苯酚降解菌TX1的补料分批扩大培养策略研究

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苯酚降解细菌实验报告

苯酚降解细菌实验报告引言苯酚是一种有机溶剂和消毒剂，在工业生产和日常生活中广泛使用。

然而，由于其具有较强的毒性和对环境的潜在危害，苯酚的降解成为了一个重要的研究领域。

本实验旨在从自然环境中分离得到能够降解苯酚的细菌，并对其降解效果进行评估。

实验方法物质及设备- 实验材料：含有苯酚的培养基、蒸馏水、苯酚溶液- 实验仪器：培养皿、移液管、恒温振荡器、烧杯、离心机实验步骤1. 从自然环境中采集土壤、水样品。

2. 将土壤、水样品分别加入含有苯酚的培养基中。

3. 分别在不同温度下（比如25、37）进行恒温振荡培养，培养时间根据实验需求确定。

4. 取样品进行稀释，并分别接种在含有苯酚的琼脂培养基上。

5. 利用平板计数法，计算出细菌的菌落数目。

6. 采用高效液相色谱法检测苯酚的含量。

7. 进一步筛选表现出较强降解能力的细菌，进行进一步鉴定。

实验结果细菌菌落数目在实验过程中，我们成功分离到了一株对苯酚具有较强降解能力的细菌。

经过平板计数法的计算，其细菌菌落数目为1.2x10^6 CFU/ml。

苯酚的降解效果我们利用高效液相色谱法对苯酚的降解情况进行了检测。

实验结果表明，在细菌作用下，苯酚的降解速率较快。

在48小时内，苯酚的浓度从初始浓度的100 mg/L 降至5 mg/L，降解率达到了95%以上。

数据分析与讨论细菌的降解机制细菌通过代谢苯酚的酶系将苯酚降解为无机化合物，并利用其作为碳源和能源。

该细菌可能通过以下途径降解苯酚：1. 将苯酚通过羟化作用转化为苯酚羟化物；2. 苯酚羟化物经进一步代谢，生成苯甲酸、邻苯酚等化合物；3. 经过一系列代谢反应，最终生成无机化合物，如水和二氧化碳。

细菌的应用前景本实验分离得到的对苯酚具有降解能力的细菌，拥有较高的降解效率和广泛的适应性。

这些细菌可应用于苯酚的处理和环境修复，对于解决苯酚污染问题具有良好的应用前景。

结论通过本次实验，我们成功地分离出具有苯酚降解能力的细菌，并对其降解效果进行了评估。

苯酚降解菌的分离鉴定及降解特性的初步研究

苯酚降解菌的分离鉴定及降解特性的初步研究马立安;石磊【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2007(004)004【摘要】为了筛选高效降解苯酚的微生物,为工业化生物处理受苯酚类污染的工业废水及污染物提供理论指导,采集长期受苯酚污染的污泥,通过选择性增菌、驯化、平板分离、摇瓶复筛等方法从中分离高效降解苯酚菌株.获得一株可耐受高浓度苯酚(2.0g/L)且具有高效降解苯酚能力的假单胞菌(PD3),该菌降解苯酚的最适条件为pH值7.0、温度30℃、苯酚浓度小于0.5g/L.通过调节工业废水及污物中苯酚浓度(小于0.5g/L),可利用分离的假单胞菌(PD3)在上述最适条件下对苯酚进行降解处理.【总页数】3页(P55-57)【作者】马立安;石磊【作者单位】长江大学生命科学学院,湖北,荆州,434023;长江大学生命科学学院,湖北,荆州,434023【正文语种】中文【中图分类】Q93;X703【相关文献】1.苯酚降解菌TX1的分离鉴定及其降解特性 [J], 邱凌峰;吴芳芳;姚尧2.苯酚降解菌F5-2的分离鉴定及其降解特性 [J], 何熙璞;刘鸿杰;张敏;梁锦添;李俊芳;陈保善3.一种苯酚降解菌Pseudoxanthomonas sp.BF-6的分离鉴定及其降解特性及途径研究 [J], 卫晓博;侯颖;程豪杰;秦翠丽;牛明福;徐建强4.苯酚降解菌DF51的分离鉴定、降解特性及其固定化的研究 [J], 张谨华;李鹏丽;王婧人;李彩虹;杨秀清5.苯酚降解菌红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strain PNAN5)的分离鉴定、降解特性及其开环双加氧酶性质研究 [J], 沈锡辉;刘志培;王保军;刘双江因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

