【9A文】脱细胞真皮基质分析报告
脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展
肤移植是覆 盖烧 伤创面的重要手段 ， 严 但
重 烧 伤 常 致 自体 皮 源 不 足 。 寻 找 永 久 的 真 皮 替 代 品 成 为 研 究 的 热 点 。 １９ 年 ９５ Ｗａ ｗｉｈ ｉ ｒ ｔ研 制 ｝ 无 细 胞 真 皮 基 质 ｎ － ｇ Ｉ ｛ （ Ｄ 充 当 永 久 性 真 皮 替 代 物 并 成 功 应 Ａ Ｍ） 用 临床 … 。近 年来 脱 细 胞 异 种 （ ） 皮 猪 真
异种 （ ） 细 胞 真皮 基质 ， 植 闩体 猪 脱 再 溥皮片 ，Ｏ例创 面皮片成 活 ， 面表面光 １ 创
滑 ， 整 ， 挛缩 ， 平 无 关节 功 ｚ Ｉ常 。 Ｈ Ｉ ￣ ｋ ｂ－ ，
临床 医生追 求 的 目标 。既往 曾应 用 同种
异体皮进行移植覆 盖创 面 ， 但面 临排异 反
脱 细 胞 异 种 （ ） 皮 基 质 临 床 应 用 与 研 究 进 展 猪 真
白胶原 等 ， 原 性大 大 减 弱甚 至 无 免 疫 抗
李开通 刘达恩 （ 讯作者 ） 通
原性 。 ５０２ 广 西 医科大 学 第一 附属 医 院 （ 宁 ） ３０ １ 南
筋膜层 上 运用 一 步法 。、 步 法 进 行脱 ・ 二 细胞异种 （ ） 猪 真皮 基 质进 行 复合 移 植 ，
创 面 凹陷 与 绀 织 缺 损 修 复 中应 用 ： 患 者 体 表 组 织 缺 损 或 陷修 复 的 火 键 是 寻
找填充材料 ， 理想 的 材 料 应 是 绀 织 相 容 性
在 临床 开 始 广泛 应 用并 取 得 定 成效 。
本 文 将 就 脱 细 胞 异 种 （ ） 皮 基 质 的 临 猪 真
应 ， 播疾病的潜在风险 ， 传 且来源有 限， 价
人脱细胞真皮基质的结构及与MG63成骨样细胞生物相容性的研究
人脱细胞真皮基质的结构及与MG63成骨样细胞生物相容性的研究刘曼;王少安;莫安春;孟耀;胡杰;李小玉【期刊名称】《华西口腔医学杂志》【年(卷),期】2008(26)2【摘要】目的观察脱细胞真皮基质(ADM)的结构及MG63成骨样细胞在其上黏附与增殖的情况.方法 ADM为实验组,膨体聚四氟乙烯(e-PrFE)膜为对照组,扫描电镜和光学显微镜下观察两组膜的结构.在两组膜上分别接种MG63成骨样细胞,并设空白对照组.采用细胞活力分析仪检测3组细胞增殖活力,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)表达,扫描电镜观察细胞在膜上接种后第1天和第5天的黏附及增殖情况.结果 ADM分为基底膜面和组织面,组织面为鳞片状的结构,基底膜面可见指突结构和毛囊孔.e-FIFE成行排列,由直径比较均一的长椭圆形的裂隙组成.与空白对照组相比,ADM和e-PTFE对MG63成骨样细胞增殖活力和ALP活性无显著影响.扫描电镜观察细胞在两种膜上生长良好,但在ADM膜上,MG63成骨样细胞伸展更充分.结论 ADM适于作引导骨再生膜材料,对MG63成骨样细胞的生长无抑制作用,相比较e-PTFE,ADM具有更优良的结构及生物学性能.【总页数】4页(P129-132)【作者】刘曼;王少安;莫安春;孟耀;胡杰;李小玉【作者单位】口腔疾病研究国家重点实验室,四川大学,四川,成都,610041;南方医科大学附属医院深圳市妇幼保健医院,口腔疾病防治中心,广东,深圳,518048;四川大学华西口腔医院,修复科,四川,成都,610041;四川大学华西口腔医院,修复科,四川,成都,610041;四川大学华西口腔医院正畸科,四川,成都,610041;北京清远伟业生物组织工程科技有限公司,北京,100101;口腔疾病研究国家重点实验室,四川大学,四川,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】R782.1【相关文献】1.氧化应激对人成骨样细胞MG63 活性的影响 [J], 付俊;范琳犀;姜宁;林海英;王琼;;;;;2.MT01对人成骨样细胞系MG63内Toll样受体7,9表达的影响 [J], 孙晗;侯旭;申玉芹;郑义;娄译心;汪洋;齐佳;孙新华3.氧化应激对人成骨样细胞MG63活性的影响 [J], 付俊;范琳犀;姜宁;林海英;王琼4.铬离子对人成骨样细胞MG63增殖活性的影响及拮抗研究 [J], 付俊;张理红;田艾;粱星5.两种矿化胶原的显微结构对成骨样细胞MG63形貌的影响 [J], 刘燕;付玉;刘帅;周彦恒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脱细胞真皮基质临床研究及应用进展
（ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｂ ｕ ｒ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ Ｐ ｌ ａ ｓ ｔ ｉ ｃ Ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｒ ｙ ， Ｙ ｉ ｊ ｉ ｓ ｈ ａ ｎ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆ Ｗａ ｏ ｎ ｎ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｗｕ ｈ ｕ ２ ４ １ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ｃ ｈ ＂ Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ： Ｌ Ｖ Ｄ ａ ｌ ｕ ｎ ， Ｅ — ｍ ａ ｉ ｌ ： ｌ ｄ ｌ Ｏ ７ ７ ６ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ ） 【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ａｃ ｅ ｌ ￣ｌ ａ ｒ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ ｍａ ｔ ｒ ｉ ｘ（ ＡＤ Ｍ） ， ａ ｓ ａ ｎ ｅ ｗｌ ｙ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｅ ｄ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ
