×反应体系10 × Ex Taq buffer 2 μlMgCL2(25mM)2uldNTP mixture (10 mM) 1μlPrimer F (20uM) 1μlPrimer R (20uM) 1μlTaq (5 u / 1 μl) 0.2μlddH2O 11.8μl混匀DNA 1 μlTotal 20 μl2. PCR反应循环条件设置:95℃3’94℃1'55℃1' 35 cycles72℃2'72℃10'4℃forever3. 检测:取10 l反应产物电泳;4. 在1.4-1.5%的琼脂糖凝胶上点样电泳;EB染色,紫外观察。