苯酚降解菌TX1的分离鉴定及其降解特性

ａｎｄＫ．ｗｅｅ０６７ｈ＿，１１／ｄ２．ｇＬｒｐｃｉｅｙｒ．６ｒ１５．４ｍｇＬａｎ７１７ｍ／，ｅｓｅｔｌ．ｖ
ＫｅｒｓＰｈｎＩＴ／ｈｓｏｏＣａｅｈ１２ｄｏｙｅａｅＧｒｗｔｉｅｉｓｙｗｏｄ：ｅｏｒｏｐｒｎｃｔｃｏＩ．－ｉｘｇｎｓｏｈｋｎｔｃ
ＩｄｃｂｅｉｔａｅｌｌｅｚｍｅＷｉｈｅｄａａｏｂａｎｄｉａｃｕｔｆｈｔａｎＴＸ１ｔｗｔｉｅｉｓｎｕｉｌｎｒｃｌａｒｎｙ．ｕｔｔｔｔｉｅｎｂｔｈｃｌｒｏｅｓｒｉｈｕｅｔ，ｉｇｏｈｋｎｔｓｒｃ
ｇｅｕｒｃｏｐｒｎｓｎｍｅＸ１ｎｓＴｉｈｓｏｏｐ．ａｄＴ．Ｔｈｒｌｎｒｔｄｎｔｅｍｅａｏｉａｈｙｏｈｏｂｕｓｓｒｎｅｐｅｉａｙｓｕｙｏｈｔｂｌｐｔｗａｆｐｅｎｌｏｌｈｉｔａｉｍｉｃａｔ
ＳａｇａｎｉｓｅｔＳｉ］ｓｈｎｈｉＥｖｏｍｎａｃｒｅｒＴｌｅｃ
苯酚降解菌Ｔ的分离鉴定及其降解特性Ｘ１
邱凌峰
苯酚降解菌Ｔ的分离鉴定及其降解特性Ｘ１
ｓｌｔｏ，ＩｅｔｆａｉｎｎＣｈｒｃｅｉａｉｎｆｈｎ —ＤｅｒｄｎｏａｉｎｄｎｉｉｔｏａｄｃａａｔｒｚｔＯＯＰｅＯＩｇａｉｇ
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氧酶（２０）位途径开环，成丙酮酸和乙醛。后Ｃ３间形最

苯酚降解菌的分离鉴定及降解特性的初步研究

菌，研究了其生长条件及降解特性，可为工业化生物处理含苯酚类污染物提供理论依据。
１试验材料及方法
１１材料．
ｉ）菌株来源取荆州市沙隆达农药厂排污口处的污泥作为试验的原始菌液。２）培养基 ① 选择培养基（机盐培养基）：ＮＨＮＯ．１０，ＣＣ０ｉ，ＫＨＰ０５，无］．．ｇａ１．ｇ。Ｏ．ｇ
按上述方法培养驯化，苯酚浓度增加至１５．ｇＬ。．、２０／
将含２５／．Ｏ／：ｍｌ０含．ｇＩ苯酚的新鲜选择培养基中，重复上述培养
驯化，至苯酚浓度达到２Ｏ／．ｇＩ，完成１个驯化周期。共进行３个驯化周期，得到耐高浓度苯酚的菌种。
苯酚降解菌的分离鉴定及降解特性的初步研究
马立安，石磊（长江大学生命科学学院，北荆州４４２）湖３０３
［要］为了筛选高效降解苯酚的微生物，为工业化生物处理受苯酚类污染的工业废水及污染物提供理论摘
维普资讯
长江大学学报（自科版）理工卷２０年１月第４第４０７２卷期ＪｕｎｌｆａｇｚｎｖｒｉＮｔｃＥｉｃｏｒａｏｎｔＵｉｅｓｙ（ａＳｉｄｔｉ＆ＥｇＶＤｃ２０．Ｖ１・Ｙｅｔ）Ｓｎｅ．０７ｏ．Ｎｏ４４
１２方法．
１）选择增茵与驯化

某种苯酚降解细菌的分离,纯化,鉴定

某种苯酚降解细菌的分离、纯化、鉴定一、引言近年来，环境污染问题日益突出，其中有机污染物的排放成为了一个备受关注的话题。

苯酚作为一种有机化合物，其在工业生产和生活中被广泛使用，但是其排放也给环境造成了不小的压力。

寻找一种能够高效降解苯酚的细菌成为了当下研究的热点之一。

本文将围绕某种苯酚降解细菌的分离、纯化、鉴定展开讨论。

二、苯酚降解细菌的分离1. 采样地点选择在开始分离苯酚降解细菌之前，首先需要明确采样地点的选择。

一般来说，苯酚的排放源比较集中，因此我们可以选择一些工业废水排放口、化工厂周围土壤和水体等地点进行采样。

2. 细菌分离方法经过采样后，我们可以利用稀释涂布法将采样的土壤或水样涂布在琼脂平板上，然后在适宜的温度和培养基条件下进行培养。

通过分离光圈和纯化培养，我们可以获得一系列有苯酚降解能力的细菌菌落。

三、苯酚降解细菌的纯化1. 选优菌落的鉴定在得到一系列有苯酚降解能力的细菌菌落之后，我们需要通过形态学、生理生化特性等手段对细菌进行初步鉴定，筛选出表现最佳的细菌进行后续的纯化培养。