表皮 、脱细胞 ，无细菌生长 、无毒性 、无刺激性 、无免疫 排斥 外基质及基底膜 ，主要成 分包括 Ｉ型胶 原 、Ⅲ型胶原 、Ⅳ型胶
反应 ，有弹性 、质地柔软 、不 断裂 的组织工程学材料 。原 材料 原 、Ⅶ型胶原 、弹性蛋 白、蛋白多糖等不溶性基质 ［ １ － ４ ］ 。
． ２ ＡＤ Ｍ 的 生物 相 容 性 为同种异体皮及异种皮 。因深度烧伤愈合后常遗 留有严重 的疤 １
ｓ ｏ ｕ ｒ ｃ ｅ ｓ ｂ ｙ ｅ ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｅ ｐ ｒ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ ｇ ． ＡＤＭ ｈ ａ ｓ ｂ ｅ ｅ ｎ ｗｉ ｄ ｅ ｌ ｙ ｕ ｓ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｐ ａ ｉ ｒ ｏ ｆ ｂ ｕ ｒ ｎ ｗｏ ｕ ｎ ｄ ， ｃ ｏ ｓ ｍｅ ｔ ｉ ｃ ， ｓ ｋ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｔ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｄ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ． Ｔ ｈ ｉ ｓ ｒ ｅ ｖ ｉ ｅ ｗ
脱细胞真皮基质血管化研究进展
化是 Ａ ＤＭ 在 整 复 外 科 领 域 中 实 现 更 好 发 展 的保 障 。 本 文 就
Ａ ＤＭ 的 血管 化 研 究现 状做 一综 述 。 １ Ａ Ｄ Ｍ 的结 构 特 点
后， 前者 的血 管 化 及 细 胞 渗 透 速 度 更 快 。 目前 Ａ ＤＭ 的血 管 化
内后 ， 血管 内皮能较快渗透进去 ， 从 而 实现 血 管 化 ， 为周 围自
体 皮或 自体 细 胞 生 长 提 供 充 足 的 营养 ，这 是 Ａ ＤＭ 相 比 其 它 同 类材 料 最 大 的优 势 。 Ｋｒ ｉ ｓ ｉ ｆ ｎ等 通 过 在 几 内 亚猪 腹 部 人 为 制
造腹 部切 口疝 。 然 后 分 别 用 人 脱 细 胞 真 皮基 质 （ Ｈｕ ｍａ ｎ ａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｕ — ｌ ａ ｒ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ ｍａ ｔ ｒ ｉ ｘ， ＨＡ ＤＭ）和 猪 脱细 胞 真 皮基 质 （ ｐ ｏ ｒ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ —
ｃ ｏ ｓ ａ ｍｉ ｎ ｏ ｇ ｌ ｙ ｃ ａ ｎ， Ｇ Ａ Ｇ） 膜 上 种植 表 皮细 胞 发 现 ， 真 皮 支 架 表 面
孔 径 小 于 培 养 细 胞 直径 （ １ ５～２ Ｏ ｍ） ， 更有利于细胞 生长 、 分
化。 但 之 后 的研 究 结 论 与 此相 反 ， Ｐ ｒ ｕ ｉ ｔ ｔ 等『 吲 认为只有 Ａ ＤＭ 孔
林 梦媛 综 述 ， 夏 德林 审校
（ 泸 州 医 学 院 附 属 口腔 医 院 颌 面 外 科 ， 四川泸州 １ ６ ４ ６ ０ ０ ０ ）
中图分类号 Ｒ ７ ８ ３ ． ９
Hale Waihona Puke 文 献标 志码 Ａ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ０ － ２ ６ ６ ９ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ２ ． ０ ３ ０
异种生物衍生材料(羊脱细胞真皮基质)的初步探究
中文摘要
异种生物衍生材料 (羊脱细胞真皮基质) 的初步研究 摘 要
目的
本研究旨在应用组织工程学技术研制、 开发新的异种生物衍生材料—异种(羊)
脱细胞真皮基质(sheep acelluar dermal matrix，SADM)，以 SD 大鼠为动物模型，参照已 相对成熟的脱细胞真皮基质制备方法，利用异种(羊)皮肤组织，经过多步骤的脱细胞处 理，获得纯天然的生物衍生支架材料。通过组织学研究，分析脱细胞后的生物衍生材料 的组织成分;在透射电镜下观察支架材料的超微结构特点;通过体内、体外的实验研究， 分析异种生物衍生支架材料——羊脱细胞真皮基质的组织相容性,观察羊脱细胞真皮基 质支架材料的血管化过程，探讨其成为皮肤组织工程新的真皮支架材料的可能性；进行 异种(羊)真皮脱细胞真皮基质作为新型医用生物敷料的实验研究。方法 （1）应用高滲 盐—化学洗涤剂及酶消化的方法，并与 0.2％戊二醛交联，对异种(羊)皮肤组织进行脱细 胞处理，制备纯天然的生物衍生支架材料。 （2）比较不同浓度 TritonX-100 对异种(羊) 皮肤组织进行脱细胞作用的影响。 （3）应用组织学方法，对制备的以异种生物衍生支架 材料—羊脱细胞真皮基质的成分进行分析。 （4）通过透射电镜观察异种(羊)脱细胞基质 支架材料的超微结构特点。 （5）应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析羊皮肤 I 型和 III 型胶原含量，旨在探讨羊皮断层处理前后羊皮胶原的变化。(（6）) 分别将高 滲盐—化学洗涤剂及酶消化处理并经 0.2％戊二醛交联及未交联的 SADM 植入 SD 大鼠 体内，通过体内埋植试验观察异种(羊)脱细胞真皮基质支架材料对组织的影响，判断该 支架材料的组织相容性，探讨异种(羊)脱细胞真皮基质成为皮肤组织工程支架材料的可 能性。 (（7）) 建立 SD 大鼠创面模型，进行异种(羊)脱细胞真皮基质作为新型医用生 物敷料的实验研究。 结果 （1） 异种(羊)脱细胞真皮基质(Sheep Acellular Dermal Matrix , SADM)支架材料的成分分析：①组织形态学观察: 1 % TritonX-100 脱细胞后，光镜下见 细胞轮廓存在，细胞外观形态无明显变化。但细胞核有的固缩，有的碎裂，不规则，细
一种脱细胞真皮基质制备方法的研究
一种脱细胞真皮基质制备方法的研究目的：研究脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix，ADM）的一种新的制备方法。
方法：取大鼠背部皮肤制成厚度0.8mm的脱毛皮片，置入1mol/L NaCl 溶液中24h，揭去表皮层，再浸入0.5%Triton X-100溶液中室温震荡48h，得到ADM。
取标本行组织学观察，并行异体移植实验。
结果：NaCl-Triton法制作的ADM，细胞成分脱除彻底，胶原纤维排列规则，没有明显的免疫原性，生物相容性好。
结论：采用NaCl-Triton法制备ADM,价廉而有效，利于推广应用。
Abstract：ObjectiveTo research a new method of producing acellular dermal matrix (ADM). MethodsThe non-hair skin grafts with 0.8mm in thickness were acquired from the back of Wistar rats’. Then the grafts were treated with 1M NaCl 4℃for about 24 hours to rip away the cuticular layers, and the remained dermis were immerged into 0.5%Triton X-100 shaking in normal temperature for about 48 hours to obtain ADM. Took samples of the ADM to do histology observation, and homoplastic tronsplantation.ResultsThere was no cell constituent remained in ADM produced by NaCl-Triton method, and the collagen fibers were in a regular arrangement. ADM had very low immunocompetence and good biocompatibility.ConclusionUsing NaCl-Triton method to produce ADM was low-cost and effective, so it was advantageous to populize application.Key words：acellular dermal matrix; preparation皮肤或粘膜缺损是口腔颌面外科常见病症。
脱细胞异体真皮基质-利用脱细胞处理技术,对真皮组织进行生物化学处理
脱细胞异体真皮基质-利用脱细胞处理技术，对真皮组织进行生物化学处理脱细胞异体真皮基质-利用脱细胞处理技术，对真皮组织进行生物化学处理，完全脱出各种可被宿主识别、能够引起机体免疫排斥反应的细胞成分，同时完整保留了细胞外基质成分及三维框架。
学术术语来源---脱细胞异体真皮基质填塞修复高位肛瘘文章亮点：1 目前传统的肛瘘手术方法存在创伤大、愈合时间长、肛门功能受损大等缺点。
脱细胞异体真皮基质填塞是近年来用于治疗高位肛瘘的微创新方法，体现了手术治疗的新理念和新模式，即从切开性手术转变为修复性手术，从影响肛门功能和外观的破坏性手术转变保护性手术，其具有创伤小、痛苦轻、愈合快的显著特点。
2 试验创新性比较脱细胞真皮基质填塞与肛瘘低位切开并高位挂线治疗高位肛瘘的临床效果，证实脱细胞异体真皮基质填塞修复高位肛瘘具有创伤小、恢复快、疗程短、治愈率高和不损害肛门功能及外观的优点。
关键词：生物材料；材料相容性；脱细胞真皮基质；高位肛瘘；低位切开；对比研究主题词：直肠瘘；复发；对比研究摘要背景：治疗高位肛瘘的方法有瘘管剔除、切开挂线、选择性黏膜瓣推移、生物蛋白胶封堵、括约肌间瘘管结扎等，大都存在创面愈合间长、一次成功率较低、复发率偏高的不足，术后并发症发生率高。
目的：观察应用脱细胞异体真皮基质治疗高位肛瘘的临床疗效，探讨治疗高位肛瘘的微创治疗新方法。
方法：选择100例高位肛瘘患者，根据患者意愿分2组治疗，治疗组采用脱细胞异体真皮基质填塞治疗，对照组采用传统的肛瘘低位切开并高位挂线治疗，比较两组手术时间、术中出血量、术后目测类比评分、术后疼痛持续时间、肛门失禁严重程度评分、创面愈合时间、一期手术成功率、治愈率及复发率。
结果与结论：治疗组手术时间、术中出血量、创面愈合时间、术后目测类比评分、术后疼痛持续时间、肛门失禁严重程度评分均低于对照组(P < 0.05)，一期手术成功率及治愈率高于对照组(P < 0.05)，两组复发率比较差异无显著性意义。
脱细胞真皮基质在口腔医学中的研究应用