2. 纯化培养方法对选优细菌进行纯化培养可以采用多次转接法，即将单一细菌菌落进行二次以上的转接，以获得单一细菌培养物。

四、苯酚降解细菌的鉴定1. 生化鉴定利用生化试剂对细菌进行生化反应鉴定，例如利用氧化酶试剂对细菌进行氧化酶试验，利用酚红素试剂对细菌进行酚氧化酶试验等，从而初步判断细菌的代谢特性。

2. 分子生物学鉴定通过16S rRNA基因测序鉴定细菌的亲缘关系，确定其属种级别的分类位置。

五、个人观点和总结苯酚降解细菌的分离、纯化、鉴定是一项具有挑战性的工作，需要从多个角度进行综合分析和判断。

通过本文的探讨，我们不仅仅了解了苯酚降解细菌的基本分离和纯化方法，还深入了解了细菌鉴定和分类的相关技术。

希望通过这些工作，能够为环境污染治理和资源开发提供一些有益的参考和借鉴。

苯酚是一种常见的工业化合物，在工业生产和生活中被广泛使用。

苯酚的生物降解特性研究_丁霞

“有机污染物——苯酚的生物降解特性研究”设计方案丁霞一、实验目的酚类化合物为原生质毒物，毒性较大。

焦化、煤气、石油、木材防腐、造纸、合成氨等工业废水中都含有高浓度的苯酚。

含酚废水在我国水污染控制中被列为重点解决的有害废水之一。

利用降解菌来控制苯酚的污染，越来越受到人们的重视。

本项目拟采用微生物培养、苯酚生物降解的途径及其降解关键酶的分析、微生物DNA的提取、分光光度计测定、PCR、TA克隆等实验技术，阐明苯酚降解菌株的生长特性和苯酚的生物降解特性，苯酚降解菌的系统发育。

对学生从事有机污染工业废水的生物处理以及有机污染的土壤或水体的生物原位修复方面的科学研究具有深远的意义。

二、实验原理利用以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐溶液作为驯化液，对某废水处理厂活性污泥进行驯化培养，从中分离筛选出苯酚降解菌。

利用比浊法测定微生物生长量，4-氨基安替比林直接光度法测定苯酚浓度，分析苯酚生物降解的途径及其降解关键酶，PCR扩增细菌的16s RNA进行苯酚降解菌的系统发育分析。

1）微生物生长量的测定方法——比浊法比浊法是实验室中常用的用来测定微生物生长量的方法，以反映微生物数量或浓度的一种指标。

该方法是根据当某一波长的光线通过混浊的液体后，光的强度将被减弱。

入射光与透过光的强度比与样品液的浊度和液体的厚度相关。

根据所测得的吸光值，就可以得到微生物的生长量。

本实验采用的波长为600nm，使用空白培养基作为对照。

2) 苯酚浓度的测定方法见后面附录。

3）苯酚降解菌的系统发育分析16S rRNA基因是细菌染色体上编码rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌的染色体基因组中。

16S rRNA具有高度的保守性和特异性。

随着PCR技术的出现及核酸研究技术的不断完善，16S rRNA基因检测技术已成为微生物检测和鉴定的一种强有力工具。

该技术主要有三个步骤：首先，基因组DNA的获得；其次，16S rRNA基因片段的PCR扩增，并进行TA克隆用于测序分析；最后，进行16S rRNA基因序列的系统发育分析。

发酵简答题

1. 简述菌种保藏的基本原理和方法？2. 酶解法制备淀粉水解糖的优点和缺点有哪些？3. 简述发酵过程的组成部分？4. 简述发酵工业对微生物菌种的要求七、回答题（本大题共2小题，第一小题7分，第二小题6分，共13分）1．分析发酵时泡沫产生的原因、泡沫对发酵的影响，并说明常见除去泡沫的方法。

2．分析发酵工业中杂菌污染的危害、原因和预防措施五、1．菌种保藏的原理是将菌种在低营养水平、缺氧状态，干燥和低温等条件下贮藏，使菌种处于“体眠”状态，抑制其繁殖能力，从而减少其变异。

方法有斜面低温保藏法、蒸馏水保藏法、麸皮保藏法、冷冻干燥法、液氮保藏法等。

2．以酶为催化剂，在常温常压下将淀粉水解为葡萄糖的方法。

优点：反应条件温和；副反应少；可在较高淀粉浓度下水解，对原料要求不高；糖液的质量高、营养物质较丰富。

缺点：水解时间长，酶制备较复杂，设备较多。

3．菌种的培养基原料来源广、廉价；培养条件易控制；发酵周期短；菌株高产；菌种抗性强，如抗病毒（噬菌体）能力强；菌株性状稳定，不易变异退化；菌种安全性高，不产生有害物质。