脱细胞真皮基质在口腔医学中的研究应用【关键词】脱细胞真皮基质；口腔医学脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix,ADM）是去除真皮中具有抗原性的细胞成份，而保留了原有胶原纤维、弹力纤维等结构的真皮支架。
ADM最先作为真皮替代物用于烧伤患者的创面修复,近些年已有眼耳鼻喉、头颈外科、牙周病学等领域应用报导。
本文要紧对ADM 在口腔科医学领域中的应用作一综述。
1 在颌脸部软组织缺损修复中的应用手术、外伤等缘故引发的口腔黏膜,颌脸部软组织缺损,其修复要紧采纳自体、异体组织移植,因容易发生免疫排斥反映、增加手术次数且受移植组织量的限制而大体不用,而ADM能够克服上述缺点,故而在口腔颌面外科软组织缺损修复和整形中取得了比较好的应用。
Rhee等［１］采纳ADM对29例大面积口腔黏膜全层缺损进行修复,术后4周观看28例创面实现了完全上皮化,无明显疤痕及挛缩形成,以为ADM 能够与口腔基底组织和口腔黏膜较好的结合,口腔黏膜上皮细胞能够沿脱细胞真皮基质胶原支架爬行,最终脱细胞真皮基质被替代并口腔黏膜上皮化。
国内法永红等［２］采纳异体脱细胞真皮基质修复口腔黏膜组织缺损患者46例,并对修复后创面情形和组织病理进行观看，所有口腔黏膜创面愈合良好,无1例显现排斥反映。
经4～6个月后组织学观看,异体脱细胞真皮基质处所生成的组织与正常黏膜组织不易区分。
Brychta等［３］将ADM结合自体刃厚皮、网状皮进行复合移植烧伤创面，发觉可减少瘢痕的形成，减轻色素沉着，增强创面修复后的弹性与柔韧性。
近来Hotta等［４］发觉上皮细胞在ADM上表现出比天然黏膜上更高的生物活性和增殖性能,术前将患者的上皮细胞在体外条件下培育在ADM上制备口腔黏膜替代物,然后移植于创面上，发觉移植10天后黏膜替代物开始与周围上皮结合，创面完全覆盖时刻平均为 d，比直接移植ADM明显缩短，且仅有轻微的瘢痕形成。
2 在牙周外科中的应用牙龈畏缩为牙周病的重要表现，传统用转移自体瓣来修复, 最近几年来ADM用于医治牙龈畏缩及牙根覆盖、牙龈增厚等手术中,取得良好的成效。
脱细胞真皮基质(ADM)制备前后的变化(1)
脱细胞真皮基质(ADM)制备前后的变化(1)】目的探讨脱细胞真皮基质制备前后出现的各种变化。
方法将人全厚皮切制成厚0.5mm的中厚皮片，先后经1M NaCl溶液、0.1％戊二醛、0.5％SDS、0.25％胰蛋白酶、冷冻干燥及水化处理，制得脱细胞真皮基质（ADM）。
观察制备前后出现的各种变化。
结果皮片经处理后，ADM具有良好的弹性和柔韧性。
皮片中所有细胞成分消失，胶原及弹力纤维结构完整、排列规则，基底膜存在。
处理前后弹力/胶原纤维面密度分别为0.25±0.08和0.26±0.08、胶原含量分别为69.18±12.51和85.17±28.93、Ⅲ/Ⅰ型胶原比值分别为0.85±0.22和0.71±0.14，均无明显变化。
结论脱细胞真皮基质制备过程可有效去除皮肤中的细胞成分，完整保留真皮基质和基底膜，形成相对无免疫活性的脱细胞真皮基质。
【关键词】脱细胞真皮基质制备Studies on the changes during preparation of acellulardermal matrix (ADM)【Abstract】 Objective To investigate the changes during preparation of ADM.Methods Split-thickness allograft， 0.5mm thick， wereobtained from full thickness human’s skins with a dermatome. Donor skins were treated with 1 M NaCL， 0.1% glutaraldehyde， 0.5 % SDSand 0.25 % trypsin successively. The resulting acellular dermal matrices were then freeze-dried in a freeze-dryer and hydrated in PBS. The processing technique resulted in acellular dermal matrices (ADM). The dynamic changes during processing were researched.Results All the cellular components in the donor skins were removed and basement membrane was retained. Regular orientation and integral framework of collagen bundles and elastin was present in elastic and flexible ADM. The area-density of elastin/ collagen，gross and Ⅲ/Ⅰ t ype ratio of collagen were 0.25±0.08，69.18±12.51，0.85±0.22 in the donor skins and 0.26±0.08，85.17±28.93，0.71±0.14 in the ADM respectively. There was no change after donor skins weretreated.Conclusion The processing technique removed all the cellular components from the donor skins， retained dermal matrix and basementmembrane， and acquired acellular dermal matrix that exhibited no immunocompetence.【Key words】 acellular dermal matrix preparation脱细胞真皮基质 (acellular dermal matrix， ADM) 是一种良好的基质，可作为真皮替代品与自体表皮复合移植，亦可作为软组织填充材料单独使用，临床上应用愈来愈广泛。
脱细胞真皮基质材料的研究及应用
脱细胞真皮基质材料的研究及应用
脱细胞真皮基质材料是一种新型的生物材料，它是从动物真皮中提取
出来的，经过一系列的处理和脱细胞处理后，得到的一种无细胞的真
皮基质材料。
这种材料具有良好的生物相容性和生物活性，可以广泛
应用于医学领域。
脱细胞真皮基质材料的制备过程主要包括真皮的收集、清洗、消毒、
切割、脱细胞、冻干等步骤。
其中，脱细胞是制备过程中最关键的一步，它可以有效地去除真皮中的细胞和免疫原性物质，从而降低材料
的免疫原性和异种排斥反应。
脱细胞真皮基质材料具有许多优点。
首先，它具有良好的生物相容性
和生物活性，可以促进组织再生和修复。
其次，它具有良好的物理性能，可以作为一种优良的支架材料，用于组织工程和再生医学。
此外，它还具有良好的生物降解性能，可以逐渐被人体吸收和代谢，不会对
人体造成任何损害。
脱细胞真皮基质材料的应用非常广泛。
在组织工程和再生医学领域，
它可以用于修复和再生各种组织和器官，如皮肤、软骨、骨骼、心脏等。
在外科手术中，它可以用于修复和重建各种组织缺损和创伤。
在
美容领域，它可以用于皮肤再生和修复，改善皮肤质量和外观。
总之，脱细胞真皮基质材料是一种非常有前途的生物材料，它具有良好的生物相容性、生物活性和物理性能，可以广泛应用于医学领域。
随着科技的不断进步和研究的深入，相信它将会在未来的医学领域中发挥越来越重要的作用。
猪皮脱细胞真皮基质生产环境要求
猪皮脱细胞真皮基质生产环境要求
1. 温度和湿度，在生产猪皮脱细胞真皮基质的过程中，需要控制生产环境的温度和湿度。
一般来说，适宜的温度范围为18-25摄氏度，适宜的湿度范围为40%-60%。
这样的环境有利于真皮基质的生产和保存。
2. 清洁和消毒，生产环境需要保持良好的清洁和消毒状态，以防止细菌和其他污染物的侵入。
定期进行环境清洁和消毒工作，使用合适的消毒剂和清洁剂对生产设备和场地进行彻底清洁，确保生产环境的卫生安全。
3. 通风和空气质量，生产环境需要保持良好的通风，以确保空气流通和新鲜空气的供应。
同时，需要定期检测空气质量，确保生产环境中的有害气体和微生物等物质的浓度处于安全范围内。
4. 噪音和振动，生产环境中的噪音和振动也需要得到控制，以确保生产过程稳定进行并保障工作人员的健康。
采取隔音和减震措施，降低噪音和振动的影响。
5. 安全设施，生产环境需要配备必要的安全设施，包括紧急报
警装置、灭火设备、应急照明等，以应对突发情况并保障生产人员的安全。
总的来说，生产猪皮脱细胞真皮基质需要一个干净、整洁、温度适宜、通风良好、安全设施完备的生产环境。
这样的生产环境有利于确保产品质量，保障生产人员的健康和安全，促进生产工作的顺利进行。
脱细胞真皮基质抑制皮肤瘢痕的研究
材料与方法
实验材料 实验方法 检测指标 统计学方法
实验材料
实验动物
实验仪器
实验试剂
实验动物
5个月龄的清洁级雄性SD大鼠56只，体重 250～300g，实验动物均由广东医学院实验 动物中心提供
实验仪器
YJ-875DA 医用净化工作台 苏州净化设备厂 SARTORIUS BP210 电 子 分 德国Sartorius公司 析天平 YX280B电热蒸汽消毒器 上海三申医疗器械有限公 司 BRANSONIC 5210E-超声清 洗器 －70℃低温冰箱 Heto恒温水浴摇床 XL-100A 型拉力试验机 LeicaRm-2135型石蜡切片机 美国Bransonic公司 美国Harris公司 丹麦Heto公司 广材试验仪器有限公司 Germany
实验组 Masson(×100)
术后28天
对照组Masson(×100)
实验组Masson(×100)
术后63天
对照组Masson(×100)
实验组Masson(×100)
胶原纤维平均光密度结果
3天
实验组 对照组 正常皮 肤
0.216 ±0.011 0.229 ±0.007 0.414 ±0.027 P<0.05
组织。
本实验的临床指导意义
可应用于各种手术切口瘢痕的防治 可预防增生性瘢痕或瘢痕疙瘩术后的 复发
结论
高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM骨架 结构完整、抗原性成分去除更彻底。 ADM的三维空间结构能通过影响成纤 维细胞的生物活性，抑制它的增生和 胶原的过度分泌，减少瘢痕的形成， 使伤口愈合更趋于正常形态。
实验组 对照组 正常皮肤
图：成纤维细胞计数 ( n/mm2，x ±s)
脱细胞真皮基质：在乳房重建和美容中的应用前景
脱细胞真皮基质：在乳房重建和美容中的应用前景脱细胞真皮基质 (ADM) 于 2001 年首次被报告用于乳腺手术。
自这份报告以来，ADM 已成为基于植入物的乳腺手术中越来越常见的组成部分。
ADM 已显示出在美容和重建乳房中的应用前景。
脱细胞真皮基质脱细胞真皮基质 (ADM) 最初用于烧伤表面重修、腹壁修复、鼓膜置换、硬脑膜修复和牙龈移植。
在乳房手术领域，ADM 首次被引入用于修复美容手术，包括矫正植入物波纹、对称性和软组织缺陷。
2005 年，科学家Breuing 和 Warren是第一个报告在重建乳房手术中使用 ADM 的人。
他们报告了 10 名接受双侧乳房切除术和使用美国AlloDerm公司ADM直接植入异体重建的患者。
这些科学家表示，他们的技术“避免或缩短了组织扩张/植入物重建过程，避免了在扩张潜伏期乳房切除术皮瓣收缩，在皮肤和植入物之间提供了额外的组织层，并提供了一个额外的选择”。
在合适的患者中将传统的两期重建转换为单期手术的优势很快得到认可，并且这种方法已成为许多外科中心的护理标准。