4．危害有：杂菌产生的一些物质会影响产量或产品质量、消耗大量的营养物质而影响生产菌的正常生长，杂菌产生的一些物质可以抑制生产菌的生长，杂菌会寄生于生产菌体内，杀死生产菌。

评分标准：根据答案要点及书写情况酌情给分。

六、原因：①机械泡沫。

②发酵泡沫。

影响：减少发酵的有效容积、增加了染菌的机会；泡沫严重时，影响通气搅拌的正常进行，影响生产率。

消泡方法：化学消泡和机械消泡。

评分标准：根据答案要点及书写情况酌情给分。

五、论述绘图题1、列举膜分离技术并作相应说明。

2. 绘图并说明氧从气相传递到液相的菌体中需要克服的几种阻力。

第页共9 页3. 噬菌体的特点、感染过程危害程度及治理措施。

39．发醇过程中异常现象（发酵液转稀、发酵液过浓、耗糖缓慢、pH不正常）处理措施？40．Monod(莫诺)方程表明了什么和什么的重要关系？简介Monod(莫诺)方程？41．补料分批发酵技术的特点, 与分批发酵，连续发酵的区别？42 通风发酵设备中的机械搅拌发酵罐必须满足的基本条件？六、论述题：（每小题10分，本大题共20分）43．如何提高高产菌的稳定性？44．发酵过程中溶解氧的控制措施？（从供氧和需氧量方面考虑）39．发酵液pH对发酵的影响包括哪些方面？40．比底物消耗速率方程？41．补料分批发酵的适用范围？42．优良的发酵装置应具有的基本特征包括哪些内容？六、论述题：（每小题10分，本大题共20分）43．试述对微生物反应器设计的基本要求？44．大规模微生物发酵工程生产, 选择菌种应遵循的原则是什么？（微生物发酵工程对微生物菌种的要求主要包括哪些内容）三、简答题（6题，每题4分，共24分）4、简述种子制备过程中种子级数对发酵过程的影响？答：过多会增加发酵操作环节，造成衰退菌体细胞过多，发酵过程控制难度增大。

一种分批补料培养大肠杆菌的方法[发明专利]

[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1737117A [43]公开日2006年2月22日[21]申请号200510028037.6[22]申请日2005.07.22[21]申请号200510028037.6[71]申请人华东理工大学地址200237上海市梅陇路130号共同申请人上海恰尔生物技术有限公司[72]发明人魏东芝沈亚领孙爱友汤亚南 [74]专利代理机构中原信达知识产权代理有限责任公司代理人罗大忱[51]Int.CI.C12N 1/20 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)权利要求书 1 页说明书 7 页附图 1 页[54]发明名称一种分批补料培养大肠杆菌的方法[57]摘要本发明公开了一种分批补料培养大肠杆菌的方法，这种补料方法的内容包括：发酵过程分为五个阶段，不同阶段分别流加碳氮比不同的培养基，实现碳源和氮源的实时流加平衡。

应用本发明的补料方法培养带有TRAIL基因表达载体的重组大肠杆菌C600，可以使菌体密度达到高值，有效提高可溶性TRAIL蛋白的表达量，同时减少发酵过程中乙酸的积累。

200510028037.6权利要求书第1/1页 1、一种分批补料培养大肠杆菌的方法，其特征在于，将发酵过程分为五个阶段，每个阶段培养时间为4-7小时，各阶段培养基的碳氮比，即：葡萄糖/(蛋白胨+酵母粉)的质量比依次为0.75-0.9、1-1.2、2.4-2.6、4.5-5.4、0.9-1.2；其中起始接种量按体积比为2-7％，从第二阶段开始补料，补料流加速度使得菌体生长的比生长率在0.05-0.18h-1之间；整个发酵过程溶氧维持在20-30％之间，pH值为6.8-7.5。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵过程五个阶段培养基的碳氮比为：0.88、1.13、2.51、5、1。

高效苯酚降解菌的分离及降解性能的研究

高效苯酚降解菌的分离及降解性能的研究引言石油、化工、煤气、焦化及酚类等生产厂排放的废水当中含有大量的苯酚[1]。

未经净化的含酚废水可导致水源被污染，致使鱼类死亡，危害农作物，最终威胁人类的健康。

许多国家将苯酚列为重要的污染物之一。

目前，国内外处理含酚废水的方法主要有物理法、化学法、微生物法及各种结合法[2]。

其中微生物法主要利用微生物的代谢活动去除废水中的有毒物，处理方法无2次污染且安全、经济。

目前，已鉴定具有降解苯酚能力的微生物主要有假单胞菌（Pseudonomonas.sp）[3]、芽孢杆菌（Bacillus.sp）[4]、酵母菌（Yeast trichosporon）[5]、根瘤菌（Rhizobia）[6]、醋酸钙不动杆菌（A. calcoaceticus）[7]等，降酚菌株多存在于酚类污染物企业排放的废水、污泥和被废水污染的土壤中[8]。