这种演变导致在不到十年的时间内将 ADM 纳入美国 60% 以上的异体重建。
AlloDerm公司是行业中描述的首个人类来源的（即同种异体）ADM产品。
随后，近几年来自同种异体和异种供体来源的多种ADM 进入了市场。
AlloDerm公司的产品包括Flex HD、DermaMatrix、AlloMax 和SurgiMend。
还推出了非ADM 合成网片产品，包括TiMesh和TIGR Matrix网片。
最佳的ADM 应该具有胶原蛋白和细胞外基质成分，并且不应被认为是外来的。
理想情况下，ADM 将被识别为宿主组织，以诱导最小或不诱导宿主免疫炎症反应。
ADM 应由宿主细胞重新填充，并最终重新血管化并纳入宿主组织。
ADM 经历了几个具有专有差异的处理步骤。
在某些情况下，处理包括组织的机械分离、脱细胞、消毒和脱水或冻干（冷冻干燥）。
脱细胞真皮基质-在制备过程中去除了表皮和真皮
脱细胞真皮基质-在制备过程中去除了表皮和真皮脱细胞真皮基质-在制备过程中去除了表皮和真皮中的细胞成分，仅保留真皮的不溶性基质成分，具有低抗原性、快速血管化和一定的稳定性。
脱细胞真皮基质为规则的三维网状支架，Ⅰ型胶原纤维占主要地位，构成脱细胞真皮基质的基本骨架；Ⅲ型胶原纤维减少至原来的一半；Ⅳ型胶原纤维和Ⅶ型胶原纤维几乎消失。
弹力蛋白明显减少，层粘连蛋白损失较多，硫酸软骨素消失殆尽，纤维连接素明显减少，糖蛋白几乎完整保存。
学术术语来源——人、猪、大鼠来源网状层真皮组织学及材料学表征的比较文章亮点：1 课题组前期研究发现猪边腹部网状层真皮较其他部位更适合作为异种脱细胞真皮支架的制作材料，但其组织学及材料学特点未见报道。
2 实验创新比较人、猪边腹部、Wistar大鼠背部网状层真皮的组织学及材料学表征，发现猪边腹部网状层真皮组织胶原纤维束直径及热力学行为与人接近，杨氏模量与人无统计学差异，取皮面积也较大鼠面积大，在单块较大面积脱细胞真皮材料的制作方面具有较好的应用前景；大鼠背部网状层真皮组织胶原纤维束排列与人类似，Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及其比值也接近于人，热稳定性较好，在脱细胞真皮材料制作方面也具有一定的应用价值，在较小面积的脱细胞真皮材料制作时其临床效果可能优于猪边腹部网状层真皮。
关键词：生物材料；材料相容性；猪边腹部；大鼠；网状层真皮；间隙率；胶原束直径；苦味酸-天狼星红染色；杨氏模量主题词：真皮；猪；人；大鼠摘要背景：课题组以往研究证实，猪边腹部网状层真皮质地柔软，伸展性也较其他部位好，适合作为异种脱细胞真皮的制作材料，但将其与人网状层真皮和大鼠网状层真皮进行组织形态学和材料学表征的系统对比未见相关报道。
目的：研究猪边腹部、大鼠背部与人网状层真皮在组织学、生物力学、分子结构和热稳定性等方面的差异。
方法：取人、猪边腹部、Wistar大鼠背部网状层真皮标本并大体观察，石蜡切片后行苏木精-伊红染色、苦味酸-天狼星红染色，显微照相后用图像分析软件测量分析；样本真空干燥并复水后用电子拉伸机测量其力学性能并计算杨氏模量；真空干燥后的样品研碎后用傅里叶红外光谱仪及同步热分析仪分析测量。
多种材料修饰脱细胞真皮基质胶原膜修复关节软骨缺损的实验研究的开题报告
多种材料修饰脱细胞真皮基质胶原膜修复关节软骨缺损的
实验研究的开题报告
一、研究背景
软骨损伤是关节疾病的一种严重类型，严重影响着患者的生活质量。
传统的治疗方法包括关节镜手术和注射类固醇等，但这些治疗方法均存在一定的缺陷。
近年来，
基于细胞外基质修复关节软骨缺损的方法成为了一种热门的治疗方式。
而脱细胞真皮
基质胶原膜是一种新型的材料，可用于修饰关节软骨缺损。
二、研究目的
本研究旨在探究不同种类的材料（如聚乳酸、明胶和玻璃化生物陶瓷等）修饰脱细胞真皮基质胶原膜对关节软骨缺损修复效果的影响，为开发一种新型的治疗关节软
骨缺损的方法提供理论和实验支持。
三、研究方法
1. 实验材料的制备：制备不同种类的材料并进行物理化学性质测试、生物相容性测试等。
2. 离体培养的人类软骨细胞的收集并进行细胞计数、分离等。
3. 制备脱细胞真皮基质胶原膜并进行物理化学性质测试、生物相容性测试等。
4. 将不同种类的材料与脱细胞真皮基质胶原膜进行复合。
5. 体外研究：将复合后的材料与软骨细胞共同培养并进行细胞增殖、分化等实验。
6. 动物实验：将复合后的材料在实验动物身上进行植入，并进行生物学、生化学、组织学等方面的检测。
四、研究意义
本研究可以为探究新型的关节软骨缺损治疗方法提供有力的支持。
同时，通过对不同种类材料与脱细胞真皮基质胶原膜进行复合，可以更好地了解这些材料在关节软
骨缺损修复中的作用机制，从而为临床治疗提供更加有效的方案。
脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展
脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.06.008创面处理贯穿烧伤治疗的全过程，皮肤移植是覆盖烧伤创面的重要手段，但严重烧伤常致自体皮源不足。
寻找永久的真皮替代品成为研究的热点。
1995年wainwright研制出无细胞真皮基质(adm)充当永久性真皮替代物并成功应用临床［1］。
近年来脱细胞异种(猪)真皮在临床开始广泛应用并取得一定成效。
本文将就脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用与研究进展作一综述。
脱细胞异种(猪)真皮基质的研制方法国内目前使用的基本是由江苏启东生物材料研究所提供的，已形成较规范的制备方法。
具体过程如下：用50kg左右无皮肤疾患的健康小白猪，活杀后剃毛，取下大张皮肤，用电动劈皮机制成0.3～0.5mm的断层皮片，用洗必泰溶液消毒后，用无菌高渗盐水(30g/l)浸泡24小时，脱去表皮，经戊二醛(2g/l浸泡10分钟)交联后，以含有胰蛋白酶为主要原料的脱细胞液进行处理，生理盐水冲洗，再制成网状包装保存备用。
脱细胞异种(猪)真皮基质生物学特性猪与人类在生物种属上具有较高同源性，异种猪皮在结构上接近于人皮肤。
异种或异体皮肤移植后出现排异反应多是因为细胞成分的存在，包括表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等。
而脱细胞异种(猪)真皮基质在制作中经脱细胞和交联处理除去了可被宿主识别的细胞成分，只保留非细胞成分的细胞外基质、蛋白胶原等，抗原性大大减弱甚至无免疫真皮在皮肤移植和创面稳定性上有很重要的作用，创面愈合后的质量及瘢痕形成情况与移植皮片中真皮含量有关，含量越高，创面瘢痕形成量越少，挛缩程度越轻［2］。
脱细胞异种(猪)真皮基质能为创面提供大量的真皮组织，且其胶原纤维排列规则，能够减少瘢痕形成和挛缩畸形发生率。
脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用对烧伤创面的重建作用：烧伤创面处理是烧伤治疗的主要内容。
传统包扎治疗烧伤创面换药次数多，增加了患者痛苦和医生工作量，因此寻求一种能够覆盖创面而中间不需要太多换药的外用敷料是临床医生追求的目标。
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前言大面积深度烧伤或其他创伤导致皮肤真皮成分缺损，通过刃厚小皮片或微粒植皮技术虽然能使创面愈合，但由于其缺乏真皮层，导致愈合后创面弹性差，凸凹不平，易挛缩且不耐摩擦。
移植自体皮瓣或全厚及中厚皮片固然是最好的方法，但大面积深度烧伤后，能作为供皮区的部位已很少，供皮区又将形成同等程度的缺损，日后形成瘢痕。
为解决这一问题，国内外学者致力于寻找一种理想的真皮替代品。
1.脱细胞真皮基质概述脱细胞真皮基质（acellulardermalmatriRADM）是用物理、化学等方法将人或动物皮肤中的表皮层及细胞成分彻底去除仅保留真皮中含胶原网架的细胞外基质。
脱细胞真皮基质由于完全没有了细胞成分和Ⅰ、Ⅱ型细胞相容性抗原的主要免疫活性,故一般不会诱发排斥反应。
但脱细胞真皮基质保留有正常胶原的三维结构和真皮中含胶原支架的细胞外基质能为组织细胞的再生提供一个良好的支架结构，具有创面覆盖、组织缺损填充、引导组织再生和支架等作用。
脱细胞真皮基质中无细胞成分,免疫活性低,不会诱发免疫反应。
它保留了表皮和真皮间的基底膜,移植后可形成真皮面和基底膜面。
基底膜面可支持断层皮片的生长,这对表皮细胞的增殖分化以及移植皮的外观和功能起着重要作用,同时也有利于种子细胞的點附增殖等。
真皮面利于脱细胞真皮基质的快速血管化,为成纤维细胞的增殖提供支架,有助于胶原成分改建,促使成纤维细胞排列分布规则,形成结构形态正常的胶原纤维,此外,还有诱导、调节宿主细胞和新生血管长入,促进上皮形成等作用。
此外,细胞外基质蛋白也可以促进表皮细胞的再生。
因此,脱细胞真皮基质可作为真皮替代品,在为烧伤创面提供真皮的同时,可明显减少瘢痕形成。
是一种理想的真皮替代材料。
1.1脱细胞真皮基质的制备方法根据来源的不同脱细胞真皮基质分为异体脱细胞真皮基质（来源主要为尸体皮）和异种脱细胞真皮基质（来源为动物皮以猪皮和牛皮为主）两种。
制备过程都是尽可能的去除具有抗原性的细胞(表皮细胞、毛囊、皮脂腺、汗腺及真皮中血管内皮细胞、成纤维细胞等),保留完整的胶原纤维成分和组织基本结构。
早期人们曾利用反复冻融法、胰酶消化法等制备ADM，但由于这些方法不能完全去除真皮内细胞成分,导致ADM移植后引起宿主强烈的排异反应,而且制备过程也过于复杂,因而并未广泛开展。
目前ADM的制备方法主要有DispaseII-Triton法、高渗盐-SDS法、高渗盐-酶消化法、NaOH消蚀法等。
只要条件控制适度,这些方法均可制备出合乎条件的ADMDispaseII-Triton法皮肤标本先经DispaseII处理(2.5U/ml溶液,4℃下作用48h),再经TritonR2100处理(0.5%溶液,室温下作用48h)可将皮肤中的细胞彻底脱除。
DispaseII主要分解IV型胶原和纤维粘蛋白,能裂解基底膜中的致密层。
DispaseII 是一种快速有效的分离表皮与真皮的酶。
标本经DispaseII处理后,表皮真皮间的基底膜及皮肤附属器官周围结缔组织成分均被破坏。
DispaseII同时也破坏了纤维细胞和结缔组织基质间的连结,更有利于TritonR2100的浸透。
TritonR2100属于非离子型表面活性剂,在溶液中稳定性高,不易受强电解质无机盐存在的影响,能与生物膜中的磷脂等脂质结合形成复合物,溶解于溶液中。
同时,TritonR2100中的疏水端也能和膜蛋白破坏生物膜,从而使细胞溶解破坏。
该方法细胞脱除彻底,但同时基底膜结构破坏大,不利于上皮细胞底黏附生长。
高渗盐-SDS法皮肤标本先经高渗盐作用(1mol/LNaCl溶液,37℃下作用24h)使锚着细丝与表皮基底细胞的半桥粒分离,从而完整地去除表皮。
然后在未改变胶原结构的情况下,再用破膜剂十二烷基硫酸钠(0.5%SDS溶液,室温下作用1h)将皮肤标本中的细胞脱除。
该方法细胞脱除也比较彻底,基底膜完整保留,但真皮中Ⅳ型胶原、纤维结合素、弹力素、HLA-DR等含量较多,因此具有相对高的抗原性。
高渗盐-NaOH消蚀法该方法利用高渗盐(1mol/LNaCl溶液,37℃下作用24h)去除表皮，同时再利用NaOH(低浓度溶液,室温下作用18h)中碱离子的吸水作用夺取组织细胞的水分,使细胞脱水而死亡;最后使用超声清洗仪清洗除去细胞。
该方法细胞彻底脱除,胶原纤维结构完整,排列较正常松散。
但要注意控制NaOH的作用时间,如果过长(如:36h)会使胶原变性,蛋白裂解,得到的是真皮皮浆。
酶消化-去垢剂法该方法用胰蛋白酶(0.25%溶液,4℃下作用24h),接着用TritonR2100(0.1%溶液,室温下作用8h),最后用Dispase(560units/L,4℃下作用24h)。