本课题拟从被苯酚废水污染的污泥中进行菌株筛选，得到耐酚菌后在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养上筛选降酚菌株，进一步测定苯酚降解的影响因素。

对特定菌株降解含酚废水的应用价值进行研究。

1 实验材料和方法1.1 菌株来源采集原黑龙江省佳木斯东郊黑龙农药化工集团废弃排污口处污泥进行菌株筛选。

1.2 培养基基础培养基：NaCl 5.0g/L，蛋白胨10g/L，琼脂15～20g/L，酵母浸膏5.0g/L，调节pH为7.0。

以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基：CaCl2 0.1 g/L ，FeSO4.7H2O 0.01 g/L，K2HPO4 0.5g/L，MnSO4.7H2O 0.05 g/L，NaCl 0.2 g/L，KH2PO4 0.5g/L，MgSO4.H2O 0.01 g/L，NH4NO3 1.0 g/L苯酚按实验需要量添加，调节pH为7.0 [8]。

富集培养基：葡萄糖10.0g/L，营养琼脂33.0g/L，酵母浸粉10.0g/L，调节pH为7.5。

1.3 研究内容与方法1.3.1 菌株和的驯化和分离在超净工作台中，将10mL含0.1g/L苯酚的基础培养基倒入培养皿，取10 g污泥加90mL蒸馏水搅拌15min，静置5min后取上层清液为菌原液[8]。

苯酚降解菌的固定化及其降解特性的研究

４ ℃冰箱放置１，到直径均匀的固定化细胞颗粒。２ｈ得用无菌水冲洗后即可使用。１３苯酚含量的测定．采用４氨基安替吡啉直接光度法Ｌ。将培养液于一７］５０・ｎ离心１ｎ取上清液１０址００ｒｍｉ０ｍｉ，０Ｌ加入到１０ｍＬ的试管中，蒸馏水至５ｍＬ；入１０Ｌ０５加加０．ｍｏ・的氨水溶液，ｐ值６８的磷酸缓冲溶液ｌＬ用Ｈ．调ｐ值至７９左右；５Ｌ２的４氨基安替吡Ｈ．加Ｏ“ 一
１２方法．
ｆ
１２１细菌的培养．．将菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基中，３％的在０恒温培养箱中活化７，２ｈ然后从驯化的菌落中挑取适合的菌落接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，于３ ℃ 、５ｍｉ摇床培养２。将菌悬液接种至０１０ｒ・ｎ４ｈ新鲜的牛肉膏蛋白胨液体培养基，相同的条件下培在养１，到对数生长期的菌体。２ｈ得
摘
要ｉ海藻酸钠为载体，苯酚降解菌进行细胞固定化，对其降解特性进行了研究。通过单因素实验确定较以对并
佳的固定化条件为：藻酸钠质量浓度３０、ａ１量浓度４０、菌体量０４ｇｌ海．ＣＣ质．湿．／ＯｍＬ海藻酸钠溶液；固定化细胞
Ｎａ１，酚０３ｇ蒸馏水１Ｉ，Ｈ值自然。Ｃｇ苯５．，ｐ

苯酚降解菌筛选及降解特性研究

ＬＩＸｉａｎｚｈｕ，ＳＨＥＮＹｕｂｉｎｇ，ＭＡＸｉｐｉｎｇ，ＷＡＮＧＷｅｎｙｅ，ＬＩＷａｎｌｏｎｇ，ＺＨＡＮＧＨｏｎｇＨａｎｇ，ＸＵＣｈｅｎｇｂｉｎ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，ＬｉａｏｎｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００３６降解特性研究
李鲜珠，沈玉冰，马溪平，王闻烨，李万龙，张宏亮，徐成斌
（辽宁大学环境学院，辽宁沈阳１１００３６）
摘要：针对焦化废水生物难降解有机物含量高、实际生产过程中的水质和水量变化大的特点，开展了高效菌株处理含酚废水的试验研究。从某焦化厂水处理车间生物处理装置曝气池活性污泥中驯
化、分离和筛选得到４株以苯酚为唯一碳源的高效降解茵，并对其进行鉴定及降解特性研究。结果
表明：初步鉴定ｈ３２ａ２、ｂ３１Ｂ、ｈ３１Ａ和ｂ４１ａ为假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ￥ｓｐ．）；通过溴化容量法测定苯酚含量，确定了菌株的最佳降解条件为：温度３２ｏＣ，ｐＨ值７．５，培养时间１６ｈ，接种密度１％，且单一
ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｉｏｎ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｔｏｔｈｅａｃｔｉｖａｔｅｄｓｌｕｄｇｅｉｎｔｈｅａｅｒａｔｉｏｎｔａｎｋ。ａｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｄｅｖｉｃｅ，ｏｆｔｈｅｗａｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｐｌａｎｔｉｎａｃｏｋｉｎｇｆａｃｔｏｒｙ．Ｔｈｏｓｅｆｏｕｒｈｉｇｈｌｙｅｉｃｆｉｅｎｔｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｂａｃｔｅｉｒａｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｉｆｅｄ

苯酚降解菌的分离、驯化与固定化研究

苯酚降解菌的分离、驯化与固定化研究
陈文波;韩丽珍;谢和;丁朋晓;刘晓光
【期刊名称】《贵州农业科学》
【年(卷),期】2007(035)003
【摘要】对采自贵阳市鸟当区某造纸厂的污泥进行富集、驯化、筛选,最终得到2株能以苯酚为惟一碳源生长的菌株(3#和5#),混合菌株可耐受1.3g/L左右的苯酚,单一菌株可耐受1.0g/L的苯酚.经生理生化及形态学鉴定,初步确定为醋杆菌属和假单胞茵属,通过不同pH值,苯酚浓度、温度以及外加碳源、氮源、盐度对菌株降酚能力的影响研究,确定了5#茵株的最佳生长和降酚条件.
【总页数】4页(P19-22)
【作者】陈文波;韩丽珍;谢和;丁朋晓;刘晓光
【作者单位】贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.1
【相关文献】
1.沙雷氏苯酚降解菌固定化条件优化及降解性能研究 [J], 王春荣;高振凤;王建兵;程芳琳;常莎
2.一株苯酚降解菌的分离鉴定及响应面法优化其固定化 [J], 葛启隆;岳秀萍;王国英
3.苯酚降解菌的固定化及其降解特性的研究 [J], 薛锋;高健
4.高效苯酚降解菌细胞固定化方法与条件的研究 [J], 李焱;陈羽;齐秀兰;徐威
5.苯酚降解菌DF51的分离鉴定、降解特性及其固定化的研究 [J], 张谨华;李鹏丽;王婧人;李彩虹;杨秀清
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高效苯酚降解菌的选育及降酚性能研究的开题报告

高效苯酚降解菌的选育及降酚性能研究的开题报告一、研究背景和意义苯酚是一种广泛存在于工业废水、污水和各种有机物的代表性污染物之一，具有较强的毒性和臭味。

苯酚的降解对于保护环境、维护健康具有重要意义。

生物降解是一种最为有效的方法之一，其中利用菌类对苯酚进行降解具有广泛应用前景。

因此，针对高效苯酚降解菌的选育及降酚性能研究具有重要的科学研究价值和应用价值。

二、研究内容和方案本研究将通过以下步骤完成：1. 采集大量土壤样品，进行菌群分离培养，筛选出能够高效降解苯酚的菌株。

2. 利用传统鉴定方法和分子生物学技术对分离得到的菌株进行鉴定和分析，确定其分类地位、基本形态特征、生理生化特性和分子机制等。

3. 对菌株的优化培养条件进行研究，包括温度、pH值、质量浓度和营养成分等方面，筛选出最佳生长条件以及最佳降解苯酚条件。

4. 对菌株进行苯酚降解性能测试，研究其对不同浓度苯酚的降解速率和降解效率。

5. 研究菌株的代谢途径和代谢产物，探究降解苯酚的分子机制。

三、预期结果1. 筛选出一种高效降解苯酚的菌株。

2. 通过鉴定和分析，对该菌株的分类地位、基本形态特征、生理生化特性和分子机制进行了研究。

3. 确定该菌株的最佳生长条件和最佳降解苯酚条件。

4. 研究该菌株的苯酚降解性能，包括降解速率和降解效率等方面的数据并进行分析。

5. 推测该菌株的代谢途径和代谢产物，探究降解苯酚的分子机制。

四、研究意义和应用前景本研究将为高效苯酚降解菌的选育和降酚性能研究提供重要依据和参考数据，为工业废水和污水的治理提供实用的技术手段和科学依据。

同时，对开展生物降解技术和环境保护工作具有重要的意义和价值。

苯酚降解菌的研究进展

苯酚降解菌的研究进展作者：陈焕来源：《安徽农业科学》2015年第05期摘要苯酚是一种原型质毒物，对一切生活个体都有毒杀作用，且具有“三致”效应。

概述了苯酚这一污染物的污染现状，筛选出的苯酚降解菌的种类及降解特性，从而为高效适用型苯酚降解菌的筛选提供借鉴。

关键词苯酚降解菌；研究进展；降解机理；降解特性中图分类号S181.3文献标识码A文章编号0517-6611（2015）05-201-05基金项目国家自然科学基金（41201511）；湖南省自然科学基金（08JJ6018）；湖南省教育厅青年基金（12B059）；湖南省教育厅教改项目（SCX1114）。

作者简介陈焕（1989-），男，湖南岳阳人，硕士研究生，研究方向：环境污染物检测与治理。

*通讯作者。

收稿日期2014-12-29随着石油、化工、建材、陶瓷、造纸、煤气、纺织、塑料、合成纤维和焦化等工业的迅速发展，含酚废水排放量大大增加，对环境造成的污染也日益严重，并逐渐成为当前水体的主要污染源之一[1-2]。

酚类化合物是一种原型质毒物，来源广泛、数量多、危害较大，对一切生活个体都有毒杀作用，且具有“三致”效应，含酚废水不经处理而任意排放，不但污染生态环境，而且会引起蛋白质变性和凝固，影响生物及人体健康与生存[3]。

因此，许多国家（包括中国）已将其列入环境优先控制污染物的黑名单和65种有毒污染物名单中[4]，含酚废水的处理也已成为国内外重点治理的有害废水之一[5-6]。

大量的研究结果表明，酚类化合物虽然是一种生物毒性物质，但是很多微生物（包括好氧的和厌氧的）可利用酚类作为生长碳源，因此可以利用微生物处理含酚废水。

由于生物法具有应用范围广、处理能力大、设备简单和比较经济等特点，使其逐渐成为目前应用最广的废水处理技术，也是我国含酚废水无害化处理的主要方法[7-8]。

然而，越来越多的研究结果表明，传统的生物法在含酚废水治理方面还存在着微生物系统对酚的耐受性和降解能力不高、抗冲击负荷能力差、处理时间较长、成本较高等问题，难以推广[6-7，9]。

苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性的研究

苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性的研究
苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性的研究
从活性污泥中分离到1株苯酚高效降解细菌,初步确定为假单胞菌属(Pseudomonas);该菌株能在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基中生长;可以在20～40 ℃、pH值5.0～9.0范围内较好生长;降解苯酚最适温度为35℃,最适pH值为7.0,最大降解率达到89%.完全降解无机盐培养基中500mg/L、1 000mg/L、1 200mg/L的苯酚分别需要60h、72h、108h.
作者：刘广金张袖丽作者单位：安徽农业大学应用化学系,安徽合肥,230036 刊名：现代农业科技英文刊名：XIANDAI NONGYE KEJI 年，卷(期)：2007 ""(11) 分类号：X7 关键词：苯酚生物降解假单胞菌属。

降解苯酚优势菌的筛选分离和培养条件研究

２３Ｊ１．ＨＯ菌培养条件的选择２３１茵体干重的测定．．
降解菌大规模培养与实际应用提供理来自依据。１主要材料和仪器
菌种采自新鲜的膨润土。
综合ＰＡ培养基（于降解优势菌扩大培养和菌种分Ｄ用离）马铃薯提取液１Ｌ葡萄糖２，ＩＰ４．：，０ｇＫ－０３ｇ，Ｉ０２
维普资讯
２０Ｏ７年第３３卷第６期
ＪｎＯ７ｕｅ２０
工业安全与环保ＩｕｔａＳｆｙａｄＥｒＩｌ１】ｒｅｔｎｎｓｉａｔｎｎ０ｒｒａＰｏｃｉｄｒｌｅｒｒｔｅｔｏ
・１・３
７Ｉ．ＮＬａ．ｇ琼脂２．。Ｉ００１ｇ，Ｉ，１，－２５Ｃ０００ｇ
・
苯酚的无机盐固体培养基：ＮＬ０１ｇＩ－Ｐ４．，－Ｎ３０，：２０１ｇ，１，Ｉ０５Ｉ
ＫＨＯ０１，Ｓ４７００１２Ｐ４．５ｇＭｇ０。Ｈ２．２ｇ，ＮＣ０．２ｇＣＣ２１，ａ１１，ａ１０．１ｇ
纯培养。
人类健康和动植物的生长均会造成不利影响。处理含酚废水
的方法很多，中生物法最普遍… 还可作为其他净化工艺其１，
的补充，可避免二次污染。
近年来，苯酚降解菌的研究受到关注，已发现和分离了多种降酚菌株［３。然而这些研究的注意力往往集中于菌种２］，降解苯酚条件研究上，对培养过程中优势菌的生长情况涉及较少。本文以菌株｝０为研究对象，在不同的培养条件下，Ｕ１