RaR等[7]使用胰蛋白酶(0.25%溶液,室温下作用18h)和SDS(0.1%溶液,室温下作用12h),然后用胰蛋白酶再作用12h,最后用Dispase(560units/L,25℃下作用12h),制得的基质均无细胞成分,胶原支架完整。
脱细胞真皮基质的制备流程1.2脱细胞真皮基质的作用机制脱细胞真皮基质保留了真皮与表皮之间的基底膜,故在应用时可形成基底膜与真皮两个面。
基底膜面支持移植于其表面的断层皮片的生长,对表皮细胞的分化成熟和移植皮的外观与功能起着非常重要的作用,亦有利于组织工程中种子细胞或培养的角朊细胞的黏附、扩展等。
真皮面有利于ADM在宿主内快速血管化,为成纤维细胞的生长提供良好的支架,有助于对脱细胞真皮胶原成分的改建,促使成纤维细胞形成形态结构及排列分布正常的胶原纤维,还具有调节、诱导、促进宿主细胞长入,促进纤维细胞增生、新生血管和上皮形成等作用。
真皮成分的多寡是创面愈合后弹性、外观是否良好的重要因素,瘢痕形成的量及挛缩程度与所植皮片中真皮的含量成反比。
真皮含量不足时成纤维细胞只能合成不成熟的基质,此种基质经改建后即成为瘢痕组织。
脱细胞真皮基质作为一种真皮代替物能被宿主接纳,并被改建成为自体真皮组织,减少皮片移植后的瘢痕形成及挛缩,能与全厚皮片移植后的效果相媲美。
1.3脱细胞真皮基质的临床应用范围1.腹壁外科(1)婴幼儿腹壁缺损（2）嵌顿性或绞窄性腹壁疝（3）腹壁缺损伴有污染或感染创面（4）食道裂孔疝（5）盆底腹膜修复（6）腹腔室间隔综合症腹腔关闭（7）全腹壁切除或缺损的腹壁再造（8）其他复杂的腹壁修复情况2.泌尿外科长段尿道狭窄或缺损、先天性尿道下裂、尿瘘、膀胱扩容、肾组织修补3.结直肠、肛门外科(1)非急性期的单纯性高位和低位肛瘘（2）阴道前庭瘘(3)对肛门括约肌功能影响大的肛瘘和肛周感染（4）管状消化道瘘4口腔科（1）口腔黏膜缺损（2）牙周手术治疗（3）腭裂修复术中修复软组织缺损5整形外科(1)烧伤创面及烧伤后期瘢痕挛缩畸形的修复(2)慢性创面及病理性瘢痕的修复(3)面部整形及美容:矫正鼻畸形、眼睑，结膜层缺损的修复、隆唇6耳鼻喉科（1）鼓膜穿孔的修补（2）鼻中隔穿孔的修补（3）咽部缺损的修复（4）脑脊液鼻漏修补及蝶鞍的修复1.4产品性能要求和技术可行性检测标准外观目测规格型号企标单位面积重量企标酸碱度企标干燥失重企标耐温性企标炽灼残渣企标重金属含量GB/T14233.1-20RR降解时间GB/T16886.13-20RR抑菌性能GB/T20944.3-20RR 致热性GB/T16886.11-20RR附录F生物学评价皮内反应试验GB/T16886.10-20RR 迟发型超敏反应GB/T16886.10-20RR 细胞毒性试验GB/T16886.5-20RR 全身毒性（急性）GB/T16886.11-20RR 亚慢性毒性GB/T16886.11-20RR 遗传毒性GB/T16886.3-20RR 植入GB/T16886.6-1997 血液相容性GB/T16886.4-20RR 无菌试验GB/T14233.2-20RR注：以上产品性能指标需要进行检测之后才能设定企业本身的产品性能要求。
从质量控制角度，可从有脱细胞真皮生产能力的厂家采购真皮材料，根据公司制定的原材料检验标准对采购的真皮材料质量进行控制，质量合格方能进入生产，然后利用公司现有分切设备，包装等设备进行生产，经过灭菌后根据产品企业标准进行检验，检验合格后方能出厂销售。
从关键技术控制角度，可对关键技术指标进行设定，要求供应商达到采购设定的性能技术要求，并制定原材料检验标准，根据检验标准对采购的真皮材料进行关键技术指标的检验，检验合格后方能入库生产。
因此，终上所述，可吸收止血纱布技术可行，产品质量可控。
2.国内外上市脱细胞真皮基质现况异体脱细胞真皮基质国内外上市的产品有美国LifeCell公司推出的Allodern，该产品的异体真皮来源于尸体皮。
临床上应用于烧伤，瘢痕切除创面取得良好的效果。
而国内上市的产品主要有北京桀亚莱福生物技术有限公司生产的J-1型异体脱细胞真皮基质和北京清源伟业生物组织工程科技有限公司生产的脱细胞异体真皮基质医用组织补片(商品名称:瑞诺)。
虽然异体脱细胞基质在临床上的应用效果较好但也存在着不可忽视的不足（1）异体皮供体来源有限；（2）有传播人类疾病的可能性；（3）存在着伦理问题；（4）需要低温保存，保存运输不方便。
而目前，异种脱细胞真皮基质在国内以上市的有：（1）北京瑞克倍尔医疗器械有限公司出产的脱细胞真皮基质敷料，该产品以猪皮为主要原材料，采用新型物理、化学及生化等方法除去了猪皮内的各种杂质，完整地保留了真皮细胞外基质的形态，保持原有的三维立体网状结构。
主要适用于1.外伤撕脱伤创面；2.骨外露、肌腱外露创面；3.慢性溃疡、褥疮及肉芽创面；4.中厚皮供皮区创面；5.刃厚皮、邮票皮、微粒皮移植手术创面，6.烧伤创面、切削痂后的创面。
（2）江苏优创生物医学科技有限公司生产的异种脱细胞真皮基质敷料(商品名：东慈真皮基质)同样该产品也是以猪皮为原料，，经病毒灭活与脱细胞等工艺制备而成具有三维网状结构，主要用于浅Ⅱ度烧(烫)伤创面、供皮区创面、深度烧伤切(削)痂创面，肉芽创面等创面的覆盖治疗。
（3）江阴奔翔生物科技有限公司生产的猪皮脱细胞真皮基质敷料，同样也是以猪皮为原料经纯化处理冷冻干燥后成型加工而成，该产品适用于Ⅱ度烧伤创面、供皮区创面覆盖。
（4）烟台正海生物技术有限公司生产的口腔修复膜(商品名：海奥)和皮肤修复膜(商品名：海孚)两者均为牛的皮肤组织经一系列处理后制备的异种脱细胞真皮基质，主要成分为胶原蛋白。
前者适用于：1.口腔内软组织浅层缺损的修复。
2.腮腺手术中预防味觉出汗(FreR`s)综合征。
后者适用于：真皮层缺损的创面修复。
上述这些一种脱细胞真皮基质的作用机理与异体脱细胞真皮基质类似，临床使用效果接近于异体脱细胞真皮基质。
同时，异种脱细胞真皮基质的来源充足，采用冻干工艺，常温存储，有效期长，运输和存储都更为方便。