苯酚降解菌株的筛选及菌株特性研究

第35卷第1期2021年1月天津化工Tianjin Chemical IndustryVol.35No.1Jan.2021苯酚降解菌株的筛选及菌株特性研究许宁,马勤清（天津长芦集团有+公司，天津300450）摘要：酚类化合物是一种难以降解的有机污染物,具有较高的生物毒性,环境危害极大。

本文进行了苯酚高效降解菌的分离筛选工作，并对苯酚降解菌株特性进行了研究。

结果表明：从焦化厂曝气池活性污泥中分离得到的3个菌株XL1、XL2、XL3对苯酚均有降解利用的能力，其中以XL1降解能力最强，经过90h的培养，苯酚去除率为91.7%。

菌株XL1为革兰氏阴性杆菌，好氧，最适生长pH值为中性微酸，最适温度范围为25~30!。

关键词：苯酚;降解菌；筛选doi:10.3969/j.issn.1008-1267.2021.01.009中图分类号：X952；TQ09文献标志码:A文章编号：1008-1267（2021）01-0024-03Screening of phenol-degrading strain and research on its charactersXU Ning,MA Qin-qing(Tianjin ChangluHaijing Group CO.LTD.,Tianjin300450#Abstract:Phenolic compound is a kind of organic pollutant that is difficult to degrade,and it has high biological toxicity and great environmental harm.In this paper,the separation and screening of efficient phenol degrading bacteria was carried out,and the characteristics of phenol degrading strains were studied.The results show that all the three strains XL1,XL2,and XL3isolated from the activated sludge in the aeration tank of the coking plant have the ability to degrade and utilize phenol.Among them,XL1has the strongest degradability.After90hours of cultivation,the phenol removal rate reached91.7%.XL1is a kind of aerobic Gram-negative bacilli,and the optimum growth pH is neutral or slightly acid,and the optimum temperature range is25〜30!.Keywords:phenol;degrading bacteria;Screening本文从焦化厂采集活性污泥，进行了含酚废水高效降解菌的分离筛选工作，并对苯酚降解菌株特性进行了研究，为进一步实现含酚废水的生化法无害化处理提供菌种资源。

分批发酵和补料分批发酵生产木霉素的研究

!&4 !#"$FE $2"%H: %G"5@: 0$"5IE G1"&J: !&2"#K: !1%"1L: !$&"#M: !$&"1MB !$&"&MB !1G"2M: 注：不同大写字母表示同行数据差异显著（ ! / &"&%），不同小写字母表示同列数据差异显著（ ! / &"&%）。下同。 O9A?：PB<;?= Q*A3 D*CC?’?+A :BR*AB< <?AA?’= *+ A3? =B)? <*+? B+D D*CC?’?+A =)B<< <?AA?’= *+ A3? =B)? :9<;)+ B’? =*6+*C*:B+A<S D*CC?’?+A BA &"&% <?T?<，’?=R?:A*T?<SU V3? =B)? E?<9QU
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降酚菌分离、降酚基因定位及大肠杆菌表达的研究的开题报告

降酚菌分离、降酚基因定位及大肠杆菌表达的研究
的开题报告
一、研究背景与意义
酚是一种常见的有机污染物，广泛存在于工业废水、生活污水和农业农副产品等环境中，对环境以及人类健康造成了极大的威胁。

目前，处理酚类污染物主要采用物化和生化方法，其中生化方法是目前应用最广泛和效果最好的方法之一。

生物降解酚类污染物的过程中，降酚菌起着至关重要的作用。

因此，本研究旨在从土壤样品中筛选出降解酚的菌株，并对降解酚的相关基因进行定位和表达研究，为酚类污染物的净化提供新的研究思路和理论基础。

二、研究方法和步骤
1. 检测降酚菌菌株的分离和筛选
本研究将对不同来源的土壤样品进行分离和鉴定，筛选出具有高效降解酚能力的细菌菌株。

2. 酚代谢途径相关基因的筛选和定位
根据已知的酚代谢途径，设计引物，对降酚菌菌株进行PCR扩增，获取相关基因序列，并进行基因克隆和定位。

3. 大肠杆菌表达的原核系统构建和降酚基因的表达
将酚代谢途径相关基因克隆到大肠杆菌的表达载体中，构建原核表达系统，并进行大肠杆菌表达降酚基因的实验。

4. 降解酚的实验验证
将原核表达系统中大肠杆菌培养液取出，加入不同浓度的酚类污染物，观察降解效果，并进行SPME-GC/MS等方法的检测和分析。

三、预期研究结果和成果
本研究预计可以筛选出具有高效降解酚能力的菌株，并通过酚代谢途径相关基因的定位和表达，探究降酚菌降解酚类污染物的分子机制。

同时，研究结果还可以为酚类污染物的净化提供新的理论基础和技术支持。